溫度對金銀花黃酮提取率與抗氧化活性的影響

展俊嶺 皇甫陽鑫 高子怡 趙二勞

(忻州師范學(xué)院化學(xué)系，山西 忻州 034000)

工藝·試驗(yàn)《Technology&Experiment》

溫度對金銀花黃酮提取率與抗氧化活性的影響

展俊嶺 皇甫陽鑫 高子怡 趙二勞

(忻州師范學(xué)院化學(xué)系，山西 忻州 034000)

通過金銀花黃酮浸提法試驗(yàn)，研究了提取溫度對金銀花黃酮提取率與抗氧化活性的影響。結(jié)果表明：提取溫度對金銀花黃酮提取率和抗氧化活性都有一定的影響，選擇金銀花黃酮提取工藝條件時，需同時考慮黃酮的提取率和抗氧化活性。

金銀花 黃酮 溫度 提取率 抗氧化活性

金銀花為忍冬科多年生植物忍冬的花蕾或初開的花，為我國傳統(tǒng)常用中藥，具有清熱解毒、涼散風(fēng)熱、保肝利膽等功效，常用于各種感染、發(fā)炎、高血脂、腫瘤放療與化療口干等癥的預(yù)防與治療，享有“中藥中的青霉素”之美譽(yù)[1,2]。黃酮類物質(zhì)是金銀花中的主要活性成分之一，相關(guān)研究[3,4]已表明，黃酮類化合物具有清除自由基、抗氧化、抗腫瘤、抗病毒、提高免疫力、改善血液循環(huán)、降血壓、降血脂等多種生物活性，研究金銀花中黃酮類成分的提取及功能活性具有重要的實(shí)際意義。我國有豐富的金銀花資源，具有得天獨(dú)厚的資源優(yōu)勢。目前，有關(guān)金銀花中黃酮類成分提取及其功能活性的研究不少[5～7]，但有關(guān)提取溫度對金銀花黃酮抗氧化活性影響的研究鮮見報道。為此，本文研究提取溫度對金銀花黃酮提取率與抗氧化活性的影響，為金銀花資源的綜合開發(fā)和金銀花中黃酮的有效提取提供科學(xué)依據(jù)。

1材料與儀器

1.1 材料

1.1.1原料

金銀花產(chǎn)地山東，購買于忻州市本草堂，藥材粉碎機(jī)粉碎，過20目篩。

1.1.2試劑

蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品，北京化學(xué)試劑公司；1,1-二苯基-2-苦肼基(DPPH·)：日本東京化成工業(yè)株式會社；其余乙醇、亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉等試劑均為國產(chǎn)分析純。實(shí)驗(yàn)用水為二次去離子水。

1.2 儀器

723型可見分光光度計，上海光譜儀器有限公司；AL204電子分析天平：梅特勒-托利多儀器上海有限公司；SHZ-2D循環(huán)水式真空泵：鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司。

2方 法

2.1 金銀花黃酮提取

稱取金銀花樣品1.0 g，以體積分?jǐn)?shù)50%乙醇溶液為提取劑，料液比 (g/mL)1∶30，在不同溫度下浸提40 min。提取液過濾后，定容為100 mL，待測。

2.2 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

根據(jù)參考文獻(xiàn)[8]的方法，準(zhǔn)確移取質(zhì)量濃度為0.25 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)蘆丁溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0和8.0mL分別加入25 mL比色管中，都加入5%亞硝酸鈉溶液1.0 mL，搖勻，靜置6 min，再都加入10%硝酸鋁溶液1.0 mL，搖勻，靜置6 min，加入4%氫氧化鈉溶液10 mL，以水定容至25 mL，靜置反應(yīng)15 min后。以試劑空白對照，在最大波長510 nm處測定吸光度。以吸光度A為縱坐標(biāo)，濃度c為橫坐標(biāo)，繪制蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線并求回歸方程。

2.3 金銀花黃酮提取率測定

準(zhǔn)確移取不同溫度下金銀花黃酮提取液1.0 mL，按2.2中方法測定其黃酮含量，進(jìn)而計算金銀花黃酮提取率，比較不同提取溫度對金銀花黃酮提取率的影響。

2.4 溫度對金銀花黃酮抗氧化活性的影響

試驗(yàn)以清除DPPH·法評價金銀花黃酮的抗氧化活性。對DPPH·清除率越高，則其抗氧化活性越強(qiáng)。

2.4.1金銀花黃酮對DPPH·的清除率的測定

根據(jù)參考文獻(xiàn)[9]的方法，取濃度為0.4 mg/mL的DPPH·溶液1.0 mL置于10 mL的比色管中，用體積分?jǐn)?shù)50%乙醇定容至刻度，在波長517 nm處測定其吸光度為A0；取濃度為0.4 mg/mL的DPPH·溶液與金銀花黃酮提取液各1.0 mL，置于10 mL比色管中，用體積分?jǐn)?shù)50%乙醇定容至刻度，搖勻，避光反應(yīng)30 min后，測定其吸光度為Ai；取金銀花黃酮提取液1.0 mL，置于10 mL比色管中，用體積分?jǐn)?shù)50%乙醇定容至刻度，在波長517 nm處測定其吸光度為Aj。按下式計算對DPPH·清除率：清除率(%)=[1-(Ai-Aj)/ A0] ×100。

