Fcγ受體與特發(fā)性膜性腎病相關(guān)性研究進(jìn)展

范 卉，于 晶，張芝平，王瑞芳，劉 鋒

(吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院 腎內(nèi)科，吉林 長(zhǎng)春130033)

特發(fā)性膜性腎病(IMN)是一種器官特異性的自身免疫性疾病，其特征性病理特征為腎臟足細(xì)胞損傷、上皮下免疫復(fù)合物的沉積、基底膜增厚。細(xì)胞表面的IgG的受體(FcγR)是一種膜結(jié)合糖蛋白，屬于免疫球蛋白超家族，是負(fù)責(zé)調(diào)控體液免疫和細(xì)胞免疫的關(guān)鍵免疫受體。近年來(lái)研究表明FcγR在自身免疫性疾病中起著重要作用，參與多種免疫復(fù)合物(IC)所致的腎臟疾病，但該受體在IMN中參與機(jī)制尚無(wú)全面報(bào)道，本文就目前文獻(xiàn)研究，總結(jié)FcγR在IMN發(fā)病及病理機(jī)制中所起作用。

1 FcγR及其功能

1.1FcγR

FcγR表達(dá)于多種免疫細(xì)胞、上皮細(xì)胞及腎小球足細(xì)胞等細(xì)胞表面。編碼人Fc受體γ鏈的基因位于1號(hào)染色體。FcγR不同的表達(dá)形式：FcγRⅠ，F(xiàn)cγRⅡ(FcγRⅡA、FcγRⅡB、FcγRⅡC)，F(xiàn)cγRⅢ(FcγRⅢA、FcγRⅢB)，F(xiàn)cγRⅣ。其中這些受體可以通過(guò)其對(duì)IgG的不同親和力及其信號(hào)傳導(dǎo)活性進(jìn)行分類[1]，F(xiàn)cγR與抗體的親和力：FcγRⅠ>FcγRⅢ>FcγRⅡ。根據(jù)胞漿內(nèi)序列差異，F(xiàn)cγR可分為活化型和抑制型受體兩類，F(xiàn)cγRⅡB為唯一的抑制型受體?；罨虵cγR通過(guò)基于免疫受體酪氨酸的活化基序(ITAM)介導(dǎo)抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用(ADCC)，調(diào)理吞噬、抗原呈遞及炎癥介質(zhì)的釋放。FcγRⅡB則通過(guò)胞內(nèi)的基于免疫受體酪氨酸抑制基序(ITIM)磷酸化，抑制免疫系統(tǒng)中各種效應(yīng)細(xì)胞信號(hào)[2]。當(dāng)兩類受體平衡狀態(tài)被打破時(shí)，將導(dǎo)致疾病的產(chǎn)生。

1.2FcγR功能

1.2.1參與IC的吞噬過(guò)程 FcγR僅有一個(gè)結(jié)構(gòu)域與抗體Fc片段的兩個(gè)下部鉸鏈區(qū)域接觸，從而插入由Fc片段的兩個(gè)不同鏈形成的凹槽中。在FcγR分子和抗體Fc片段之間形成不對(duì)稱接觸，阻止其他FcγR分子與相同F(xiàn)c片段的結(jié)合。研究顯示大型免疫復(fù)合物的快速清除與肝臟中Kuffer細(xì)胞的FcγR結(jié)合有關(guān)[3]。巨噬細(xì)胞可表達(dá)活化型和抑制型FcγR。巨噬細(xì)胞質(zhì)膜包被粒子，閉合成吞噬體，然后通過(guò)與其他膜狀細(xì)胞器之間的相互作用，降解吞噬體[4]。Fc受體γ亞基的靶向破壞導(dǎo)致小鼠免疫受損，雖然γ鏈缺陷型小鼠活化的巨噬細(xì)胞Fc受體可正常結(jié)合抗體包被的顆粒，但細(xì)胞缺乏吞噬顆粒的能力[5]。因此，F(xiàn)cγR可以介導(dǎo)IC和IgG包被顆粒的內(nèi)化，參與吞噬。

1.2.2FcγR參與細(xì)胞信號(hào)通路 FcγR參與細(xì)胞信號(hào)通路與ITAM和ITIM有關(guān)。大部分細(xì)胞同時(shí)表達(dá)活化型及抑制型FcγR，IC與FcγR結(jié)合后，SRC家族的激酶Lyn會(huì)同時(shí)對(duì)ITAM和ITIM進(jìn)行磷酸化，觸發(fā)激活性和抑制性信號(hào)通路。這兩種信號(hào)通路共同參與為細(xì)胞活化設(shè)定一個(gè)閾值，細(xì)胞活化的強(qiáng)度取決于閾值的高低[6,7]。

