靈芝多糖生物活性研究進(jìn)展

才曉玲 何 偉 楊國(guó)琴

（1滇西科技師范學(xué)院，云南臨滄677000；2云南臨滄市民族中學(xué)，云南臨滄677000）

靈芝（Ganoderma lucidum）又稱靈芝草、神芝、芝草、仙草、瑞草，是多孔菌科植物赤芝或紫芝的干燥子實(shí)體。據(jù)本草綱目記載“靈芝性平，味苦，無(wú)毒，主胸中結(jié)，益心氣，補(bǔ)中，增智慧，不忘，久服輕身不老，延年神仙”。靈芝中含有多種活性物質(zhì)，具有抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫力、抗氧化、降血脂和降血糖等多種藥理作用[1-2]。目前，關(guān)于靈芝的研究多集中在人工栽培、液體深層發(fā)酵液及有效成分提取等方面，對(duì)于靈芝生物活性的研究也逐漸深入。筆者對(duì)靈芝生物活性方面的研究進(jìn)展進(jìn)行總結(jié)，以期為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用這一珍貴資源提供依據(jù)。

1 靈芝多糖生物活性

1.1 抗氧化

國(guó)內(nèi)外一些研究表明靈芝具有抗氧化活性，其活性成分為靈芝多糖（GLP），能夠顯著抑制高糖誘導(dǎo)的腎小球系膜細(xì)胞增殖，對(duì)羥自由基具有明顯的清除作用，且能減少自由基對(duì)細(xì)胞器的損傷，抑制不同氧化劑激發(fā)的脂質(zhì)過(guò)氧化作用，從而抑制細(xì)胞凋亡過(guò)程，延緩機(jī)體衰老［3-5］。張志軍等［6］報(bào)道靈芝多糖質(zhì)量濃度為2.5 mg∕mL時(shí)對(duì) DPPH（1，1-二苯基-2-三硝基苯肼）自由基的清除率達(dá)到57.6%，其清除能力與多糖的濃度存在一定的正相關(guān)；李響等[7]研究表明靈芝多糖能顯著增加表皮和真皮厚度，改善皮膚組織結(jié)構(gòu)，并提高皮膚組織超氧化物歧化酶水平，證實(shí)了靈芝多糖具有較好的抗氧化能力與延緩皮膚衰老作用；XU J等[8]研究還發(fā)現(xiàn)羧甲基化的靈芝多糖有更高的抗氧化活性，這將為食品和藥品中抗氧化劑的研發(fā)指明了新的方向。MDA（丙二醛）是自由基引起的脂質(zhì)過(guò)氧化的主要產(chǎn)物之一，經(jīng)常被用作機(jī)體組織中氧化損傷標(biāo)志物[9]。宿彥峰[10]研究表明，灌胃中、高劑量的GLP能顯著提高力竭運(yùn)動(dòng)后小鼠肝、肌肉中SOD（超氧化物歧化酶）、CAT（過(guò)氧化氫酶）、GSH-Px（谷胱甘肽過(guò)氧化物酶）活性，降低MDA活性，這表明GLP能上調(diào)機(jī)體組織抗氧化酶活性，清除過(guò)量自由基，降低脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，對(duì)力竭運(yùn)動(dòng)誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激及氧化損傷具有保護(hù)作用。這一結(jié)果與JIA J等[11]報(bào)道靈芝多糖具有顯著提高的小鼠SOD、CAT、GSH-Px等抗氧化酶活性；王君巧等[12]報(bào)道結(jié)果相一致，即灌服黑靈芝多糖可使脾臟組織中的SOD、CAT、T-AOC（總抗氧化能力）的含量較模型對(duì)照組顯著提高，而MDA含量較模型對(duì)照組顯著下降，進(jìn)一步證實(shí)了靈芝多糖具有抗氧化活性這一結(jié)論。有關(guān)靈芝多糖抗氧化作用機(jī)理，研究人員認(rèn)為靈芝多糖發(fā)揮抗氧化作用有一套完整的抗氧化防御機(jī)制，包括對(duì)機(jī)體SOD、T-AOC、CAT等一系列抗氧化酶活性的影響，從而使機(jī)體的自由基保持著動(dòng)態(tài)平衡[12-13]。

