感染性疾病病原學(xué)診斷新技術(shù)與臨床應(yīng)用策略

張堅(jiān)磊，馬小軍

1天津市第一中心醫(yī)院檢驗(yàn)科， 天津 3001922中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)院感染內(nèi)科， 北京 100730

感染性疾病仍是威脅人類(lèi)健康的主要疾病，根據(jù)世界衛(wèi)生組織(World Health Organization，WHO)發(fā)布的數(shù)據(jù)，患感染性疾病死亡人數(shù)占全球死亡總?cè)藬?shù)的28%[1]。由于傳統(tǒng)病原學(xué)診斷滯后，難以滿(mǎn)足感染性疾病的診療需要，故WHO提出[2]，臨床微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)盡可能把目標(biāo)集中于快速診斷方面，利用一切手段將實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)化為臨床有用的信息。近年來(lái)，基于非培養(yǎng)的新型診斷技術(shù)平臺(tái)正在迅速發(fā)展，給感染性疾病的診斷帶來(lái)了重大變革，包括檢測(cè)時(shí)間縮短、操作簡(jiǎn)便及檢測(cè)準(zhǔn)確度和精密度有所提升等，給臨床應(yīng)用帶來(lái)了希望。臨床微生物室一方面需不斷采用新的病原學(xué)診斷技術(shù)，提高臨床診斷效率；另一方面還需培養(yǎng)臨床醫(yī)生正確解讀報(bào)告的能力，提高診斷準(zhǔn)確率，使病原學(xué)診斷新技術(shù)真正解決臨床診斷問(wèn)題，進(jìn)而提高抗菌藥物靶向治療的及時(shí)性，改善患者結(jié)局。

1 病原學(xué)診斷新技術(shù)

1.1 即時(shí)檢驗(yàn)

即時(shí)檢驗(yàn)(point-of-care testing，POCT)指在患者初診時(shí)，短時(shí)間內(nèi)便可提供診斷信息，使患者迅速得到治療，減少對(duì)經(jīng)驗(yàn)治療的依賴(lài)，從而促進(jìn)抗生素的管理，減少感染傳播，控制感染性疾病的流行。感染性疾病的POCT始于免疫層析法，目前最常用的是側(cè)流免疫層析法(lateral flow immunoassay， LFIA)。隨著分子診斷技術(shù)的發(fā)展，實(shí)時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(real time polymerase chain reaction，RT-PCR)技術(shù)可以滿(mǎn)足POCT速度快、成本低、易于操作的要求，成為POCT另一大主流方法。POCT還可提高經(jīng)濟(jì)不發(fā)達(dá)地區(qū)感染性疾病的診斷能力[3]。

1.1.1 以側(cè)流免疫層析法為基礎(chǔ)的即時(shí)檢驗(yàn)

以 LFIA為基礎(chǔ)的POCT的檢測(cè)原理為：臨床樣本中微生物抗原與標(biāo)記抗體結(jié)合，抗體-抗原復(fù)合物在固體基質(zhì)通過(guò)毛細(xì)作用側(cè)向流動(dòng)，在反應(yīng)區(qū)產(chǎn)生可見(jiàn)的信號(hào)，而過(guò)量的標(biāo)記抗體繼續(xù)遷移通過(guò)第二次抗體捕獲，導(dǎo)致出現(xiàn)第二條顏色帶，15 min內(nèi)便可得到直觀結(jié)果[4]。因其操作簡(jiǎn)單、快速、無(wú)需或僅需簡(jiǎn)單的儀器，操作人員無(wú)需培訓(xùn)，非常適合現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。隨著免疫標(biāo)記技術(shù)的發(fā)展，免疫標(biāo)記物新型材料(如磁顆粒、熒光微球、量子點(diǎn)、上轉(zhuǎn)換熒光粉、碳納米顆粒、銪納米顆粒等)顯著提高了檢測(cè)靈敏度，可實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)；而試紙閱讀儀通過(guò)將檢測(cè)線和質(zhì)控線的顏色強(qiáng)度轉(zhuǎn)變?yōu)楣饷芏戎?，可?shí)現(xiàn)定量分析。已有使用智能手機(jī)作為試紙閱讀器，利用內(nèi)置軟件進(jìn)行定量分析的報(bào)道[3]。LFIA 在快速病原學(xué)檢測(cè)如肺炎鏈球菌尿抗原、軍團(tuán)菌尿抗原、A群溶血鏈球菌、流感病毒抗原以及隱球菌莢膜多糖抗原檢測(cè)方面比較成熟。以隱球菌多糖抗原為例，WHO在關(guān)于兒童、青少年和成人人類(lèi)免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus，HIV)感染者隱球菌病診斷、預(yù)防和管理快速推薦中指出，隱球菌病是HIV相關(guān)機(jī)會(huì)感染中最主要的感染之一，也是造成早期死亡的主要原因之一[5]。診斷延遲導(dǎo)致腦膜炎發(fā)展至晚期，治療效果較差是這一現(xiàn)象的主要原因。因此，WHO于2011年推薦采用 LFIA檢測(cè)隱球菌多糖抗原，對(duì)患者的腦脊液、血清或血漿進(jìn)行篩查，針對(duì)陽(yáng)性者給予預(yù)防性氟康唑治療，目的在于通過(guò)快速診斷、預(yù)防用藥，降低隱球菌的發(fā)病率和死亡率。

