岳陽地區(qū)Rh(D)陰性獻(xiàn)血者D變異型調(diào)查

蘇湘暉,孫 昂,粟玉萍,陳 敏,譚 濤

(湖南省岳陽市中心血站輸血研究室 414000)

到目前已發(fā)現(xiàn)人類有36個(gè)血型系統(tǒng)，對(duì)臨床輸血最為重要的是ABO和Rh血型系統(tǒng)。Rh血型是血型系統(tǒng)中最復(fù)雜、最具多態(tài)性的血型系統(tǒng)，其臨床意義僅次于ABO血型系統(tǒng)，可引起嚴(yán)重的輸血反應(yīng)和新生兒輸血反應(yīng)。為了給臨床醫(yī)院提供及時(shí)、有效、安全的血液，筆者對(duì)2013-2017年410例初篩為Rh(D)陰性的血液進(jìn)行確認(rèn)試驗(yàn)，并對(duì)其表型、D變異型、不規(guī)則抗體篩查及抗體鑒定進(jìn)行調(diào)查。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2013-2017年岳陽地區(qū)第1次無償獻(xiàn)血者[第1次做過Rh(D)陰性確認(rèn)試驗(yàn)的獻(xiàn)血者，第2次獻(xiàn)血不被納入此試驗(yàn)]在用單克隆IgM類抗-D常規(guī)檢測(cè)初篩為Rh(D)陰性的血液進(jìn)行確認(rèn)試驗(yàn)。

1.2試劑和儀器 單克隆IgM類抗-D、抗-C、抗-c、抗-E、抗-e,IgG類抗-D,抗人球蛋白試劑(IgG，C3d)，篩選細(xì)胞均由上海血液生物公司提供。 IgM+IgG類抗-D由Bioscot公司提供，譜細(xì)胞由Reagens公司提供。細(xì)胞洗滌離心機(jī)(KA-2200型，日本久保田公司),顯微鏡(CX41型，Olympus公司)。

1.3方法

1.3.1Rh(D)陰性篩查及確認(rèn) 用單克隆IgM類抗-D試劑對(duì)所有標(biāo)本進(jìn)行初篩，常規(guī)鑒定為Rh(D)陰性的標(biāo)本再分別用另一廠家的單克隆IgM類抗-D，IgM+IgG類抗-D，IgG類抗-D 3種試劑進(jìn)行確認(rèn)，如果3種試劑均為陰性，則判斷為Rh(D)陰性。如果IgM+IgG類抗-D，IgG類抗-D與抗人球蛋白試劑進(jìn)行間接抗人球蛋白試驗(yàn)有1管陽性，則判斷為D變異型(弱D表型或部分D表型)，如果3管全都為陰性，則確認(rèn)為陰性血。

1.3.2Rh(D)陰性血清學(xué)表型鑒定 將初篩為Rh(D)陰性分別用抗-C、抗-c、抗-E、抗-e試劑對(duì)Rh(D)陰性標(biāo)本進(jìn)行試管法血清學(xué)表型分型。

1.3.3不規(guī)則抗體篩選及鑒定 將初篩為Rh(D)陰性的獻(xiàn)血者血清與篩選細(xì)胞和自身細(xì)胞用鹽水法、凝聚胺法和抗人球法進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查。篩查結(jié)果為陽性的標(biāo)本再與譜細(xì)胞和自身細(xì)胞進(jìn)行抗體鑒定，確定其特異性。

2 結(jié) 果

2.1Rh(D)陰性獻(xiàn)血者的血清學(xué)表型分布情況 410例無償獻(xiàn)血者初篩為Rh(D)陰性，確認(rèn)為Rh(D)陰性的391例(95.37%),ccdee 219例(56.01%),Ccdee 125例(31.97%),CCdee 27例(6.91%),ccdEe 16例(4.09%),CcdEe 3例(0.77%),CCdEe 1例(0.25%)。

2.2RhD變異型的血清學(xué)表型分布情況 410例無償獻(xiàn)血者初篩為Rh(D)陰性經(jīng)過確認(rèn)，D變異型共19例(4.80%)，其中表型為ccDuEe 4例(21.05%),CCDuee 3例(15.80%),CcDuee 7例(36.84%),CcDuEe 5例(26.31%)。

2.3血清學(xué)不規(guī)則抗體篩查及鑒定 391例Rh(D)陰性無償獻(xiàn)血者血清中查出不規(guī)則抗體陽性共4例，均為IgG類抗-D抗體(1.02%)。19例D變異型獻(xiàn)血者血清中檢出1例gG類抗-D抗體(5.26%)。

3 討 論

Rh血型系統(tǒng)是所有血型系統(tǒng)最復(fù)雜的血型系統(tǒng)，從臨床上講，除ABO血型系統(tǒng)外D抗原具有最重要的血型多態(tài)性。D抗原是Rh抗原中免疫原性最強(qiáng)的抗原，也是最具有臨床意義的抗原[1]。根據(jù)紅細(xì)胞上D抗原的有無，分為Rh陽性和Rh陰性。本調(diào)查的410例初篩為RhD陰性獻(xiàn)血者經(jīng)間接抗人球蛋白試驗(yàn)確認(rèn)391例為RhD陰性(95.37%)，19例為D變異型(4.80%)。Rh血型系統(tǒng)其他重要的抗原有C、c、E、e，岳陽地區(qū)的RhD陰性人群以ccdee和Ccdee為主。與岳陽地區(qū)Rh血型表型調(diào)查相符[2]。

由于D抗原是由1號(hào)染色體短臂上的Rh基因表達(dá)，D基因重組、缺失、點(diǎn)突變、無意義突變以及mRNA的表達(dá)水平下降均會(huì)導(dǎo)致紅細(xì)胞出現(xiàn)弱D表型或部分D表型的變異型抗原[3]。弱D紅細(xì)胞帶有完整的D抗原，只是表達(dá)減弱，并且具有所有的D表位，所以不產(chǎn)生抗-D，而部分D即有本部分D表位的缺失，剩下的D表位表達(dá)又減弱，可產(chǎn)生同種抗-D[3]。本調(diào)查的391例確認(rèn)為RhD陰性獻(xiàn)血者經(jīng)不規(guī)則抗體篩查和抗體鑒定共檢出IgG類抗-D抗體4例(1.02%)。19例D變異型中，1例(5.26%)產(chǎn)生抗-D,此例應(yīng)歸類于部分[4]。

為保證臨床輸血的有效性和安全性，初篩試驗(yàn)為RhD陰性經(jīng)確認(rèn)后為D變異型者，作為獻(xiàn)血者時(shí)，應(yīng)該視為RhD陽性供血，因?yàn)镈變異型只是D抗原表達(dá)減弱或者缺失部分D正常表達(dá)，如果視為RhD陰性血輸給陰性患者，就會(huì)刺激產(chǎn)生抗-D,會(huì)導(dǎo)致下次輸血或妊娠發(fā)生輸血反應(yīng)或新生兒溶血癥。D變異型作為受血者時(shí)應(yīng)視為RhD陰性接受D陰性血，因?yàn)橛械牟糠諨已產(chǎn)生抗-D,如輸入陽性血就會(huì)發(fā)生輸血反應(yīng)[5]。

綜上所述，為了降低血液的報(bào)廢率，在固定RhD陰性獻(xiàn)血者充足的情況下，筆者對(duì)已產(chǎn)生抗-D抗體的陰性和變異型(部分D)獻(xiàn)血者進(jìn)行屏蔽。