化學(xué)

楊悠悠，謝云峰，田菲菲，等

常見(jiàn)食品中鄰苯二甲酸酯類(lèi)增塑劑含量及食品包裝材料中鄰苯二甲酸酯類(lèi)增塑劑遷移量的測(cè)定

楊悠悠，謝云峰，田菲菲，等

目的：臺(tái)灣“塑化劑”風(fēng)波以后，增塑劑越來(lái)越受到人們的關(guān)注，成為近年食品安全風(fēng)險(xiǎn)重點(diǎn)監(jiān)控對(duì)象。本文通過(guò)不同食品基質(zhì)中鄰苯二甲酸酯類(lèi)增塑劑分離分析方法的優(yōu)化及不同食品包裝材料中鄰苯二甲酸酯類(lèi)增塑劑遷移方案的考察，以期將其應(yīng)用于鄰苯二甲酸酯類(lèi)增塑劑的日常風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)控中。方法：采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，優(yōu)化使用液液萃取及固相萃取的樣品前處理方式，進(jìn)行果汁飲料、白酒、牛奶等從簡(jiǎn)單到復(fù)雜食品基質(zhì)中鄰苯二甲酸酯類(lèi)增塑劑的分離分析方法的建立，提供食品中鄰苯二甲酸酯類(lèi)增塑劑含量的監(jiān)測(cè)評(píng)價(jià)手段。此外，將該方法應(yīng)用于食品包裝材料中鄰苯二甲酸酯類(lèi)增塑劑的遷移研究，以異辛烷為油脂食品模擬物，測(cè)定保鮮膜與保鮮袋中16種鄰苯二甲酸酯類(lèi)增塑劑的遷移量。結(jié)果：通過(guò)程序升溫條件、柱流速、進(jìn)樣口溫度、進(jìn)樣模式等一系列條件的優(yōu)化，16種鄰苯二甲酸酯得到了基線(xiàn)分離，采用選擇離子監(jiān)測(cè)模式（SIM），以確保分析方法有較高的檢測(cè)靈敏度以及減少基質(zhì)干擾。在優(yōu)化的色譜條件下，采用內(nèi)標(biāo)法定量，以各目標(biāo)化合物與內(nèi)標(biāo)物的峰面積比對(duì)濃度比繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，相關(guān)系數(shù)均大于0.999。16種鄰苯二甲酸酯類(lèi)增塑劑的檢出限（LOD，3 S/N）范圍為0.005～0.025 μg/mL；峰面積相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）均小于2%。對(duì)于簡(jiǎn)單基質(zhì)的樣品如水樣或果汁飲料等，僅需采用正己烷進(jìn)行提取即可獲得滿(mǎn)意的回收率，16種鄰苯二甲酸酯類(lèi)增塑劑的回收率范圍為75%～107%。含酒精樣品中，提取前需除去酒精，16種鄰苯二甲酸酯的回收率可獲得顯著提高。對(duì)于復(fù)雜基質(zhì)如牛奶樣品，采用乙腈提取，凈化過(guò)程則采用無(wú)水MgSO4和PSA填料。對(duì)于需要日常監(jiān)測(cè)的鄰苯二甲酸酯DMP、DBP、DIBP及DEHP，它們的回收率范圍為75%～94%，完全滿(mǎn)足分析需求。在測(cè)定食品包裝材料中塑化劑的遷移量時(shí)，采用異辛烷為食品模擬物，以模擬家用儲(chǔ)存油脂食物時(shí)的遷移情況。檢測(cè)數(shù)據(jù)表明，保鮮袋基本不存在增塑劑的遷移，而在保鮮膜產(chǎn)品中，塑化劑的遷移行為非常明顯，對(duì)于有明確遷移限量標(biāo)準(zhǔn)的DBP和DEHP均存在超標(biāo)情況。另外，作為國(guó)家重點(diǎn)監(jiān)測(cè)對(duì)象的DIBP，其含量也較高，為8.17 mg/kg。因而，保鮮膜在使用過(guò)程中應(yīng)避免接觸油脂性食品。結(jié)論：本文建立了用于檢測(cè)飲料、白酒及牛奶三類(lèi)從簡(jiǎn)單到復(fù)雜食品基質(zhì)中16種鄰苯二甲酸酯的GC-MS分析方法。采用SIM模式，顯著提高了檢測(cè)的靈敏度與選擇性；通過(guò)優(yōu)化液液萃取及基質(zhì)分散固相萃取樣品前處理方法，獲得了較高的回收率，可滿(mǎn)足實(shí)際樣品中痕量鄰苯二甲酸酯類(lèi)塑化劑檢測(cè)要求。此外，將所建立的分析方法應(yīng)用于常見(jiàn)食品包裝材料安全性考察，發(fā)現(xiàn)保鮮膜存在顯著的增塑劑遷移現(xiàn)象。該方法簡(jiǎn)便、快速、經(jīng)濟(jì)、可靠，適用于對(duì)食品及食品包裝材料中鄰苯二甲酸酯類(lèi)增塑劑的常規(guī)監(jiān)測(cè)。

