急性腦梗死合并2型糖尿病患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群比例異常觀察

任麗 黃銘娜 馮季靈 吳錫驊 蘇施雅

[摘要]目的探討急性腦梗死（ACI）合并2型糖尿病（T2DM）患者外周血免疫調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞的表達(dá)特點(diǎn)及相關(guān)影響因素。方法選取在我院治療的ACI患者129例，根據(jù)是否合并有T2DM將其分為單純ACI組67例和ACI合并T2DM組62例。另同期選取30例健康體檢者為正常對(duì)照組（NC組）。檢測(cè)各組外周血輔助性T細(xì)胞1（Th1）、Th2、Th17、調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）亞群及相關(guān)效應(yīng)因子表達(dá)水平。結(jié)果與NC組相比，ACI合并T2DM組Th1、Th17、Th1/Th2、Th17/Treg及白介素-17（IL-17）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）升高，Th2、Treg及白介素-10（IL-10）降低;與單純ACI組相比，ACI合并T2DM組Th1、Th17、Th1/Th2、Th17/Treg及IL-17和TNF-α升高，Treg降低，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。Pearson相關(guān)分析顯示：糖化血紅蛋白（HbAlc）與Th1、Th1/Th2、Th17/Treg、IL-17和TNF-α呈正相關(guān)（r=0.35～0.56，P<0.05）;與Treg和IL-10呈負(fù)相關(guān)（r=-0.46，-0.39，P<0.05）。多元回歸分析結(jié)果顯示：低密度脂蛋白-膽固醇（LDL-C）是Th1影響因素，舒張壓（DBP）和HbAlc是Th2及Th1/Th2影響因素，LDL-C和空腹血糖（FPG）是Th17影響因素，TG和HbAlc是Treg影響因素，LDL-C和HbAlc是Th17/Treg影響因素。結(jié)論ACI合并T2DM患者外周血存在Treg數(shù)目減少及Th1/Th2和Th17/Treg比例失衡。

[關(guān)鍵詞]急性腦梗死;2型糖尿病;T淋巴細(xì)胞亞群;調(diào)節(jié)性T細(xì)胞

中圖分類號(hào)：R587.1：R743.3文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1009-816X（2018）06-0457-04

doi：10.3969/j.issn.1009-816x.2018.06.005

研究顯示免疫調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞如輔助性T細(xì)胞（Th）和調(diào)節(jié)性（Treg）細(xì)胞在腦梗死發(fā)生、發(fā)展中扮演著重要角色[1，2]。高血糖是急性腦梗死（ACI）患者發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。2型糖尿病（T2DM）患者存在細(xì)胞及體液免疫異常，T淋巴細(xì)胞可作為評(píng)價(jià)糖尿病患者免疫狀態(tài)的重要指標(biāo)[3，4]。但目前關(guān)于ACI合并T2DM患者免疫調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞亞群分布特點(diǎn)研究仍鮮有報(bào)道，且未有研究系統(tǒng)分析影響ACI合并T2DM患者免疫調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞比例的相關(guān)影響因素。本文對(duì)在我院治療的129例急性腦梗死患者進(jìn)行T淋巴細(xì)胞亞群表達(dá)檢測(cè)，旨在探討ACI合并T2DM患者T淋巴細(xì)胞亞群表達(dá)特點(diǎn)及臨床意義，并分析影響其表達(dá)的相關(guān)因素。

1資料與方法

1.1一般資料：選取2015年1月至2017年5月在我院神經(jīng)內(nèi)科住院治療的129例ACI患者，其中男78例，女51例，年齡44～75歲，平均（66.42±10.28）歲，合并有T2DM的62例ACI患者納入ACI合并T2DM組;無合并糖尿病的67例ACI患者納入ACI組。

納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）所有納入患者ACI診斷明確，均符合全國第四屆腦血管病會(huì)議修訂的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]，且經(jīng)頭顱CT和（或）磁共振成像（MRI）等影像資料證實(shí);（2）T2DM患者診斷均符合WHO1999年糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn);（3）首次發(fā)病;（4）急性起病，發(fā)病至入院時(shí)間<24h。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）既往腦梗死、腦出血、腦部腫瘤等病史患者;（2）合并糖尿病急性并發(fā)癥、全身活動(dòng)性感染者;（3）合并有血液系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)及內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病者;（4）3個(gè)月內(nèi)有外傷、手術(shù)、輸血及服用抗炎藥物、激素或免疫抑制劑者;（5）合并有嚴(yán)重肝腎心功能不全等患者。同期隨機(jī)選取本院健康體檢中心30例健康體檢者為正常對(duì)照組（NC組）。本研究獲得醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，且所有入組患者均已簽署知情同意書。

1.2方法：

1.2.1實(shí)驗(yàn)室檢查：所有受試者均在空腹?fàn)顟B(tài)下計(jì)算體質(zhì)量指數(shù)（BMI），并記錄患者平靜狀態(tài)下收縮壓（SBP）、舒張壓（DBP）及心率;入院次日清晨采集空腹血15ml，分別測(cè)定空腹血糖（FPG）、血清總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白-膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白-膽固醇（HDL-C）及糖化血紅蛋白（HbAlc）等指標(biāo)水平。

2結(jié)果

2.1各組一般資料及生化指標(biāo)比較：見表1。

2.4免疫調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞比例影響因素的多因素分析：分別以Th1、Th2、Th17、Treg細(xì)胞比例及Th1/Th2、Th17/Treg比值為因變量，以性別、年齡、BMI、SBP、DBP、心率、高血壓比例、高脂血癥比例、吸煙飲酒史、TC、TG、LDL-C、HDL-C、FPG和HbAlc水平等指標(biāo)為自變量，多元回歸分析結(jié)果顯示：LDL-C是Th1影響因素，DBP和HbAlc是Th2及Th1/Th2影響因素，LDL-C和FPG是Th17影響因素，TG和HbAlc是Treg影響因素，LDL-C和HbAlc是Th17/Treg影響因素，見表3。

