生理鹽水與富濃縮血小板血漿兩種毛囊培養(yǎng)液對自體毛發(fā)（囊）移植成活率的影響

朱啟剛　王志明　李梁

[摘要]目的：利用單位毛囊提取術（FUE技術）提取毛囊，觀察生理鹽水與富濃縮血小板血漿（PRP）兩種毛囊培養(yǎng)液對毛發(fā)移植術后毛囊成活率的影響。方法：40例患者均采用FUE技術，將影響毛囊成活率眾多因素控制在同等條件下，將同一個患者頭部分為左右A/B兩個種植區(qū)域，采用即插即種技術，每個區(qū)域種植100毛囊單位。觀察術后10個月A/B兩個區(qū)域在不同毛囊培養(yǎng)液的培育下毛囊成活率。結果：A組術后10個月平均毛囊成活率83%，B組74%，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.001）。結論：通過利用FUE技術治療脫發(fā)具有微創(chuàng)、恢復期短、無瘢痕、出血少等優(yōu)點，當影響毛囊成活率的多種因素在可控范圍內，利用PRP培養(yǎng)液的毛囊較生理鹽水組成活率高，對于供區(qū)毛囊資源稀少的患者提高其毛囊成活率具有積極的臨床意義。

[關鍵詞]PRP；自體毛發(fā)移植術；毛裳單位；毛囊移植

[中圖分類號]R758.71 [文獻標志碼]A [文章編號]1008-6455（2017）07-0013-03

“脫發(fā)”雖然不是重大頑疾，但可影響個人外貌形象，使之產生不自信的心理，影響其生活質量。脫發(fā)的原因是復雜多樣的，除了具有遺傳因素外，雄激素水平升高也是導致脫發(fā)重要原因之一。隨著生活節(jié)奏的加快巨大的職場競爭壓力及高度持續(xù)的精神緊張、上網、熬夜、染燙發(fā)及吸煙、酗酒、辛辣油膩等不良飲食習慣等都在損傷著頭發(fā)的健康。近年來，我國已有1億多脫發(fā)患者，發(fā)病呈逐年上升趨勢，且逐漸出現(xiàn)“低齡化”，中青年成為脫發(fā)人群的主力軍。毛發(fā)移植技術有很多種，如切取頭皮條游離術（FUT）、自體毛發(fā)移植術（FUE）、無痕毛發(fā)移植術（SHT）等，因毛囊單位體積極其微小，在分離微小毛囊過程中普遍存在著極易損傷性的問題而影響毛囊成活率。目前，國內少有關于培養(yǎng)液對毛囊成活率影響的研究報道，本實驗對40例脫發(fā)患者采用無痕毛發(fā)移植術，并將影響毛囊成活率的多種因素人為可控在一定范圍內，探討兩種不同培養(yǎng)液對毛囊成活率的影響。

1資料和方法

1.1一般資料：收集本院門診于2013年2月至2013年8月毛發(fā)移植患者40例，均為男性，年齡20～52歲，平均33.82歲，男性型脫發(fā)穩(wěn)定期，Norwood分級Ⅲ～Ⅳ級，前額脫發(fā)面積約16cm×4cm～17cm×6cm；術前向全部受術者說明兩種手術方式的特點、適應證、禁忌證及效果等，所有受術者均了解并愿意接受該手術方式。全部病例均為身體健康，頭皮無感染，無心腦血管及肝腎、造血系統(tǒng)嚴重疾病，無精神神經科疾病，均簽署手術知情同意書和臨床研究知情同意書。

1.2方法

1.2.1術前設計：根據三庭五眼的比例和患者臉型來確定新發(fā)際線位置和外形，即：下頦正中鼻尖前發(fā)際線長度各占1/3比例。劃定兩個對稱性的2.5cm²的脫發(fā)區(qū)域，將其分為A/B兩個種植區(qū)，甲紫碘酊固定；其他區(qū)域按正常需種植范圍畫線，供區(qū)在優(yōu)勢供區(qū)畫線。供區(qū)受區(qū)正面、左右45度、前額、頭頂、后枕部均需清晰拍照。見圖1。

1.2.2富濃縮血小板血漿制備：①抽取靜脈血20ml注入含抗凝劑的試管，以600轉離心10min，第一次離心分離出的血液成分分為3層；②吸取全部上清液及交界面下3mm的液體，并將其注入一個不含抗凝劑的試管中；③以200轉再次離心10min，離心后試管中最下部為少量的剩余濃縮紅細胞，最上部是乏血小板血漿（約占總體積80%），兩層之間黃色血漿即為PRP，加入氯化鈣0.2ml激活血小板。