1.1.2 以實(shí)時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)為基礎(chǔ)的即時(shí)檢驗(yàn)

LFIA對(duì)抗原檢測(cè)的性能依賴(lài)于臨床樣本中分析物的濃度。分析的濃度低于濃度檢測(cè)范圍可能產(chǎn)生假陰性結(jié)果。最近美國(guó)疾病預(yù)防控制中心在流感高發(fā)期，將流感病毒LFIA法與RT-PCR及病毒培養(yǎng)對(duì)比，提出對(duì)于流感病毒抗原檢測(cè)的陰性結(jié)果需謹(jǐn)慎解讀[6]。

為了提高POCT在病原學(xué)快速診斷中的敏感度，將分子診斷應(yīng)用于POCT，使感染性疾病的診斷有了革命性變化。POCT分子診斷技術(shù)主要基于RT-PCR。RT-PCR技術(shù)是一種定量測(cè)定樣本中特定DNA序列的PCR。使用標(biāo)記的PCR引物, 病原模板需95 ℃變性，低溫60 ℃左右復(fù)性，72 ℃延伸為一個(gè)PCR循環(huán)，需要經(jīng)過(guò)30～40個(gè)循環(huán)擴(kuò)增，在每個(gè)周期內(nèi)放大，反應(yīng)需要20～100 min，從而增加測(cè)試敏感度和特異度，但需要特定的設(shè)備，限制廣泛應(yīng)用。而環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(loop-mediated isothermal amplification,LAMP) 是一種RT-PCR新的替代方法，LAMP法的特征是針對(duì)靶基因上的6個(gè)區(qū)域設(shè)計(jì)4條引物，利用鏈置換型DNA聚合酶在恒溫60～65 ℃條件下進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)，可在15～60 min內(nèi)實(shí)現(xiàn)109～1010倍的擴(kuò)增，產(chǎn)生大量擴(kuò)增產(chǎn)物即焦磷酸鎂白色沉淀，通過(guò)肉眼觀察有無(wú)白色沉淀以判斷是否存在靶基因。該技術(shù)不需要熱循環(huán)器，比PCR便宜、節(jié)能、操作簡(jiǎn)便，更適于在經(jīng)濟(jì)不發(fā)達(dá)地區(qū)使用，當(dāng)前主要應(yīng)用于瘧疾和結(jié)核病的快速診斷[7- 9]。RT-PCR比免疫層析法更敏感，但對(duì)技術(shù)和培訓(xùn)程度要求更高，這可能會(huì)限制在不發(fā)達(dá)地區(qū)的使用。目前，病原學(xué)分子診斷檢測(cè)主要涉及[10]如艱難梭菌、結(jié)核分枝桿菌、肺炎支原體、性傳播性疾病病原體、常見(jiàn)呼吸道病毒及腸道病毒的檢測(cè)，肝炎病毒的定量檢測(cè)和寄生蟲(chóng)檢測(cè)。

