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    氟氯氰菊酯對(duì)草魚的急性毒性及轉(zhuǎn)氨酶活性的影響

    2018-01-08 10:32:19孫翰昌丁詩(shī)華
    關(guān)鍵詞:轉(zhuǎn)氨酶菊酯草魚

    王 偉,柴 菁,孫翰昌,丁詩(shī)華*

    氟氯氰菊酯對(duì)草魚的急性毒性及轉(zhuǎn)氨酶活性的影響

    王 偉1,柴 菁2,孫翰昌3,丁詩(shī)華1*

    (1.西南大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,水產(chǎn)科學(xué)重慶市市級(jí)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,重慶 400715;2.遂寧市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所,四川 遂寧 629000;3.重慶文理學(xué)院林學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院,重慶 402160)

    為了揭示氟氯氰菊酯對(duì)水生動(dòng)物的毒性效應(yīng),本研究采用靜水暴露法分析不同濃度氟氯氰菊酯(0、0.2、0.4、0.6、0.8 μg·L-1)對(duì)草魚肝腎谷丙轉(zhuǎn)氨酶(Alanine aminotransferase,ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(Aspartate aminotransferase,AST)活性的影響。研究結(jié)果顯示,氟氯氰菊酯對(duì)草魚96 h LC50為1.112 μg·L-1。在暴露初始階段,氟氯氰菊酯對(duì)ALT、AST活性具有誘導(dǎo)作用,濃度越高誘導(dǎo)作用越顯著。其中0.8 μg·L-1氟氯氰菊酯處理1 d后,肝臟、腎臟ALT活性分別上升28.12%、26.74%,AST活性分別上升31.45%、22.56%;但隨著暴露時(shí)間延長(zhǎng),氟氯氰菊酯對(duì)肝腎ALT、AST活性表現(xiàn)出抑制作用,且高濃度(0.8 μg·L-1)氟氯氰菊酯的抑制作用極顯著,暴露10 d后肝腎ALT、AST活性有顯著下降。與腎臟相比,氟氯氰菊酯處理后肝臟ALT、AST活性變化更明顯。本研究結(jié)果表明,亞致死濃度的氟氯氰菊酯可引起肝腎ALT、AST活性變化,提示氟氯氰菊酯污染物可影響草魚肝腎的生理功能,對(duì)肝腎具有一定的毒性效應(yīng)。

    草魚;氟氯氰菊酯;谷丙轉(zhuǎn)氨酶;谷草轉(zhuǎn)氨酶

    氟氯氰菊酯[α-氰基-4-氟-3-苯氧基芐基-3-(2,2-二氯乙烯基)-2,2-二甲基環(huán)丙烷羧酸酯,Cyfluthrin]是農(nóng)業(yè)上廣泛應(yīng)用的擬除蟲菊酯類殺蟲劑,比傳統(tǒng)的有機(jī)氯、有機(jī)磷類殺蟲劑具有更好的殺蟲效果,已成為傳統(tǒng)殺蟲劑的重要替代品[1]。但由于長(zhǎng)期過量使用,氟氯氰菊酯污染、殘留所造成的環(huán)境問題已受到廣泛關(guān)注[2],研究其在環(huán)境中的降解、轉(zhuǎn)運(yùn)以及生物毒性顯得尤為迫切。近年來(lái),已有較多關(guān)于擬除蟲菊酯對(duì)魚類毒性的研究報(bào)道[3-5],但有關(guān)氟氯氰菊酯對(duì)魚類肝腎毒性效應(yīng)的研究,特別是對(duì)肝腎轉(zhuǎn)氨酶活性影響的研究仍鮮有報(bào)道。肝臟、腎臟是脊椎動(dòng)物重要的內(nèi)臟器官,研究氟氯氰菊酯對(duì)魚類肝腎轉(zhuǎn)氨酶活性的影響,有助于揭示氟氯氰菊酯對(duì)肝腎生理功能的毒性效應(yīng)。