活化型FcγR通過(guò)Lyn對(duì)ITAM進(jìn)行磷酸化，隨后招募Syk家族激酶，產(chǎn)生磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸(PIP3)，誘導(dǎo)PI3K產(chǎn)生Btk和PLCγ的膜對(duì)接位點(diǎn)[8,9]。PLCγ激活后，產(chǎn)生第二信使IP3與DAG。其中IP3促使細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Ca2+釋放，觸發(fā)進(jìn)一步的下游信號(hào)傳導(dǎo)。DAG可以激活PKC通路，從而參與炎癥介質(zhì)釋放、氧化爆發(fā)、吞噬、抗原呈遞、ADCC、細(xì)胞增殖等細(xì)胞活動(dòng)。另一方面Syk家族激酶誘導(dǎo)PI3K活化Btk，并且可以促使SOS與Grb2結(jié)合，激活Ras/Raf/MAP通路，從而參與細(xì)胞活化[3]。

抑制型FcγR通過(guò)干擾關(guān)鍵磷脂酰肌醇中間體(如PIP3)的產(chǎn)生來(lái)抑制活化型信號(hào)通路。B細(xì)胞僅表達(dá)FcγRⅡB，該受體調(diào)節(jié)由B細(xì)胞受體(BCR)引發(fā)的激活信號(hào)通路。FcγRⅡB通過(guò)Lyn對(duì)ITIM進(jìn)行磷酸化，激活SHIP，隨后水解磷脂酰肌醇中間體PIP3，影響激活型FcγR介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)。另一方面，ITIM被磷酸化后，引起Shc和Dok的募集，抑制Ras通路，從而抑制細(xì)胞活動(dòng)[6]。

1.2.3FcγR參與維持免疫耐受 FcγRⅡB是唯一的抑制型Fc受體。FcγRⅡB的主要功能是通過(guò)上述ITIM依賴性抑制機(jī)制實(shí)現(xiàn)其抑制作用。FcγRⅡB通過(guò)增加BCR活化閾值和抑制B細(xì)胞介導(dǎo)的抗原呈遞來(lái)調(diào)節(jié)B細(xì)胞活化。 FcγRⅡB可以中斷免疫突觸的形成，這在早期B細(xì)胞激活中至關(guān)重要[10]。另外，在不存在BCR連接的情況下，交聯(lián)FcγRⅡB可以誘導(dǎo)成熟B細(xì)胞的凋亡。B細(xì)胞FcγRⅡB過(guò)表達(dá)導(dǎo)致小鼠T細(xì)胞依賴性IgG應(yīng)答降低，而FcγRⅡB缺陷小鼠對(duì)T細(xì)胞依賴性抗原反應(yīng)的抗體水平升高[11,12]。在自發(fā)性SLE的小鼠模型中，骨髓細(xì)胞上FcγRⅡB表達(dá)水平的恢復(fù)可以預(yù)防自身免疫，并且適度轉(zhuǎn)基因過(guò)表達(dá)FcγRⅡB在B細(xì)胞上顯著減少在MRL-lpr小鼠中的SLE[13,14]。在其他自身免疫性疾病小鼠模型研究也得到相似的結(jié)論，F(xiàn)cγRⅡB在自身免疫的發(fā)病機(jī)制和維持B細(xì)胞耐受性方面起著十分重要作用。

2 IMN與FcγR關(guān)系

2.1FcγRⅡB與IMN

B細(xì)胞在機(jī)體免疫耐受中起著重要作用。研究表明，F(xiàn)cγRⅡB在B細(xì)胞上起著“檢查站”的作用，在體液免疫中，在防止自身反應(yīng)性抗體的產(chǎn)生中發(fā)揮關(guān)鍵作用。提示B細(xì)胞中FcγRⅡB表達(dá)異常將導(dǎo)致自身免疫性疾病的產(chǎn)生。IMN是一種器官特異性的自身免疫性疾病，雷麗[15]等人研究結(jié)果顯示IMN患者大量蛋白尿組患者記憶B細(xì)胞FcγRⅡB表達(dá)明顯低于非大量蛋白尿組及正常對(duì)照組，其表達(dá)水平與24h尿蛋白定量呈負(fù)相關(guān)。石巖[16]對(duì)26例MN患者及80例健康對(duì)照組分別進(jìn)行血樣分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)MN組患者FcγRⅡBI232T基因型比例明顯高于對(duì)照組，表明FcγRⅡBI232T為MN的危險(xiǎn)因素。以上結(jié)果表明，F(xiàn)cγRⅡB低表達(dá)在IMN發(fā)病機(jī)制中起著重要作用，同時(shí)，F(xiàn)cγRⅡBI232T基因型為MN的危險(xiǎn)因素。

