分子生物學(xué)技術(shù)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用進(jìn)展

665000普洱市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，云南

分子生物學(xué)是將蛋白質(zhì)、核酸等作為主要探究對(duì)象的一種學(xué)科，而分子生物學(xué)相關(guān)技術(shù)則是建立于核酸生化前提下的一類(lèi)技術(shù)手段，現(xiàn)階段這些技術(shù)已被普遍使用在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域之中，探索、研究的內(nèi)容囊括了DNA鑒定、核酸檢驗(yàn)及表達(dá)產(chǎn)物檢驗(yàn)分析[1]。此文以概述分子生物學(xué)技術(shù)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的實(shí)際運(yùn)用為主，并分析了此類(lèi)技術(shù)的現(xiàn)存問(wèn)題及未來(lái)發(fā)展趨勢(shì)。

分子生物學(xué)技術(shù)用于醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)工作中的簡(jiǎn)要概述

生物實(shí)驗(yàn)及評(píng)估分析過(guò)程中，經(jīng)常接觸到的分子生物技術(shù)種類(lèi)較多，當(dāng)中，分子生物傳感器屬于依據(jù)分子生物進(jìn)行結(jié)合的固定性技術(shù)，該技術(shù)將生物識(shí)別原件結(jié)合于換能器上，而待檢驗(yàn)物品(樣品)能和生物傳感器形成特異性反應(yīng)，進(jìn)而分子生物傳感器對(duì)所檢驗(yàn)的對(duì)象實(shí)施內(nèi)部技術(shù)鑒定，并將識(shí)別、鑒定的分子以信號(hào)方式進(jìn)行傳遞，傳遞方式包括光信號(hào)、電信號(hào)[2]。殘留的待檢驗(yàn)物質(zhì)將利用下一程序展開(kāi)定性檢驗(yàn)以及綜合分析。檢驗(yàn)液體物品時(shí)，會(huì)檢出微量小分子物質(zhì)、蛋白物質(zhì)及核酸，這些物質(zhì)基本屬于小分子類(lèi)物質(zhì)，但分子生物傳感器均能檢測(cè)出來(lái)。與此同時(shí)，醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中運(yùn)用的現(xiàn)代技術(shù)程序相當(dāng)復(fù)雜，能為臨床疾病判定、病患病情評(píng)估等提供有效參考信息，以核酸生化為前提的分子生物學(xué)技術(shù)能為臨床主治醫(yī)生提供一種新式檢驗(yàn)手段，促使臨床診斷和病情分析等工作的效率、質(zhì)量進(jìn)一步提升。

醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)工作中分子生物學(xué)技術(shù)的實(shí)際運(yùn)用

用于檢驗(yàn)病原微生物：分子生物學(xué)相關(guān)技術(shù)用在病原微生物的臨床檢驗(yàn)中，能提升疾病檢測(cè)、鑒別的效率。和傳統(tǒng)免疫檢驗(yàn)測(cè)定、培養(yǎng)鑒定等相比較，生物芯片、PCR技術(shù)用于病原微生物實(shí)際檢驗(yàn)中的敏感性更高，且耗時(shí)短、適用范圍廣。PCR技術(shù)能用于檢驗(yàn)液體物質(zhì)，并能有效檢測(cè)出微量的小分子類(lèi)物質(zhì)(小分子物質(zhì)、蛋白物質(zhì)及核酸等)。生物芯片技術(shù)的醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)運(yùn)用則表現(xiàn)出高效率性、高靈敏性，該技術(shù)可同時(shí)檢驗(yàn)出上百種類(lèi)型的病原微生物，能為快速查找標(biāo)本耐藥基因作出有效指導(dǎo)。由于病原微生物的自身體積非常微小，這就增加了日常檢驗(yàn)工作的操作難度，通過(guò)分子生物學(xué)相關(guān)技術(shù)可在樣本的大量死菌中篩查、識(shí)別出活菌，這類(lèi)技術(shù)的優(yōu)勢(shì)之一體現(xiàn)為不會(huì)受到液體內(nèi)其他類(lèi)型微生物的干擾，能精確查找出致病因素，并予以及時(shí)治療[3]。

用于診斷腫瘤及遺傳疾?。涸谀[瘤疾病及遺傳疾病的臨床診斷當(dāng)中，如果聯(lián)合分子生物學(xué)技術(shù)開(kāi)展工作，將能依據(jù)病例的實(shí)際病況，查找到疾病源頭(即機(jī)體中存在的基因缺陷)?；蚱畏治鍪欠肿訉W(xué)的研究范疇，合理使用分子生物學(xué)技術(shù)能快速找到基因的缺陷片段，利用基因芯片鑒定靶基因P53抑癌基因是否出現(xiàn)突變，并以生物傳感器、分子蛋白質(zhì)組學(xué)、流式細(xì)胞術(shù)等技術(shù)手段可有效識(shí)別出腫瘤的特異性標(biāo)志物質(zhì)。對(duì)于遺傳疾病的鑒定，分子生物技術(shù)可鑒別出患病家族的基因中存在特定多態(tài)性，常見(jiàn)的技術(shù)包括分析單鏈構(gòu)象多態(tài)性、DNA限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性、熒光原位雜交染色體及微陣列技術(shù)與酶基因調(diào)控技術(shù)[4]。值得注意的一點(diǎn)是，DNA片段的結(jié)構(gòu)很復(fù)雜，表現(xiàn)為特殊雙螺旋的結(jié)構(gòu)，運(yùn)用分子生物技術(shù)實(shí)施檢驗(yàn)時(shí)，應(yīng)注重保護(hù)DNA原始分布結(jié)構(gòu)，不可對(duì)其進(jìn)行破壞。

