厚葉巖白菜無性繁殖技術(shù)研究

周和達(dá)，呂秀立，黃軍華，尹麗娟，陳紹燦，余 剛

（1上海星源農(nóng)業(yè)實(shí)驗(yàn)場，上海 201708；2上海市園林科學(xué)規(guī)劃研究院，上海 200232；3上海城市困難立地綠化工程技術(shù)研究中心，上海 200232；4國家林業(yè)種質(zhì)資源平臺(tái)上海子平臺(tái)，上海 200232；5福建省寧德市林業(yè)局，福建 355100；6陜西省西安植物園，西安 710061）

厚葉巖白菜無性繁殖技術(shù)研究

周和達(dá)1，呂秀立2，3，4*，黃軍華2，尹麗娟2，陳紹燦5，余 剛6**

（1上海星源農(nóng)業(yè)實(shí)驗(yàn)場，上海 201708；2上海市園林科學(xué)規(guī)劃研究院，上海 200232；3上海城市困難立地綠化工程技術(shù)研究中心，上海 200232；4國家林業(yè)種質(zhì)資源平臺(tái)上海子平臺(tái)，上海 200232；5福建省寧德市林業(yè)局，福建 355100；6陜西省西安植物園，西安 710061）

對(duì)厚葉巖白菜一年生組培苗探索了分株苗生根和根莖扦插。結(jié)果表明：一年生組培苗的分株倍數(shù)可達(dá)5；用0.2 mg/L IBA浸泡分株苗基部20 s，生根率可達(dá)100%；帶頂芽或腋芽的根莖進(jìn)行扦插，修切長為4 cm時(shí)成活率可達(dá)90%；在珍珠巖∶草炭土∶腐殖質(zhì)＝2∶1∶1的混合基質(zhì)中，培育6個(gè)月即可成為商品苗。

厚葉巖白菜；根莖；扦插；分株；無性繁殖

厚葉巖白菜［Bergenia crassifolia（L.）Fritsch］為虎耳草科巖白菜屬多年生常綠草本，是同屬植物中形體較大種類，國內(nèi)野生種僅見分布于新疆阿爾泰山海拔2 000 m以上灌木叢下的巖石縫隙中，極早春開花，葉片在冬季呈紫紅色，花葉俱美，觀賞價(jià)值高［1］。全草含有巖白菜素，藥材含量比較高，為治療呼吸系統(tǒng)疾病的特效藥［2-4］。自然結(jié)實(shí)率極低，實(shí)生苗很難在惡劣的環(huán)境下存活［5］。為保護(hù)和開發(fā)該野生資源，國內(nèi)已有多家研究機(jī)構(gòu)開展了厚葉巖白菜的離體培養(yǎng)研究［6-8］，課題組于2012年建立了離體快繁技術(shù)體系，率先在國內(nèi)實(shí)現(xiàn)了厚葉巖白菜的規(guī)?；a(chǎn)，優(yōu)質(zhì)種苗已在新疆、河南、福建、浙江等地應(yīng)用［9］。

近幾年試劑、基質(zhì)等材料費(fèi)和人工費(fèi)持續(xù)高漲，組培苗價(jià)格較高，阻礙了后期的大面積推廣。為節(jié)約生產(chǎn)成本，又能為需求各方提供優(yōu)質(zhì)種苗，課題組就厚葉巖白菜組培苗進(jìn)行了系統(tǒng)栽培［10］，統(tǒng)計(jì)一年生組培苗的分株苗數(shù)，探索分株苗培養(yǎng)生根和根莖扦插兩種無性繁殖方式，使大面積人工栽培成為可能。本文報(bào)道階段研究結(jié)果。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)點(diǎn)氣候及土壤基本情況

