中醫(yī)藥對血管新生促進(jìn)或抑制作用的研究進(jìn)展

何建成，王 利

(上海中醫(yī)藥大學(xué)，上海 201203)

血管新生(angiogenesis, AG)是指在原有血管基礎(chǔ)上通過血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、芽生、游走、血管分裂和分支而形成新的毛細(xì)血管網(wǎng)，使其功能與局部的需要相適應(yīng)的生物學(xué)過程[1]。缺血性心腦血管疾病和腫瘤是使人類致殘或者死亡的首要原因之一，AG在其治療中有著不可替代的作用，已引起中西醫(yī)研究者的高度重視。眾所周知，中醫(yī)藥對血管相關(guān)性疾病的診治效果顯著，經(jīng)驗(yàn)豐富。臨床治療中發(fā)現(xiàn)許多中藥及其復(fù)方等具有促進(jìn)或抑制AG的作用。

1 中醫(yī)藥與促血管新生

中醫(yī)學(xué)雖沒有對AG概念的直接描述，但有其相關(guān)的理論敘述。如血管屬于中醫(yī)的脈或者血絡(luò)，“脈為血之府”“氣血互根”“行氣通脈”“活血化瘀”“補(bǔ)氣活血”“祛瘀生新”等，為中醫(yī)藥促血管新生的研究奠定理論基礎(chǔ)。從中醫(yī)學(xué)角度而言，心肌梗死和腦缺血疾病病機(jī)在于脈絡(luò)痹阻、血行不暢，而AG可以促進(jìn)血管生成、重建以及建立側(cè)枝循環(huán)，從而起到防治缺血性心腦血管疾病的作用。

1.1中藥復(fù)方與促血管新生研究發(fā)現(xiàn)，促進(jìn)AG的中藥復(fù)方多是益氣活血化瘀類，其中對血府逐瘀湯、當(dāng)歸補(bǔ)血湯、補(bǔ)陽還五湯、桃紅四物湯、益氣活血方、芪參益氣方、丹龍醒腦方、腦泰方、龍蛭湯、麝香保心丸、芪參益氣滴丸、芪丹通脈片、芎芍膠囊、通脈地仙丸、祛痰化瘀通脈顆粒等相關(guān)研究較多，機(jī)制與血管內(nèi)皮生長因子(VEGFA、VEGFB)及其受體Flt-1(VEGFR1)、KDR/Flk-1(VEGFR2)、血管生成素(Ang)-1及其受體Tie-2密切相關(guān)。

高冬等[2]研究發(fā)現(xiàn)，血府逐瘀湯上調(diào)VEGF-VEGFR2途徑，促進(jìn)VEGF表達(dá)增加，誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移和血管形成，說明了血府逐瘀湯有促AG的作用。許曉玲等[3]探索血府逐瘀湯的促AG作用，用不同濃度血府逐瘀湯的含藥血清干預(yù)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC-12)，用相關(guān)的實(shí)驗(yàn)方法分別檢測細(xì)胞增殖、遷移，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，血府逐瘀湯促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞遷移、粘附，機(jī)制與EphB4/EphrinB2通路相關(guān)。SHEN等[4]利用大鼠局灶性腦缺血模型研究發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)陽還五湯增加腦缺血后Ang-1的表達(dá)；王飛龍等[5]制備大鼠大腦中動(dòng)脈栓塞模型，發(fā)現(xiàn)桃紅四物湯可以降低ET-1含量，上調(diào)VEGF、Ang-1水平；麝香保心丸能促進(jìn)心肌梗死大鼠梗死交界區(qū)的VEGF的表達(dá)，上調(diào)20-HETE調(diào)控EPCs的增殖、遷移和管狀結(jié)構(gòu)形成能力，促進(jìn)心肌缺血區(qū)域血管的形成[6]。張騰等[7]實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，芪參益氣滴丸能有效保護(hù)大鼠心肌缺血區(qū)的缺血心肌，其機(jī)制與促進(jìn)VEGF、Ang-1 mRNA表達(dá)、降低堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)mRNA表達(dá)有關(guān)。

1.2單味中藥與促血管新生隨著對中藥及其有效成分促血管新生研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)大多是川芎、丹參、黃芪、人參、三七、紅花、當(dāng)歸、紅景天等益氣活血之品，其他類如黃芩、葛根、白藜蘆等。