用于診斷免疫系統(tǒng)疾?。涸诿庖呦到y(tǒng)性疾病的鑒別、診斷工作中運(yùn)用分子生物技術(shù)，可盡早確定患者基因片段有無(wú)異常突變現(xiàn)象，而診斷這類(lèi)疾病的關(guān)鍵就在于鑒別基因片段的正常狀況。對(duì)人體的免疫系統(tǒng)展開(kāi)研究，需用分子生物技術(shù)完成基因片段的高效檢測(cè)。例如，在檢測(cè)人類(lèi)免疫缺陷病毒時(shí)，分子生物納米技術(shù)將抗體作為基礎(chǔ)，通過(guò)免疫分析、磁性修飾等方式檢出免疫物質(zhì)，運(yùn)用同位素、熒光劑、酶固定特異性抗體抗原及納米磁性微球，如此可自動(dòng)查找出免疫缺陷病毒1型抗體、2型抗體，繼而為防治病毒性疾病提供了有效信息[5]。免疫系統(tǒng)性疾病的分類(lèi)繁多，在鑒定這類(lèi)疾病的具體分型時(shí)需利用精準(zhǔn)的分子生物技術(shù)來(lái)展開(kāi)檢驗(yàn)辨別。

分子生物學(xué)技術(shù)的現(xiàn)存問(wèn)題以及未來(lái)發(fā)展趨勢(shì)

對(duì)分子生物技術(shù)的運(yùn)用現(xiàn)狀展開(kāi)分析得知，當(dāng)前此類(lèi)技術(shù)面臨的主要問(wèn)題包括：技術(shù)程序較復(fù)雜、對(duì)儀器設(shè)備的要求過(guò)高、試劑藥品與反應(yīng)盒的價(jià)格較昂貴等，因此限制了相關(guān)技術(shù)的進(jìn)一步推廣。具體來(lái)講，分子生物學(xué)技術(shù)的檢驗(yàn)方法兼具高靈敏性、高特異性，其可為臨床診斷提供較可靠的信息依據(jù)，但是，臨床中仍然需要選擇適合經(jīng)濟(jì)條件的檢驗(yàn)項(xiàng)目，譬如，結(jié)核菌培養(yǎng)、涂片鏡檢等都可以達(dá)到鑒定目的，沒(méi)有必要舍廉選貴，加重患者經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。還有，疾病診斷不可過(guò)度依賴(lài)于檢測(cè)的結(jié)果，還要綜合考量患者的各項(xiàng)信息、資料，若僅按照分子生物技術(shù)的檢驗(yàn)結(jié)果便妄下定論，很可能會(huì)忽視樣本取樣有限、檢測(cè)操作不當(dāng)、病情發(fā)展規(guī)律等客觀因素所造成的假陰性、假陽(yáng)性問(wèn)題，進(jìn)而延誤病情。最后，運(yùn)用分子生物技術(shù)的部分檢驗(yàn)人員不具備過(guò)硬技能水平，使分子生物檢驗(yàn)的過(guò)程受到一定干擾，并降低了檢驗(yàn)所得結(jié)果的精確度、可信度[6]。

即使分子生物技術(shù)的運(yùn)用過(guò)程存在一些問(wèn)題，但其依然表現(xiàn)出迅速發(fā)展、進(jìn)步的趨勢(shì)，分子生物技術(shù)的未來(lái)發(fā)展將傾向于以下兩大方面：①分子生物技術(shù)的運(yùn)用將從實(shí)驗(yàn)室內(nèi)研究逐步過(guò)渡至臨床實(shí)用型分析，以減少實(shí)驗(yàn)物品的成本投入，簡(jiǎn)化具體的操作程序，逐步實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)過(guò)程的全面自動(dòng)化，減少人為因素對(duì)操作的干擾，持續(xù)增強(qiáng)技術(shù)檢驗(yàn)敏感性、特異性。②加大檢驗(yàn)儀器的投入，推進(jìn)實(shí)驗(yàn)室的優(yōu)化建設(shè)，注重加強(qiáng)檢驗(yàn)人員的技能培訓(xùn)，以確保分子生物技術(shù)在臨床運(yùn)用中的可信度、準(zhǔn)確度，通過(guò)可持續(xù)性、科學(xué)性的檢驗(yàn)手段為臨床提供高效服務(wù)[7]。

綜合以上闡述，當(dāng)前分子生物學(xué)技術(shù)已在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域中受到普遍認(rèn)可，醫(yī)學(xué)衛(wèi)生部門(mén)對(duì)其制定了相應(yīng)管理制度。規(guī)范運(yùn)用分子生物技術(shù)可明顯減少醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)程序里交叉污染的有關(guān)問(wèn)題，同時(shí)能提升醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)操作的整體效率，使醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)的靈敏度、特異度、精確度得到提高。