百令膠囊對(duì)急性加重期COPD患者T淋巴細(xì)胞亞群及炎性因子的影響研究

張秀軍 尉理梁 王建華

百令膠囊對(duì)急性加重期COPD患者T淋巴細(xì)胞亞群及炎性因子的影響研究

張秀軍 尉理梁 王建華

目的 探討百令膠囊對(duì)急性加重期慢性阻塞性肺疾?。–OPD）患者T淋巴細(xì)胞亞群及炎性因子的影響。方法 選擇2013年5月至2016年10月急性加重期COPD患者130例，根據(jù)隨機(jī)數(shù)字表法分為觀察組與對(duì)照組，各65例，對(duì)照組患者采用常規(guī)西醫(yī)綜合治療，觀察組患者在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上加用百令膠囊治療，觀察比較兩組患者治療前后的BODE指數(shù)、外周血T淋巴細(xì)胞亞群以及血清IL-β、IL-6、IL-8、TNF-α、IL-10、IL-2等炎性細(xì)胞因子水平的變化情況。結(jié)果 觀察組患者治療有效率（93.85%）明顯高于對(duì)照組（76.92%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=7.46，P=0.01）。治療后兩組患者BODE指數(shù)、MMRC評(píng)分均明顯降低，BMI評(píng)分、FEV1%pred評(píng)分、6MWD評(píng)分均明顯升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），且治療后觀察組患者BODE指數(shù)、MMRC評(píng)分明顯低于對(duì)照組，BMI評(píng)分、FEV1%pred評(píng)分、6MWD評(píng)分明顯高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。治療后兩組患者的CD4+和CD4+/ CD8+明顯升高，CD8+明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），且觀察組患者的CD4+和CD4+/ CD8+明顯高于對(duì)照組，CD8+明顯低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。治療后兩組患者的IL-β、IL-6、IL-8、TNF-α水平明顯降低，IL-2、IL-10水平明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），且治療后觀察組患者IL-β、IL-6、IL-8、TNF-α水平明顯低于對(duì)照組，IL-2、IL-10水平明顯高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。兩組患者治療期間不良反應(yīng)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.10，P=0.75）。結(jié)論 百令膠囊治療急性加重期COPD患者能夠較好的改善患者的免疫功能，降低患者的炎癥反應(yīng)，改善患者的肺部癥狀，臨床療效較好，且安全性較高。

百令膠囊 慢性阻塞性肺疾病 免疫功能 炎癥因子

Objective To study the effect of bailing capsule on T lymphocyte subsets and inflammatory factors in patients with acute exacerbation of COPD. Methods From May 2013 to October 2016，130 patients with acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease（COPD） were divided into study group （65 cases） and control group （65 cases） according to the method of random number table. Patients in the control group were treated with conventional therapy，while patients in the study group were treated with bailing capsule combined with conventional treatment. The BODE index，peripheral blood T lymphocyte subsets，serum IL-β，IL-6，IL-8，IL-10 and IL-2 were measured and compared between two groups before and after treatment. Results The effective rate of the study group （93.85%） was signif i cantly higher than that of the control group （76.92%），the difference was statistically significant （χ2=7.46，P=0.01）. After treatment，BODE index，MMRC score were signif i cantly decreased （P＜0.05），and the BMI score，F(xiàn)EV1% pred score，6MWD score were signif i cantly increased in both groups of patients，and BMI score，F(xiàn)EV1% pred score and 6MWD score in the study group were signif i cantly higher in the study group than in the control group（P＜0.05），and the BODE index and MMRC score of the study group were signif i cantly lower than those of the control group （P＜0.05）. The CD4+and CD4+/CD8+levels in the study group were signif i cantly higher than those in the control group，and the levels of CD8+ were signif i cantly lower than those in the control group，the difference were statistically signif i cant （P＜0.05）. IL-6，IL-8 and TNF-α levels were signif i cantly decreased and IL-2，IL-10 levels were signif i cantly increased in both groups after treatment （P＜0.05），and the levels of IL-6，IL-8 and TNF-α were signif i cantly lower than those in the control group，and the levels of IL-2，IL-10 were signif i cantly higher than those in the control group （P＜0.05）. There was no signif i cant difference in adverse events between the two groups （χ2=0.10，P=0.75）. Conclusion Bailing capsule can improve the immune function of patients with acute exacerbation of COPD，reduce the inf l ammatory response of patients，improve the patient's lung symptoms，the clinical eff i cacy is better and the security is higher.

