SelS水平與冠心病發(fā)生的相關(guān)性研究

潘 穎， 鄭穎穎， 瑪依熱·麥合木提， 阿布地?zé)岷下ね聦獙O尼牙孜， 買吾蘭·艾買提，孜海依拉·艾合買提， 謝 翔

(1新疆醫(yī)科大學(xué)臨床5+3一體化專業(yè)本碩2015-2班， 烏魯木齊 830011; 2新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院心臟中心， 烏魯木齊 830054;3新疆醫(yī)科大學(xué)， 烏魯木齊 830011)

冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病(coronary heart disease, CHD)是多種因素共同作用的一種慢性心血管性疾病，其發(fā)病率和死亡率都非常高，是發(fā)達(dá)國(guó)家和大多數(shù)發(fā)展中國(guó)家成年人發(fā)病和死亡的主要原因。我國(guó)冠心病發(fā)病率的速度一直處于上升趨勢(shì)[1]，對(duì)于動(dòng)脈硬化的病因?qū)W及發(fā)病機(jī)制尚未闡明。在眾多相關(guān)的危險(xiǎn)因素中僅有50%～60% 的發(fā)病原因能解釋冠心病發(fā)病原因，其余的則可能歸因于遺傳因素[2-3]。近年來一些研究發(fā)現(xiàn)了一種新型硒蛋白S (selenoprotein S, SelS)作為血清淀粉樣蛋白A(Serum amyloid A, SAA)的受體參與機(jī)體調(diào)節(jié)。而SAA在炎癥反應(yīng)、膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)和胰島素抵抗等諸多環(huán)節(jié)起著重要的作用。本研究在前期的工作中發(fā)現(xiàn)，SAA 基因多態(tài)性與心血管疾病的多種危險(xiǎn)因素存在關(guān)聯(lián)[4-8]?，F(xiàn)有針對(duì)SelS與冠心病發(fā)病的關(guān)聯(lián)研究較少，關(guān)于二者之間的相互作用機(jī)制仍不清楚。因此，本研究對(duì)SelS水平與冠心病相關(guān)性的研究進(jìn)行報(bào)道，旨在說明二者之間的關(guān)系，為冠心病的診斷和防治提供理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1分組及診斷標(biāo)準(zhǔn)選取2014 年6月-2017 年6月于新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院住院的患者，嚴(yán)格執(zhí)行納入標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn)將其分為冠心病組和對(duì)照組。冠心病組納入標(biāo)準(zhǔn)：采用Judkin′s法行選擇性冠狀動(dòng)脈造影術(shù)，結(jié)合臨床癥狀、病史、實(shí)驗(yàn)室檢查發(fā)現(xiàn)及心電圖改變至少一支或以上主要冠狀動(dòng)脈直徑≥50%。冠心病組共納入188例，其中男性134例，女性54例。對(duì)照組納入標(biāo)準(zhǔn)：無冠心病的家族史，并且胸部X線片、標(biāo)準(zhǔn)12導(dǎo)聯(lián)心電圖、血生化檢查均未見異常，以胸部不適癥狀就診且行冠狀動(dòng)脈造影正常者。對(duì)照組共納入101例，其中男性66例，女性41例。冠心病組和對(duì)照組人群年齡、性別比較的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，在納入研究前簽署入選知情同意書。

1.2排除標(biāo)準(zhǔn)合并嚴(yán)重感染性疾病、急性心力衰竭、心肌病、心肌炎和NYHA心功能分級(jí)Ⅲ～Ⅳ級(jí)；冠心病病史并置入支架或行冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)者； 血液系統(tǒng)疾病者；合并慢性肝腎功能不全、結(jié)締組織疾病和惡性腫瘤者；既往有長(zhǎng)期服用或近3 個(gè)月內(nèi)服用硒蛋白制劑或服用影響體內(nèi)SelS水平的藥物者。

1.3基線資料基線資料包括身高、體質(zhì)量、年齡、性別、吸煙、飲酒和高血壓等。高血壓的診斷參照“中國(guó)高血壓防治指南”(2010年修訂版)的診斷標(biāo)準(zhǔn)[9]。高脂血癥診斷標(biāo)準(zhǔn)參考《內(nèi)科學(xué)》(第8版，人民衛(wèi)生出版社，2014年)診斷。

1.4血生化指標(biāo)檢測(cè)冠心病組和對(duì)照組患者需空腹8 h以上，采集靜脈血，測(cè)定患者生化指標(biāo)，包括血脂項(xiàng)目：總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、血糖、肝功能、腎功能的檢測(cè)，檢測(cè)指標(biāo)均由新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)中心測(cè)定。

1.5SelS的檢測(cè)冠心病組和對(duì)照組患者入院后，采用8號(hào)針管、19 號(hào)針頭采肘前靜脈血5 mL，置于EDTA-Na抗凝管中，輕柔混勻，置于室溫20 min，以3 000 r/min離心20 min，用離心管分裝，并置于-80℃冰箱內(nèi)待測(cè)，實(shí)驗(yàn)前常溫解凍待用。抽取血樣標(biāo)本時(shí)盡量一次成功，避免反復(fù)穿刺血管，由同一實(shí)驗(yàn)人員在一天中的同一時(shí)間采血。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)測(cè)定SelS水平，所用試劑盒均由Cusabio公司同一批次生產(chǎn)提供。實(shí)驗(yàn)前先于室溫環(huán)境下復(fù)溫各試劑和標(biāo)本30 min，同批次試劑盒檢測(cè)所有待測(cè)樣本以減少誤差。操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。