1.2.3提取、制備毛囊：①患者取俯臥位常規(guī)消毒、鋪巾，采用1%利多卡因40ml局部神經阻滯浸潤及腫脹麻醉；②提取針芯內徑0.8mm行分散、提取毛囊，拔出毛囊后置于（0℃～4℃）生理鹽水中浸潤低溫保存；③單株毛囊在2倍的目視放大鏡下分離，毛囊外鞘直徑保留在0.3～0.6mm，每小時分離600株，毛囊離體時間控制在2h內；④將分離好的毛囊分別放入已標記A、B的2組毛囊培養(yǎng)皿中，將術前提取好的PRP用2ml注射器吸取后加氯化鈣0.2ml均勻平鋪推至于A組毛囊冰碗中浸潤保存，剩余1ml待種植時皮下多點注射，B組毛囊培養(yǎng)皿中為生理鹽水10ml。

1.2.4毛囊種植：毛囊于培養(yǎng)液中低溫保存（0℃～4℃）保存1.5h，夾持力度恒定的條件下用鑷子夾持毛囊]21/3處，用9號針頭在術前設計好的A、B兩組種植區(qū)域左右間隔交錯各種植100單位。余下毛囊種植畫線另外區(qū)域，用時1.5h。供區(qū)碘伏消毒外涂紅霉素軟膏敷料包扎固定，術畢。見圖2。

1.3統(tǒng)計學分析：所有數據采用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計分析，兩組間比較采用獨立樣本t檢驗。P<0.01認為差異具有統(tǒng)計學意義。

2結果

40例患者術后第1天供區(qū)換藥拆除紗布，術后7d清理局部血痂，術后1個月、3個月、6個月種植區(qū)毛發(fā)逐漸進入脫落期、休止期與生長期。在術后10個月用毛囊檢測儀放大50倍觀察、測量A/B兩區(qū)毛發(fā)數量，大部分種植區(qū)域的毛發(fā)生長茂密，可以覆蓋頭皮，毛發(fā)生長方向與原有毛發(fā)方向一致；A組術后10個月平均毛囊成活率（生長期，每100株內）為82.52%，B組為73.8%，且差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.001）。供區(qū)毛發(fā)總體數量分散減少，無明顯瘢痕。見圖3～4。

3討論

生理鹽水能夠避免細胞破裂，它的滲透壓和細胞外離子一樣所以不會讓細胞脫水或者過度吸水，故各種醫(yī)療操作中需要用液體的地方很多都用它，人體細胞生活中所處液體環(huán)境的濃度。

PRP與生理鹽水不同機制：PRP含有多種生長因子：①轉化生長因子B（TGF B）能促進成纖維細胞、前成骨細胞和血管內皮細胞的有絲分裂；②血小板衍生生長因子（PDGF）具有有絲分裂、促進血管生長、增減膠原蛋白合成、激活巨噬細胞及其它細胞因子的作用；③胰島素樣生長因子（IGF）促進細胞分化、增殖；④血管內皮細胞生長因子（VEGF）可刺激膠原蛋白及透明質酸的形成，有修復組織再生功能；⑤表皮細胞生長因子（EGF）是一只種強有效的促細胞分裂因子，它能刺激體內多種細胞的分裂和增殖，并促進ECM合成和沉積以及纖維組織的形成；⑥成纖維細胞生長因子-2（FGF-2）可激發(fā)細胞活化，加速組織修復。endprint

毛囊發(fā)育可分為3個階段。第一階段：毛囊生長期初期，為活躍的生長階段，毛囊細胞會主動繁殖和角化，非脫發(fā)的頭皮上，大約90%的頭發(fā)會處于這個階段，約持續(xù)3年；第二階段：毛發(fā)在生長中期，毛囊基底開始角化，形成棒狀，將其自身和真皮乳頭分開，然后向表面移動生長，最終僅靠結締組織條和真皮乳頭連接，該階段持續(xù)約2～3周；第三階段：毛囊生長終期，即“靜止期”，毛囊基底的附著處變得更薄弱，直到毛發(fā)最終脫落，在此階段，毛囊生長停止，這個階段約持續(xù)3～4月，也叫休止期。一些自然的頭發(fā)因手術的刺激而進入毛發(fā)生長中期，然后進入毛發(fā)生長終期，這被稱為靜止期脫發(fā)。此外，在非脫發(fā)頭皮上，有大約10%的毛囊會處于毛發(fā)生長終期。當每天脫發(fā)的速度超過生長速度時，頭發(fā)會變薄，最終形成脫發(fā)。