近年來(lái)快速高度自動(dòng)化病原學(xué)分子診斷平臺(tái)(如GeneXpert和FilmArray等)發(fā)展迅速，這些平臺(tái)均是基于核酸擴(kuò)增檢測(cè)原理。GeneXpert平臺(tái)是基于PCR方法的全自動(dòng)一體化核酸檢測(cè)系統(tǒng)，將整合樣品制備、擴(kuò)增及檢測(cè)3個(gè)步驟集中于一個(gè)獨(dú)立試劑盒中，并進(jìn)一步自動(dòng)化和模塊化；其可檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌、利福平耐藥菌、甲氧西林耐藥金黃色葡萄球菌、艱難梭菌等項(xiàng)目。而FilmArray平臺(tái)則采用巢式多重PCR以及熔解曲線測(cè)定方法進(jìn)行病原體靶標(biāo)快速檢測(cè)與分析；通過(guò)陣列將每一種靶標(biāo)的擴(kuò)增反應(yīng)分隔到單孔完成，并且針對(duì)每一種靶標(biāo)設(shè)有3個(gè)重復(fù)，檢測(cè)結(jié)果更準(zhǔn)確；儀器與測(cè)試條均為全封閉系統(tǒng)，核酸提取純化、PCR擴(kuò)增與產(chǎn)物檢測(cè)均在一臺(tái)儀器中完成，同一測(cè)試可檢測(cè)多種病原。該產(chǎn)品按疾病系統(tǒng)分為上呼吸道感染測(cè)試(19種病毒和3種細(xì)菌)，胃腸道感染測(cè)試(13種細(xì)菌、5種病毒和4種寄生蟲(chóng))以及腦膜炎/腦炎測(cè)試(6種細(xì)菌、7種病毒和1種真菌)，提供了一種全面、快速、流線型的替代方法，其檢出病原體的覆蓋范圍廣，準(zhǔn)確度和特異度比傳統(tǒng)培養(yǎng)及PCR更高[11- 13]。病原學(xué)分子診斷將不斷被探索和應(yīng)用于臨床。

目前POCT產(chǎn)品種類(lèi)繁雜，檢測(cè)原理、操作方法、質(zhì)量控制與校準(zhǔn)方式及周期差異均極大，不同產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果不可比，也為臨床準(zhǔn)確診斷與治療帶來(lái)了極大挑戰(zhàn)。針對(duì)POCT質(zhì)量管理體系建設(shè)，世界各發(fā)達(dá)國(guó)家均給予了極大關(guān)注。

1.2 快速微生物鑒定系統(tǒng)質(zhì)譜技術(shù)[14]

1906年，英國(guó)物理學(xué)家Thomson研制出世界首臺(tái)質(zhì)譜儀，當(dāng)時(shí)作為一種化學(xué)分析手段。20世紀(jì)80年代，軟電離技術(shù)的發(fā)明使檢測(cè)相對(duì)分子質(zhì)量高達(dá)幾十萬(wàn)的生物大分子成為可能，從而開(kāi)拓了質(zhì)譜學(xué)的嶄新領(lǐng)域——生物質(zhì)譜。生物質(zhì)譜迅速成為微生物鑒定領(lǐng)域的新寵，基質(zhì)輔助激光解吸電離質(zhì)譜(matrixassisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)技術(shù)即是其中之一。其原理為：樣品同基質(zhì)溶液混合后形成樣品結(jié)晶，結(jié)晶體被裝載至質(zhì)譜儀后利用激光轟擊結(jié)晶體，基質(zhì)從激光中吸收能量使得樣品解吸電離導(dǎo)致離子化分子在電場(chǎng)中飛行，不同質(zhì)荷比的離子因到達(dá)檢測(cè)器的時(shí)間不同而被分開(kāi)。通過(guò)構(gòu)建的細(xì)菌鑒定質(zhì)譜圖與數(shù)據(jù)庫(kù)圖譜比對(duì)，從而可將各種細(xì)菌進(jìn)行鑒定區(qū)分。MALDI-TOF-MS技術(shù)與傳統(tǒng)方法相比，具有操作簡(jiǎn)單快速、重復(fù)性強(qiáng)、靈敏度高、準(zhǔn)確度好、自動(dòng)化和高通量等特點(diǎn)，臨床主要應(yīng)用于細(xì)菌、真菌的快速鑒定與分類(lèi)。一種病原微生物的質(zhì)譜鑒定試驗(yàn)，包括樣品采集和制備，整個(gè)過(guò)程不到10 min，在感染性疾病的病原學(xué)快速診斷方面發(fā)揮了重要作用。