    在脊椎動(dòng)物體內(nèi),谷丙轉(zhuǎn)氨酶(Alanine aminotransferase,EC2.6.1.2,ALT) 與谷草轉(zhuǎn)氨酶(Aspartate aminotransferase,EC2.6.1.1,AST) 是活性最強(qiáng)的兩種轉(zhuǎn)氨酶,催化機(jī)體內(nèi)α-氨基和α-酮基相互轉(zhuǎn)換[6]。中毒或其他原因引起肝腎組織發(fā)生病變或損傷時(shí),ALT、AST活性將明顯升高。因此,ALT、AST可作為研究肝腎組織損傷的一項(xiàng)重要指標(biāo)[7-8]。本研究以草魚(Ctenopharyngodon idellus)為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,利用酶學(xué)測(cè)定法檢測(cè)亞致死濃度氟氯氰菊酯處理引起的肝腎ALT、AST活性變化,分析實(shí)驗(yàn)室條件下氟氯氰菊酯污染物對(duì)草魚肝腎ALT、AST活性的影響,進(jìn)而評(píng)估該污染物對(duì)草魚肝腎生理功能的毒性效應(yīng),為進(jìn)一步研究氟氯氰菊酯等擬除蟲菊酯類污染物的毒理機(jī)制提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 實(shí)驗(yàn)魚及飼養(yǎng)

    實(shí)驗(yàn)用魚為草魚(屬重慶永川雙竹草魚原種場(chǎng)的長(zhǎng)江水系草魚原種),購(gòu)自重慶市北碚區(qū)歇馬鎮(zhèn)留緣水產(chǎn)養(yǎng)殖場(chǎng),體重 20~30 g,體長(zhǎng) 10.0~12.0 cm,體質(zhì)健康,無(wú)傷病。暫養(yǎng)容器為直徑2 m、高1 m的圓柱養(yǎng)殖缸,養(yǎng)殖用水為曝氣7 d以上的自來(lái)水,水溫為(24±1)℃,溶解氧在 5 mg·L-1以上,pH 在 6.8 左右,光暗周期為10∶14。暫養(yǎng)一周后,挑取2000尾體質(zhì)健康、規(guī)格一致的草魚作為受試對(duì)象,暫養(yǎng)期間每日早晚各喂食一次,投喂量為草魚體重的3%。

    1.2 試劑及儀器

    氟氯氰菊酯購(gòu)自山東新勢(shì)立生物科技有限公司,是有效濃度為2.5%的水乳劑;總蛋白(TP)測(cè)定試劑盒、ALT測(cè)試盒和AST測(cè)試盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所,其他試劑均為分析純;UV-1700型紫外分光光度計(jì)為日本Shimadzu公司產(chǎn)品;3K15型冷凍離心機(jī)為德國(guó) Sigma公司產(chǎn)品;SANYO MDF-382E(N)型超低溫冰箱為日本SANYO公司產(chǎn)品;A-5082型酶標(biāo)儀為澳大利亞TECAN公司產(chǎn)品;DY89-Ⅱ電動(dòng)玻璃勻漿機(jī)為寧波新芝生物科技有限公司產(chǎn)品。

    0.1 g·L-1氟氯氰菊酯母液配制:用微量移液器量取400 μL 2.5%氟氯氰菊酯加入蒸餾水稀釋,攪拌并用100 mL容量瓶定容,搖勻,放到4℃?zhèn)溆?。?shí)驗(yàn)時(shí),根據(jù)處理組濃度,取相應(yīng)量加入水中,并混勻。

    1.3 草魚暴露處理

    1.3.1 急性毒性實(shí)驗(yàn)

    采用靜水染毒法,實(shí)驗(yàn)容器為120 L的聚乙烯塑料桶,加50 L水,將實(shí)驗(yàn)魚隨機(jī)分組,每組10尾。實(shí)驗(yàn)用水為曝氣7 d以上的自來(lái)水,水溫為(24±1)℃,溶解氧在5 mg·L-1以上,pH 在6.8左右,光暗周期為10∶14。實(shí)驗(yàn)設(shè) 5 個(gè)處理組(0.6、0.8、1.0、1.5、2.0 μg·L-1)和1個(gè)空白對(duì)照組,每個(gè)處理組設(shè)3個(gè)重復(fù),分別于24、48、72 h和96 h后觀察草魚鰓蓋是否還有活動(dòng),并用玻璃棒輕觸尾柄觀察是否有應(yīng)激反應(yīng),若沒有則說(shuō)明魚已死亡,并記錄草魚的死亡數(shù),死亡魚及時(shí)從水中撈出。實(shí)驗(yàn)期間不進(jìn)行喂食,各組每24 h用相應(yīng)濃度的新鮮實(shí)驗(yàn)液更換1/2水體。