試驗(yàn)點(diǎn)地處福建省寧德市蕉城區(qū)西北部山區(qū)，年平均氣溫13.8℃，全年≥10℃有效積溫4 110℃，30℃≤氣溫≤35℃的天數(shù)為22 d。5—6月為梅雨季，占全年雨量的28.6%；7月份雨量減少；8—9月份臺(tái)風(fēng)，降雨量占33%。試驗(yàn)地集中連片，土壤主要為灰黃泥土，有機(jī)質(zhì)含量1.75%—2.18%，全N含量0.11%—0.14%，速效P含量8.3 mg/kg，速效K含量95 mg/kg，肥力狀況中等。土壤pH 5.5—6.2，中性偏酸。

一試驗(yàn)點(diǎn)位于蕉城區(qū)虎貝鎮(zhèn)新厝村，該試驗(yàn)點(diǎn)海拔820 m，采用地膜覆蓋，株間距10 cm，溫室種植方式，種植一年后，種苗成活率95%（圖1-A—B）。

另一試驗(yàn)點(diǎn)位于蕉城區(qū)石后鄉(xiāng)小嶺村，該處海拔450 m，采用露天種植方式，當(dāng)?shù)卦练N植，土壤沒有改良，種植一年后，成活率達(dá)90%（圖1-C）。

1.2 試驗(yàn)材料

兩處試驗(yàn)點(diǎn)，分別隨機(jī)選取5處，每處挖取10棵（圖1-D），統(tǒng)計(jì)分株苗數(shù)。分別統(tǒng)計(jì)了全部分株苗數(shù)及基部至葉片最高點(diǎn)垂直距離超過5 cm的分株苗數(shù)。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.3.1 梯度設(shè)計(jì)

選取高度超過5 cm的分株苗進(jìn)行生根培養(yǎng)，保留1 cm的基部并修切平整。分別采用NAA和IBA處理，浸泡濃度設(shè) 0.05 mg/L、0.1 mg/L、0.2 mg/L、0.5 mg/L、1.0 mg/L 5種；浸泡時(shí)間設(shè) 1 s、5 s、10 s、15 s、20 s、30 s 6種。

高度低于5 cm的芽苗，保留于原根莖上，進(jìn)行扦插。根莖修切長度設(shè)1 cm、2 cm、3 cm、4 cm、5 cm、6 cm 6種；扦插時(shí)間設(shè)1—12月不同月份。

1.3.2 培養(yǎng)條件

分株苗生根培養(yǎng)和根莖扦插培養(yǎng)時(shí)，都在溫室里進(jìn)行，操作后澆透水，然后用塑料薄膜搭拱棚封閉保濕，適時(shí)加蓋草簾或遮陽網(wǎng)遮陰降溫，保持光照度在2 500 lx左右，12 h光照時(shí)間，棚內(nèi)溫度為（25±2）℃。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)時(shí)，每種處理調(diào)查20個(gè)，除特別說明外，每種處理重復(fù)3次。統(tǒng)計(jì)總分株苗數(shù)、5 cm高分株苗數(shù)、分株苗生根率、根莖扦插成活率。

根莖扦插成活率＝成活數(shù)/扦插苗數(shù)，分株苗生根率＝生根株數(shù)/分株苗數(shù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 分株培養(yǎng)

2.1.1 分株情況

種植在820 m處溫室地栽與種植在450 m處全光照地栽，兩種情況下一年生組培苗總分株倍數(shù)分別為4.98、5.10，差異不顯著；但苗高超過5 cm的分株倍數(shù)分別為2.94、3.26，差異顯著（表1）。450 m處種植的分株苗比820 m處數(shù)量略多，這與海拔較低溫度稍高，長勢略強(qiáng)有關(guān)（圖1-E）。

表1 不同種植地點(diǎn)種苗分株情況Table 1 Plant division of p lantlets on different p lanting sites

2.1.2 分株苗生根培養(yǎng)

不同激素及其不同濃度對(duì)分株苗生根的影響見表2。不管是采用NAA還是IBA處理，隨著激素濃度的升高，生根率隨之提高，當(dāng)濃度為0.2 mg/L時(shí)，生根率達(dá)到最高，分別為65%、75%；之后生長素濃度升高，反而對(duì)生根有抑制效果，生根率下降。篩選IBA 0.2 mg/L為最佳處理濃度，與其他處理比較，差異顯著。