Bailing capsule Chronic obstructive pulmonary disease Immune function Inf l ammatory factors

慢性阻塞性肺疾?。–OPD）的主要臨床特點(diǎn)是患者的氣道阻塞進(jìn)行性加重、氣流受限，COPD急性加重期（AECOPD）患者會(huì)出現(xiàn)明顯氣道炎性反應(yīng)，導(dǎo)致患者呼吸困難缺氧，CO2潴留加?。?］。對(duì)于急性加重期COPD患者的治療主要有應(yīng)用抗菌藥物、支氣管擴(kuò)張劑、抗膽堿能藥物、β2受體激動(dòng)劑、糖皮質(zhì)激素、呼吸興奮劑等［2］。近年來(lái)隨著對(duì)COPD免疫學(xué)研究的深入，免疫調(diào)節(jié)已經(jīng)成為COPD治療新方向［3］。本文探討百令膠囊對(duì)急性加重期慢性阻塞性肺疾?。–OPD）患者T淋巴細(xì)胞亞群及炎性因子的影響。

1 臨床資料

1.1 一般資料 選擇2013年5月至2016年8月本院急性加重期COPD患者130例，年齡38～67歲。隨機(jī)分為觀察組與對(duì)照組，其中觀察組患者65例，男37例，女28例；年齡38～65歲，平均年齡（52.75±8.75）歲。病程3～14年，平均（8.54±3.55）年。對(duì)照組患者65例，男38例，女27例；年齡38～67歲，平均年齡（52.63±9.12）歲。病程 3～15年，平均（8.47±4.74）年。兩組患者年齡、性別、病程等一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本項(xiàng)目經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有患者均簽署知情同意書。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn) （1）納入標(biāo)準(zhǔn)：COPD的診斷符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì)2013年制定的慢性阻塞性肺疾病修訂診治指南［4］；患者肺功能符合第一秒用力呼氣容積（FEV1）/用力肺活量（FVC）＜70%，F(xiàn)EV1＜80%預(yù)計(jì)值（吸入β2受體激動(dòng)劑后的測(cè)定值）；患者咳嗽加重、痰量和膿痰量均增多、發(fā)熱、合并肺炎或呼吸困難加重。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：自身免疫性疾??；具有嚴(yán)重的肝腎功能不全；合并肺栓塞及氣胸；有先天性或后天性免疫缺陷患者。

1.3 方法 所有患者均在入院后按照COPD診治指南上推薦的診治型抗生素治療，根據(jù)痰或氣道分泌物細(xì)菌培養(yǎng)選擇抗菌藥物，并輔以其他綜合性治療手段，包括平喘、止咳、解痙。觀察組患者在此基礎(chǔ)上口服百令膠囊（杭州中美華東制藥有限公司），5粒/次，3次/d，療程共3個(gè)月。對(duì)照組患者僅進(jìn)行常規(guī)西醫(yī)綜合治療而不使用免疫調(diào)節(jié)劑。

