HBV-DN A定量與乙型肝炎 HBV-M的相關性分析

陜西省漢中市人民醫(yī)院檢驗科 (漢中 723000)李全德 姚超峰 樊高娟

*陜西省核工業(yè) 215醫(yī)院

用酶聯(lián)法檢測乙型肝炎病毒(HBV)尤其是乙型肝炎病毒血清標志物(HBV-M),不能直接反映乙型肝炎患者血清病毒含量。近年來熒光定量聚合酶鏈反應的建立,為臨床解決了這一問題。我們對 200份乙型肝炎患者血清,分別進行 HBVDAN定量測定,以探討 HBV-DNA定量與乙型肝炎 HBV-M的相關性,現(xiàn)報道如下。

對象與方法

1 對 象 200份血清選自我院門診及住院的乙型肝炎患者,男 120例,女 80例,年齡 10～ 65歲 ,診斷符合 2000年全國傳染病寄生蟲學術會議制定的診斷標準[1]。

2 方 法 乙型肝炎血清學標志物檢測:采用酶聯(lián)免疫吸附測定法。HBV-DN A定量檢測:在 PCR反應管中加入 PCR反應成分后,置于達安 7600基因實時自動熒光 PCR測定儀擴增,熒光標記探針雜交,計算機根據(jù)標準建立的直線回歸方程計算出待檢血清的含量,以每毫升基因拷貝數(shù)(copies/m1)報告,定量范圍為 103～ 108(copies/m1)。 HBV-DNA陰性指數(shù)小于最低檢測線 103copies/ml,HBV-DNA陽性大于等于 103copies/ml。

3 統(tǒng)計學方法 采用t檢驗和直線相關回歸分析。

結 果

200份血清 HBV-DN A定量及 HBV-M結果見附表。HBVM測定結果分為 6種模式:1、3、5項(俗稱大三陽),HBsAg陽性+ HBeAg陽性+抗 HBc陽性。 1、4、5項 (俗稱小三陽),HBsAg陽性+HBeAb陽性+ 抗 HBc陽性。l、5項,HBsAg陽性+抗 HBc陽性。第 1項 HBsAg陽性。第 5項抗 HBc陽性。 2、4、5項,HBsAb陽性+HBeAb陽性+抗 HBc陽性。經(jīng) t檢驗,1、3、5項陽性率及 HBV-DN A含量拷貝數(shù)明顯高于 1、4、5項,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。 1、4、5項與其他各型之間差異亦有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。

附表 HBV-M各種模式和HBV-DNA含量比較(copies/m1)

討 論

HBV感染后有兩種發(fā)展:病毒清除后的免疫狀態(tài)和病毒持續(xù)感染狀態(tài)。病毒持續(xù)感染的自然史,常開始于 HBeAg(+)期,細胞毒性 T細胞(CTL)清除病毒的細胞毒活性很低;HBeAg血清轉換期 CTL活性增高,清除 HBV,也使病變加重;而后處于低病毒血癥期,病變靜息,可出現(xiàn)前 C/C基因變異,常僅能以 PCR檢出;如變異毒株活躍復制,HBeAg(-)的病毒血癥期,可多次病變活動,在感染持續(xù)中病變累積加重[2]。

大三陽與其他模式含量和百分率比較,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)說明 HBV-DN A含量與 HBeAg的存在有明顯的關系,提示病毒在體內復制活躍,傳染性較強[3,4]。進一證明了HBeAg存在是 HBV活躍復制的標志。小三陽與其它各組比較差異也有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。表明雖然血清 HBeAg陰性或HBeAg/抗 HBe血清轉換,但病毒并未停止復制,只是復制緩解或部分患者出現(xiàn)病毒基因變異[5]。最常見的是前 C區(qū)變異,使 HBeAg缺失,以逃避宿主免疫攻擊和藥物的作用。這類感染更容易在患者體內長期潛伏,大量復制,對患者肝組織造成慢性損害,嚴重者發(fā)生肝硬化、肝癌。因此臨床不能僅以酶免的檢測血清 HBeAg陰性就確定 HBV在體內有無復制,而要結合敏感、準確的 PCR檢測 HBV-DN A含量結果,才能確切判斷HBV在體內的存在情況。HBsAg陽性模式可能是病毒感染早期,還未在宿主體內大量復制,使血清中 HBV-DN A含量末明顯升高?？?HBc陽性模式和 HBsAb陽性+ HBeAb陽性+抗HBc陽性模式在本組可能由于標本量小暫無檢出 HBV-DN A復制,表明這兩種模式通常提示既往感染而非現(xiàn)在感染,與文獻[6]報道一致。 HBV基因型是影響 HBV復制和感染的的主要因素之一。所以定量檢測外周血的 HBV-DN A可以直接反映HBV在血液中的復制情況,從而能夠較為準確地解釋感染后的傳染性,若同時檢測肝功能各項指標可以直接了解肝功能的受損程度,為臨床治療提供重要依據(jù)。

[1]中華醫(yī)學會傳染病學會肝病學分會.病毒性感染研究方案(試行)[J].中華傳染病雜志,2000,8(6):324-329.

[2]姜湘寧,王功遂,明 朗.HBeAg陰性慢性乙型肝炎患者血清 HBV-DN A定量檢測的意義[J].華中醫(yī)學雜志 2004,28(6):741-745.

[3]王添章,張宜俊,劉樹人,等.慢性感染患者血清 HBVDN A與 HBeAg量的關系及臨床意義 [J].檢驗醫(yī)學,2004,19:71-75.

[4]張 玲,朱江華,馬 韻,等.乙型肝炎病毒核酸定量檢測與臨床的關系 [J].中華肝臟病雜志,2002,10:49-51.

[5]劉傳苗,張欣欣,陸志蒙,等.乙型肝炎病毒聯(lián)合前變以及臨床意義 [J].中華傳染病雜志,2002,20:274-277.

[6]梅小平 ,李 健,曾 躍,等.乙型肝炎病毒 HBV-DNA與臨床分析 [J].中華肝臟病雜志,2004,5(12):313.