化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)人免疫缺陷病毒抗體價(jià)值的Meta分析

朱有森，曾艷華，張朝霞

(新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心，烏魯木齊 830054)

·循證醫(yī)學(xué)·

化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)人免疫缺陷病毒抗體價(jià)值的Meta分析

朱有森，曾艷華，張朝霞△

(新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心，烏魯木齊 830054)

目的系統(tǒng)評(píng)價(jià)化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)人免疫缺陷病毒(HIV)抗體作為HIV初篩方法的價(jià)值。方法通過計(jì)算機(jī)檢索和手工檢索方法，收集萬(wàn)方、維普、中國(guó)知網(wǎng)(CNKI)、CBM、Pubmed、Web of Science等數(shù)據(jù)庫(kù)發(fā)表的采用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)HIV抗體的中文和英文研究，檢索時(shí)限截止至2016年11月。由2位研究者按照納入與排除標(biāo)準(zhǔn)獨(dú)立篩選文獻(xiàn)、提取資料和評(píng)價(jià)納入研究的方法學(xué)質(zhì)量后，應(yīng)用Meta-disc1.4和Stata12.0軟件進(jìn)行Meta 分析。結(jié)果共納入8篇文獻(xiàn)，共計(jì)26 168例受試者。Meta分析結(jié)果顯示：化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)HIV抗體的合并敏感度為100%(95%CI：1.00～1.00)，合并特異度為100%(95%CI：0.99～1.00)，合并陽(yáng)性似然比為237.79(95%CI：80.50～702.42)，合并陰性似然比為0.00(95%CI：0.00～0.02)，診斷比值比(DOR)為48 911.05(95%CI：8 257.50～289 711.20)，曲線下面積AUC為0.999 4(SE=0.000 2)。結(jié)論化學(xué)發(fā)光法可作為HIV初篩方法在臨床推廣應(yīng)用。

化學(xué)發(fā)光測(cè)定法；人免疫缺陷病毒；Meta分析；診斷性試驗(yàn)

艾滋病又稱獲得性免疫缺陷綜合征(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)，是由人類免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)引起的病死率極高的惡性傳染病，我國(guó)于1985年首次報(bào)告艾滋病病例以來(lái)，HIV感染人數(shù)呈逐年上升趨勢(shì)[1-2]。目前，AIDS是全球15～59歲人群的主要致死原因，已成為全球嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題[3]。目前我國(guó)多采用ELISA檢測(cè)HIV抗體，但因其易受檢測(cè)環(huán)境、試劑等多種因素的影響，存在諸多的局限性[4]。近年來(lái)，具有高靈敏度、自動(dòng)化的化學(xué)發(fā)光法在HIV抗體檢測(cè)中的應(yīng)用越來(lái)越廣泛，為系統(tǒng)評(píng)價(jià)其價(jià)值，本研究收集相關(guān)中英文文獻(xiàn)進(jìn)行Meta分析，以期為臨床應(yīng)用提供可靠的依據(jù)。

1 資料與方法

1.1檢索策略 通過計(jì)算機(jī)檢索和手工檢索方法，收集萬(wàn)方、維普、中國(guó)知網(wǎng)(CNKI)、中國(guó)生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫(kù)、Pubmed、Web of Science等數(shù)據(jù)庫(kù)發(fā)表的采用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)HIV抗體的中文和英文研究，檢索時(shí)限截至2016年11月。同時(shí)篩選納入研究的參考文獻(xiàn)，以補(bǔ)充相關(guān)文獻(xiàn)。中文檢索詞包括：化學(xué)發(fā)光法、人免疫缺陷病毒抗體、HIV抗體；英文檢索詞包括：chemiluminescence immunoassay、human immunodeficiency virus antibody、HIV antibody、anti-HIV、Western blot、WB、sensitive、specificity等。采用主題詞與自由詞相結(jié)合的方式進(jìn)行檢索，所有檢索策略通過多次預(yù)檢索后確定。

1.2納入和排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)國(guó)內(nèi)外已發(fā)表的化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)HIV抗體的診斷性試驗(yàn)；(2)包括HIV感染者及HIV非感染者(健康體檢者、獻(xiàn)血者等)；(3)待評(píng)價(jià)方法為化學(xué)發(fā)光法，診斷金標(biāo)準(zhǔn)為蛋白免疫印跡試驗(yàn)(Western blot)和核酸擴(kuò)增檢測(cè)(nucleic acid amplification test,NAAT)；(4)結(jié)局指標(biāo)：化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)HIV抗體的靈敏度、特異度、診斷比值比(diagnostic odds ratio，DOR)和受試者工作特征曲線下面積(area under the curve,AUC)。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)未用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)的文獻(xiàn)；(2)無(wú)金標(biāo)準(zhǔn)或未與金標(biāo)準(zhǔn)比較的文獻(xiàn)；(3)數(shù)據(jù)不全或無(wú)法獲取四格表數(shù)據(jù)的文獻(xiàn)；(4)綜述、文摘或個(gè)案報(bào)道等文獻(xiàn)；(5)非中英文文獻(xiàn)；(6)重復(fù)發(fā)表的文獻(xiàn)。