表2 不同生長激素及其濃度對(duì)分株苗生根的影響Table 2 Effects of grow th hormones and their concentrations on rooting of offshoot seed lings

采用0.2 mg/L IBA浸泡分株苗基部，觀察其在不同浸泡時(shí)間下的生根情況，結(jié)果顯示浸泡時(shí)間對(duì)生根率影響顯著。短時(shí)速浸，生根率不高；隨著浸泡時(shí)間的延長，生根率快速提高；浸泡時(shí)間為20 s時(shí)，生根率達(dá)最高100%（表3、圖1-F）。

表3 不同浸泡時(shí)間對(duì)分株苗生根的影響Table 3 Effect of soaking time on rooting of offshoot seed lings

綜合激素種類、濃度及浸泡時(shí)間，確定0.2 mg/L IBA浸泡20 s為最佳處理方式。

2.2 根莖扦插

將根莖修切為不同長度，觀察根莖不同長度對(duì)扦插成活率的影響。結(jié)果顯示，當(dāng)根莖長度為1 cm時(shí)，扦插成活率僅為15%；而當(dāng)根莖長度達(dá)到4 cm及以上時(shí)，扦插成活率可以達(dá)到100%（圖1G—I）。帶頂芽或者腋芽的根莖扦插時(shí)取4 cm即可（表4）。

表4 根莖不同長度對(duì)扦插成活率的影響Table 4 Effect of rhizome length on survival rate of cuttings

取4 cm根莖于不同月份扦插，觀察扦插季節(jié)對(duì)成活率的影響。結(jié)果顯示：3—7月、9—11月，扦插成活率在90%以上，與其他月份比較，差異顯著；8月份成活率略低為85%；而在12月至明年的2月期間，成活率降低到55%（表5）。

2.3 栽培管理

基質(zhì)為珍珠巖∶草炭土∶腐殖質(zhì)＝2∶1∶1的混合基質(zhì)，種植前需澆透。緩苗前需補(bǔ)水，以當(dāng)天蒸發(fā)完為佳；緩苗后采用干透澆透的模式，并適當(dāng)延長光照。肥料按寶力豐∶銨鈣鎂＝7∶3的比例混合，每月噴施兩次肥水，EC值控制在250—500μS/cm。每周施一遍殺菌藥，及時(shí)防治根蛆。養(yǎng)護(hù)至半年時(shí)，分株苗和根莖扦插苗根部形成土球，高度達(dá)10 cm，可作為成品苗發(fā)售。

表5 不同月份扦插對(duì)成活率的影響Table 5 Effect of cutting time on survival rate of cuttings

圖1 厚葉巖白菜無性繁殖技術(shù)Fig.1 Asexual propagation of Bergenia crassifolia（L.）Fritsch

3 結(jié)論與討論

對(duì)比寒冷干旱、生長期短、高海拔的原產(chǎn)地，厚葉巖白菜一棵母株在兩年內(nèi)僅能產(chǎn)生一株分株苗，目前選擇的種植基地，除了生長量提高外，分株苗數(shù)也有所增加，這與海拔降低溫度提高，植物生長代謝加快，長勢旺盛有關(guān)。

根莖扦插時(shí)，隨著保留根莖長度的增加，成活率隨之提高，當(dāng)長度為4 cm時(shí)，成活率可達(dá)100%，這與根莖積累營養(yǎng)多少緊密相關(guān)，為了降低種植成本提高藥材產(chǎn)量，根莖扦插時(shí)取4 cm即可。季節(jié)不同，根莖扦插成活率也有差異，8月份雨水比較多，根莖出現(xiàn)腐爛現(xiàn)象，影響成活率；而在冬季成活率更低，這與溫度低時(shí)根莖發(fā)新根慢有直接關(guān)系。

巖白菜分株或根莖扦插成本低，管理也較為簡單，由此形成了通過組培來生產(chǎn)前期母本苗，后期通過分株或根莖扦插繁殖的生產(chǎn)鏈條，為大規(guī)模種植開發(fā)提供了保障。

［1］仲江兵，托爾遜阿衣，黃艷.厚葉巖白菜的引種栽培試驗(yàn)［J］.新疆林業(yè)，2007（5）：33-35.

