低聚糖素和井岡霉素A殺菌劑組合物及其應(yīng)用

張愛華++馮艾祖

摘要 本文研究了一種農(nóng)用殺菌劑組合物及其應(yīng)用，該組合物以低聚糖素和井岡霉素A為主要活性成分，其中低聚糖素和井岡霉素A的質(zhì)量比為1∶1～30。室內(nèi)和田間試驗(yàn)表明，配比為1∶3～15時(shí)，增效作用明顯，以1∶12該組合物對(duì)水稻稻曲病具有良好的防效，且具有持效期長(zhǎng)、無毒性、無殘留物、對(duì)人畜無害、降低用藥成本、不污染環(huán)境、重復(fù)使用不會(huì)使植物產(chǎn)生特異性、抗病性等優(yōu)點(diǎn)。

關(guān)鍵詞 低聚糖素；井岡霉素A；殺菌劑復(fù)配；水稻稻曲病；配方篩選；防效

中圖分類號(hào) S482.2+99 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-5739（2017）23-0109-02

1 技術(shù)背景

低聚糖素為植物源農(nóng)藥，低聚糖是復(fù)雜的碳水化合物，在植物體內(nèi)作為信號(hào)分子調(diào)節(jié)植物生長(zhǎng)、發(fā)育和在環(huán)境中的生存能力。低聚糖素即植物或寄生物水解酶從植物或病原真菌細(xì)胞壁多糖分解出來的導(dǎo)致寄主植物過敏反應(yīng)的活性激發(fā)子，誘導(dǎo)植株合成、積累抗毒素。

井岡霉素A是一種放線菌產(chǎn)生的農(nóng)用抗生素，內(nèi)吸性強(qiáng)，易被菌體細(xì)胞吸收并迅速傳導(dǎo)，干擾和抑制菌體細(xì)胞生長(zhǎng)和發(fā)育，具有良好的治療作用。井岡霉素對(duì)人畜低毒，對(duì)鳥類、魚類安全。主要用于防治水稻稻曲病、水稻紋枯病、小麥紋枯病、玉米大小斑病等，多年大規(guī)模田間試驗(yàn)結(jié)果證明其防效高、無公害、無污染，是一種理想的生物農(nóng)藥[1]。

稻曲病是水稻上常見的一種真菌病害，近年來流行發(fā)生，危害逐年加重。該病主要在水稻抽穗揚(yáng)花期發(fā)生，危害穗上部分谷粒。稻曲病可導(dǎo)致水稻癟谷率增加、千粒重下降，降低稻谷品質(zhì)。另外，該病還能產(chǎn)生對(duì)人畜有害的毒素，對(duì)人們的健康構(gòu)成危害。因此，控制稻曲病的發(fā)生，對(duì)水稻生產(chǎn)及糧食安全至關(guān)重要。目前，化學(xué)藥劑防治仍然是控制稻曲病的主要方法，然而稻曲病對(duì)有機(jī)硫制劑已有抗性，多菌銅、DT、可殺得等高效藥劑易產(chǎn)生藥害。因此，根據(jù)稻曲病的發(fā)生規(guī)律及防治狀況，亟需研制高效、廣譜、低毒、安全的新型殺菌劑或復(fù)配劑代替上述藥劑防治稻曲病。

2 技術(shù)內(nèi)容

2.1 技術(shù)問題

本研究的目的在于研發(fā)防治水稻稻曲病的新型復(fù)配殺菌劑，解決的主要技術(shù)問題是防治稻曲病效果顯著、殺菌活性高、更安全環(huán)保，并能治理對(duì)其他藥劑產(chǎn)生抗藥性的病菌群體，為治理稻曲病提供具有不同作用方式、相容性好的殺菌劑復(fù)配配方，并用于指導(dǎo)生產(chǎn)實(shí)踐。

2.2 技術(shù)方案

選擇對(duì)稻曲病殺菌活性高、對(duì)環(huán)境安全低毒、具有不同作用方式的二元?dú)⒕鷦┑途厶撬睾途畬顾谹進(jìn)行室內(nèi)毒力測(cè)定及復(fù)配配方篩選，獲得室內(nèi)表現(xiàn)增效作用的配方，選取增效作用顯著的配方用于田間藥效試驗(yàn)。