    1.3.2 亞急性毒性實(shí)驗(yàn)

    根據(jù)急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果,按常規(guī)方法以96 h LC50×0.10作為安全濃度,實(shí)驗(yàn)處理濃度為亞致死濃度,介于96 h LC50與安全濃度之間。實(shí)驗(yàn)容器為120 L塑料桶,每桶加相應(yīng)實(shí)驗(yàn)液100 L,將受試草魚隨機(jī)分組,每組100尾,設(shè)4個(gè)處理組(0.2、0.4、0.6、0.8 μg·L-1)和 1個(gè)空白對(duì)照組,每個(gè)處理組設(shè)置 3個(gè)重復(fù),每24 h更換實(shí)驗(yàn)液的1/2,每日喂食一次。

    1.4 樣品制備

    分別在暴露的第 1、2、3、5、10 d,從各處理組隨機(jī)抽取10尾草魚,并分別放到含35 mg·L-1魚安定的水中進(jìn)行麻醉,解剖取肝臟、腎臟。然后置于預(yù)冷生理鹽水中漂洗,除去血液,濾紙拭干,于冰浴中將肝(或腎)剪碎。稱取2 g肝(或腎)樣品,加入預(yù)冷生理鹽水8 mL,一起倒入勻漿器,在冰浴中以 1000 r·min-1勻漿8 min,使組織勻漿化。將勻漿液以 12 000 r·min-1離心10 min,收集上清液,用于酶活性測(cè)定。

    1.5 酶活性測(cè)定

    總蛋白含量測(cè)定采用考馬斯亮藍(lán)法。按照南京建成“蛋白(TP)含量試劑盒”說(shuō)明書的操作步驟,在樣品液中添加相應(yīng)試劑,混勻后靜置1 min,在595 nm下測(cè)定吸光值。

    ALT活性測(cè)定:按照南京建成“ALT測(cè)試盒”說(shuō)明書,根據(jù)步驟加入預(yù)熱的基質(zhì)液20 μL,并加入待測(cè)樣品 5 μL 混合,37℃水浴 30 min,然后加入 2,4-二硝基苯肼液20 μL,混勻,37℃水浴20 min,然后加入0.4 mol·L-1氫氧化鈉 200 μL,混勻,室溫放置 15 min后,在510 nm下測(cè)定吸光值。

    AST活性測(cè)定:按照南京建成“AST測(cè)試盒”說(shuō)明書,根據(jù)步驟加入預(yù)熱的基質(zhì)液20 μL,并加入待測(cè)樣品 5 μL 混合,37℃水浴 30 min,然后加入 2,4-二硝基苯肼液20 μL,混勻,37℃水浴20 min,然后加入0.4 mol·L-1氫氧化鈉 200 μL,混勻,室溫放置 15 min后,在510 nm下測(cè)定吸光值。

    根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線分別求出ALT、AST活性,酶活性以每克蛋白所含的酶活力單位數(shù)(U·g-1)來(lái)表示。1.6數(shù)據(jù)處理

    實(shí)驗(yàn)結(jié)果利用SPSS 19.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(Mean±SD)表示,用Origin2017制作柱狀圖,方差分析采用單因素方差分析法(One-Way ANOVA),應(yīng)用最小極差法(LSD)比較組間差異,以P<0.05作為差異顯著水平;同時(shí)將處理組酶活性與對(duì)照組酶活性進(jìn)行t檢驗(yàn),以確定差異的極顯著水平(P<0.01)。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果

    氟氯氰菊酯暴露處理時(shí),中毒草魚行為異常,身體失去平衡,游動(dòng)緩慢,腹部向上,游動(dòng)過程中出現(xiàn)側(cè)翻、打轉(zhuǎn)、跳躍等癥狀,隨之沉入水底,最后死亡。死魚眼球突出,眼底有出血點(diǎn),解剖發(fā)現(xiàn)腹腔內(nèi)有黃色液體,腎臟上有小黑點(diǎn),肝胰臟、膽囊腫大。急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1,采用Bliss法計(jì)算出96 h LC50為1.112 μg·L-1,并以此為依據(jù)設(shè)置 4 個(gè)亞致死暴露濃度:0.2、0.4、0.6、0.8 μg·L-1。

