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    多囊卵巢綜合征不孕患者卵泡液同型半胱氨酸水平檢測及與葡萄糖、雌二醇水平的相關(guān)性探討

    2018-02-01 11:10:40黃娟娟張利平
    檢驗醫(yī)學 2018年1期
    關(guān)鍵詞:卵子生殖半胱氨酸

    黃娟娟, 張利平, 張 娟, 李 華, 高 霞, 曹 英

    (1.延安大學附屬醫(yī)院產(chǎn)科,陜西 延安 716000;2.寶雞市婦幼保健院產(chǎn)科,陜西 寶雞 721000)

    多囊卵巢綜合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是常見的女性內(nèi)分泌疾病之一,在12~45歲的女性中發(fā)病率為5%~10%[1],是導致女性不孕的主要因素。有研究認為,胰島素抵抗和同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)水平升高可能是PCOS患者發(fā)生動脈粥樣硬化等心血管疾病的危險因素[2]。Hcy是細胞和組織生長的必需氨基酸,且是蛋氨酸降解的中間產(chǎn)物。血清Hcy水平受多種因素影響,包括年齡、性別、營養(yǎng)、吸煙、慢性炎癥、身體活動和胰島素等[3]。卵泡液中的Hcy水平可能反映了全身的Hcy代謝情況,同時也為卵子的發(fā)育提供了重要的微環(huán)境[4]?,F(xiàn)已證實在接受輔助生殖技術(shù)治療的PCOS患者中,血清Hcy水平與卵子、胚胎的質(zhì)量呈負相關(guān)[5]。PCOS患者代謝異常導致血清Hcy水平的變化可能會影響卵泡液中的Hcy水平,從而影響PCOS患者卵子和胚胎的質(zhì)量。為此,本研究檢測了行體外受精(in νitro fertilization,IVF)治療的PCOS患者的卵泡液Hcy水平,并分析其與卵泡液中葡萄糖(glucose,Glu)、雌二醇(estradiol,E2)水平的關(guān)系。

    1 材料和方法

    1.1 研究對象

    選取2014年3月—2015年9月在延安大學附屬醫(yī)院生殖醫(yī)學中心及寶雞市婦幼保健院生殖醫(yī)學中心行IVF治療的不孕患者100例,年齡20~42歲。診斷標準:夫妻可完成正常的性生活,且未避孕未育1年以上。其中有50例確診為PCOS患者,入組標準:B超監(jiān)測每側(cè)卵巢有>10個直徑2~8 mm的卵泡且卵巢間質(zhì)密度增強,月經(jīng)稀發(fā)(月經(jīng)周期>45 d)或閉經(jīng),睪酮>2.2 nmol/L或黃體生成素(luteotropic hormone,LH)/卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,F(xiàn)SH)比值≥2;排除患有其他系統(tǒng)性疾病的患者,如全身性炎性疾病、先天性腎上腺皮質(zhì)增生癥、高泌乳素血癥及甲狀腺疾病等,排除血性的卵泡液。另50例不孕婦女為非PCOS患者,不孕原因主要為男方因素或輸卵管因素。入組標準:月經(jīng)規(guī)律,月經(jīng)初期卵泡數(shù)<10個且大小正常;基礎(chǔ)激素水平正常。男性不育的診斷參考世界衛(wèi)生組織(World Health Organization,WHO)2010年標準。所有對象近3個月未服用激素類藥物及葉酸、B族維生素等可能影響Hcy代謝的藥物,且無吸煙、吸毒及酗酒史。該項研究經(jīng)延安大學附屬醫(yī)院及寶雞市婦幼保健院倫理委員會批準,所有參與者均簽署知情同意書。

    1.2 方法

    1.2.1 促排卵方案 患者在前一月經(jīng)周期的20 d左右(黃體中期)注射促性腺激素釋放激素激動劑(商品名為達必佳,0.1 mg/d)。下一個月經(jīng)周期第3天檢測血清激素水平,當FSH<5 IU/ L、LH<5 IU/L、E2<50 pg/mL、子宮內(nèi)膜<5 mm時,給予重組人促卵泡激素或尿促卵泡素(75 U/ 支)進行控制性卵巢刺激。當3個及以上的卵泡直徑達到18 mm時,檢測血清性激素水平,當日20:00—21:00注射5 000~10 000 IU人絨毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,HCG)。注射HCG 36 h后在在陰道超聲下取卵。

    1.2.2 收集卵泡液 9:00—11:00收集患者撿卵后的卵泡液。通過肉眼觀察判斷是否存在血液污染,丟棄渾濁或著色樣本。收集的卵泡液在4 ℃下3 000×g離心15 min,除去細胞成分,隨即-80 ℃凍存,后續(xù)進行生化指標和激素檢測。卵泡液從收集到凍存的時間間隔不超過30 min。

    1.2.3 各項指標的檢測 Glu采用己糖激酶法檢測。E2和胰島素采用ROCHE MODULAR E170全自動化學發(fā)光儀(瑞士羅氏公司)及配套試劑(電化學發(fā)光法)檢測。Hcy采用循環(huán)酶法,試劑盒由北京九強公司生產(chǎn),檢測儀器為OLYMPUS AUS 5400全自動生化分析儀(日本奧林巴斯公司)。