來(lái)源出版物：色譜, 2013, 31(7): 674-678

入選年份：2015

超高效液相色譜—飛行時(shí)間質(zhì)譜法高通量篩查乳制品中20種鎮(zhèn)靜劑

嚴(yán)麗娟，張潔，潘晨松，等

摘要：食品中獸藥殘留檢測(cè)已從單一化合物發(fā)展為多種不同化合物的同時(shí)定性和定量分析。與低分辨的三重四級(jí)桿質(zhì)譜不同，高分辨飛行時(shí)間質(zhì)譜能夠采集高質(zhì)量分辨率和高準(zhǔn)確度的全掃描數(shù)據(jù)，目標(biāo)化合物數(shù)目沒(méi)有任何限制。利用精確分子量和同位素峰形還可對(duì)異常未知峰進(jìn)行準(zhǔn)確的定性分析。鎮(zhèn)靜劑藥物具有抑制躁、鎮(zhèn)吐等作用，可能被添加到奶牛飼料中以促進(jìn)采食，提高飼料轉(zhuǎn)化率，并緩解奶牛熱應(yīng)激，提高產(chǎn)奶量。但是，這類(lèi)藥物的殘留會(huì)造成過(guò)敏、心悸、肝損害等不良反應(yīng)。鑒于我國(guó)食品安全的現(xiàn)狀，有必要對(duì)更多鎮(zhèn)靜劑進(jìn)行監(jiān)測(cè)。本研究中，利用超高效液相色譜/高分辨飛行時(shí)間質(zhì)譜，結(jié)合數(shù)據(jù)庫(kù)，建立了乳制品中常見(jiàn)鎮(zhèn)靜劑（唑吡旦、利眠寧、氯氮平、咪達(dá)唑侖、氟西泮、氟哌啶醇、硝西泮、氟硝西泮、異丙嗪、艾司唑侖、安眠酮、諾氟西汀、奧沙西泮、阿普唑侖、利血平、三唑侖、氯丙嗪、替馬西泮、甲硫達(dá)嗪、地西泮）的高通量篩查方法。樣品以乙腈和酸化乙腈沉淀蛋白質(zhì)和脂肪，冷凍離心濃縮，經(jīng)超高效液相色譜分離，采用電噴霧離子源，正離子模式，基質(zhì)匹配法進(jìn)行定量分析，可在9 min內(nèi)對(duì)20種鎮(zhèn)靜劑進(jìn)行高通量篩查和定量分析。鎮(zhèn)靜劑的質(zhì)量濃度在1～500 mg/L或5～1000 mg/L 范圍內(nèi)具有較好的線(xiàn)性關(guān)系，檢出限為 0.3～1.5 mg/L，定量限為1～5 mg/L。在5和50 mg/L添加水平時(shí)，平均回收率為76.1%～108.2%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.5%～9.0%。利用Target Analysis軟件建立鎮(zhèn)靜劑數(shù)據(jù)庫(kù)，并應(yīng)用于加標(biāo)樣品的篩查分析。通過(guò)數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)，樣品中添加的鎮(zhèn)靜劑被全部篩查出來(lái)，鑒定準(zhǔn)確度達(dá)到了100%，保留時(shí)間偏差小于0.1 min，質(zhì)量偏差小于3 mDa，同位素峰形匹配度大于89.5%。國(guó)標(biāo)GB/T22993—2008中氯丙嗪和氟哌啶醇的檢出限分別為0.5和0.1 mg/L，而本研究中這兩種鎮(zhèn)靜劑的檢出限均為0.3 mg/L，與國(guó)標(biāo)相當(dāng)。由于我國(guó)目前尚未對(duì)乳制品中鎮(zhèn)靜劑制定限量標(biāo)準(zhǔn)，本研究參考了日本肯定列表的一律標(biāo)準(zhǔn)。本方法中鎮(zhèn)靜劑的檢出限均低于一律標(biāo)準(zhǔn)的限量值（10 mg/L）。因此，本方法完全能夠滿(mǎn)足日常檢測(cè)的需要。利用本方法對(duì)購(gòu)自超市的8個(gè)不同品牌的50余份乳制品進(jìn)行了篩查分析，均未檢出陽(yáng)性樣品。