1.4 評(píng)價(jià)指標(biāo) （1）臨床療效的判定［5］：①患者咳嗽、口唇發(fā)紺、喘息、發(fā)熱等癥狀、體征基本消失或明顯減輕，F(xiàn)EV1%增加＞25%即為顯效；②臨床癥狀、體征有所減輕，F(xiàn)EV1增加15%～24%即為好轉(zhuǎn)；③臨床癥狀、體征未明顯改善或有加重趨勢(shì)即為無(wú)效?；颊咧委煹挠行?（顯效+有效）/總?cè)藬?shù)×100%。（2） BODE指數(shù)：總分為10分，分值越高表示情況越差，BODE共分為4級(jí)［6］，包括（1）體質(zhì)指數(shù)（BMI）。（2）氣流阻塞程度（the degree of airflow obstruction，O）：表示方法為第一秒用力呼氣容積占預(yù)計(jì)值百分比（FEV1% pred）表示，測(cè)定前24h不對(duì)患者使用支氣管擴(kuò)張劑，霧化吸入沙丁胺醇400μg，20min后再行支氣管擴(kuò)張實(shí)驗(yàn)。（3）呼吸困難（Dyspnea，D）：采用改良過后的英國(guó)醫(yī)學(xué)研究委員會(huì)呼吸困難量表（MMRCdyspned scale）進(jìn)行衡量，有明顯呼吸困難且不能離開房屋或換衣服時(shí)氣短為4分；在平地上行走約100m左右或數(shù)分鐘后需要停下休息為3分；較同齡人在平地上行走慢或需要停下休息，抑或存在氣短為2分；在快步行走或在上緩坡時(shí)出現(xiàn)氣短為1分；除進(jìn)行劇烈運(yùn)動(dòng)外無(wú)氣短相關(guān)呼吸問題出現(xiàn)為0分。（4）運(yùn)動(dòng)能力（exercise capacity，E）：評(píng)價(jià)方式為6min步行距離（6MWD）。具體評(píng)分見表1。

表1 BODE指數(shù)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

1.5 外周血T淋巴細(xì)胞亞群的檢測(cè) 流式細(xì)胞儀型號(hào)為美國(guó)BD公司FACSCalibur，單抗為FITC/PE標(biāo)記的單抗（Phaemingen公司），陰性對(duì)照為FITC/PE雙色標(biāo)記的同型IgG。采集患者清晨空腹肘靜脈血，EDTA3K+抗凝，取100μl康寧全血，加入20μl陰性對(duì)照，室溫閉關(guān)孵育15min后固定，5min后上機(jī)檢測(cè)。分別于治療前和治療后檢測(cè)。

1.6 炎性細(xì)胞因子的檢測(cè) 包括IL-β、IL-6、IL-10、TNF-α、IL-2、IL-10等炎性細(xì)胞因子，檢測(cè)方法為酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），試劑盒購(gòu)自上海豐壽實(shí)業(yè)有限公司。

1.7 不良反應(yīng) 比較兩組患者出現(xiàn)的不良反應(yīng)情況，主要是轉(zhuǎn)氨酶輕度升高的癥狀，其檢測(cè)方法為賴氏比色法（Reitman-Frankel）。

1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以（x±s）表示，用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以［n（%）］表示，用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者臨床療效比較 見表2。

表2 兩組患者臨床療效比較［n（%）］

2.2 兩組患者BODE指數(shù)比較 見表3。

表3 兩組患者BODE指數(shù)比較（x±s）

2.3 T細(xì)胞免疫功能的改變情況 見表4。

表4 T細(xì)胞亞群的變化比較（x±s）

2.4 炎性細(xì)胞因子的改變情況 見表5。

2.5 不良反應(yīng)情況 觀察組患者出現(xiàn)5例（7.69%）患者轉(zhuǎn)氨酶輕度升高，對(duì)照組患者出現(xiàn)6例（9.23%）患者轉(zhuǎn)氨酶輕度升高，其余未見明顯不良反應(yīng)，兩組患者不良反應(yīng)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.10，P=0.75）。