    表1 草魚的急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果Table 1 The acute toxicity test on C.idellus

    2.2 氟氯氰菊酯對(duì)草魚肝臟ALT活性的影響

    肝臟ALT活性的測(cè)定結(jié)果見圖1。在暴露初期(3 d內(nèi)),不同濃度的氟氯氰菊酯對(duì)草魚肝臟ALT活性均表現(xiàn)誘導(dǎo)作用,并且當(dāng)暴露濃度不超過0.6 μg·L-1時(shí),誘導(dǎo)作用隨暴露濃度增加而不斷增強(qiáng)。經(jīng)0.2 μg·L-1氟氯氰菊酯暴露的10 d內(nèi),草魚肝臟ALT活性均高于對(duì)照組。0.6 μg·L-1濃度處理組在暴露3 d后表現(xiàn)顯著誘導(dǎo)作用(P<0.01),ALT活性上升39.37%,5 d后則表現(xiàn)抑制作用,10 d后活性下降32.26%。0.8 μg·L-1氟氯氰菊酯處理 1 d 后,ALT 活性便上升28.12%,隨后逐漸下降,5 d后ALT活性被抑制,并且隨時(shí)間的延長(zhǎng),抑制作用逐漸增強(qiáng)。

    2.3 氟氯氰菊酯對(duì)草魚腎臟ALT活性的影響

    圖1 氟氯氰菊酯暴露對(duì)草魚肝臟ALT活性的影響Figure 1 Effects of cyfluthrin on liver ALT activity of C.idellus

    圖2氟氯氰菊酯對(duì)草魚腎臟ALT活性的影響Figure 2 Effects of cyfluthrin on kidney ALT activity of C.idellus

    圖2 顯示,氟氯氰菊酯對(duì)草魚腎臟ALT活性也有較大影響。經(jīng)氟氯氰菊酯處理1 d后,各處理組腎臟ALT活性大多有所升高,且高濃度處理組(0.8 μg·L-1)活性上升顯著,較對(duì)照組上升26.74%。當(dāng)氟氯氰菊酯濃度較低(0.2、0.4 μg·L-1)時(shí),隨著暴露時(shí)間的增加,ALT活性基本保持恒定,5 d后相對(duì)于對(duì)照組有所升高。在 0.6 μg·L-1和 0.8 μg·L-1處理組,草魚腎臟ALT活性分別在第3 d和第2 d開始降低,并逐漸接近對(duì)照組的酶活性水平,在第5 d則顯著低于對(duì)照組(P<0.01)。

    2.4 氟氯氰菊酯對(duì)草魚肝臟AST活性的影響

    氟氯氰菊酯暴露對(duì)草魚肝臟AST活性的影響結(jié)果見圖 3。在 0.2 μg·L-1處理組中,肝臟 AST 活性在2 d內(nèi)受到一定程度的抑制,3 d后與對(duì)照組差異不顯著(P>0.05)。其余各處理組在暴露1 d時(shí),AST活性均高于對(duì)照組,且 0.6 μg·L-1和 0.8 μg·L-1處理組活性上升極顯著,分別比對(duì)照組上升23.36%、31.45%。2 d后AST活性開始逐漸降低,并在5 d后顯著低于對(duì)照組,10 d 后 0.8 μg·L-1氟氯氰菊酯對(duì)肝臟 AST 活性的抑制作用極顯著(P<0.01)。

    圖3 氟氯氰菊酯暴露對(duì)草魚肝臟AST活性的影響Figure 3 Effects of cyfluthrin on liver AST activity of C.idellus

    2.5 氟氯氰菊酯對(duì)草魚腎臟AST活性的影響

    氟氯氰菊酯對(duì)草魚腎臟AST活性的影響見圖4。在整個(gè)暴露期間(10 d內(nèi)),低濃度氟氯氰菊酯(0.2 μg·L-1)處理組 AST 活性均略低于對(duì)照組活性,對(duì)腎臟AST活性影響較小。其他濃度的處理組在暴露1 d時(shí)對(duì)腎臟AST活性有不同程度的誘導(dǎo)作用,0.8 μg·L-1處理組在暴露1 d時(shí)AST活性上升22.56%。2 d時(shí)處理組AST活性降低并接近對(duì)照組,3 d后開始表現(xiàn)一定的抑制作用,并且隨暴露時(shí)間延長(zhǎng)抑制作用增大,10 d 時(shí) 0.4、0.6、0.8 μg·L-1處理組的 AST 活性分別下降 30.71%(P<0.01)、20.35%(P<0.01)、36.02%(P<0.01)。