來(lái)源出版物：分析化學(xué), 2013, 41(1): 31-35

入選年份：2015

基質(zhì)固相分散—超快速液相色譜法測(cè)定牛肉中磺胺類(lèi)獸藥

王重洋，王遠(yuǎn)鵬，王寧，等

摘要：磺胺類(lèi)藥物主要通過(guò)外用或作為飼料添加劑而引入動(dòng)物體中。近年來(lái)，動(dòng)物源食品中磺胺類(lèi)藥物殘留量超標(biāo)現(xiàn)象十分嚴(yán)重，尤其是在豬、禽、牛等動(dòng)物源食品中。歐盟規(guī)定肉類(lèi)食品中的磺胺類(lèi)藥物的MRL為單一磺胺類(lèi)藥物≤25 μg/kg，磺胺類(lèi)藥物總量≤100 μg/kg。國(guó)際食品法典委員會(huì)與我國(guó)農(nóng)業(yè)部2002年12月發(fā)布的235號(hào)公告《動(dòng)物性食品中獸藥最高殘留限量》中規(guī)定動(dòng)物組織中磺胺類(lèi)藥物的MRL為100 μg/kg?；|(zhì)固相分散（matrix solid phase dispersion，MSPD）是由Barker最先提出的樣品前處理技術(shù)，將樣品均化、預(yù)處理、過(guò)濾、凈化、提取過(guò)程一并完成，避免了樣品均化、沉淀、離心、濃縮等造成的檢測(cè)對(duì)象的損失，節(jié)約時(shí)間和溶劑的用量，因此被廣泛應(yīng)用于固體、半固體和高粘性的生物樣品的制備。目前該技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域囊括了動(dòng)物組織及植物樣品。在其發(fā)展過(guò)程當(dāng)中，由于其具備無(wú)需萃取溶劑、提取條件溫和（室溫和大氣壓）、適用范圍更廣等優(yōu)點(diǎn)，而使得現(xiàn)場(chǎng)處理樣品成為可能?；前奉?lèi)獸藥的殘留檢測(cè)方法主要有高效液相色譜（HPLC），氣相色譜法（GC），液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（HPLC-MS），氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（GC-MS），毛細(xì)管電泳法（CE）等。GC需要進(jìn)行樣品衍生操作，不利于實(shí)際樣品的快速分析。HPLC-MS/MS和GC-MS具有準(zhǔn)確性好、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，但儀器價(jià)格昂貴，普及范圍受到限制。CE重現(xiàn)性差，限制了其廣泛應(yīng)用。目前，由于液相色譜儀的普及，液相色譜法已經(jīng)廣泛應(yīng)用于磺胺類(lèi)獸藥殘留的檢測(cè)。本實(shí)驗(yàn)采用超快速液相色譜（UFLC）對(duì)牛肉中磺胺類(lèi)獸藥殘留進(jìn)行同時(shí)測(cè)定。本研究采用基質(zhì)固相分散-超快速液相色譜測(cè)定了牛肉組織中磺胺噻唑、磺胺甲基嘧啶、磺胺甲基異惡唑和磺胺間二甲氧嘧啶?；|(zhì)固相分散萃取的最佳條件為：硅藻土為分散劑，6 mL甲醇為洗脫劑，樣品與分散劑的質(zhì)量比為1︰4。方法：的檢出限為4.39～7.82 ng/g，定量限為14.62～26.08 ng/g，4種磺胺化合物回收率為71.73%～113.13%，測(cè)定的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.9%～12.7%。實(shí)驗(yàn)建立了牛肉中4種磺胺類(lèi)獸藥殘留的基質(zhì)固相分散-超快速液相色譜測(cè)定方法。采用基質(zhì)固相分散技術(shù)進(jìn)行樣品前處理，具有樣品處理簡(jiǎn)單、快速、提取效率高、消耗溶劑少和吸附劑成本低等優(yōu)點(diǎn)，超快速液相色譜技術(shù)也具有高通量樣品分析的能力。

