三種補腎中藥有效成分對皮質酮致骨質疏松大鼠骨髓間充質干細胞基因表達譜的作用
卞琴,黃建華,楊鑄,等
摘要:目的:觀察3種補腎中藥淫羊藿、補骨脂和女貞子各自的有效成分淫羊藿苷、補骨脂素和齊墩果酸對皮質酮大鼠骨髓間充質干細胞(bone marrow stromal cell,BMSC)的調控作用。方法:50只Sprague-Dawley大鼠隨機分為正常對照組、皮質酮造模組(模型組)、皮質酮加淫羊藿苷治療組(淫羊藿苷組)、皮質酮加補骨脂素治療組(補骨脂素組)、皮質酮加齊墩果酸治療組(齊墩果酸組)(后3組合稱治療組)。模型組和治療組予皮質酮皮下注射,每日1次,連續(xù)14 d。正常對照組予等劑量橄欖油皮下注射。治療組皮質酮注射前5 d開始按20 mg/kg給予對應藥物每日1次灌胃,連續(xù)19 d。分別于造模第1、4、7、11和14 d稱量體質量,大鼠處死后取第4腰椎進行Micro-CT掃描,評價骨量改變情況,所選結構參數(shù)包括:(1)骨小梁的體積(bone volume,BV)與樣本的體積(total volume,TV)的比值,為興趣區(qū)域(region of interest,ROI)內代表骨性結構體素的總體積與區(qū)域內所有體素的總體積之比;(2)骨小梁間隙(trabecular spacing,Tb.Sp);(3)骨小梁厚度(trabecular thickness,Tb.Th);(4)骨小梁數(shù)目(trabecular number,Tb.N)。BV/TV、Tb.Sp、Tb.Th、Tb.N等數(shù)據(jù)從軟件直接獲得。采用全骨髓貼壁培養(yǎng)法培養(yǎng)原代BMSC,于取材后第7天干細胞基因芯片技術檢測mRNA表達?;虮磉_譜檢測操作過程由上??党缮锕こ逃邢薰就瓿?;基因表達譜數(shù)據(jù)分析各組基因差異表達用Genespring 4.0軟件分析?;虿町惐磉_(上調或下調)兩倍以上為有意義。結果:造模和治療后各組大鼠體質量沒有發(fā)生明顯變化。Micro-CT顯示,皮質酮注射14 d后,模型組與正常對照組之間,治療組與模型組之間腰椎骨形態(tài)計量學參數(shù)未出現(xiàn)顯著變化。干細胞基因表達譜顯示在皮質酮改變的基因中,淫羊藿苷、補骨脂素和齊墩果酸分別可逆轉11、12和15種基因。3個有效成分共同作用的基因有5種,主要包括成骨分化相關分子Alpl和Bmpr1a,細胞周期調節(jié)相關因子Cdkn2a和細胞因子Fgf21,以及Notch信號通路上Adam17分子。結論:補腎中藥可能從BMSC周期調節(jié)和細胞代謝等方面發(fā)揮促進BMSC成骨分化的作用,最終實現(xiàn)治療骨質疏松的療效,但其確切的機制還有待深入研究。
來源出版物:中西醫(yī)結合學報, 2011, 9(2): 179-185
入選年份:2016