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    雞的動(dòng)物疫病檢測方法

    2018-02-03 22:26:55劉凱歌陳培娟
    農(nóng)家科技中旬版 2017年11期

    劉凱歌 陳培娟

    摘 要:使用疫病檢測技術(shù)能夠促進(jìn)雞類養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展。基于此,本文闡述了雞的動(dòng)物疫病檢測方法,包括血清中和實(shí)驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)、熒光抗體等血清學(xué)檢測方法,同時(shí),提出了核酸探針方法、熒光實(shí)時(shí)定量檢測方法、寡核苷酸指紋圖譜方法等分子生物學(xué)診斷方法,通過論述以上方法,為檢測人員提供一些參考。

    關(guān)鍵詞:雞新城疫??;血清學(xué)檢測方法;分子生物學(xué)檢測方法

    新城疫等疫病能夠威脅雞的生存,具有發(fā)病速度快、死亡率高、傳染性強(qiáng)等特點(diǎn),是阻礙雞類養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展的主要原因。通過對新城疫等疫病進(jìn)行正確的診斷是控制疾病發(fā)展、蔓延的重要前提?,F(xiàn)如今,雞的疫病檢測方法主要包括血清學(xué)檢測方法及分子生物學(xué)檢測方法,通過研究這兩種檢測方法,對于防治雞疫病具有重要意義。

    一、血清學(xué)檢測方法

    1.酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)

    酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)是現(xiàn)如今較為廣泛的檢測方法,是通過物理原理將血清中的抗體吸附在載體上,來實(shí)現(xiàn)免疫檢測。它具有靈敏、快速、簡便等優(yōu)點(diǎn),將其應(yīng)用在新城疫病檢測中,能夠有效的檢測出疫病病毒。

    2.熒光抗體方法

    熒光抗體方法是將熒光性的染料結(jié)合抗體免疫球蛋白,成為標(biāo)記抗體,將此類抗體和相抗源結(jié)合,能夠發(fā)生特異性變化。此時(shí)用紫外線進(jìn)行照射,可以在顯微鏡下看到由抗原激發(fā)出來紅色或是藍(lán)色的光纖,確定感染源。熒光抗體方法具有簡單、便捷、準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn),可以用在快速檢測中。

    二、分子生物學(xué)診斷方法

    1.核酸探針方法

    核酸探針方法是在獲得特異病毒片段基礎(chǔ)上,增加生物素,來作為一種分子雜交的檢測方法。其可以應(yīng)用在病毒原位雜交,來確定病毒的分布順序,同時(shí),使用探針還能夠區(qū)分病毒的強(qiáng)弱,具有極高的應(yīng)用價(jià)值。

    2.熒光實(shí)時(shí)定量檢測方法

    熒光實(shí)時(shí)定量檢測方法是在PCR反應(yīng)系統(tǒng)中增加熒光,使用信號(hào)來檢測整個(gè)PCR流程,最后通過曲線來描繪整個(gè)定量分析的方法。熒光實(shí)時(shí)定量檢測方法主要分為兩種:一是Taq Man;二是Green 1熒光染料??梢哉f,熒光實(shí)施定量檢測方法是基因檢測方法的飛躍。

    3.寡核苷酸指紋圖譜方法

    寡核苷酸指紋圖譜方法是將提純的RNA病毒進(jìn)行酶切,形成大小不一的片段,然后采用放射型光線定位,進(jìn)行雙向電泳,再通過顯影功能,得到光照圖譜。指紋圖譜可以顯示出病毒不同株的變異效果,因此,在防治雞疾病中具有非常突出的作用。

    三、雞的動(dòng)物疫病檢測方法具體應(yīng)用

    1.將檢測方法用在雞的疾病檢測中

    血清學(xué)檢測方法及分子生物學(xué)診斷方法是我國標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù),如今已經(jīng)成為雞疾病診斷和控制必不可少的手段,將它們應(yīng)用在大型雞類養(yǎng)殖場中,能夠有效防治雞疫病,提高養(yǎng)殖效益。

    (1)雞類養(yǎng)殖場需要主動(dòng)配合血清學(xué)檢測技術(shù),來對雞群進(jìn)行免疫檢測。通過定期開展血清學(xué)及生物分子檢測方法,分階段、分群監(jiān)控雞群的健康,來提高免疫效果。比如面對新城疫病,很多成年的雞或者攜帶抗體的雞,總是最后感染,而生長期的雞卻最先發(fā)病;