3討論

ACI患者外周血受多種因素影響出現(xiàn)T淋巴細(xì)胞亞群分布異常[6]，如ACI合并T2DM患者體內(nèi)存在T淋巴細(xì)胞亞群重新分布，合并糖尿病患者更容易出現(xiàn)免疫功能紊亂[7]。

Th1細(xì)胞是由初始CD4+T細(xì)胞在IL-2和干擾素-γ（IFN-γ）誘導(dǎo)下分化形成，主要參與機(jī)體細(xì)胞免疫過程。Th2細(xì)胞主要分泌IL-5、IL-10等細(xì)胞因子，激活B淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的體液免疫過程。Th1細(xì)胞可參與T2DM發(fā)生發(fā)展過程。T2DM外周血存在Th1細(xì)胞升高及Th2降低[8]。研究發(fā)現(xiàn)，IFN-γ、IL-2等Th1細(xì)胞因子在ACI患者腦組織功能損傷中起重要作用[9，10]。本研究也得與De等[11]類似結(jié)果。本文認(rèn)為，T2DM加重ACI患者免疫調(diào)節(jié)紊亂的機(jī)制有：（1）晚期終末糖代謝產(chǎn)物促進(jìn)氧自由基生成，誘發(fā)氧化應(yīng)激反應(yīng)[11];（2）Th1細(xì)胞功能減弱，Th2細(xì)胞功能增強(qiáng)，Th1/Th2比例失衡，誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)發(fā)生。但目前具體相關(guān)調(diào)節(jié)機(jī)制仍鮮有報(bào)道，有待進(jìn)一步研究。

既往認(rèn)為，Th1和Th2比例失衡是ACI發(fā)生的免疫學(xué)基礎(chǔ)。而近來研究發(fā)現(xiàn)Th17及Treg細(xì)胞也可通過多種途徑參與ACI的發(fā)生發(fā)展過程[12]。Th17和Treg細(xì)胞是由初始T細(xì)胞分化出的不同亞型，二者在分化上相互排斥、功能上相互拮抗[13]。Miossec等[14]研究證實(shí)，Th17可通過促進(jìn)機(jī)體內(nèi)皮細(xì)胞釋放IL-17參與腦梗死區(qū)細(xì)胞凋亡過程，機(jī)體IL-17水平與ACI患者病情嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。Treg細(xì)胞是在TGF-β誘導(dǎo)下分化形成的具有免疫抑制功能的T細(xì)胞亞群，其可通過多種途徑抑制初始T細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞增殖和分化。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，Treg細(xì)胞可通過分泌IL-10改善腦缺血再灌注大鼠神經(jīng)功能損傷程度[15]。而Dolati等[16]對(duì)30例ACI患者外周血Th17和Treg細(xì)胞頻率進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)患者外周血Treg細(xì)胞比例顯著降低，Th17比例顯著增加，下游TGF-β表達(dá)水平顯著降低。本研究中單純ACI組患者Th17、Treg細(xì)胞比例與上述結(jié)果類似。但與單純ACI組比，ACI合并T2DM患者Th17細(xì)胞比例及Th17/Treg比值更高，Treg細(xì)胞比例更低，血清IL-17表達(dá)水平明顯升高。Feuerer等[17]也發(fā)現(xiàn)采用高脂飲食誘導(dǎo)肥胖小鼠，與正常小鼠相比，肥胖小鼠內(nèi)臟組織中出現(xiàn)Treg細(xì)胞數(shù)量及比例下降，Th17細(xì)胞比例升高。而Kuriya等[18]則認(rèn)為T2DM患者本身即存在Th17/Treg軸免疫失衡，故上述結(jié)果均表明ACI患者存在一定程度的Th17/Treg比例失衡，而T2DM是加重ACI患者Th17/Treg軸功能平衡失調(diào)的重要影響原因。

T2DM發(fā)展成為ACI與多種危險(xiǎn)因素有關(guān)，包括年齡、血糖控制水平、合并有高血壓、高血脂等[3]。本文結(jié)果表明T2DM患者更易合并血壓、血脂等代謝異常情況，血壓、血糖和血脂異常能對(duì)患者體內(nèi)T淋巴細(xì)胞亞群分布產(chǎn)生影響，且患者近期血糖控制情況與免疫T淋巴細(xì)胞亞群明顯相關(guān)。T2DM合并血糖、血脂等代謝異常能夠刺激機(jī)體產(chǎn)生持續(xù)慢性炎癥反應(yīng)，可進(jìn)一步加重ACI合并T2DM患者體內(nèi)免疫異常反應(yīng)[19]。故建議對(duì)于ACI合并T2DM患者，急性期綜合監(jiān)測(cè)并及時(shí)控制患者體內(nèi)血脂異常及血壓穩(wěn)定非常重要，HbAlc水平也能在一定程度上反映出患者外周血免疫細(xì)胞亞群異常分布情況。

本文研究細(xì)胞免疫功能參與ACI患者的發(fā)生發(fā)展過程，將為未來ACI的治療提供更多思路。仍存在不足之處，比如納入例數(shù)較少，循證醫(yī)學(xué)級(jí)別較弱、未設(shè)置糖尿病對(duì)照組，研究結(jié)果的代表性和推廣性有一定限制。我們將進(jìn)一步納入更多的病例數(shù)，同時(shí)對(duì)腦梗死急性期及慢性期患者進(jìn)行分層研究。

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（收稿日期：2018-5-31）