2.2FcγR與足細(xì)胞自身抗原

IgG4在IMN中占主導(dǎo)地位[17,18]。目前已發(fā)現(xiàn)的足細(xì)胞自身抗原中，醛糖還原酶(AR)、超氧化物歧化酶2(SOD2)、α-烯醇化酶(α-enolase)、磷脂酶A2受體(PLA2R)及1型血小板反應(yīng)蛋白7A域(THSD7A)的抗體均為IgG4，僅中性肽鏈內(nèi)切酶(NEP)的抗體為IgG1，而NEP僅在新生兒MN中作為自身抗原。成人IMN沉積物中主要免疫球蛋白為IgG4，此外還有少量IgG1，表明IMN中可能存在與IgG1相結(jié)合的自身抗原。而FcγR主要與IgG1結(jié)合，推測(cè)FcγR對(duì)IMN沉積物的形成起著部分作用。另外，在IMN患者腎臟中PLA2R表達(dá)陽(yáng)性率高達(dá)70%，5%-10%PLA2R抗體陰性的IMN患者體內(nèi)可檢測(cè)到1型血小板反應(yīng)蛋白7A域抗體[19]。但是大約10%-20%IMN患者的血清樣品不與PLA2R及THSD7A反應(yīng)[18]，提示可能存在其他足細(xì)胞自身抗原，F(xiàn)cγR在足細(xì)胞表達(dá)，提示可能是足細(xì)胞另外一種自身抗原。

2.3介導(dǎo)腎小球基底膜增厚

腎小球基底膜增(GBM)由層粘連蛋白、Ⅳ型膠原、硫酸乙酰肝素蛋白多糖和巢蛋白組成，由足細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞合成[20]，足細(xì)胞或內(nèi)皮細(xì)胞的變化可導(dǎo)致GBM組成改變。FcγR可在足細(xì)胞表達(dá)，介導(dǎo)多種細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)，推測(cè)該受體在特發(fā)性膜性腎病GBM損傷、增厚機(jī)制中起著重要作用。

足細(xì)胞自身抗原或循環(huán)抗原與抗體結(jié)合后形成上皮下免疫復(fù)合物，導(dǎo)致足細(xì)胞損傷。受損的足細(xì)胞產(chǎn)生新的細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)，在IC之間和周圍組裝，從而產(chǎn)生特征性的“峰值”和GBM增厚[21]。Heymann腎炎模型[22]研究顯示足細(xì)胞受損產(chǎn)生Ⅰ型膠原及Ⅳ型膠原，而此Ⅳ型膠原為正常GBM中Ⅳ膠原的異構(gòu)體。新生成的膠原降解異常，GBM增厚。此外，膜攻擊復(fù)合物(MAC)可刺激足細(xì)胞產(chǎn)生氧自由基，導(dǎo)致Ⅳ型膠原降解減少，也可能是GBM增厚原因之一。除此以外，MN[23]中足細(xì)胞過(guò)度表達(dá)TGF-β、血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)。AngⅡ誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激可能激活潛在的TGF-β，從而激活足細(xì)胞中的Smads和Ras/ERK信號(hào)通路。足細(xì)胞中TGF-β活性增強(qiáng)可能導(dǎo)致GBM蛋白過(guò)量產(chǎn)生，GBM增厚，GBM降解受損。

活化型FcγR過(guò)表達(dá)或FcγRⅡB低表達(dá)可通過(guò)Syk家族激酶促使SOS與Grb2結(jié)合，激活Ras相關(guān)通路，同時(shí)，Ras通路也可以通過(guò)抑制型FcγR引起Shc和DOK招募，導(dǎo)致SHIP酪氨酸磷酸化而抑制Ras通路。足細(xì)胞FcγR可能參與細(xì)胞相關(guān)信號(hào)傳導(dǎo)通路，介導(dǎo)GBM增厚。另外，腎小球足細(xì)胞可分泌金屬蛋白酶(MMPs)，水解GBM蛋白，TGF-β增加MMPs-2和-9的活性[24]，使GBM水解增加。綜上所述，IMN中基底膜損傷可能是：(1)足細(xì)胞FcγR通過(guò)細(xì)胞信號(hào)通路介導(dǎo)ECM產(chǎn)生增加，且新產(chǎn)生的ECM速度較降解速度快，導(dǎo)致GBM增厚；(2)足細(xì)胞新產(chǎn)生的膠原蛋白不能被正常降解；(3)新合成的ECM在IC附近包裹形成特征性的“峰值”。

足細(xì)胞可表達(dá)FcγR，F(xiàn)cγR可通過(guò)調(diào)節(jié)機(jī)體免疫活性參與IMN。FcγRⅡB低表達(dá)，自身免疫反應(yīng)增強(qiáng)，誘導(dǎo)IMN的發(fā)生。FcγR介導(dǎo)足細(xì)胞產(chǎn)生過(guò)量ECM可導(dǎo)致GBM增厚。另外，足細(xì)胞表達(dá)的FcγR有可能與PLA2R相似，作為另外一種足細(xì)胞自身抗原參與IMN，提示FcγR是一個(gè)潛在的IMN發(fā)病機(jī)制研究靶點(diǎn)。目前該方面的研究還相對(duì)較少，有待進(jìn)一步深入研究，以期望在IMN病因、發(fā)病機(jī)制、以及靶向治療中找到新的方向。

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