西歸的化學(xué)成分、質(zhì)量控制及藥理學(xué)研究概況

保山中醫(yī)藥高等專(zhuān)科學(xué)校，云南 保山 678000

西歸為傘形科凹乳芹屬植物西藏凹乳芹(Vicatia thibetica de Boiss)的根，主要分布于四川、云南、西藏等地，在云南大理有人工栽培，當(dāng)?shù)赝ǔＲ云渥鳛橹兴幃?dāng)歸的代用品，又名獨(dú)腳當(dāng)歸。其性溫，味辛、甘、微苦，具有祛風(fēng)除濕、散寒止痛，民間用于健脾補(bǔ)胃、血虛所致的月經(jīng)不調(diào)、痛經(jīng)、貧血等癥[1-2]。近年來(lái)研究表明[2,14]，西歸主要含有傘形花內(nèi)酯、佛手柑內(nèi)酯、阿魏酸、芹菜素、β-谷甾醇、胡蘿卜甙、d-甘露醇、蔗糖8種化學(xué)成分，具有抗疲勞、抗痛經(jīng)、抗氧化、促智等藥理作用。文章對(duì)近年來(lái)西歸的化學(xué)成分、質(zhì)量控制及藥理作用進(jìn)行綜述，以期為西歸進(jìn)一步研究提供參考。

1 化學(xué)成分

張維明等[2]以95%乙醇回流提取西歸，采用硅膠柱色譜分離，然后用石油醚-乙酸乙酯、氯仿-甲醇分別梯度洗脫乙酸乙酯、正丁醇的萃取物，從中分離得到8種化學(xué)成分，分別為傘形花內(nèi)酯、佛手柑內(nèi)酯、阿魏酸、芹菜素、β-谷甾醇、胡蘿卜甙、d-甘露醇、蔗糖。

2 質(zhì)量控制

2.1 多糖的提取及含量測(cè)定 周萍等[3]分別采用苯酚-硫酸法和蒽酮-硫酸法測(cè)定西歸中多糖的含量，結(jié)果顯示，苯酚-硫酸法測(cè)得多糖含量為0.274 g/g，加樣回收率為101.0%，RSD=2.50%;而蒽酮-硫酸法測(cè)得多糖含量為0.292 g/g,加樣回收率為86.6%，RSD=2.63%，說(shuō)明苯酚-硫酸法優(yōu)于蒽酮-硫酸法。許嘉強(qiáng)等[4]以料液比為1∶30，100℃水提取3次，每次1 h，采用苯酚-硫酸法于492 nm波長(zhǎng)測(cè)得西歸含量為0.200 g/g，加樣回平均收率為101.0%,RSD=2.63%(n=6),說(shuō)明該方法準(zhǔn)確度高。周萍等[5]以90 ℃水回流提取3次，每次1 h，固液比1∶10，采用苯酚-硫酸法于478 nm波長(zhǎng)測(cè)定西歸多糖含量為0.327 g/g，加樣平均回收率99.79%，RSD=2.23%。

2.2 阿魏酸、佛手內(nèi)酯的提取及含量測(cè)定 肖培云等[6]以10倍量的甲醇回流提取2h，采用高效液相色譜外標(biāo)法，測(cè)定西歸中阿魏酸含量為124.58 ug/g，其平均回收率為99．66%，RSD=1.06%(n=5)。孫邦燕等[7]以固液比1∶5，55 ℃甲醇提取3次，每次50 min，采用高效液相色譜法測(cè)得西歸中阿魏酸、佛手內(nèi)酯的平均含量分別為0.1586、0.0894 mg/g，RSD分別為1.04%、1.08%(n=3)。

2.3 總黃酮的提取及含量測(cè)定 周萍等[8]以固液比1∶20，70%乙醇提取2次，每次60 min，采用NaNO2-Al(NO)-NaOH比色法測(cè)得西歸中總黃酮含量為4.45 mg/g，其加樣平均回收率99.8%，RSD=2.09%(n=3)。

2.4 總氨基酸的提取及含量測(cè)定 梁英麗等[9]以物料比1∶15，70%乙醇回流提取2次，每次2 h，采用茚三酮顯色-分光光度法測(cè)得西歸中總氨基酸的平均含量為20.38 mg/g，其加樣回收率為99.44%，RSD=2.34%(n=9)。

2.5 微量元素的含量測(cè)定 周萍等[10]采用原子熒光光譜法測(cè)得西歸中As、Hg、Cd、Pb含量分別為0.4204、0.0035、0.0264、0.3326/(mg/kg)，其加標(biāo)回收率為101.0%～104.0%，RSD<3.1%(n=4)。