來(lái)源出版物：分析化學(xué), 2013, 41(1): 83-87

入選年份：2015

尿液代謝組學(xué)方法研究人參總皂苷治療糖尿病心肌病大鼠作用機(jī)制

谷金寧，?？。ぷ峪P，等

摘要：利用基于液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)的代謝組學(xué)方法，研究人參總皂苷（TG）治療糖尿病心肌?。―CM）大鼠尿液中代謝物的變化，結(jié)合多元統(tǒng)計(jì)學(xué)分析方法尋找潛在生物標(biāo)記物，考察了人參總皂苷治療糖尿病心肌病大鼠的效應(yīng)機(jī)制。通過(guò)建立糖尿病心肌病大鼠模型，隨機(jī)分為模型組和TG給藥組，TG組口服人參總皂苷，模型組和空白對(duì)照組給予生理鹽水。連續(xù)給藥12周后收集24小時(shí)尿液樣本，采用快速高分辨液相色譜/四級(jí)桿—飛行時(shí)間/質(zhì)譜（RRLC/Q-TOF/MS）技術(shù)對(duì)空白組、DCM組和TG組大鼠尿樣的尿液代謝物進(jìn)行分析，采用主成分分析對(duì)兩組代謝物進(jìn)行分類(lèi)，并尋找潛在生物標(biāo)記物，同時(shí)檢測(cè)心肌病理超微結(jié)構(gòu)、血液生化指標(biāo)和心肌氧化應(yīng)激水平。TG降低了DCM大鼠心肌超微結(jié)構(gòu)損傷并改善其血脂、血糖及心肌氧化應(yīng)激水平，心肌電鏡結(jié)果提示糖尿病心肌病模型成功建立，TG治療組可改善糖尿病心肌超微結(jié)構(gòu)損傷。TG可通過(guò)降低血糖與血脂的水平，保護(hù)心臟免受葡萄糖和脂類(lèi)代謝產(chǎn)物引起的心肌損傷，并降低心肌氧化應(yīng)激水平。RRLC/Q-TOF/MS檢測(cè)結(jié)果表明，DCM組和TG組大鼠的尿液代謝物譜發(fā)生了明顯變化，且兩組能得到很好的區(qū)分，發(fā)現(xiàn)并鑒定了3種生物標(biāo)記物：蛋氨酸亞砜、L-肉毒堿和精氨基琥珀酸。TG可能通過(guò)影響糖尿病心肌病大鼠檸檬酸循環(huán)、脂肪酸代謝和氧化應(yīng)激水平，從而對(duì)糖尿病心肌病大鼠體內(nèi)的代謝紊亂進(jìn)行調(diào)節(jié)。精氨基琥珀酸經(jīng)精氨基琥珀酸裂解酶作用生成延胡索酸進(jìn)入檸檬酸循環(huán)，而檸檬酸循環(huán)是糖類(lèi)、脂類(lèi)、氨基酸的最終代謝通路，精氨基琥珀酸水平異常升高可能是精氨基琥珀酸裂解酶下調(diào)造成，表明檸檬酸循環(huán)可能因缺乏底物的參與而減弱，經(jīng)TG治療后的DCM大鼠尿液中精氨基琥珀酸水平恢復(fù)性下降，這可能是TG對(duì)于檸檬酸循環(huán)的調(diào)節(jié)機(jī)制。L-肉毒堿對(duì)于給肌肉包括心肌提供能量來(lái)說(shuō)非常關(guān)鍵，L-肉毒堿最重要的代謝功能是轉(zhuǎn)運(yùn)脂肪到肌肉（包括心?。┘?xì)胞的線(xiàn)粒體中用于氧化，這也是心臟大部分能量的來(lái)源。TG治療后的DCM大鼠尿液中L-肉毒堿水平升高表明人參總皂苷對(duì)于心肌代謝和能量供給的積極作用。蛋氨酸亞砜是蛋氨酸被ROS經(jīng)兩電子依賴(lài)機(jī)制氧化產(chǎn)物，被認(rèn)為是體內(nèi)氧化應(yīng)激的一個(gè)生物標(biāo)記物，經(jīng)TG治療后，DCM大鼠尿液中蛋氨酸亞砜減少，這可能是TG一種可能的抗氧化作用機(jī)制。本研究利用基于RRLC/MS的代謝組學(xué)方法研究了人參總皂苷治療糖尿病大鼠的尿液代謝譜變化并檢測(cè)了血液生化指標(biāo)和心肌氧化應(yīng)激水平，多元統(tǒng)計(jì)分析表明，疾病模型組與給藥治療組獲得了較好的區(qū)分，找出并鑒定了3個(gè)生物標(biāo)記物蛋氨酸亞砜、L-肉毒堿和精氨基琥珀酸，這些標(biāo)記物的變化趨勢(shì)反映了人參總皂苷在檸檬酸循環(huán)、脂肪酸代謝和氧化應(yīng)激上的調(diào)節(jié)作用，闡明了人參總皂苷治療糖尿病心肌病的可能的作用機(jī)制。