    1.3 統(tǒng)計學方法

    采用SPSS 17.0軟件進行統(tǒng)計分析。呈正態(tài)分布的數(shù)據(jù)以x± s表示,組間比較采用t檢驗。采用Pearson相關(guān)分析評估卵泡液Hcy水平與生殖指標的相關(guān)性。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

    2 結(jié)果

    2.1 PCOS組和非PCOS組一般資料比較

    PCOS組年齡、不孕年限、體重指數(shù)、原發(fā)性不孕比例、繼發(fā)性不孕比例、不孕因素、促性腺激素與非PCOS組比較差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05),而注射HCG 當日總卵泡數(shù)、直徑≥14 mm的卵泡數(shù)及平均直徑、直徑<14 mm的卵泡數(shù)、血清E2水平2個組之間差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

    2.2 PCOS組和非PCOS組卵泡液各項指標比較

    PCOS組卵泡液Hcy、胰島素水平均明顯高于非PCOS組(P<0.05),而卵泡液Glu、E2水平2個組之間差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

    2.3 PCOS組和非PCOS組臨床結(jié)局的比較

    非PCOS組獲卵數(shù)明顯低于PCOS組(P<0.05),而優(yōu)質(zhì)卵率、優(yōu)質(zhì)胚胎率及臨床妊娠率均明顯高于PCOS組(P<0.05)。2個組之間受精率差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表2。

    2.4 卵泡液Hcy水平與生殖指標的相關(guān)性分析

    Pearson相關(guān)分析顯示,PCOS及非PCOS患者卵泡液Hcy水平與體重指數(shù)、年齡、獲卵數(shù)及卵泡液E2、Glu水平均無相關(guān)性(P>0.05)。見表3。

    表1 PCOS組和非PCOS組卵泡液各項指標的比較 (x±s)

    表2 PCOS組和非PCOS組臨床臨床結(jié)局的比較

    表3 PCOS及非PCOS患者卵泡液Hcy水平與生殖指標的相關(guān)性分析

    3 討論

    Hcy是細胞和組織生長必需的氨基酸,同時提供了卵子發(fā)育非常重要的微環(huán)境。外周循環(huán)的環(huán)境變化可能會影響Hcy水平。因此,分析Hcy水平有利于了解血清代謝變化的信息。目前,已證實接受輔助生殖技術(shù)治療的PCOS患者Hcy水平與卵子及胚胎質(zhì)量呈負相關(guān)[6],但在接受輔助生殖技術(shù)治療的PCOS患者中還未見有卵泡液Hcy與卵泡液E2相關(guān)性的報道。

    本研究結(jié)果顯示,PCOS患者卵泡液Hcy水平明顯高于非PCOS患者(P<0.05)。有研究結(jié)果顯示PCOS患者血漿Hcy水平明顯升高[7]。本研究還發(fā)現(xiàn)PCOS患者卵泡液Hcy水平與體重指數(shù)、年齡、獲卵數(shù)及卵泡液E2、胰島素、Glu水平均無相關(guān)性(P>0.05),提示PCOS患者卵泡液Hcy水平不受這些因素的影響。因此,PCOS患者Hcy水平可能與胰島素抵抗和相對高雄激素血癥有關(guān)[8],但還需要更多的研究來揭示PCOS患者食物或體質(zhì)效應及高遺傳因素與Hcy的關(guān)系。

    本研究結(jié)果顯示PCOS患者的總平均獲卵數(shù)顯著高于非PCOS患者(P<0.003),但非PCOS患者的臨床妊娠率(50%)明顯高于PCOS患者(33%)。多數(shù)研究認為PCOS患者的卵子和胚胎質(zhì)量較差,受精率低,從而導致妊娠率降低[9],但有些研究則認為受精率不受影響[10]。在接受輔助生殖技術(shù)治療的婦女中,卵泡液Hcy水平與卵子及胚胎質(zhì)量呈顯著負相關(guān)[11]。由此可見,卵泡液Hcy水平可能會影響PCOS患者的妊娠結(jié)局。本研究結(jié)果還顯示PCOS組和非PCOS組之間卵泡液E2水平差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),與文獻報道[12]一致。有研究發(fā)現(xiàn)在IVF/胚胎移植周期中,PCOS患者與正常排卵的不孕婦女之間卵泡液E2水平差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)[13]。VOLPE等[14]發(fā)現(xiàn)PCOS患者與正常排卵的不孕婦女之間卵泡液E2水平無明顯差異。因此,促性腺激素刺激的PCOS患者卵巢存在正常的芳香化酶活性的固有潛能,PCOS并不是由遺傳性卵巢芳香化酶活性缺陷導致的。

    綜上所述,盡管PCOS和非PCOS患者的卵泡液Glu和E2水平是恒定的,但PCOS患者卵泡液Hcy水平明顯升高。

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