    圖4 氟氯氰菊酯暴露對(duì)草魚腎臟AST活性的影響Figure 4 Effects of cyfluthrin on kidney AST activity of C.idellus

    3 討論

    3.1 氟氯氰菊酯對(duì)草魚的急性毒性

    擬除蟲菊酯是一類含有苯氧基的環(huán)丙烷酯類農(nóng)藥,具有高效、廣譜的特點(diǎn),廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)病蟲害防治和衛(wèi)生等方面[9]。氟氯氰菊酯是一種含有α-氰基的Ⅱ型擬除蟲菊酯,與不含α-氰基的擬除蟲菊酯農(nóng)藥相比具有較高的毒性,在我國(guó)的使用量較大,現(xiàn)已被美國(guó)環(huán)保局確定為首要控制使用的擬除蟲菊酯類農(nóng)藥之一[10]。本研究結(jié)果顯示氟氯氰菊酯污染對(duì)草魚急性毒性作用明顯,并且隨著濃度或暴露時(shí)間的增加,草魚死亡率增大。氟氯氰菊酯對(duì)草魚96 h LC50為1.112 μg·L-1,與鳙魚(Aristichthys nobilis)、鯽魚(Carassiusauratus)、鯉魚(Cyprinuscarpio)[11]、虹鱒(Oncorhyncus mykiss)[12]等相比,本研究得出的半致死濃度相對(duì)偏大,這可能與實(shí)驗(yàn)魚的種類、個(gè)體大小差異以及實(shí)驗(yàn)環(huán)境不同有關(guān)。根據(jù)我國(guó)急性毒性相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)[13],氟氯氰菊酯對(duì)草魚屬于急性毒性類別1。擬除蟲菊酯類農(nóng)藥對(duì)魚類來(lái)說(shuō)屬于劇毒農(nóng)藥,對(duì)魚類具有較強(qiáng)的神經(jīng)毒性,魚類中毒后出現(xiàn)失去平衡、反轉(zhuǎn)、跳躍、打轉(zhuǎn)等神經(jīng)異常的行為,這些均見于本研究結(jié)果。擬除蟲菊酯還能誘導(dǎo)肝腎臟病變,本研究中草魚肝胰臟腫大,腎臟出現(xiàn)黑點(diǎn)。許多研究發(fā)現(xiàn),擬除蟲菊酯能引起魚類肝臟組織出血,肝細(xì)胞腫脹,水樣變性,甚至細(xì)胞裂解等;也能引起腎臟腎間組織充血,腎小管管壁細(xì)胞水樣變性,腎小球萎縮,腎小囊膨脹等[14-15]。

    3.2 氟氯氰菊酯對(duì)草魚轉(zhuǎn)氨酶活性的影響

    本研究發(fā)現(xiàn),氟氯氰菊酯對(duì)草魚體內(nèi)ALT、AST具有顯著性的影響。ALT、AST是生物體內(nèi)兩種廣泛存在的轉(zhuǎn)氨酶,在機(jī)體蛋白質(zhì)代謝過程中發(fā)揮重要作用[16],當(dāng)肝腎等器官的組織細(xì)胞發(fā)生病變或損傷時(shí),ALT、AST活性會(huì)出現(xiàn)明顯變化[17]。此外,已發(fā)現(xiàn)很多農(nóng)藥污染物對(duì)肝腎ALT、AST活性具有一定的誘導(dǎo)或抑制作用[16,18]。這些研究結(jié)果表明,肝腎等器官出現(xiàn)的ALT、AST活性變化實(shí)際上提示其生理功能出現(xiàn)異常。因此,ALT、AST可作為檢測(cè)機(jī)體組織、器官是否中毒或病變的重要指標(biāo)[19]。