MALDI-TOF-MS技術(shù)雖然在微生物的鑒定上具有快速、簡(jiǎn)單、成本低等優(yōu)點(diǎn)，但該方法也存在一定的局限性。其準(zhǔn)確鑒定依賴(lài)于完善的數(shù)據(jù)庫(kù)，如數(shù)據(jù)庫(kù)無(wú)待測(cè)菌譜圖，將無(wú)法得到鑒定結(jié)果；另一方面，MALDI-TOF-MS技術(shù)應(yīng)于微生物鑒定是檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)核糖體蛋白圖譜，當(dāng)核糖體蛋白圖譜相同時(shí)則無(wú)法鑒別；此外，有些微生物細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)不同，需要個(gè)體化提取核糖體蛋白，蛋白提取成功與否，也決定能否準(zhǔn)確進(jìn)行鑒定。MALDI-TOF-MS技術(shù)鑒定微生物必須是可培養(yǎng)微生物，直接標(biāo)本鑒定應(yīng)用于臨床尚有待于進(jìn)一步深入開(kāi)發(fā)研究。

1.3 下一代測(cè)序技術(shù)

隨著人類(lèi)基因組計(jì)劃在2003年徹底完成，基因測(cè)序技術(shù)不斷發(fā)展，下一代測(cè)序(next generation sequencing, NGS)技術(shù)逐步成為主流測(cè)序技術(shù)。NGS又稱(chēng)高通量測(cè)序，包括二代大規(guī)模平行測(cè)序和三代大分子測(cè)序。二代測(cè)序原理：將基因組DNA隨機(jī)切割成小片段DNA，在通過(guò)構(gòu)建文庫(kù)、PCR擴(kuò)增等技術(shù)流程獲得測(cè)序模板進(jìn)行測(cè)序及數(shù)據(jù)分析，相對(duì)于Sanger測(cè)序通量高、速度快、費(fèi)用低，但普遍存在讀長(zhǎng)較短的缺點(diǎn)。三代測(cè)序原理：不需要進(jìn)行PCR擴(kuò)增，通過(guò)不同手段區(qū)分堿基信號(hào)差異，直接讀取序列信息，其讀長(zhǎng)長(zhǎng)、通量高，可以對(duì)RNA和甲基化DNA序列進(jìn)行直接測(cè)序，但目前還存在錯(cuò)誤率高、成本較高和生物信息分析軟件不夠豐富等缺點(diǎn)[15- 16]。

近年來(lái)，隨著全球感染性疾病譜的變化，疑難感染不斷增多，并非所有病原體均能在診斷實(shí)驗(yàn)室中成功培養(yǎng)出來(lái)，而病原學(xué)分子診斷提供信息有限，NGS技術(shù)不依賴(lài)培養(yǎng)技術(shù)，直接檢測(cè)臨床樣本 (血液、腦脊液、肺泡灌洗液等)，應(yīng)用NGS技術(shù)和生物信息分析軟件可快速全面鑒定細(xì)菌、病毒、真菌、寄生蟲(chóng)，為疑難危重感染提供快速精準(zhǔn)診斷依據(jù)，指導(dǎo)抗菌藥物的合理應(yīng)用成為優(yōu)勢(shì)。NGS在時(shí)間上與細(xì)菌培養(yǎng)所需時(shí)間相當(dāng)，能檢測(cè)到不被培養(yǎng)的細(xì)菌并進(jìn)行菌種鑒定，確定細(xì)菌種類(lèi)的分類(lèi)基因組學(xué)[17]并可提供關(guān)于此細(xì)菌致病潛力的直接信息，通常對(duì)于作出準(zhǔn)確的臨床決策至關(guān)重要。隨著成本降低，高通量測(cè)序有望在臨床廣泛應(yīng)用。