2.4.2溫度對金銀花黃酮抗氧化活性的影響

分別取不同溫度下所提、相同濃度的金銀花黃酮提取液1.0 mL，按2.4.1的方法測定其對DPPH·的清除率，研究提取溫度對金銀花黃酮抗氧化活性的影響。

3結(jié)果與分析

3.1 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線及回歸方程

按試驗(yàn)方法，測得蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖1。由標(biāo)準(zhǔn)曲線求得回歸方程為：A=10.439c+0.0084，相關(guān)系數(shù)R2=0.9992。蘆丁在質(zhì)量濃度0.01 ( 0.08mg/mL的范圍內(nèi)與其吸光度呈良好的線性關(guān)系。

圖1 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig 1 Standard curve of Rutin

3.2 溫度對金銀花黃酮提取率的影響

按試驗(yàn)方法，測定不同溫度下金銀花黃酮提取率如圖2。由圖2可知，隨提取溫度的增加，金銀花黃酮率呈先升后降趨勢。在30 ℃～70 ℃溫度范圍內(nèi)，隨提取溫度的增加，金銀花黃酮提取率逐漸增大，提取溫度為70 ℃時，金銀花黃酮提取率達(dá)到最大值10.51%。提取溫度高于70 ℃后，金銀花黃酮提取率呈下降趨勢。顯見，提取溫度不同，金銀花黃酮提取率不同，提取溫度對金銀花黃酮提取率有一定影響。

圖2 溫度對黃酮提取率的影響Fig 2 Effects of temperature on extraction rate

3.3 溫度對金銀花黃酮抗氧化活性的影響

按試驗(yàn)方法，測得不同溫度下所提金銀花黃酮對DPPH·清除率如圖3。由圖3可知，在30 ℃～60 ℃溫度范圍內(nèi)，隨提取溫度的增加，金銀花黃酮對DPPH·清除率增大，提取溫度為60 ℃時，金銀花黃酮對DPPH·清除率達(dá)到最大值76.2%。在60 ℃～80 ℃溫度范圍內(nèi)，隨提取溫度的增加，金銀花黃酮對DPPH·清除率逐漸減少。其原因可能是提取溫度相對較高時，易于使黃酮活性降低。顯見，不同提取溫度對DPPH·清除率有一定的影響，即溫度對金銀花黃酮的抗氧化活性有一定的影響。

圖3 金銀花黃酮對DPPH·清除率Fig 3 Scavenging rate of flavonoids on DPPH·

4結(jié) 論

通過金銀花黃酮浸提法試驗(yàn)研究表明，提取溫度對金銀花黃酮的提取率和抗氧化活性都有一定影響。提取溫度為70 ℃時，金銀花黃酮提取率最高，達(dá)到10.51%。提取溫度為60 ℃時，金銀花黃酮抗氧化活性最強(qiáng)，對DPPH·清除率達(dá)到76.2%。顯見，選擇金銀花黃酮提取工藝條件時，需同時考慮黃酮的提取率和抗氧化活性。

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EffectofTemperatureontheExtractionYieldandAntioxidantActivityofHoneysuckleFlavonoids

Zhan Junling Huangpu Yangxin Gao Ziyi Zhao Erlao

(Department of Chemistry, Xinzhou Teachers University, Shanxi Xinzhou 034000)

The extraction yield and antioxidant activity of Honeysuckle flavonoids were studied based on soaking extracting method. The results showed that the temperature had certain effects on the extraction yield and antioxidant activity of Honeysuckle flavonoids. The extraction yield and antioxidant activity should be considered simultaneously when choosing the extraction process of Honeysuckle flavonoids.

Honeysuckle Flavonoids Temperature Extraction yield Antioxidant Activity

10.16597/j.cnki.issn.1002-154x.2017.11.006

2017-08-14

國家級大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計劃項(xiàng)目(201610124001)；山西省高等學(xué)校大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計劃項(xiàng)目(2016381)；忻州師范學(xué)院化學(xué)化工創(chuàng)新基地項(xiàng)目(2017)

展俊嶺(1996～)，男，本科生，研究方向：天然產(chǎn)物化學(xué)。通訊作者：趙二勞(1952-)，男，教授，研究方向：天然產(chǎn)物化學(xué)。E-mail: zel0350@163.com