來(lái)源出版物：分析化學(xué), 2013, 41(3): 371-376

入選年份：2015

定量核磁共振波譜法同時(shí)測(cè)定中藥虎杖中白藜蘆醇和虎杖苷的含量

禹珊，郭強(qiáng)勝，王會(huì)琳，等

摘要：目的：虎杖作為常用中藥已收入中國(guó)藥典。白藜蘆醇和虎杖苷是虎杖中兩種主要藥效成分，近年來(lái)測(cè)定這兩種成分主要以HPLC和液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用為主。定量核磁共振波譜法（qNMR）簡(jiǎn)單、快捷，實(shí)際樣品測(cè)定時(shí)可以不使用待測(cè)組分的對(duì)照品，已先后被各國(guó)藥典收錄。本文通過(guò)對(duì)虎杖樣品進(jìn)行有效的提取和凈化，用定量核磁共振波譜建立同時(shí)測(cè)定虎杖中白藜蘆醇和虎杖苷的方法。方法：虎杖樣品以乙醇-水（4︰1，v/v）室溫超聲提取30 min，抽濾、旋干后再用丙酮兩次超聲提取凈化后抽濾并旋干，精密稱(chēng)取并加入用基準(zhǔn)物質(zhì)鄰苯二甲酸氫鉀標(biāo)定的2,3,5-三碘苯甲酸為內(nèi)標(biāo)（標(biāo)定時(shí)溶劑為氘代二甲亞砜-重水（4︰1，v/v）），在塑料離心管中超聲溶于氘代二甲亞砜-重水（10︰1，v/v）混合溶劑，然后轉(zhuǎn)移至核磁管用定量核磁共振氫波譜法測(cè)定。定量峰為6.388～6.391（白藜蘆醇：d，2H）、6.322～6.330（虎杖苷：t，1H），8.329～8.332（內(nèi)標(biāo)2,3,5-三碘苯甲酸：d，1H）和7.917～7.935（鄰苯二甲酸氫鉀：dd，2H）。核磁共振波譜（NMR）采集條件為：脈沖序列zg30，脈沖寬度14.4 μs。選擇延遲時(shí)間5 s，掃描次數(shù)32次。測(cè)定樣品的NMR譜圖積分時(shí)，先將NMR譜圖基線(xiàn)調(diào)平，選定峰積分區(qū)間，每個(gè)峰積分3～5次，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）＜1%時(shí)取平均值。用中國(guó)藥典2010版中的絕對(duì)定量公式計(jì)算含量。結(jié)果：通過(guò)考察實(shí)驗(yàn)條件對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響選定樣品提取與凈化的預(yù)處理?xiàng)l件，以及氘代試劑、內(nèi)標(biāo)、采集參數(shù)等NMR實(shí)驗(yàn)條件。