1.2 抗腫瘤

許多研究[14-17]表明靈芝多糖中β-D葡聚糖具有一定的抗腫瘤功效，其抗腫瘤機(jī)理可能是靠宿主的免疫介導(dǎo)發(fā)揮作用，通過(guò)激活并促進(jìn)免疫細(xì)胞（淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞、中性粒細(xì)胞）的增殖與分化、增加效應(yīng)免疫細(xì)胞的數(shù)量、抑制或殺傷腫瘤細(xì)胞而發(fā)揮抗腫瘤作用。郭焱等[18]應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)中藥?kù)`芝多糖對(duì)S180荷瘤小鼠T細(xì)胞亞群變化的影響，結(jié)果表明靈芝多糖使荷瘤小鼠的CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)量明顯提高，從而增強(qiáng)荷瘤小鼠T細(xì)胞免疫活性。也有研究人員認(rèn)為靈芝多糖可能是通過(guò)抑制腫瘤細(xì)胞的活動(dòng)、黏附作用及遷移反應(yīng)、減緩腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)速度而發(fā)揮抗腫瘤作用［19-22］；有研究表明靈芝多糖可抑制荷瘤小鼠S-180腫瘤的生長(zhǎng)，并增加荷瘤小鼠血液中白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的數(shù)量[17]；崔永偉[23]報(bào)道當(dāng)靈芝多糖劑量為250 mg∕kg時(shí)，對(duì)喂食S180小鼠肉瘤細(xì)胞的抑瘤率為43.44%；NONAK Y等[24]給接種乳腺內(nèi)瘤及S-180的小鼠飼喂含2.5%鹿角靈芝粉（AF）的飼料，發(fā)現(xiàn)服用后可顯著抑制腫瘤生長(zhǎng)，且延長(zhǎng)了存活期；李廣遠(yuǎn)等[25]應(yīng)用MTF比色法檢測(cè)靈芝多糖對(duì)人類白血病細(xì)胞株NB4細(xì)胞增長(zhǎng)的抑制作用，結(jié)果表明靈芝多糖在體外對(duì)NB4細(xì)胞增殖具有抑制作用并可加速其凋亡，抑制率最高分別為33.5%及18.77%；李楊［26］研究了靈芝硒多糖SeGLP-2B-1誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞MCF-7凋亡的機(jī)制，結(jié)果表明，SeGLP-2B-1作用MCF-7細(xì)胞24 h后即開(kāi)始出現(xiàn)早期的凋亡，72 h后抑制作用達(dá)到三個(gè)時(shí)間點(diǎn)的峰值，抑制率高達(dá)80.53%，IC50僅為0.158。綜上所述，靈芝的抗腫瘤機(jī)制是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程，并不是單一成分引起的單一的簡(jiǎn)單反應(yīng)，而是一個(gè)由多種靈芝成分引起的綜合系統(tǒng)反應(yīng)。一方面通過(guò)提高抑制腫瘤的細(xì)胞因子的合成和分泌發(fā)揮抗腫瘤作用；另一方面也通過(guò)減少抑制性細(xì)胞因子的水平而發(fā)揮抗腫瘤作用，但其具體的反應(yīng)機(jī)制還有待深入研究。

1.3 免疫調(diào)節(jié)