2.3 有益效果

針對(duì)生產(chǎn)上長(zhǎng)期使用單一殺菌劑防治稻曲病易產(chǎn)生抗藥性或藥害，導(dǎo)致用藥失效或下降等問題，以植物源農(nóng)藥低聚糖素和農(nóng)用抗生素井岡霉素A二元復(fù)配。通過室內(nèi)毒力測(cè)定，結(jié)果得出低聚糖素∶井岡霉素A=1∶3～15的復(fù)配殺菌劑對(duì)稻曲病的室內(nèi)毒力活性高，有明顯的增效作用，其中以低聚糖素和井岡霉素A配比為1∶12時(shí)增效作用最大，此配比的復(fù)配劑在田間藥效試驗(yàn)中亦表現(xiàn)出較顯著的增效作用。

與單一的殺菌劑防治稻曲病相比，此復(fù)配劑具有以下幾方面的有益效果。一是本組合物屬于二元復(fù)配殺菌劑，具有相容性，提高了殺菌活性，對(duì)防治稻曲病表現(xiàn)出顯著的增效作用，減少了用藥劑量，節(jié)省了農(nóng)藥使用成本，減少了環(huán)境污染和農(nóng)藥殘留。二是該配方是不同作用方式的二元?dú)⒕鷦┑膹?fù)配，具有高效、廣譜、持久等優(yōu)點(diǎn)，增加了對(duì)稻曲病菌的作用位點(diǎn)，并對(duì)稻曲病抗藥性發(fā)生和發(fā)展有顯著抑制作用。三是該配方的殺菌效果顯著提高，能有效指導(dǎo)生產(chǎn)應(yīng)用，減少稻曲病菌對(duì)水稻生產(chǎn)造成的危害，提高水稻產(chǎn)量和品質(zhì)。

3 具體實(shí)施方案及效果

3.1 配方篩選

本組合物以稻曲病菌（Ustilaginoidea virens）為研究對(duì)象，進(jìn)行室內(nèi)復(fù)配藥劑的配方篩選，參照《農(nóng)藥室內(nèi)生測(cè)試驗(yàn)準(zhǔn)則殺菌劑第8部分：防治水稻稻瘟病試驗(yàn) 盆栽法》的標(biāo)準(zhǔn)方法。稻曲病菌U-22菌株在PSA培養(yǎng)基上預(yù)培養(yǎng)9 d，移邊緣的菌落至PS培養(yǎng)液中，在28 ℃、120 r/min條件下振蕩培養(yǎng)14 d，用勻漿機(jī)把菌絲充分打碎，將含有菌絲碎段和分生孢子的混合液作為接種體；鎮(zhèn)秈優(yōu)988種子用85%強(qiáng)氯精500倍液浸種12 h，再用清水充分沖洗后播于育秧盤，按常規(guī)方法育秧。秧苗三葉期移至塑料杯中，每杯移栽3～4株苗，常規(guī)管理至水稻孕穗始期，每杯留生長(zhǎng)較一致的7～10株作供試植株；64%井岡霉素A原藥、90.2%低聚糖素原藥用蒸餾水分別溶解成10 000 μg/mL母液，并在母液中加入0.5%吐溫-20作表面活性劑以增加植株葉面的附著性，再用0.1%吐溫-80的水溶液稀釋2個(gè)供試藥劑的母液和11個(gè)混配的樣品，按系列稀釋法配制不同濃度的藥液；每4杯水稻（孕穗始期）置于PWT-510型噴霧塔內(nèi)定量噴霧不同濃度的藥劑，噴藥后待葉片藥液無明顯水漬后將塑料杯移到29～31℃、16 h光照的生長(zhǎng)室中培養(yǎng)。各濃度處理4次重復(fù)，每次重復(fù)1個(gè)塑料杯，以噴清水的處理作為對(duì)照。各處理第1次噴藥后9 d進(jìn)行第2次噴藥；各處理稻苗在第2次噴藥后4 d進(jìn)行稻曲病的人工接種。稻曲病的接種方法參照張君成等的方法，接種后的水稻植株仍移至生長(zhǎng)室中培養(yǎng)[2-3]。

調(diào)查方法：水稻稻曲病病癥穩(wěn)定后，記錄每穗上稻曲球粒數(shù)，計(jì)算各處理每重復(fù)的平均病粒數(shù)，按下式計(jì)算防治效果：防治效果（%）=（對(duì)照處理平均病粒數(shù)-藥劑處理平均病粒數(shù)）/對(duì)照處理平均病粒數(shù)×100，用 DPS軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)算出回歸方程、EC50、相關(guān)系數(shù)?；靹┑穆?lián)合作用測(cè)定根據(jù)孫云沛法計(jì)算共毒系數(shù)（CTC）。以CTC值判斷藥劑的聯(lián)合毒力作用，CTC≤80表現(xiàn)為拮抗作用；80