1.3文獻(xiàn)篩選、資料提取與質(zhì)量評(píng)價(jià) 由2位研究者根據(jù)納入與排除標(biāo)準(zhǔn)獨(dú)立篩選文獻(xiàn)、提取資料和評(píng)價(jià)納入研究的方法學(xué)質(zhì)量，如遇分歧則討論解決或交由第三方幫助決定。資料提取內(nèi)容主要包括：(1)研究的基本特征，包括第一作者、發(fā)表時(shí)間、國(guó)家；(2)納入研究的檢測(cè)方法，金標(biāo)準(zhǔn)方法；(3)納入研究的數(shù)據(jù)信息，包括研究例數(shù)、真陽(yáng)性值、假陽(yáng)性值、真陰性值、假陰性值。采用診斷準(zhǔn)確性研究的質(zhì)量評(píng)價(jià)工具(quality assessment of diagnostic accuracy studies，QUADAS)-2[5]對(duì)納入研究的方法學(xué)質(zhì)量及偏倚風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行評(píng)價(jià)，包括病例的選擇、待評(píng)價(jià)試驗(yàn)、金標(biāo)準(zhǔn)、病例流程和進(jìn)展情況4部分，所有組成部分在偏倚風(fēng)險(xiǎn)方面都被評(píng)估，前3部分也在臨床適用性方面被評(píng)估。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用Meta-disc1.4軟件進(jìn)行Meta分析。通過計(jì)算敏感度對(duì)數(shù)與特異度對(duì)數(shù)的Spearman 相關(guān)系數(shù)來(lái)檢驗(yàn)閾值效應(yīng)，采用I2對(duì)納入研究進(jìn)行異質(zhì)性分析，同時(shí)使用I2評(píng)估異質(zhì)性的大小，以P≤0.1為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。若各研究之間不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)異質(zhì)性(P>0.1，I2≤50%)，則采用固定效應(yīng)模型進(jìn)行Meta分析，反之則采用隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行Meta分析。若存在非閾值效應(yīng)引起的異質(zhì)性，則采用敏感性分析評(píng)估研究結(jié)果的穩(wěn)定性[6]，采用Stata12.0軟件繪制Deeks漏斗圖評(píng)估納入研究的發(fā)表偏倚，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1文獻(xiàn)檢索結(jié)果 通過計(jì)算機(jī)和手工方法初步檢索共獲得相關(guān)文獻(xiàn)256篇，排除重復(fù)發(fā)表的文獻(xiàn)53篇，余203篇文獻(xiàn)根據(jù)納入與排除標(biāo)準(zhǔn)，通過閱讀題目和摘要進(jìn)行初篩，剩余64篇文獻(xiàn)，仔細(xì)閱讀全文復(fù)篩，排除不同方法、數(shù)據(jù)不全、綜述等文獻(xiàn)后最終納入符合條件的8個(gè)研究[7-14]，共計(jì)26 168例受試者，包括HIV感染者5 485例，HIV非感染者20 683例。文獻(xiàn)篩選流程及結(jié)果見圖1。

圖1 文獻(xiàn)篩選流程及結(jié)果

2.2納入研究的基本特征與偏倚風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估 納入研究的基本特征見表1。偏倚風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果見圖2。

表1 納入研究的基本特征

TP：真陽(yáng)性；FP：假陽(yáng)性；FN：假陰性；TN：真陰性；WB:Western blot-：此項(xiàng)無(wú)數(shù)據(jù)

偏倚風(fēng)險(xiǎn)判斷：(1)病例選擇：選擇的病例是否會(huì)產(chǎn)生偏倚；(2)待評(píng)價(jià)試驗(yàn)：待評(píng)價(jià)試驗(yàn)的實(shí)施或解釋是否會(huì)產(chǎn)生偏倚；(3)金標(biāo)準(zhǔn)：金標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)施及解釋是否會(huì)產(chǎn)生偏倚；(4)病例流程和進(jìn)展情況：病例的流程是否會(huì)產(chǎn)生偏倚；臨床適用性評(píng)價(jià)：(1)病例選擇：納入相關(guān)的患者和背景與評(píng)價(jià)問題匹配情況；(2)待評(píng)價(jià)試驗(yàn)：待評(píng)價(jià)試驗(yàn)的實(shí)施和解釋與評(píng)價(jià)問題的匹配情況評(píng)價(jià)；(3)金標(biāo)準(zhǔn)：金標(biāo)準(zhǔn)的適用性評(píng)價(jià)