現(xiàn)代藥理研究表明，靈芝中的多糖具有免疫調(diào)節(jié)作用，可通過(guò)提高巨噬細(xì)胞、樹(shù)突細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞的細(xì)胞活性來(lái)調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能，增強(qiáng)抗感染能力；研究人員[27]通過(guò)小鼠靈芝多糖灌胃，腹腔注射雞紅細(xì)胞懸液后，觀察得到巨噬細(xì)胞能顯著提高對(duì)雞紅細(xì)胞的吞噬率及吞噬指數(shù)；靈芝多糖還能刺激細(xì)胞因子（IL-1、IL-2、IL-3、IL-6）、TNF-α（腫瘤壞死因子）、IFN-γ（干擾素）等細(xì)胞因子的分泌，調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的功能[37]。YU Q等[28-29]研究發(fā)現(xiàn)黑靈芝多糖可以明顯提高免疫抑制小鼠體內(nèi)TNF-α含量；耿衛(wèi)樸等［30］發(fā)現(xiàn)靈芝多糖能下調(diào)Caspase-3蛋白表達(dá)并抑制T淋巴細(xì)胞凋亡，具有確切地促進(jìn)人外周血T細(xì)胞免疫的作用；靈芝多糖還具有提高B16F10細(xì)胞激活淋巴細(xì)胞的活性能力［31］；MA C等[32]研究證實(shí)了靈芝孢子的多糖提取物能刺激脾單核細(xì)胞的增殖和細(xì)胞因子的分泌，實(shí)現(xiàn)調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞活性。上述研究結(jié)果證實(shí)赤靈芝多糖可以通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞因子的含量來(lái)調(diào)節(jié)小鼠的免疫功能。

胸腺和脾臟是動(dòng)物機(jī)體的兩個(gè)最主要的免疫器官，是機(jī)體發(fā)揮防御功能的重要器官，而胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)能直觀反映動(dòng)物機(jī)體的免疫功能[33]。有研究結(jié)果表明靈芝多糖可促進(jìn)免疫抑制小鼠胸腺及脾臟等的組織分化及細(xì)胞增生，能夠促進(jìn)免疫器官的發(fā)育，增加免疫器官的質(zhì)量，進(jìn)而提高免疫功能，這與WANG J等[34]研究發(fā)現(xiàn)靈芝多糖經(jīng)硫酸化和羧甲基化后對(duì)小鼠的脾臟和胸腺指數(shù)均有提高作用，HUANG S Q等[35]研究發(fā)現(xiàn)經(jīng)超聲微波協(xié)同萃取的靈芝多糖可以提高免疫抑制小鼠的脾臟和胸腺指數(shù)，ZHANG S等[36]研究發(fā)現(xiàn)黑靈芝多糖對(duì)CT26（小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞）型腫瘤細(xì)胞小鼠的脾臟和胸腺指數(shù)均有提高得出的結(jié)果一致。

1.4 降血糖、降血脂

靈芝多糖有明顯的降血糖和降血脂作用。有研究[37-38]表明，在鏈脲佐菌素（STZ）誘導(dǎo)的糖尿病大鼠模型中，靈芝多糖能顯著降低STZ誘導(dǎo)的糖尿病鼠的空腹血糖、總膽固醇和甘油三酯，降低血清中的葡萄糖水平，并顯著提高大鼠血漿胰島素水平。黃智旋等［39］研究發(fā)現(xiàn)靈芝多糖對(duì)四氧嘧啶、去甲腎上腺素所致的高血糖有降血糖作用。XIAO C等［40］研究表明靈芝多糖能顯著降低Ⅱ型糖尿病模型小鼠空腹血糖水平，且呈劑量依賴性。王艷梅［41］研究表明靈芝多糖是以劑量性依賴的方式抑制高糖環(huán)境下腎小球系膜細(xì)胞的轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（TGF-β1）、Col-IV（IV型膠原）過(guò)度表達(dá)而發(fā)揮降糖作用。研究還發(fā)現(xiàn)靈芝多糖和二甲雙胍聯(lián)合應(yīng)用在改善Ⅱ型糖尿病大鼠模型心肌重構(gòu)方面作用明顯優(yōu)于單用，這可能與調(diào)節(jié)心肌膠原容積分?jǐn)?shù)，改善心肌血流動(dòng)力學(xué)及下調(diào)心肌MMP-2的表達(dá)有關(guān)[42]。有研究表明［43］糖尿病患者在用靈芝多糖治療3個(gè)療程后，血糖降低27.18%。