3 藥理作用

3.1 抗疲勞作用 黃斌等[11]通過(guò)小鼠負(fù)重游泳、常壓下耐缺氧、耐高溫實(shí)驗(yàn)研究西歸的抗疲勞作用，以13.4 g/(kg·d)，6.6 g/(kg·d)、3.3 g/(kg·d)的西歸分別給予不同組小鼠，連續(xù)給藥7 d，于末次給藥2 h后測(cè)定各項(xiàng)指標(biāo)，結(jié)果顯示西歸能明顯延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳、常壓下耐缺氧存活、耐高溫的時(shí)間。雷婷等[12]通過(guò)以1.25、2.50、5.00 g/(kg·d)西歸給予不同組小鼠，連續(xù)給藥20 d，于末次給藥0.5 h，小鼠游泳10 min后，測(cè)定小鼠體內(nèi)血乳酸含量、乳酸脫氫酶活力、肝糖原含量，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，西歸能顯著提高乳酸脫氫酶活力、肝糖原含量，并能顯著降低血乳酸的含量。董壽堂等[13]以80.88 g生藥/(kg·d)、40.44 g生藥/(kg·d)、20.22 g生藥/(kg·d)分別給予小鼠，連續(xù)給藥9 d，于末次給藥1 h，測(cè)定負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)、急性腦缺血缺氧實(shí)驗(yàn)、亞硝酸鈉中毒存活實(shí)驗(yàn)、耐低溫實(shí)驗(yàn)及自主活動(dòng)實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明，西歸能明顯延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳、NaNO2中毒、急性斷頭張口喘氣的時(shí)間，并能提高小鼠低溫存活率，降低小鼠自主活動(dòng)。董壽堂等[14]采用負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)篩選西歸的抗疲勞活性組分，并初步研究其抗疲勞作用機(jī)制，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，西歸抗疲勞的活性組分為水溶性組分，具有明顯增加小鼠體內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白含量，能明顯增加小鼠肌肉中肌糖原含量，減少乳酸、丙二醛含量，降低乳酸脫氫酶活性，提高超氧化物歧化酶活性。

3.2 增強(qiáng)免疫作用 李橋云等[15]以80.88 g生藥/(kg·d)、40.44 g生藥/(kg·d)、20.22 g生藥/(kg·d)西歸分別給予小鼠，連續(xù)9 d。第10 d開(kāi)始采用單平臺(tái)水環(huán)境法剝奪小鼠睡眠，連續(xù)3 d，同時(shí)繼續(xù)給予西歸。于末次給藥后1 h，進(jìn)行炭粒廓清試驗(yàn)及肝臟、脾臟指數(shù)的測(cè)定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示西歸能明顯增加睡眠剝奪小鼠廓清指數(shù)、吞噬指數(shù)及肝臟指數(shù)，說(shuō)明西歸具有增強(qiáng)睡眠剝奪小鼠非特異性免疫功能的作用。張冰清等[16]通過(guò)腹腔注射80mg/kg環(huán)磷酰胺制備免疫低下的小鼠模型，然后以5.00、2.50、1.25 g/(kg·d)西歸分別給予各組小鼠，連續(xù)15 d，于末次給藥后24 h，測(cè)定外周血象、臟器重量及周期指數(shù)、骨髓有核細(xì)胞數(shù)、T和B淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化功能。結(jié)果表明，西歸能明顯提高免疫低下小鼠的外周血象、臟器的重量和臟器指數(shù)、骨髓有核細(xì)胞數(shù)量、脾淋巴細(xì)胞的增殖功能，提示西歸具有增強(qiáng)免疫低下小鼠免疫功能的作用。李祿鵬等[17]、呂鴻等[18]通過(guò)腹腔注射20 mg/kg·2d環(huán)磷酰胺所致小鼠免疫功能低下模型，并同時(shí)分別給予13.4 g/(kg·d),6.6 g/(kg·d),3.3 g/(kg·d)的西歸，連續(xù)給藥14 d。治療后,分別測(cè)定各組小鼠臟器質(zhì)量、臟器指數(shù)，血清中免疫球蛋白G、免疫球蛋白M的含量及丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性，以及外周血象。結(jié)果表明西歸能明顯提高免疫力低下小鼠臟器質(zhì)量、臟器指數(shù)及血清中免疫球蛋白G、免疫球蛋白M、溶血素含量，能提高血清及肝臟中超氧化物歧化酶活性，能明顯降低血清、肝臟中MDA含量，能提高小鼠外周血血細(xì)胞及血紅蛋白含量，提示西歸具有增強(qiáng)免疫及造血功能。