研究表明，川芎聯(lián)合赤芍可升高大腦中動(dòng)脈局灶性腦缺血模型大鼠血清中Ang-1的水平及缺血腦組織中缺氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)mRNA的表達(dá)，發(fā)揮了促進(jìn)AG的作用[8]。衛(wèi)國等[9]研究結(jié)果顯示，丹參素(DSS)和羥基紅花黃色素A聯(lián)合運(yùn)用可上調(diào)VEGF、基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1(SDF-1)及其特異受體CXCR4蛋白表達(dá)，促進(jìn)AG；丹參多酚酸鹽上調(diào)心肌梗死大鼠心肌miR-126、VEGF表達(dá)[10]；黃芪甲苷-Ⅳ可促進(jìn)MI模型鼠心肌HIF-1α、VEGF的表達(dá)[11]；黃芪多糖膠原上調(diào)VEGF mRNA[12]，黃芪提取物上調(diào)VEGF、CD34蛋白表達(dá)[13]；魏英等[14]發(fā)現(xiàn)，人參總皂苷提高梗死區(qū)心肌的VEGF、bFGF mRNA表達(dá)水平；三七、紅花、紅景天等亦可以促進(jìn)VEGF等表達(dá)水平[15-17]，從而發(fā)揮促進(jìn)AG的作用。

王玉梅[18]實(shí)驗(yàn)制備慢性腦缺血記憶障礙模型，發(fā)現(xiàn)黃芩莖葉黃酮(SSF)能有效降低腦缺血大鼠海馬細(xì)胞中N-甲基-D-天門冬氨酸受體(NMDAR)的表達(dá)，增加皮層細(xì)胞中VEGF的表達(dá)，發(fā)揮了促血管新生和神經(jīng)保護(hù)作用。郭重儀[19]觀察黃芩苷對高脂血癥大鼠的作用，發(fā)現(xiàn)其降低TG、CHO、LDL-C，并提高HDL-C的含量，從而發(fā)揮減輕血管內(nèi)皮細(xì)胞的氧化損傷，促AG的作用。葛根素促進(jìn)VEGF及HIF-1α的表達(dá)[20]；白藜蘆通過上調(diào)局灶腦缺血/再灌注大鼠大腦缺血皮質(zhì)區(qū)內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)和VEGF表達(dá)，促進(jìn)腦微血管再生，發(fā)揮缺血損傷后腦保護(hù)作用[21]。

1.3中藥藥對與促血管新生根據(jù)缺血性心腦血管疾病不同的病機(jī)特點(diǎn)，比如氣虛血瘀或者氣滯血瘀等，臨床可以靈活地選用中藥藥對，增強(qiáng)原有藥物的功效，如相須、相使。李時(shí)珍在《本草綱目?序例上》總結(jié)說：“藥有七情，獨(dú)行者，單方不用輔也；相須者，同類不可離也……相使者，我之佐使也；相惡者，奪我之能也；相畏者，受彼之制也；相反者，兩不相合也；相殺者，制彼之毒也?！北姸嗟膶?shí)驗(yàn)研究亦證明了中藥藥對促進(jìn)AG的顯著療效。

李悅山等[22]研究藥對黃芪配伍當(dāng)歸，以體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)為模型，MTT法檢測不同劑量黃芪與當(dāng)歸對細(xì)胞增殖的影響；流式細(xì)胞儀檢測黃芪與當(dāng)歸對HUVEC增殖周期的影響；半定量RT-PCR檢測黃芪與當(dāng)歸對HUVEC的VEGF mRNA表達(dá)的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，黃芪與當(dāng)歸具有促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖作用。

楊鋒[23]觀察藥對黃芪和地黃，可調(diào)節(jié)VEGF-VEGFR-2通路，共同促人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞血管新生的作用。張大方等[24]研究川芎嗪與黃芪甲苷不同配伍濃度對雞胚絨毛尿囊膜模型(chick embryochorioallantoic membrane, CAM)血管新生的作用，探討二藥配伍對缺血性心臟病的影響。結(jié)果表明，川芎嗪與黃芪甲苷各濃度配伍均能促進(jìn)雞胚絨毛尿囊膜血管新生，且與濃度有一定的劑量依賴關(guān)系。

2 中醫(yī)藥與抗血管新生

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，腫瘤屬于《黃帝內(nèi)經(jīng)》中所闡述的“積”“伏梁”“石瘕”的范疇。“久病入絡(luò)”，正氣不足、氣滯、血瘀、痰凝、毒聚，臟腑功能失調(diào)是發(fā)病關(guān)鍵，針對病機(jī)，以扶正為本，兼清利濕熱，活血化瘀軟堅(jiān)為治法。眾所周知，在腫瘤的發(fā)展過程中，快速的血管新生是不利的。已有的研究發(fā)現(xiàn)，中醫(yī)藥對腫瘤血管新生有抑制作用，可以減緩腫瘤生長和惡化的速度，提高了患者的生活質(zhì)量，已是目前抗腫瘤研究的重要方向。