目前，NGS技術(shù)常規(guī)應(yīng)用于臨床病原學(xué)檢測(cè)仍存在很多實(shí)際問(wèn)題：(1)病原體鑒定的準(zhǔn)確度很大程度取決于分析的參考數(shù)據(jù)庫(kù)的范圍和完整性；(2)臨床標(biāo)本的復(fù)雜性，可能使病原體信息太少而導(dǎo)致數(shù)據(jù)丟失或病原體數(shù)據(jù)混雜在正常菌群中難以區(qū)分；(3)NGS測(cè)序數(shù)據(jù)的解讀至關(guān)重要，測(cè)序的長(zhǎng)度、數(shù)量、質(zhì)量以及試劑可能的細(xì)菌污染，均可影響病原體識(shí)別，導(dǎo)致標(biāo)本中細(xì)菌多樣性估計(jì)過(guò)高；(4)目前尚未建立不同標(biāo)本測(cè)序前處理和參數(shù)設(shè)置的統(tǒng)一規(guī)定，微生物NGS測(cè)序質(zhì)量評(píng)估、質(zhì)量控制體系亦尚在建立中，美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局尚未批準(zhǔn)臨床微生物NGS測(cè)試[18- 19]。

2 病原學(xué)診斷新技術(shù)臨床應(yīng)用策略

2.1 基于循證檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，全面了解病原學(xué)診斷新技術(shù)的檢驗(yàn)效能

目前各種新型診斷技術(shù)平臺(tái)層出不窮,基于上述技術(shù)的平臺(tái)診斷產(chǎn)品正不斷被探索和應(yīng)用于臨床，臨床診斷正向著更快捷、準(zhǔn)確、經(jīng)濟(jì)的方向發(fā)展，因此各種新型診斷技術(shù)平臺(tái)的臨床應(yīng)用問(wèn)題顯得尤為重要。現(xiàn)實(shí)是，制造商熱情提供試劑，臨床醫(yī)生和檢驗(yàn)人員欣然接受，許多新的檢驗(yàn)項(xiàng)目在檢驗(yàn)效能未被充分了解之前，即已被積極推向臨床，其應(yīng)用效果通常是在信息不完整的情況下由臨床醫(yī)生各自得出的。例如，半乳糖甘露聚糖(galactomannan，GM)試驗(yàn)在2008年版《曲霉菌病診治指南》中被建議用于高風(fēng)險(xiǎn)患者的篩查， 而2016年版《曲霉菌病診治指南》[20]指出，對(duì)于血液系統(tǒng)惡性腫瘤及造血干細(xì)胞移植患者，建議將血清和肺泡灌洗液中的GM作為侵襲性曲霉病的精確診斷標(biāo)志物，屬于高級(jí)別證據(jù)推薦意見(jiàn)。同時(shí)，必須認(rèn)識(shí)到此推薦意見(jiàn)的適用人群具有一定范圍，且精確診斷標(biāo)志物和確診標(biāo)志物并不等同，不應(yīng)過(guò)分強(qiáng)調(diào)GM試驗(yàn)的價(jià)值。過(guò)去幾年中，GM試驗(yàn)實(shí)際被廣泛應(yīng)用于非血液系統(tǒng)惡性腫瘤及造血干細(xì)胞移植患者，造成檢測(cè)結(jié)果與診斷預(yù)期不符，試驗(yàn)結(jié)果受到質(zhì)疑。經(jīng)過(guò)循證醫(yī)學(xué)研究確定了GM試驗(yàn)的應(yīng)用范圍，體現(xiàn)了感染性疾病診療的精細(xì)化。