圖2納入研究的偏倚風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

2.3Meta分析結(jié)果

2.3.1異質(zhì)性檢驗(yàn) 通過計(jì)算敏感度對(duì)數(shù)與1-特異度對(duì)數(shù)的spearman相關(guān)系數(shù)為0.204(P=0.629)，表明納入研究不存在閾值效應(yīng)。以診斷比值比(DOR)探討非閾值效應(yīng)引起的異質(zhì)性，Cochran-Q=46.00(P=0.000 0)，I2=84.8%，表明納入研究存在非閾值效應(yīng)引起的異質(zhì)性。進(jìn)一步采用隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行Meta分析。

2.3.2Meta分析 隨機(jī)效應(yīng)模型Meta分析結(jié)果顯示，化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)HIV抗體的敏感度為98%～100%，合并敏感度為100%(95%CI：1.00～1.00)，P=0.000 9；特異度為96%～100%，合并特異度為100%(95%CI：0.99～1.00)，P=0.000 0；合并陽(yáng)性似然比為237.79(95%CI：80.50～702.42)；合并陰性似然比為0.00(95%CI：0.00～0.02)；DOR為48 911.05(95%CI：8 257.50～289 711.20)。繪制ROC，AUC為0.999 4(SE=0.000 2)，Q*=0.995 4(SE=0.002 0)，見圖3。

2.3.3亞組分析 為進(jìn)一步探討非閾值效應(yīng)引起的異質(zhì)性來(lái)源，本研究對(duì)樣本量和金標(biāo)準(zhǔn)數(shù)量的不同進(jìn)行亞組分析，結(jié)果提示按照樣本量的不同進(jìn)行分組產(chǎn)生的異質(zhì)性較低，詳見表2。

2.3.4敏感性分析 分別單個(gè)排除納入質(zhì)量較差的文獻(xiàn)，重新計(jì)算合并的敏感度、特異度、DOR等數(shù)據(jù)，與排除前結(jié)果相比，結(jié)果均未發(fā)生明顯改變，提示納入文獻(xiàn)的穩(wěn)定性較好。

2.3.5發(fā)表偏倚 采用STATA12.0軟件繪制Deeks漏斗圖評(píng)估納入研究的發(fā)表偏倚，結(jié)果顯示，t=-1.32，P=0.234，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示存在發(fā)表偏倚的可能性較小。見圖4。

表2 納入研究的亞組分析結(jié)果

圖3 納入研究的ROC曲線

圖4 Deeks漏斗圖

3 討 論

目前HIV感染一般仍以血清或血漿中檢測(cè)到HIV特異性抗體為診斷依據(jù)[15]。而化學(xué)發(fā)光法與ELISA相比，對(duì)于抗體效價(jià)較低的弱陽(yáng)性血清樣本具有明顯優(yōu)勢(shì)，有利于早期發(fā)現(xiàn)HIV感染[16]。本研究按照納入與排除標(biāo)準(zhǔn)對(duì)相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行系統(tǒng)性分析與評(píng)價(jià)，為其臨床應(yīng)用提供循證醫(yī)學(xué)依據(jù) 。

本研究共納入8個(gè)相關(guān)研究，根據(jù)QUADAS-2工具進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)，結(jié)果表明：在偏倚風(fēng)險(xiǎn)方面，有3個(gè)研究[8,11,13]存在偏倚風(fēng)險(xiǎn)的可能性較低，其余5個(gè)研究[7,9-10，12,14]均存在部分未知偏倚風(fēng)險(xiǎn)；在臨床適用性方面，有3個(gè)研究[9,12,14]存在未知或較高風(fēng)險(xiǎn)?？傮w來(lái)說(shuō)，本研究納入的文獻(xiàn)質(zhì)量中等，今后需要更多地開展一些設(shè)計(jì)嚴(yán)謹(jǐn)、大樣本量的相關(guān)研究，以獲得可信度高的循證醫(yī)學(xué)證據(jù)。