歸屬了樣品與內(nèi)標(biāo)NMR譜圖中的各NMR信號(hào)峰。選定的定量峰不受附近峰的干擾，各定量峰的信噪比符合要求。對(duì)所建立NMR測(cè)定方法進(jìn)行了方法評(píng)價(jià)。組分峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積比值的日內(nèi)與日間精密度（RSD）均小于0.6%。以（樣品/內(nèi)標(biāo)）質(zhì)量比為橫坐標(biāo)（X），NMR定量峰面積比為縱坐標(biāo)（Y），用標(biāo)定后純品評(píng)價(jià)的零截距標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)分別為白藜蘆醇：Y＝4.4368X，相關(guān)系數(shù)R＝0.9994；虎杖苷：Y＝1.2885X，R＝0.9995，理論計(jì)算線(xiàn)性曲線(xiàn)的斜率對(duì)白藜蘆醇為4.3797，對(duì)虎杖苷為1.2803。兩者接近，可以直接用絕對(duì)定量模式測(cè)定。用線(xiàn)性回歸曲線(xiàn)Y軸截距的偏差與斜率計(jì)算定量NMR方法的檢測(cè)限和定量限，白藜蘆醇和虎杖苷的檢測(cè)限分別為0.23 g/L和0.24 g/L，定量限評(píng)價(jià)還考慮了英國(guó)藥典中NMR峰信噪比大于150的要求，結(jié)果白藜蘆醇為0.69 g/L，虎杖苷為1.57 g/L。樣品提取后qNMR方法的回收率結(jié)果白藜蘆醇為99.6%～102.3%（RSD＝1.0%，n＝6），虎杖苷為98.7%～101.1%（RSD＝0.9%，n＝6）。包括樣品提取過(guò)程的回收率結(jié)果白藜蘆醇為97.7%～103.5%（RSD＝2.4%，n＝6），虎杖苷為94.5%～99.2%（RSD＝1.6%，n＝6）。實(shí)際測(cè)定4種虎杖飲片、超微飲片及配方顆粒樣品中白藜蘆醇含量為3.57～5.69 mg/g；虎杖苷含量為12.73～24.07 mg/g。結(jié)論：建立了qNMR同時(shí)定量中藥虎杖中白藜蘆醇和虎杖苷的方法。所建立的樣品提取方法穩(wěn)定有效，定量NMR方法精密度好，線(xiàn)性評(píng)價(jià)顯示可以直接用絕對(duì)定量公式計(jì)算含量，定量準(zhǔn)確?？捎糜诨⒄葘?shí)際樣品的測(cè)定。