循證檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)是依據(jù)循證醫(yī)學(xué)“以當(dāng)前最佳證據(jù)為基礎(chǔ)”的原則，規(guī)范檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的研究、設(shè)計(jì)和文獻(xiàn)評(píng)價(jià)，目的是向臨床提供有效檢驗(yàn)證據(jù)、最有利于醫(yī)患雙方診斷試驗(yàn)的診斷效能、成本-效果分析等信息。Neal等[21]提出了評(píng)估任何診斷性試驗(yàn)效能的主要步驟：(1)該試驗(yàn)?zāi)芊窨煽窟M(jìn)行？確定該試驗(yàn)的準(zhǔn)確度、精密度和依賴(lài)于使用者的程度。(2)是否在合適的人群中對(duì)該試驗(yàn)進(jìn)行了評(píng)估?試驗(yàn)數(shù)據(jù)是從哪一部分人中得出的？(3)是否使用了合適的參考標(biāo)準(zhǔn)？(4)是否選擇了合適的臨界值來(lái)優(yōu)化敏感度和特異度？理想的試驗(yàn)?zāi)軌蚴姑舾卸群吞禺惗茸畲蠡?，從而使假?yáng)性率和假陰性率最小化。(5)陽(yáng)性和陰性似然比是多少？陽(yáng)性似然比越高越好，陰性似然比越低越好。(6)該試驗(yàn)在特定人群中的檢驗(yàn)效能、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別是多少？(7)疾病成本與試驗(yàn)成本之間的平衡如何？

當(dāng)新型診斷技術(shù)應(yīng)用于臨床時(shí)，檢驗(yàn)人員有責(zé)任和義務(wù)通過(guò)循證醫(yī)學(xué)手段獲得新診斷技術(shù)的檢驗(yàn)效能，即靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值、陽(yáng)性和陰性似然比及該試驗(yàn)適用的特定人群等，以幫助臨床醫(yī)生更合理地選擇試驗(yàn)，正確解讀報(bào)告。此項(xiàng)工作也將隨著臨床研究的進(jìn)展而逐步更新。

2.2 臨床醫(yī)生應(yīng)重視臨床經(jīng)驗(yàn)、微生物學(xué)特點(diǎn)、流行病學(xué)和最佳診斷證據(jù)有機(jī)的結(jié)合

在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)快速發(fā)展的今天，許多臨床醫(yī)生往往過(guò)于重視新技術(shù)的掌握，卻忽視了臨床基本功的價(jià)值。臨床醫(yī)生日積月累的臨床經(jīng)驗(yàn)是非常寶貴的，感染性疾病的循證醫(yī)學(xué)在強(qiáng)調(diào)醫(yī)生臨床經(jīng)驗(yàn)的同時(shí)，也強(qiáng)調(diào)臨床醫(yī)生必須掌握尋找證據(jù)、評(píng)估證據(jù)、應(yīng)用證據(jù)的技能。在應(yīng)用靈敏度和特異度均很高的診斷試驗(yàn)技術(shù)時(shí)，還要注意其應(yīng)用的特定人群,在高危人群中進(jìn)行篩查可獲得較高的陽(yáng)性預(yù)測(cè)值，最佳證據(jù)也要應(yīng)用于合適的人群才能達(dá)到最佳效果。例如，血清和肺泡灌洗液中的GM可作為血液系統(tǒng)惡性腫瘤及造血干細(xì)胞移植患者中侵襲性曲霉病的精確診斷標(biāo)志物，而不建議作為實(shí)體器官移植受者或慢性肉芽腫病患者篩查項(xiàng)目(強(qiáng)力推薦，證據(jù)級(jí)別高)[20]。因此把臨床經(jīng)驗(yàn)、病原微生物的特點(diǎn)、流行病學(xué)與最佳診斷證據(jù)多方面信息有機(jī)結(jié)合，才能得到科學(xué)的臨床決策。

3 結(jié)語(yǔ)

由于感染性疾病具有宿主易感性、感染部位及致病微生物復(fù)雜多變等諸多特性，臨床微生物實(shí)驗(yàn)室已從過(guò)去強(qiáng)調(diào)技術(shù)的先進(jìn)性和前沿性，轉(zhuǎn)變?yōu)閺难C醫(yī)學(xué)角度關(guān)注技術(shù)如何為臨床提供最佳證據(jù)。臨床醫(yī)生則需將感染性疾病的臨床表現(xiàn)、病原微生物特點(diǎn)、流行病學(xué)特點(diǎn)及最佳診斷證據(jù)等多方面信息有機(jī)結(jié)合，制定更加準(zhǔn)確的治療方案，以實(shí)現(xiàn)感染性疾病的精準(zhǔn)治療。