由于納入研究之間存在非閾值效應(yīng)引起的異質(zhì)性，采用隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，結(jié)果顯示，化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)HIV抗體的敏感度為98%～100%，合并敏感度為100%，特異度為96%～100%，合并特異度為100%，表明該方法具有較好的臨床應(yīng)用價(jià)值。合并陽(yáng)性似然比為237.79，合并陰性似然比為0.00，合并DOR為48 911.05，表明該診斷試驗(yàn)具有很高的診斷效力。ROC的AUC為0.999 4，說(shuō)明化學(xué)發(fā)光法對(duì)HIV抗體檢測(cè)的準(zhǔn)確性很高。

為探討非閾值效應(yīng)引起的異質(zhì)性來(lái)源，本研究以納入標(biāo)本量和診斷金標(biāo)準(zhǔn)對(duì)不同亞組進(jìn)行分析，結(jié)果顯示，研究的標(biāo)本量小于或等于3 000和標(biāo)本量大于3 000的合并敏感度分別為99%和100%，合并特異度分別為99%和100%，I2分別為29.5%和5.0%，與總的I2(84.8%)相比，異質(zhì)性均有明顯的下降；而以診斷金標(biāo)準(zhǔn)的不同分亞組進(jìn)行分析，結(jié)果顯示異質(zhì)性仍較高，提示納入研究的標(biāo)本量不同可能為引起異質(zhì)性的來(lái)源之一。

本次Meta分析仍存在以下不足之處：(1)僅檢索中、英文已正式發(fā)表的文獻(xiàn)，存在語(yǔ)種偏倚的可能；(2)納入的研究數(shù)量較少，且部分研究的質(zhì)量不高，不排除假陽(yáng)性結(jié)果的可能；(3)在選擇研究對(duì)象時(shí)，部分研究?jī)H選取了HIV高發(fā)人群，存在選擇性偏倚；(4)部分研究未明確說(shuō)明檢測(cè)時(shí)是否使用了盲法，存在測(cè)量偏倚的可能。

綜上所述，化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)HIV抗體具有很高的靈敏度和特異度，同時(shí)也具有自動(dòng)化及高通量的優(yōu)勢(shì)，且檢測(cè)快速，非常適合急診篩查。但其作為初篩試驗(yàn)，仍存在假陽(yáng)性的可能，因此，對(duì)每一位初篩陽(yáng)性的被檢者，應(yīng)結(jié)合臨床資料及確認(rèn)試驗(yàn)結(jié)果綜合判斷，必要時(shí)應(yīng)定期復(fù)檢，以便最大限度地預(yù)防艾滋病的傳播。

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Valueofchemiluminescenceassayfordetectinghumanimmunodeficiencyvirusantibodies:aMeta-analysis

ZhuYousen,ZengYanhua,ZhangZhaoxia△

(DepartmentofClinicalLaboratory,FirstAffiliatedHospitalofXinjiangMedicalUniversity,Urumqi,Xinjiang830054,China)

ObjectiveTo systematically evaluate the value of chemiluminescence assay for detecting human immunodeficiency virus(HIV) antibodies as a HIV preliminary screening method.MethodsThe Chinese and English studies on chemiluminescence assay for detecting HIV antibodies published by the databases of WanFang,VIP,CNKI,CBM,Pubmed and Web of Science were collected by computer retrieval and manual retrieval.The retrieval time limit was from the database establish to November 2016.Two reviewers independently screened the literature,extracted the data and assessed the methodological quality of included studies.Then the meta-analysis was performed by using Meta-disc1.4 and Stata12.0 software.ResultsA total of 8 studies involving 26 168 patients were included.The meta-analysis results showed that the pooled sensitivity of chemiluminescence assay for detecting HIV antibodies was 100%(95%CI：1.00-1.00),the pooled specificity was 100%(95%CI：0.99-1.00),the pooled positive likelihood ratio was 237.79(95%CI：80.50-702.42),the pooled negative likelihood ratio was 0.00(95%CI：0.00-0.02),the diagnostic odds ratio(OR) was 48 911.05(95%CI：8 257.50-289 711.20),and the area under the curve(AUC) was 0.999 4(SE=0.000 2).ConclusionChemiluminescence assay can serve as a HIV preliminary screening method for promotion and application in clinic.

] chemiluminescent measurements;HIV;Meta analysis;diagnostic test

朱有森(1969-)，副主任技師，本科，主要從事急診檢驗(yàn)工作與研究。△

，E-mail:285715300@qq.com。

2016年度重慶市出版專項(xiàng)資金資助項(xiàng)目

10.3969/j.issn.1671-8348.2017.36.031

R446.6

A

1671-8348(2017)36-5134-03

2017-08-12

2017-09-26)