九個(gè)樣品黃芩苷測(cè)定的探討

孫榮飛 趙曉星 張金璽 陳睿彥 趙澤娟 賽金旭

（昭通市食品藥品檢驗(yàn)所 云南 昭通 657000）

銀黃顆粒等九種制劑，為常用藥，收載于中國(guó)藥典及國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)中[1-2]，肺力咳合劑、清開靈注射液為處方藥外，其余均為非處方藥。黃芩苷為方中的主要成分之一，有抗癌、抗菌、抗病毒、解熱、降壓、鎮(zhèn)靜等多種藥效[3]，各標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)下，均用高效液相測(cè)定其含量，作為質(zhì)量指標(biāo)之一，其中一些品種，在進(jìn)行含量測(cè)定時(shí)，出現(xiàn)供試品溶液放置一定時(shí)間后，所測(cè)得含量有不同程度的升高或降低，通過(guò)查找資料，暫未有報(bào)道，本文便從樣品制備、方法學(xué)驗(yàn)證、數(shù)據(jù)分析方面作考察。

1.儀器、試藥

1.1 儀器

LC-20AT高效液相色譜儀（日本島津），MS105DU電子天平（梅特勒-托利多，上海公司），UC-7100S超聲波清洗器（美瑞泰克科技（天津）有限公司）。

1.2 試藥

黃芩苷對(duì)照品（批號(hào)：110715-201619）購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所，甲醇為色譜純，乙酸乙酯、磷酸、鹽酸均為分析純，水為純化水。九種制劑購(gòu)自本地藥店，編號(hào)分別為1～9，便于書寫及表述，以下均以數(shù)字編號(hào)標(biāo)示，詳細(xì)信息見表1。

2.方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

2.1.1 1號(hào)樣品色譜條件：色譜柱為島津vp-ODS柱（4.6mm×250mm，5μm），DAD檢測(cè)器，流動(dòng)相為甲醇-水-磷酸（50:50:0.2），檢測(cè)波長(zhǎng)274nm，柱溫30℃，流速1.0mL/min。

2.1.2 2號(hào)樣品色譜條件：流動(dòng)相為甲醇-水-冰醋酸（50:50:1），其他條件同2.1.1。

2.1.3 3號(hào)樣品色譜條件：流動(dòng)相為甲醇-0.1%磷酸（40:60），檢測(cè)波長(zhǎng)280nm，其他條件同2.1.1。

2.1.4 4號(hào)樣品色譜條件：流動(dòng)相為甲醇-0.2mol/L磷酸二氫鈉（40:60），檢測(cè)波長(zhǎng)275nm，其他條件同2.1.1。

2.1.5 5號(hào)樣品色譜條件：流動(dòng)相為甲醇-水-磷酸（47:53:0.2），檢測(cè)波長(zhǎng)315nm，其他條件同2.1.1。

2.1.6 6、7號(hào)樣品色譜條件：流動(dòng)相為甲醇-磷酸鹽緩沖液（45:55），檢測(cè)波長(zhǎng)280nm，其他條件同2.1.1。

2.1.7 8號(hào)樣品色譜條件：流動(dòng)相為甲醇-水-磷酸（47:53:0.2），檢測(cè)波長(zhǎng)280nm，其他條件同2.1.1。

2.1.8 9號(hào)樣品色譜條件：流動(dòng)相為甲醇-水-冰醋酸（45:55:1），其他條件同2.1.1。

2.2 溶液的配制

2.2.1 對(duì)照品溶液的配制 取黃芩苷對(duì)照品，用甲醇制成每 1mL 分別含 50μg、0.1mg、25μg、50μg、60μg、0.1mg、70μg、0.1mg的溶液，即得。

2.2.2 供試品溶液的配制

2.2.2.1 1號(hào)供試品溶液的制備 取1號(hào)樣品，研細(xì)，分別精密稱取1.5g（n=6），置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇50mL，超聲（功率250W，頻率40kHz）30分鐘，依次放置0、1、2、4、8、24h，補(bǔ)足重量，過(guò)濾，即得。

2.2.2.2 2號(hào)供試品溶液的制備 取2號(hào)樣品，研細(xì)，分別精密稱取1g（n=6），置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇50mL，超聲（功率250W，頻率40kHz）20分鐘，依次放置0、1、2、4、8、24h，補(bǔ)足重量，過(guò)濾，即得。

2.2.2.3 3號(hào)供試品溶液的制備 取3號(hào)樣品，去除包衣，研細(xì)，分別精密稱取0.1g（n=6），置具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇25mL，超聲（功率250W，頻率40kHz）10分鐘，依次放置0、1、2、4、8、24h，補(bǔ)足重量，過(guò)濾，即得。

2.2.2.4 4號(hào)供試品溶液的制備 取4號(hào)樣品，研細(xì)，分別精密稱取0.75g（n=6），置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇100mL，超聲（功率250W，頻率40kHz）10分鐘，依次放置0、1、2、4、8、24h，補(bǔ)足重量，過(guò)濾，即得。

2.2.2.5 5號(hào)供試品溶液的制備 取5號(hào)樣品，研細(xì)，分別精密稱取3g（n=6），置具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇50mL，超聲（功率250W，頻率40kHz）30分鐘，依次放置0、1、2、4、8、24h，補(bǔ)足重量，過(guò)濾，即得。

3.討論

3.1 9 個(gè)樣品中黃芩苷的測(cè)定，7個(gè)為固體制劑，5個(gè)出現(xiàn)不同程度的溶出增加，1個(gè)無(wú)影響，1個(gè)含量在降低；2個(gè)液體制劑無(wú)影響。從提取溶劑、提取方式上看，有甲醇、70%甲醇、50%甲醇、水，均出現(xiàn)顯著變化。而2個(gè)液體制劑及1個(gè)含乳糖的固體制劑無(wú)顯著變化，其他固體制劑中均有蔗糖或糊精，所測(cè)定的9個(gè)樣品，黃芩苷在含蔗糖或糊精的固體制劑中的溶出與放置時(shí)間有明顯關(guān)聯(lián)。鑒于2、5號(hào)在24h內(nèi)的結(jié)果變化在3%之內(nèi)，屬于可接受范圍，在制法中加入過(guò)乙醇，與1、3、4號(hào)不同，是否還與制法有關(guān)，還需進(jìn)一步研究。

3.2 甲醇及不同濃度甲醇從固體制劑中提取黃芩苷，出現(xiàn)溶出滯后，需放置一定時(shí)間，以及含蔗糖固體制劑水溶乙酸乙酯萃取，出現(xiàn)黃芩苷隨時(shí)間延長(zhǎng)而下降的現(xiàn)象，以上是否具有普遍性，還有待進(jìn)一步驗(yàn)證，這種現(xiàn)象應(yīng)引起檢驗(yàn)檢測(cè)的重視，特別是監(jiān)督檢驗(yàn)。