    在本研究中,暴露初期氟氯氰菊酯誘導(dǎo)肝腎ALT、AST活性升高,并且隨著氟氯氰菊酯濃度增大,兩種轉(zhuǎn)氨酶活性逐漸增強(qiáng)。原因可能是肝腎具有解毒功能,有毒物質(zhì)與谷胱甘肽結(jié)合是肝腎臟重要的解毒環(huán)節(jié)[20]。在短期脅迫下,擬除蟲菊酯誘導(dǎo)ALT、AST活性升高,催化谷氨酸的生成反應(yīng),從而促進(jìn)谷胱甘肽生成,解毒能力增強(qiáng),保持機(jī)體正常的代謝能力,減少對(duì)魚體的損傷[21]。在肝臟中ALT、AST活性被誘導(dǎo)的時(shí)間長(zhǎng)于腎臟,原因可能是肝臟是機(jī)體最大的解毒器官[22],ALT、AST活性升高可促進(jìn)肝臟對(duì)有毒物質(zhì)的代謝。氟氯氰菊酯在暴露初期對(duì)ALT、AST具有一定的誘導(dǎo)作用,并且氟氯氰菊酯濃度越大,誘導(dǎo)作用越短暫,反之則誘導(dǎo)作用越持久。Loteste等[23]也發(fā)現(xiàn)亞致死濃度(0.300 μg·L-1)的氯氰菊酯可引起條紋鯪脂鯉(Prochilodus lineatus)肝臟中兩種轉(zhuǎn)氨酶活性的顯著升高。王媛等[24]發(fā)現(xiàn)高效氯氰菊酯能夠誘導(dǎo)鯽魚(Carassius auratus)血清中ALT、AST活性顯著升高。夏曉華等[25]的研究結(jié)果顯示,在暴露初期高濃度(7.15 μg·L-1)氯氟氰菊酯對(duì)泥鰍(Misgurnus anguillicaudatus)肝臟組織中ALT、AST活性的誘導(dǎo)時(shí)間少于低濃度處理組,這些研究與本實(shí)驗(yàn)獲得的結(jié)果基本一致。

    隨著暴露時(shí)間延長(zhǎng)及濃度的升高,草魚肝腎ALT、AST活性表現(xiàn)下降趨勢(shì),并顯著低于對(duì)照組,說(shuō)明氟氯氰菊酯對(duì)肝腎ALT、AST活性具有抑制作用。類似的結(jié)果也見于其他研究報(bào)道,例如高濃度(7.15 μg·L-1)高效氯氟氰菊酯對(duì)泥鰍肝臟 ALT、AST的抑制比率分別能達(dá)到62.27%、59.91%[25]。原因可能是高濃度脅迫或長(zhǎng)時(shí)間暴露下,肝腎功能障礙,代謝紊亂,有害物質(zhì)導(dǎo)致組織損傷,肝腎細(xì)胞功能下降[25],甚至壞死,致使轉(zhuǎn)氨酶活性降低,從而影響魚體生理功能,甚至導(dǎo)致魚體死亡。但Prusty等[26]研究發(fā)現(xiàn),用1.79 μg·L-1氰戊菊酯處理南亞野鯪(Labeo rohita)15 d 后,肝臟ALT、AST活性增強(qiáng)。Vani等[27]在研究氯氰菊酯對(duì)卡特拉魮(Catla catla)的影響時(shí),也發(fā)現(xiàn)經(jīng)0.443 μg·L-1氯氰菊酯處理60 d后,卡特拉魮肝臟ALT、AST活性分別升高30.16%、32.47%,這些發(fā)現(xiàn)與本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果有些差異,可能由于長(zhǎng)期暴露下,氧化應(yīng)激的作用引起蛋白質(zhì)代謝增加或者肝組織過度損傷[28]。

    氟氯氰菊酯對(duì)草魚肝腎ALT、AST活性均有明顯的影響,且具有相似的變化趨勢(shì),存在明顯的時(shí)間-劑量效應(yīng)關(guān)系。尤其是肝臟ALT、AST活性變化表現(xiàn)更為明顯的時(shí)間-劑量效應(yīng)關(guān)系,可作為擬除蟲菊酯類農(nóng)藥污染物的生物標(biāo)記。本研究揭示了氟氯氰菊酯對(duì)草魚肝腎ALT、AST的影響,但有關(guān)氟氯氰菊酯進(jìn)入草魚機(jī)體后的轉(zhuǎn)運(yùn)、富集、代謝機(jī)制以及對(duì)基因表達(dá)的毒理效應(yīng)仍需進(jìn)一步的研究。