來(lái)源出版物：分析化學(xué), 2015, 43(1): 69-74

入選年份：2015

固相萃取—高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定養(yǎng)殖海水中23種抗生素

杜鵑，趙洪霞，陳景文

摘要：目的：抗生素因其可導(dǎo)致抗性增加和超級(jí)細(xì)菌產(chǎn)生而成為被廣泛關(guān)注的新型環(huán)境污染物。由于環(huán)境基質(zhì)的復(fù)雜性，目前沒(méi)有同時(shí)分析多種抗生素的標(biāo)準(zhǔn)方法。已有方法分析的抗生素類(lèi)別較少，相對(duì)耗時(shí)較長(zhǎng)，本研究通過(guò)優(yōu)化分析和前處理?xiàng)l件，建立了6類(lèi)23種抗生素的快速分析方法，并用于對(duì)養(yǎng)殖海水的分析。方法：取經(jīng)0.45 μm玻璃纖維濾膜過(guò)濾的水樣1 L，加入50 ng氘代磺胺甲惡唑，用鹽酸-水溶液（1/1，v/v）調(diào)節(jié)pH至2.5；以流速10 mL/min經(jīng)過(guò)用20 mL甲醇、6 mL超純水和6 mL pH為2.5的鹽酸溶液活化的HLB柱進(jìn)行富集，用10 mL超純水淋去雜質(zhì)，氮?dú)獯祾? min后用12 mL甲醇分兩次洗脫。洗脫液在40℃水浴中氮吹至近干，定容至1 mL，并用0.22 μm濾膜過(guò)濾。采用Agilent LC1100-6410B液質(zhì)系統(tǒng)進(jìn)行測(cè)定，進(jìn)樣量5 μL，柱溫40℃，洗脫梯度以95%A（甲酸0.1%（v/v）-1 g/L甲酸銨水溶液）-5%B（甲醇-乙腈（1/1，v/v））起始，保持3 min，30 min內(nèi)線(xiàn)性變?yōu)?8%B，流速0.3 mL/min；質(zhì)譜檢測(cè)采用ESI+/ESI﹣切換多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式。結(jié)果：氯霉素類(lèi)在ESI模式下響應(yīng)較強(qiáng)，而其他5類(lèi)抗生素相反，因此本方法中選擇正負(fù)離子同時(shí)監(jiān)測(cè)，一次完成23種目標(biāo)抗生素分析，減少了分析時(shí)間。比較分離效果，選擇了Waters Xterra柱（100 mm×2.1 mm，3.5 μm）。本研究中甲醇做溶劑時(shí)，響應(yīng)值偏低且色譜峰出現(xiàn)前伸現(xiàn)象，而采用初始流動(dòng)相（5%B）時(shí)得到改善，提高了方法靈敏度。前處理中，溶液pH會(huì)影響抗生素的形態(tài)、穩(wěn)定性和與萃取柱填料之間的作用，考察酸性、中性（未調(diào)節(jié)pH）和堿性條件下的萃取效果，確定上樣pH為大部分抗生素回收率最高時(shí)的2.5。洗脫實(shí)驗(yàn)表明，以6 mL甲醇洗脫兩次，可保證較高的回收率，縮短了分析時(shí)間。在處理前添加回收率指示物，并使用空白和平行樣進(jìn)行質(zhì)量控制與質(zhì)量保證。工作曲線(xiàn)通過(guò)測(cè)定稀釋成5個(gè)梯度混合標(biāo)準(zhǔn)工作液獲得，所有目標(biāo)物質(zhì)線(xiàn)性相關(guān)系數(shù)（r2）均大于0.995。方法：檢出限（MDL）為0.1～2.9 ng/L（除阿莫西林為8.5 ng/L）。在3個(gè)添加水平下考察方法回收率（n＝3）分別為47.3%～122.2%、53.9%～132.6%、58.6%～125.7%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為1.6%～18.8%、0.6%～14.5%、1.2%～13.8%，顯示本方法具有較好重現(xiàn)性和穩(wěn)定性。用所建方法對(duì)東營(yíng)地區(qū)5個(gè)海水養(yǎng)殖水樣中的抗生素進(jìn)行分析，共檢出6種抗生素，總質(zhì)量濃度在7.4～378.9 ng/L之間。所檢出抗生素基本涵蓋所有目標(biāo)種類(lèi)，顯示了實(shí)用性和有效性。結(jié)論：采用固相萃取—高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法技術(shù)建立了水中6類(lèi)23種抗生素同時(shí)測(cè)定的分析方法，MDL為0.1～2.9 ng/L，加標(biāo)回收率為47.3%～132.6%。采用本方法對(duì)海水養(yǎng)殖區(qū)5個(gè)養(yǎng)殖池水樣進(jìn)行了檢測(cè)，除青霉素類(lèi)外各類(lèi)抗生素均有檢出，所建立的方法高效、靈敏、可靠，可用于海水樣中多種抗生素的分析。

來(lái)源出版物：色譜, 2015, 33(4): 348-353

入選年份：2015