蔬菜中滅蠅胺殘留量的液質(zhì)聯(lián)用分析方法

張從文 李紅梅

摘 要：該研究建立了液質(zhì)聯(lián)用測定蔬菜中滅蠅胺殘留量的實驗方法。色譜柱采用Agilent SB-C18柱（2.1×50mm），以乙腈和0.1%甲酸水溶液為流動相，樣品經(jīng)過提取凈化柱洗脫濃縮后，采用液相串聯(lián)四級桿質(zhì)譜檢測器測定蔬菜中滅蠅胺殘留量，方法線性范圍在10～100ng/mL，最低檢出限為1.0μg/kg，加標回收率在75.2%～82.4%。該方法適用于蔬菜中滅蠅胺殘留量的定量分析。

關鍵詞：滅蠅胺；高效液相色譜；蔬菜；殘留量

中圖分類號 TS255.7 文獻標識碼 A 文章編號 1007-7731（2018）22-0091-02

滅蠅胺，CAS NO.：66215-27-8，白色或淡黃色固體，熔點220～222℃，為1，3，5，-三嗪類昆蟲生長調(diào)節(jié)劑，對雙翅目幼蟲有特殊活性，具有內(nèi)吸傳導誘使昆蟲在形態(tài)上發(fā)生畸變，因而常用于防治蔬菜和花卉上的美洲斑潛蠅[1-3]。國家標準GB 2763-2016[4]《食品安全國家標準 食品中農(nóng)藥最大殘留量》規(guī)定黃瓜中最大限量值為1mg/kg，其他豆類蔬菜中最大限量值為0.5mg/kg。本文采用液質(zhì)串聯(lián)4級桿聯(lián)用檢測蔬菜中滅蠅胺的殘留量，方法回收率較高，適用于蔬菜中滅蠅胺殘留量的測定。

1 材料與方法

1.1 材料和儀器 滅蠅胺標準品（農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護科研檢測所）；蔬菜（超市購買）；甲醇、乙腈（色譜純）（美國天地）；超純水（實驗室自制）；Cleanert SCX-SPE固相萃取柱（天津博納艾杰爾科技有限公司）；美國安捷倫1290-6410B串聯(lián)4級桿液質(zhì)聯(lián)用儀。

1.2 實驗方法

1.2.1 色譜條件 色譜柱：Agilent SB-C18柱（2.1×50mm）；流動相：乙腈∶0.1%甲酸水溶液=20∶80，進樣量1μL；流速0.2mL/min。

1.2.2 質(zhì)譜條件 LC-MS-MS接口為電噴霧接口（ESI）正離子模式，離子檢測模式為選擇離子掃描模式（SIM），選擇監(jiān)測滅蠅胺的準分子離子峰及子離子峰，即m/z 167.0母離子和m/z125.0子離子。電噴霧壓力4500v，噴霧氣和干燥氣為氮氣，干燥氣流速為11L/min，離子源溫度：350℃。

1.2.3 標準溶液配制 準確稱取滅蠅胺標準品10mg，用乙腈溶解后定容至100mL容量瓶中，搖勻，該溶液作為標準儲備溶液（100μg/mL）。稀釋1000倍得到100ng/mL的溶液，同種方法依次用乙腈稀釋定容為10，20，40，80，100ng/mL標準系列溶液。

1.2.3 樣品制備 稱取20g搗碎樣品于離心管中，加入40mL乙腈，用高速組織搗碎機在15000r/min，勻漿提取1min，加入5mg氯化鈉，再勻漿提取1min，在3800r/min離心5min，取上清液20mL，在40℃水浴中旋轉(zhuǎn)濃縮至約1mL，經(jīng)過SCX-SPE凈化柱凈化，旋轉(zhuǎn)濃縮后，用乙腈+水（3+2）定容至5mL，用0.2μm微孔濾膜過濾后進樣。