由表1可知，室內(nèi)活體條件下不同配比的低聚糖素和井岡霉素A對(duì)稻曲病的EC50是不同的，共毒系數(shù)（CTC）值在80.381 2～225.373 3之間，配比為1∶3～15時(shí)具有增效作用，其中配比為1∶12時(shí)，其共毒系數(shù)最大，說明此配比下的低聚糖素和井岡霉素A復(fù)配增效作用最顯著。

3.2 制備實(shí)施案例

下面結(jié)合具體實(shí)施案例對(duì)本組合物進(jìn)行進(jìn)一步說明，但并不將本組合物局限于這一具體實(shí)施案例（在制劑配比中百分含量為重量百分比）。

懸浮劑的配制方法：將去離子水、分散劑、潤(rùn)濕劑按照配方比例，泵入配備高速剪切攪拌機(jī)的配置釜中，開啟攪拌至完全溶解。加入原藥繼續(xù)剪切30 min，將其他輔助材料按照比例加入配置釜中，繼續(xù)剪切45 min。開啟兩級(jí)砂磨，控制出料速度，得到懸浮劑[4-5]。

實(shí)施案例（13%低聚糖素·井岡霉素A懸浮劑，有效成分1∶12）：稱取1.1%低聚糖素原藥（含量90.2%）、19.3%井岡霉素A原藥（含量64%）、8%分散劑T/36、4%潤(rùn)濕劑YUS-TXC、6%抗凍劑丙二醇、2%防腐劑尼泊金丁酯、0.2%增稠劑黃原膠、0.5%消泡劑SAG630、2%助懸劑硅酸鎂鋁、56.9%去離子水，制成漿料進(jìn)行砂磨，得到產(chǎn)品。

3.3 防治水稻稻曲病的田間試驗(yàn)

試驗(yàn)地位于淮安市洪澤縣岔河鎮(zhèn)施湯村某農(nóng)戶稻田，為多年水稻重栽地，且稻曲病歷年發(fā)病嚴(yán)重，調(diào)查發(fā)病情況，進(jìn)行田間藥效試驗(yàn)。試驗(yàn)設(shè)置6個(gè)處理，分別為6%低聚糖素水劑22.5 g/hm2；28%井岡霉素A可溶粉劑168 g/hm2；13%低聚糖素·井岡霉素A懸浮劑19.5、39.0、78.0 g/hm2；以清水作對(duì)照（CK）。每個(gè)處理3次重復(fù)，不同處理小區(qū)隨機(jī)分布，小區(qū)面積為20 m2。當(dāng)水稻距破口期7 d左右時(shí)開始噴藥（使用新加坡利農(nóng)Jacto 16LITROS型噴霧器噴霧，孔徑<7 mm，藥劑不留殘液），噴藥量750 kg/hm2，第1次噴藥后7 d進(jìn)行第2次噴藥。第2次施藥后14 d調(diào)查防效，調(diào)查方法為每小區(qū)5點(diǎn)取樣，每點(diǎn)調(diào)查10叢，共50叢，記載總穗數(shù)和發(fā)病穗數(shù)，并按分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)分級(jí)（0級(jí)：無??；1級(jí)：每穗有1個(gè)病粒；2級(jí)：每穗有2～4個(gè)病粒；3級(jí)：每穗有5～7個(gè)病粒；4級(jí)：每穗有8～10個(gè)病粒；5級(jí)：每穗有10個(gè)以上病粒），計(jì)算病情指數(shù)和防治效果[6]，公式如下：

由表2可知，13%低聚糖素·井岡霉素A懸浮劑39.0、78.0 g/hm2對(duì)稻曲病的防效分別為81.95%、84.37%，顯著高于井岡霉素A單獨(dú)使用的防效（63.59%），與低聚糖素單劑的防效（81.48%）相當(dāng)。

3.4 試驗(yàn)結(jié)論

室內(nèi)毒力試驗(yàn)表明，低聚糖素、井岡霉素A 2種殺菌劑有效成分具有相容性，低聚糖素、井岡霉素A復(fù)配劑的增效配比范圍是1∶3～15，最佳復(fù)配比為1∶12。田間試驗(yàn)表明，13%低聚糖素·井岡霉素A懸浮劑對(duì)稻曲病的防效顯著高于井岡霉素A單獨(dú)使用時(shí)的防效。在防治稻曲病方面，雖然低聚糖素單劑的效果也很好，但使用成本很高。因此，在生產(chǎn)實(shí)踐中低聚糖素、井岡霉素A聯(lián)合使用，既經(jīng)濟(jì)又高效環(huán)保。

4 參考文獻(xiàn)

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