2 結(jié)果

2.1冠心病組與對(duì)照組一般臨床資料的比較冠心病組高血壓、吸煙 、TC高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；冠心病組HDL-C、TG低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；冠心病組飲酒、LDL-C高于對(duì)照組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；冠心病組SelS水平高于對(duì)照組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(表1)。

表1 冠心病組和對(duì)照組之間臨床資料比較

注：HP: 高血壓; SelS: 硒蛋白S; TG: 甘油三酯； TC: 總膽固醇；HDL-C: 高密度脂蛋白；LDL-C:低密度脂蛋白。

2.2SelS與冠心病關(guān)系的多因素Logistic回歸分析多因素logistic回歸分析顯示，吸煙、HDL-C與冠心病均具有相關(guān)性，但SelS與冠心病之間無明顯相關(guān)性(P=0.201，OR=1.001，95%CI: 1.000～1.002)(表2)。

表2 多因素非條件Logistic回歸分析結(jié)果

注： SelS: 硒蛋白S; TG: 甘油三酯； TC: 總膽固醇；HDL-C: 高密度脂蛋白；LDL-C:低密度脂蛋白。

3 討論

SelS是近年來發(fā)現(xiàn)的一種新型的葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白，在生物體內(nèi)有著廣泛分布，在心臟、肝臟、腎臟、脂肪和骨骼肌等組織中均有表達(dá)。SelS具有抗氧化作用，可保護(hù)細(xì)胞免受內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激原誘導(dǎo)的應(yīng)激損傷；與炎性細(xì)胞因子之間存在反饋調(diào)節(jié)作用；作為血清淀粉樣蛋白A(SAA)的受體參與炎性反應(yīng)，而且還與血糖、胰島素抵抗核血脂水平具有相關(guān)性[10]。

冠心病的發(fā)病基礎(chǔ)是動(dòng)脈粥樣硬化。病理學(xué)研究表明，氧化應(yīng)激、內(nèi)膜損傷、炎性反應(yīng)、脂質(zhì)浸潤(rùn)、免疫反應(yīng)等參與動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展過程。國(guó)內(nèi)外許多關(guān)于SelS生物學(xué)功能的研究，證實(shí)其可能參與冠心病發(fā)病過程。

SelS參與抗氧化損傷作用：硒蛋白家族都具有抗氧化性的功能，以保護(hù)細(xì)胞免受損傷。內(nèi)皮細(xì)胞損傷是動(dòng)脈粥樣硬化最重要的始動(dòng)環(huán)節(jié)。過表達(dá)的SelS可能通過對(duì)氧化作用的調(diào)控從而保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞免受氧化損傷，達(dá)到降低冠心病發(fā)生的目的。

SelS具有類胰島素作用： Walder等[11]研究發(fā)現(xiàn)2型糖尿病模型大鼠禁食24 h后，肝中SelS基因的表達(dá)水平明顯增高。胰島素抵抗可通過引起2型糖尿病、血脂代謝異常、內(nèi)皮細(xì)胞功能異常等間接引起冠心病的發(fā)生[12]。SelS的類胰島素作用可能間接促進(jìn)冠心病的發(fā)生。

SelS參與炎癥和免疫反應(yīng)：通過酵母雙雜交分析顯示，SelS與SAA之間存在相互作用，并可能作為后者的受體而發(fā)揮作用[13]。有研究顯示，SAA可以影響HDL的抗炎作用[14]，激活NF-κB途徑使趨化因子和促炎細(xì)胞因子的表達(dá)水平提高[15]。SAA是一種急性反應(yīng)期蛋白，與胰島素和動(dòng)脈粥樣硬化高度相關(guān)，可以作為心血管事件的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子[16]。SelS作為SAA的受體可能參與冠心病的反生。 因此，認(rèn)為SelS可能以上述3種作用方式參與冠心病發(fā)病過程，且不同的SelS水平對(duì)冠心病發(fā)生的影響不同。本研究測(cè)定冠心病組和對(duì)照組患者血清中SelS水平來驗(yàn)證作者的假說。

本研究運(yùn)用病例-對(duì)照的研究方法，發(fā)現(xiàn)冠心病組SelS濃度較對(duì)照組高，但兩者的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=1.581，P=0.210)。多因素非條件Logistic回歸分析剔除了混雜因素的干擾后發(fā)現(xiàn)，SelS水平未入選主效應(yīng)(P=0.201,OR=1.001, 95%CI: 1.000～1.002)。這些結(jié)果可能與本研究的樣本量少有關(guān)，SelS水平與冠心病的相關(guān)性尚需要更大的樣本量才能進(jìn)一步解釋。

綜上所述，本實(shí)驗(yàn)?zāi)壳暗难芯拷Y(jié)果僅表明SelS可能與冠心病無相關(guān)性，不是冠心病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。SelS水平與冠心病的相關(guān)性問題仍有待深入探討，本實(shí)驗(yàn)為后續(xù)研究奠定了基礎(chǔ)。

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