毛發(fā)移植方法多樣，移植術后毛囊成活率需重點關注。影響毛囊成活因素眾多，如毛囊供區(qū)選擇，毛囊單位提取方法，毛囊單位在分離過程中受到切割、擠壓、干燥，毛囊胚周圍多余組織切除大小，存儲條件，毛囊培植液，種植的方式，毛囊離體時間，室溫，局麻藥中腎上腺素濃度及受區(qū)血運情況（瘢痕）等都會影響毛囊的成活?？煞譃橹饔^因素和客觀因素分別闡述。

3.1主觀因素：①毛囊優(yōu)勢供區(qū)的選擇：通常在后發(fā)際邊緣上6～8cm，耳后發(fā)際線上方4～5cm范圍區(qū)域作為供區(qū)，此處毛囊無雄激素受體，可以不受雄性激素水平的影響，移植到受區(qū)不易脫落；②腫脹液中腎上腺素的濃度：在進行頭皮腫脹麻醉時筆者常采用1%利多卡因20ml+生理鹽水40ml+腎上腺素0.4ml的混合溶液，如果為了單純的頭皮止血加入過多的腎上腺素注射液收縮頭皮血管，會導致其乳頭缺血而脫發(fā)，頭皮會變成白色，甚至壞死；③在毛囊單位的提?。簡挝幻姨崛∵^程中極易損傷毛囊，建議將供區(qū)毛干理短1～2mm有利于毛囊的提?。虎苊业姆蛛x：一般毛囊在2倍的頭戴式放大鏡下分離，保留毛囊直徑0.3～0.6mm，除必要分離單株外其他無需分離單株，一并去除皮下脂肪和表皮；⑤毛囊離體后的保存條件：術中將毛囊放在盛有生理鹽水的培養(yǎng)皿中保濕，底部置于冰塊保持低溫環(huán)境（0℃～4℃），可以增強毛囊耐缺血缺氧的能力；⑥毛囊的離體時間：供區(qū)毛囊提取之后暫時中斷毛囊的血液循環(huán)，處于“休克狀態(tài)”，如果超過一定時間（約8h）部分毛囊會因為缺血導致壞死，表現(xiàn)為干癟、變長、卷曲；⑦種植方式的選擇：有多種毛發(fā)種植方法，如：寶石刀打孔法：損傷原有頭皮處的毛囊、出血多、恢復時間相對長；種植筆種植法：種植筆有0.6mm、0.8mm、1.0mm眉毛內徑的筆芯可供選擇；即插即種法：利用7^#、9^#不同直徑注射器針頭在受區(qū)插入打孔種植。⑧種植密度的選擇：在種植區(qū)每平方厘米超過30FU稱為高密度毛發(fā)移植，每次種植超過3000FU即稱為超大數量毛發(fā)移植，一次局部超大量種植可破壞皮下血管網使毛囊供血障礙影響毛囊成活；⑨術后護理：通常局部創(chuàng)口在24h后已收縮閉合，術后7d可進行清洗，但要注意方法，若清洗方法有誤將導致毛囊脫落。術后2個月盡量少食辛辣、酒、海鮮、油膩等刺激性食物，避免發(fā)生過敏及毛囊炎等并發(fā)癥。

3.2客觀因素：①自身毛囊的質量：供區(qū)毛囊質量各有不同，粗壯的毛囊對各種損傷抗擊力強，比如提取時損傷、分離時損傷、耐缺血時間、種植損傷等，粗壯毛囊的成活率較細軟的毛囊成活率強；②季節(jié)因素：冬季寒冷，頭皮血運較春夏時節(jié)差，毛發(fā)生長速度也較其他季節(jié)慢，可影響其成活效率；③患者自身的體質：身體虛弱以及伴有其他疾病者自體免疫功能差，毛囊的血運差、營養(yǎng)不足也不利于頭發(fā)快速生長；④受區(qū)血運情況：受區(qū)是否瘢痕存在，瘢痕區(qū)域組織增生、血運差，毛囊成活率低；⑤毛發(fā)移植術后多處于毛囊生長終期，故移植后近期不會出現(xiàn)明顯的增長，直至這一階段結束。

4結論

在影響毛囊成活率的多種因素在一定人為可控范圍內，A組術后10個月平均毛囊成活率（生長期，每100株內）較B組成活率高，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.001），說明富濃縮血小板通過血小板釋放其顆粒內容物到周圍環(huán)境中含有大量的生長因子可以提高毛囊的成活率，對于毛發(fā)稀疏、細軟者提高其毛囊成活率具有較高的臨床意義。endprint