表5 治療前后炎性因子的變化比較（x±s）

3 討論

研究顯示，COPD的發(fā)病機(jī)制主要包括空氣污染、吸煙、職業(yè)粉塵化學(xué)物質(zhì)、蛋白酶-抗蛋白酶失衡、氧化應(yīng)激等［7］。自20世紀(jì)90年代在COPD患者肺和氣道黏膜發(fā)現(xiàn)T細(xì)胞群集依賴［8］，研究相繼發(fā)現(xiàn)COPD患者體內(nèi)分離出的CD4+T細(xì)胞在彈性蛋白肽刺激下能夠釋放干擾素受體γ和IL-10，且存在增殖現(xiàn)象，與疾病的嚴(yán)重程度具有正相關(guān)性［9］。另外相關(guān)研究顯示［10］，在戒煙患者體內(nèi)持續(xù)多年存在T細(xì)胞介導(dǎo)的炎癥，表明免疫反應(yīng)與COPD的發(fā)生密切相關(guān)。目前全身性炎性細(xì)胞因子成為研究COPD發(fā)病機(jī)制的新方向和熱點(diǎn)，COPD的臨床特點(diǎn)包括肺實(shí)質(zhì)、氣道和肺血管的慢性炎癥等，在COPD患者的肺部均發(fā)現(xiàn)存在肺泡巨噬細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞及中性粒細(xì)胞增多的現(xiàn)象，相關(guān)炎癥細(xì)胞被激活后可以釋放多種炎性細(xì)胞因子，包括 IL-β、IL-6、IL-10、TNF-α、IL-2、IL-10等，這些炎性細(xì)胞因子可以對(duì)肺的結(jié)構(gòu)造成破壞，促進(jìn)相關(guān)細(xì)胞發(fā)生炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)發(fā)生變化等一系列反應(yīng)，釋放溶酶體，形成超氧化物，參與COPD的病理過程［11］。

本資料結(jié)果顯示，經(jīng)過百令膠囊治療后，患者的臨床有效率明顯升高，COPD指數(shù)明顯改善，患者的CD4+和CD4+/CD8+明顯升高，CD8+明顯降低，表明治療后患者的免疫調(diào)節(jié)功能增強(qiáng)。另外治療后患者IL-β、IL-6、IL-8、TNF-α 水平明顯降低，IL-2、IL-10水平明顯升高，表明在急性加重期COPD患者的病情得到緩解后，T細(xì)胞免疫功能也逐漸得到加強(qiáng)。相關(guān)研究結(jié)果顯示［12］，老年COPD患者的T細(xì)胞亞群存在CD4+下降，CD8+上升的現(xiàn)象，分析原因可能是由于長(zhǎng)期存在缺氧狀況影響細(xì)胞正常的新陳代謝過程，進(jìn)而影響機(jī)體的免疫功能，尤其是T細(xì)胞免疫功能。本資料結(jié)果顯示，急性加重期COPD患者經(jīng)過百令膠囊治療后患者通氣功能明顯改善，與此同時(shí)患者T細(xì)胞免疫功能也得到改善，炎性細(xì)胞因子的分泌也趨于正常，這與上述結(jié)果吻合，也表明百令膠囊相比于常規(guī)治療而言其臨床療效更為顯著。百令膠囊具有較好的免疫調(diào)節(jié)功能，主要是通過提高機(jī)體單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)的吞噬功能，增加T細(xì)胞毒作用［13］。COPD患者機(jī)體抵抗力下降，呼吸道易反復(fù)感染，使臟器受損，當(dāng)機(jī)體脾、肺、腎三臟功能下降時(shí)，特別是腎氣虛的時(shí)候機(jī)體的免疫功能下降尤其明顯。因而，增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能能夠有效解決患者病情反復(fù)發(fā)作的特點(diǎn)，減輕癥狀，百令膠囊具有益腎補(bǔ)肺、益精氣的作用，不僅能夠抗炎止咳，還能夠增強(qiáng)機(jī)體的免疫力［14］。

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312000 浙江省紹興市立醫(yī)院