3.3 抑制消化道運(yùn)動(dòng)作用 張龍等[19]采用固體排空法、碳末法、離體腸平滑肌法研究西歸對(duì)消化道運(yùn)動(dòng)的影響。以0.6 g/kg、1.2 g/kg、2.4 g/kg西歸分別給予小鼠，每日2次，連續(xù)3 d，于末次給藥后24 h，分別給予營(yíng)養(yǎng)性半固體糊、碳末混懸液，30 min后處死動(dòng)物，取胃、小腸，并稱(chēng)取胃全重和胃凈重及測(cè)量小腸全長(zhǎng)和碳末推進(jìn)的長(zhǎng)度，然后分別計(jì)算胃內(nèi)殘留率及小腸推進(jìn)率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示西歸能延緩胃排空及抑制小腸推進(jìn)的作用。以取豚鼠的回腸制備離體腸平滑肌標(biāo)本，利用BL-420生物機(jī)能系統(tǒng)記錄西歸對(duì)正常離體腸平滑肌及乙酰膽堿、組胺、氯化鋇所致興奮的離體腸平滑肌的作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，西歸能明顯抑制正常離體腸平滑肌及興奮離體腸平滑肌的作用[19]。

3.4 抗痛經(jīng)作用 董壽堂等[20]利用BL 420生物機(jī)能系統(tǒng)觀察西歸對(duì)大鼠子宮自主平滑肌條及縮宮素所致興奮的作用，并采用小鼠扭體實(shí)驗(yàn)法研究西歸對(duì)縮宮素所致痛經(jīng)模型及醋酸所致疼痛模型的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示西歸能明顯降低大鼠子宮平滑肌條及縮宮素所致興奮的頻率、振幅、面積及持續(xù)時(shí)間，并能明顯降低醋酸、縮官素所致小鼠扭體的反應(yīng)次數(shù)，說(shuō)明西歸具有抗痛經(jīng)的作用。

3.5 改善學(xué)習(xí)記憶作用 董壽堂等[21]采用跳臺(tái)法、避暗法觀察西歸對(duì)東莨菪堿、亞硝酸鈉、乙醇所致小鼠學(xué)習(xí)記憶功能障礙的影響。以80.88 g/(kg·d)、40.44 g/(kg·d)、20.22 g/(kg·d)西歸分別灌胃給藥小鼠，連續(xù)給藥6 d，分別給予0.1 mL/10 g 40%乙醇、2 mg/kg東莨菪堿、120 mg/kg亞硝酸鈉所致小鼠記憶障礙模型，通過(guò)跳臺(tái)法、避暗法記錄小鼠的潛伏期及錯(cuò)誤次數(shù)。結(jié)果表明，西歸能明顯延長(zhǎng)東莨菪堿、亞硝酸鈉、乙醇所致學(xué)習(xí)記憶障礙小鼠的潛伏期，并能降低錯(cuò)誤次數(shù)，提示西歸具有改善學(xué)習(xí)記憶的作用。

3.6 其他 周萍等[22]采用鄰苯三酚自氧化法、水楊酸比色法和DPPH法研究西歸西歸黃酮體外抗氧化的作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明西歸黃酮具有較強(qiáng)的清除超氧陰離子自由基、羥自由基及DPPH自由基的作用，且存在劑量的相關(guān)性，說(shuō)明西歸黃酮具有較好的體外抗氧化作用。

3 小結(jié)

西歸在云南大理、西藏等地有百余年的使用歷史，當(dāng)?shù)爻３⑵渥鳛樽萄a(bǔ)蔬菜食用，用于燉雞、燉排骨等，有著廣闊的開(kāi)發(fā)應(yīng)用前景，但由于西歸的現(xiàn)代藥學(xué)研究比較少，限制了它的使用價(jià)值。近年來(lái)，為了提高西歸的應(yīng)用價(jià)值，學(xué)者們對(duì)西歸的化學(xué)成分、質(zhì)量控制及藥理學(xué)方面進(jìn)行了探究，從中發(fā)現(xiàn)了8種化學(xué)成分，并對(duì)其中多糖、總氨基酸、黃酮等進(jìn)行提取分離及含量的分析，為西歸及其產(chǎn)品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定奠定基礎(chǔ)。此外，現(xiàn)代藥理學(xué)研究顯示西歸具有抗疲勞、抗痛經(jīng)、抗氧化、促智等藥理作用，可為西歸藥食品的開(kāi)發(fā)提供理論依據(jù)。盡管對(duì)西歸進(jìn)行了多方面的藥學(xué)研究，并在某些方面取得了一定的成果，但對(duì)于西歸的藥效學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)尚不清楚，其化學(xué)成分、質(zhì)量控制及藥理作用機(jī)制尚不十分明確。因此，應(yīng)進(jìn)一步探究西歸的化學(xué)成分及質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，深入研究其藥效學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)及藥理學(xué)作用機(jī)制，從而開(kāi)發(fā)出具有一定社會(huì)意義和經(jīng)濟(jì)效益的系列產(chǎn)品，為西歸的產(chǎn)業(yè)發(fā)展奠定堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。