    4 結(jié)論

    (1)氟氯氰菊酯對(duì)草魚的 96 h LC50為 1.112 μg·L-1,根據(jù)我國(guó)相關(guān)急性毒性標(biāo)準(zhǔn),氟氯氰菊酯對(duì)草魚有劇毒。

    (2)暴露初期,亞致死濃度的氟氯氰菊酯對(duì)草魚肝腎ALT、AST活性具有一定的誘導(dǎo)作用。隨著暴露時(shí)間的延長(zhǎng),亞致死濃度的氟氯氰菊酯對(duì)兩種轉(zhuǎn)氨酶表現(xiàn)出抑制的趨勢(shì),并且濃度越大抑制作用越強(qiáng)。

    (3)氟氯氰菊酯可影響草魚肝腎某些生理生化指標(biāo),提示其對(duì)草魚肝腎具有一定的毒性效應(yīng)。

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    Acute toxicity of cyfluthrin and its effect on transaminase activity in grass carp(Ctenopharyngodon idellus)

    WANG Wei1,CHAI Jing2,SUN Han-chang3,DING Shi-hua1*
    (1.Key Laboratory of Aquatic Science of Chongqing,College of Animal Science and Technology,Southwest University,Chongqing 400715,China;2.Suining Institute Product Quality Supervision&Inspection,Suining 629000,China;3.College of Forestry and Life Science,Chongqing University of Arts and Sciences,Chongqing 402160,China)

    Cyfluthrin is a widely used pesticide in agriculture,but its potential toxicity to aquatic animals is not well understood.In this study,the effects of different concentrations of cyfluthrin (0,0.2,0.4,0.6,0.8 μg·L-1)on the activities of alanine aminotransferase(ALT)and aspartate aminotransferase(AST)in the liver and kidney of grass carp(Ctenopharyngodon idellus)were studied.The results showed that the 96 h LC50(median lethal concentration)of cyfluthrin was 1.112 μg·L-1.In the early exposure stage,cyfluthrin induced the activities of ALT and AST and there was a positive correlation between cyfluthrin concentration and induction effects.After 1 day of exposure to 0.8 μg·L-1cyfluthrin,the ALT activity in the liver and kidney increased by 28.12%and 26.74%,respectively,and the AST activity increased by 31.45%and 22.56%,respectively.However,the activities of AST and ALT were inhibited as exposure time increased,and the inhibitory effects increased with cyfluthrin concentration.The activities of ALT and AST in the liver and kidney were significantly decreased after 10 days of exposure to 0.8 μg·L-1cyfluthrin.Following cyfluthrin exposure,changes in ALT and AST activities in the liver were more obvious than those in the kidney.These results showed that sublethal concentrations of cyfluthrin induced changes in ALT and AST activities in the liver and kidney,suggesting that cyfluthrin contaminants affect the physiological function and have toxic effects on the liver and kidney of grass carp.

    Ctenopharyngodon idellus;cyfluthrin;ALT;AST

    2017-06-09 錄用日期:2017-08-23

    王 偉(1991—),男,河南鄲城人,碩士研究生,主要研究方向?yàn)樗a(chǎn)毒理學(xué)。E-mail:290265776@qq.com

    *通信作者:丁詩(shī)華 E-mail:1031288162@qq.com

    重慶市科委社會(huì)事業(yè)與民生保障科技創(chuàng)新項(xiàng)目(cstc2015shmszx80032)

    Project supported:The Science and Technology Innovation Foundation of Chongqing Science and Technology Commission(cstc2015shmszx80032)

    X503.225

    A

    1672-2043(2017)12-2388-06

    10.11654/jaes.2017-0817

    王 偉,柴 菁,孫翰昌,等.氟氯氰菊酯對(duì)草魚的急性毒性及轉(zhuǎn)氨酶活性的影響[J].農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào),2017,36(12):2388-2393.

    WANG Wei,CHAI Jing,SUN Han-chang,et al.Acute toxicity of cyfluthrin and its effect on transaminase activity in grass carp(Ctenopharyngodon idellus)[J].Journal of Agro-Environment Science,2017,36(12):2388-2393.

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