2 結(jié)果與分析

2.1 流動相選擇 實驗中比較了不同流動相對分離度、峰形等的影響。發(fā)現(xiàn)在水相中加入0.1%的甲酸會提高離子化效率，滅蠅胺信噪比提高3倍，所以選擇了0.1%的甲酸溶液作為流動相。另外，采取乙腈∶0.1%甲酸水=60∶40，乙腈∶0.1%甲酸水=50∶50，乙腈∶0.1%甲酸水=20∶80這3個梯度，乙腈比例20%時候峰形最好，所以實驗中采用乙腈∶0.1%甲酸水=20∶80作為此次實驗的流動相體系。

2.2 質(zhì)譜條件的選擇 滅蠅胺分子式C6H10N6，相對分子質(zhì)量166.18，從其分子結(jié)構(gòu)看在ESI源中容易得到1個氫原子而帶正電荷，因而選擇ESI源正離子模式對其進行檢測。滅蠅胺質(zhì)譜圖見圖1，其分子中含有1個三元碳環(huán)，在雙重4級桿中容易被轟擊丟失掉，因而對其準分子離子峰（m/z167.0）和子離子峰（m/z125.0）進行選擇離子掃描，采用外標法定量。

2.3 樣品前處理 實驗中比較了NH2-SPE萃取柱、PEP-SPE萃取柱、MCX-SPE萃取柱，發(fā)現(xiàn)經(jīng)過NH2-SPE萃取柱、PEP-SPE萃取柱處理的滅蠅胺，雜質(zhì)比較多，處理不干凈，回收率比較低。經(jīng)過MCX-SPE柱子處理后，效果比較好，故本實驗選用MCX-SPE固相萃取柱。

2.4 線性范圍、回歸方程及檢出限 吸取滅蠅胺標準系按照1.2.1條件進行檢測，以峰面積為縱坐標，以質(zhì)量濃度為X軸，繪制標準曲線得到回歸方程為：y=2313.0586x+22434.98，R2=0.998。阿力甜在10～100ng/mL線性關系良好。并且以信噪比等于3為標準，測得阿力甜的檢出限為1μg/kg。

2.5 方法精密度、回收率及檢出限 選擇中高低3個濃度，每個濃度測定6個樣品，按照1.2.3樣品制備樣品溶液，液質(zhì)聯(lián)用儀外標法測定加標量，結(jié)果見表1。由表1可知，加標回收率在75.2%～82.4%，標準偏差在3.23%～9.95%，方法的回收率和精密度較好，能夠達到分析檢測要求。

2.6 樣品測定 根據(jù)本實驗建立的方法對蔬菜進行檢測分析，滅蠅胺標準品色譜圖和樣品中滅蠅胺圖譜見圖3、圖4，滅蠅胺標準品出峰時間在1min左右。從圖3、圖4可以看出，樣品中滅蠅胺能夠很好地被分離，基本無干擾峰，且分析時間很短，只需5min就能完成1個樣品的檢測，說明方法有較好的分離度。

3 結(jié)論

本研究建立了蔬菜中滅蠅胺殘留量的高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測分析方法。樣品經(jīng)過提取和MCX-SPE柱子凈化后，HPLC-MS/MS檢測，滅蠅胺在蔬菜中平均加標回收率在75.2%～82.4%，RSD在3.23%～9.95%，最低檢出限位1μg/kg。該方法可以滿足蔬菜中滅蠅胺殘留量的檢測分析要求。

參考文獻

[1]劉新艷，潘燦平，劉肅，等.蔬菜中滅蠅胺殘留的強陽離子交換固相萃取柱凈化-液相色譜分析[J].農(nóng)藥學學報，2008，10（2）：166-171.

[2]董嬌，曹寧陽，耿鑫.全自動固相萃取-高效液相色譜測定蔬菜中滅蠅胺殘留[J].現(xiàn)代食品，2018，（4）：94-98.

[3] 宋衛(wèi)國，饒欽雄，陳珊珊，等.同位素內(nèi)標法檢測滅蠅胺及其代謝物三聚氰胺在雙孢蘑菇子實體和覆土中的殘留[J].農(nóng)藥學學報，2018，20（3）：363-369.

[4]中國人民共和國國家衛(wèi)生和計劃生育委員會.GB 2763-2016食品安全國家標準食品中農(nóng)藥最大殘留限量[S].

（責編：張宏民）