2.1中藥復(fù)方與抗血管新生抗血管新生的中藥復(fù)方，有以補(bǔ)益為主的復(fù)方(如參麥注射液、補(bǔ)腎健脾方)，但以清熱燥濕解毒散結(jié)的復(fù)方居多，如鱉甲煎丸、復(fù)方苦參注射液、西黃丸、肺巖寧顆粒、六神丸、解毒消癥飲、解毒三根湯。機(jī)制多是抑制基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)的活性，如降低MMP-2、TIMP-1的表達(dá)或者抑制VEGF、bFGF等促血管生成因子的表達(dá)。文彬等[25]發(fā)現(xiàn)鱉甲煎丸通過Wnt/β-catenin信號(hào)通路來調(diào)控人肝癌HepG2裸鼠Tbx3的表達(dá)以抑制肝癌細(xì)胞的生長，促進(jìn)肝癌細(xì)胞的凋亡，從而達(dá)到抑制肝癌組織生長的目的；任征遠(yuǎn)等[26]認(rèn)為西黃丸可降低乳腺荷瘤小鼠VEGF、MMP-9的表達(dá)，改變腫瘤微環(huán)境，具有逆轉(zhuǎn)免疫逃逸的趨勢；復(fù)方苦參注射液有效降低結(jié)直腸癌患者血清中的VEGF水平[27]，可以顯著抑制內(nèi)皮細(xì)胞的生長，阻止癌細(xì)胞的擴(kuò)散以及增殖；而其通過抑制MMP-9、VEGF的表達(dá)，可發(fā)揮抑制肺癌細(xì)胞的生長和轉(zhuǎn)移的作用[28]。肺巖寧顆粒明顯降低Lewis肺癌移植瘤模型C57BL/6小鼠的MMP-2、MMP-9、NF-κBp65表達(dá)，可明顯改善小鼠生存質(zhì)量及抑制腫瘤轉(zhuǎn)移[29]；解毒三根湯通過降低CT-26結(jié)腸癌成纖維細(xì)胞上清液中VEGF、IL-6的表達(dá)量，可抑制腫瘤細(xì)胞的遷移能力[30]。

2.2單味中藥與抗血管新生抗腫瘤血管新生的中藥，亦多是一些清熱解毒(姜黃、半枝蓮、黃芩、雷公藤、蟾酥、蝎毒)、益氣活血化瘀(水蛭、丹參、川芎、人參、云芝)之品。

姜黃素抑制Lewis肺癌小鼠模型VEGF的表達(dá)，明顯增加內(nèi)皮抑素的表達(dá)[31]，抑制肺癌腫瘤的生長；其抑制宮頸癌皮下移植瘤模型的MMP-2、MMP-9的表達(dá)，進(jìn)而調(diào)控腫瘤的發(fā)生發(fā)展[32]。半枝蓮多糖抑制荷瘤小鼠肺癌模型肺癌細(xì)胞95-D的增殖，降低微血管密度(CD-31標(biāo)記)，以發(fā)揮抗肺癌細(xì)胞增殖的作用[33]；雷公藤紅素可降低人胃癌細(xì)胞SGC-7901和人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞ECV304的HIF-1α、MCT-4蛋白的表達(dá)，從而達(dá)到抑制胃癌細(xì)胞生長和腫瘤血管生成的雙重抗腫瘤作用[34]。黃芩素有效抑制結(jié)腸癌裸鼠移植瘤的VEGF、TNF-α的表達(dá)，從而抑制體內(nèi)結(jié)腸腫瘤的生長，表現(xiàn)出抗腫瘤活性[35]；云芝多糖減少肝轉(zhuǎn)移的癌癥組織中的新生血管，發(fā)揮抑制腫瘤的作用[36]。

3 展 望

人參、丹參、川芎等益氣活血化瘀類中藥以及黃芩等清熱燥濕類中藥，不僅應(yīng)用于缺血性心腦血管疾病的治療，也被應(yīng)用于腫瘤治療中，且有較好的臨床療效。作用機(jī)制的研究目前多集中在調(diào)控因子(VEGF、Ang-1、SDF-1、bFGF、HIF-1a等)和通路(Notch、PTEN/PI3K/AKT、JAK/STAT通路)。而中藥影響血管新生機(jī)制非常復(fù)雜，不是通過某單一因素起作用，而是多成分、多環(huán)節(jié)、多靶點(diǎn)、多因素共同作用的結(jié)果。如我們在研究黃芩苷時(shí)發(fā)現(xiàn)，低劑量黃芩苷具有促血管新生的作用，而高劑量黃芩苷則對血管生成具有抑制作用[37]。這些可能與黃芩苷的劑量有關(guān)，臨床應(yīng)用需要有針對性。

目前，從細(xì)胞或者分子學(xué)的角度，研究者雖然發(fā)現(xiàn)和證實(shí)了很多單味中藥或復(fù)方具有促進(jìn)或抑制血管生成的作用，然而對藥對及中藥復(fù)方的研究則較少，如何更高效、優(yōu)化中藥的配伍，從而發(fā)揮更大的效果，尚需從多層次、多學(xué)科、多種實(shí)驗(yàn)技術(shù)手段對單味中藥、藥對及中藥復(fù)方促進(jìn)或抑制血管新生的作用及其機(jī)制進(jìn)行更具體、更深入的實(shí)驗(yàn)研究。