靈芝多糖還具有一定的降血脂作用，孫可[44]用靈芝多糖對(duì)高脂血癥大、小鼠模型進(jìn)行干預(yù)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)靈芝多糖可明顯降低大、小鼠模型TC（總膽固醇）、TG（甘油三酯）與LDL-C（低密度脂蛋白膽固醇）含量，升高HDL-C（高密度脂蛋白膽固醇）水平，與模型組比較差異顯著，說(shuō)明靈芝多糖具有較好的降血脂作用。

上述研究均從一定量效關(guān)系說(shuō)明靈芝多糖具有降血糖和降血脂的作用，但其具體的作用機(jī)制還有待于進(jìn)一步研究。

1.5 保肝護(hù)肝

靈芝已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于慢性肝病的輔助治療。血清ALT（谷丙轉(zhuǎn)氨酶）和AST（谷草轉(zhuǎn)氨酶）活力被認(rèn)為是反映肝損傷程度的敏感指標(biāo)[45]。周婕等[46]研究發(fā)現(xiàn)100 mg∕kg、200 mg∕kg靈芝多糖能顯著降低GaIN所致急性肝損傷小鼠血清ALT活性、AST活性及TBIL（總膽紅素）水平，提高血清ALB（血清白蛋白）含量，說(shuō)明靈芝多糖可減輕GaIN所致小鼠急性肝損傷程度；在BCG誘導(dǎo)的小鼠肝炎模型中，靈芝多糖能抑制ALT和NO的生成，減少中央靜脈周圍肝小葉出血和組織壞死，減輕淋巴細(xì)胞的炎癥浸潤(rùn)，能夠緩解小鼠肝臟傷。賈亞敏等[47]研究發(fā)現(xiàn)富硒靈芝多糖可顯著減少肝臟組織中的脂肪顆粒，并降低血清中AST、AIJT（丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶）和TG含量，可緩解高脂飲食誘導(dǎo)的非酒精性脂肪肝大鼠癥狀。

綜上所述，靈芝多糖具有護(hù)肝活性，但其具體作用機(jī)制還有待于進(jìn)一步研究。

1.6 其他活性

靈芝多糖除具有抗氧化、抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫、降血糖及降血脂等活性外，還具有抗輻射等功效。PILLAI T G等[48]通過(guò)小鼠的生存率、網(wǎng)狀細(xì)胞內(nèi)微核的誘導(dǎo)、質(zhì)粒pBR322 DNA的絲條斷裂和制止過(guò)氧化作用抑制等試驗(yàn)證實(shí)靈芝多糖在體內(nèi)外具有一定的防輻射作用；靈芝多糖還具有一定的抗疲勞作用，它可改善機(jī)體的能量代謝，提高能量利用率，減少機(jī)體的疲勞感［49］。此外，有研究表明[50]靈芝多糖還可使心肌缺血大鼠心肌梗死面積明顯縮小，降低血清CK（肌酸激酶）、Troponin（肌鈣蛋白）含量；靈芝多糖還具有一定的抗凝血和抗栓作用，可抑制血小板聚集和減弱部分凝血酶活性，是作用溫和的抗血小板聚集劑[51]，這也為抗血栓藥物的研發(fā)提供新的方向；靈芝多糖還可能通過(guò)升高GLAST（谷氨酸∕天門冬氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體）、GLT1（谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體）、EAAC1（氨基酸遞質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)體）的表達(dá)來(lái)降低神經(jīng)元興奮性，減輕或抑制癲癇發(fā)作[52]。

2 存在問(wèn)題及展望

靈芝作為我國(guó)珍稀食藥用菌，已引起了世界各國(guó)的廣泛注意和高度重視。近年來(lái)，針對(duì)靈芝的研究主要集中于靈芝子實(shí)體、液體發(fā)酵菌絲中靈芝多糖成分提取，但靈芝中還有其他化學(xué)成分如三萜、多肽、氨基酸、生物堿及核苷類化合物等成分[53]，而這些成分是否也具有一定的生物活性，目前研究的較少，因此靈芝中其他活性成分的研究可能是今后研究的新方向。