    (2)要開展雞疫病的病原監(jiān)測和流行病學(xué)調(diào)查,掌握疫病產(chǎn)生的規(guī)律及多發(fā)季節(jié),來把握疫情。如果雞類養(yǎng)殖場受到了病原攻擊,要使用血清學(xué)檢測方法及分子生物學(xué)檢測方法進(jìn)行免疫檢測,并將結(jié)果和養(yǎng)殖場的雞群發(fā)病、用藥等方面進(jìn)行結(jié)合,做出最科學(xué)的檢測報(bào)告及分析,從控制疫病的發(fā)展,確保雞群的存活率。

    2.將檢測方法用在雞疾病預(yù)警中

    (1)各級(jí)疾病監(jiān)控站需要對本地區(qū)的雞養(yǎng)殖場逐一進(jìn)行免疫監(jiān)督,確保防疫落實(shí)到位,發(fā)現(xiàn)疫情要趁早;雞疫病種類很多,在進(jìn)行接種時(shí),需使用血清學(xué)檢測,來確定疫病的種類及程度;在檢測過程中,要建立免疫檢測制度,切實(shí)做好雞疾病的防疫檢測工作。

    (2)在采血清時(shí),要保證標(biāo)本采取的準(zhǔn)確性及全面性;在相關(guān)部門發(fā)布疫情信息后,要及時(shí)檢測雞群是否發(fā)生疫情現(xiàn)象,做好防疫準(zhǔn)備,購買藥品及藥具設(shè)備,來做到早診斷、早治療;在開展預(yù)警工作中時(shí),疫病防控中心也要使用血清學(xué)等科學(xué)的檢測方法,來確定地區(qū)疫病情況,交代流行病特點(diǎn)及疫病防控方法,進(jìn)而將雞疫病控制在一定范圍內(nèi),來開展針對化的檢測工作。

    (3)很多雞類養(yǎng)殖場都配備了血清學(xué)檢測實(shí)驗(yàn)室,來開展抗體檢測工作。實(shí)驗(yàn)室主要采用血凝實(shí)驗(yàn)及ELISA實(shí)驗(yàn),血凝實(shí)驗(yàn)操作簡便,比如試管凝聚試驗(yàn)、禽流感及新城疫病等;ELISA實(shí)驗(yàn)可以檢測雞瘟、禽流感等檢測中。ELISA檢測具有敏感、重復(fù)性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。因此,雞類養(yǎng)殖場可以使用凝血試驗(yàn)及免疫技術(shù)來檢測雞的抗體滴度,進(jìn)而真正推動(dòng)血清學(xué)及分子生物學(xué)檢測技術(shù)進(jìn)步。

    3.將檢測方法用在雞的免疫評估中

    (1)監(jiān)測免疫效果。使用血清學(xué)檢測方法來監(jiān)測雞群的免疫抗體,可以得知雞的抗體水平及疫情來確定疫苗。分析雞群的疫情,能夠?yàn)閺V大養(yǎng)殖人員提供一些針對性的方法,及時(shí)關(guān)注疫病隱患,進(jìn)而采取有效措施。

    (2)修訂免疫程序?,F(xiàn)如今,很多雞類養(yǎng)殖人員的檢測方法都是借鑒他人的,由于地區(qū)不同,并非適合所有養(yǎng)殖戶。而使用血清學(xué)檢測方法及分子生物學(xué)檢測方法,定期開展檢測,能夠確定雞群的免疫接種時(shí)間。在使用疫苗時(shí),充分考慮MDA的影響,測定出母源抗體的消長水平,來確定首次免疫時(shí)機(jī)。檢測標(biāo)本中的母源抗體在一定時(shí)間內(nèi),會(huì)產(chǎn)生變化,抗體水平過高會(huì)導(dǎo)致免疫失??;抗體水平過低,會(huì)導(dǎo)致免疫空白期,給雞群帶來潛在威脅,因此,通過定期開展雞群血清學(xué)檢測及分支生物學(xué)檢測,能夠制定合理的免疫程序。

    四、結(jié)語

    綜上所述,通過血清學(xué)及分子生物學(xué)檢測方法,能夠有效預(yù)防雞疫病,在此基礎(chǔ)上,雞在接種時(shí),使用血清學(xué)檢測方法,能夠確定疫病的種類及程度,選取正確的疫苗;同時(shí),通過定期使用血清學(xué)生物分子檢測方法,分階段監(jiān)控雞群健康,能夠提高免疫效果。因此,合理使用血清學(xué)及分子生物檢測方法能夠提高雞的存活率。

    參考文獻(xiàn):

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