［2］王繼良，何瑾，鄒澄，等.巖白菜素的研究進(jìn)展［J］.中國民族民間醫(yī)藥雜志，2006，83（6）：321-324.

［3］王剛，麻兵繼.巖白菜素的研究概況［J］.安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2002，21（6）：59-61.

［4］劉海周，孫海林，李文軍，等.巖白菜中巖白菜素的純化及提取工藝研究［J］.云南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，34（2）：22-25.

［5］楊麗云，陳翠，湯王外，等.藥用植物巖白菜種子發(fā)芽特性研究［J］.種子，2010，29（12）：81-86.

［6］劉敏，郝秀英，徐琴，等.野生花卉厚葉巖白菜組織培養(yǎng)及再生體系的建立［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，37（8）：3455-3456，3462.

［7］彭紅衛(wèi)，趙剛，權(quán)秋梅，等.巖白菜組培中POD活性的研究［J］.西華師范大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2011，32（3）：227-230.

［8］朱軍，李曉瑾，賈曉光，等.新疆珍稀藥用植物厚葉巖白菜離體快繁研究［J］.時(shí)珍國醫(yī)國藥，2012，23（9）：2308-2309.

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［10］王景先.厚葉巖白菜引種栽培試驗(yàn)初報(bào)［J］.中國園藝文摘，2014（9）：25-26.

Research on asexual propagation of Bergenia crassifolia（L.）Fritsch

ZHOU He-da1，LYU Xiu-li2，3，4*，HUANG Jun-hua2，YIN Li-juan2，CHEN Shao-can5，YU Gang6**
（1Shanghai Xingyuan Experimental Farm，Shanghai201708，China；2Shanghai Academy of Landscape Architecture and Planning，Shanghai200232，China；3Shanghai Engineering Research Center of Landscaping on Challenging Urban Sites，Shanghai200232，China；4National Forest Genetic Resources Platform at Shanghai，Shanghai200232，China；5Forestry Bureau of Ningde City，F(xiàn)ujian355100，China；6Xi’an Botanical Garden of Shaanxi Province，Xi’an710061，China）

One-year-old tissue-cultured plantlets of Bergenia crassifolia were cultured for rooting，and with their rhizomes an experiment of cutting propagation was carried out.The results showed that the one-year-old tissue-cultured plantlets could be up to 5-fold in plant division；When the offshoots’basal parts were soaked with 0.2 mg/L IBA for 20 seconds，their rooting rate could reach 100%；When the cut rhizome bore terminal buds or axillary buds and was 4 cm long，the cuttings’survival rate could reach 90%；The regenerated plants could become commodity seedlings after cultured for six months on the substrate mixed with pearlite，turfy soil and humus at a ratio of 2∶1∶1.

Bergenia crassifolia（L.）Fritsch；Rhizome；Cutting；Plant division；Asexual propagation

2016-12-14

上海市種業(yè)發(fā)展項(xiàng)目［滬農(nóng)科種字（2015）第8號(hào)］；陜西省科學(xué)院基礎(chǔ)應(yīng)用與研究（2015k-13）

周和達(dá)（1966—），男，大專，農(nóng)藝師，研究方向：農(nóng)業(yè)生產(chǎn)。E-mail：1030142407＠qq.com

*并列第一作者：呂秀立（1980—），女，碩士，綠化林業(yè)高級(jí)工程師，研究方向：林木遺傳育種。E-mail：tkdyun＠163.com

**通信作者：余剛（1982—），男，碩士，助理研究員，主要從事植物生理學(xué)研究。E-mail：wolves1937＠163.com

S682.19

A

1000-3924（2017）06-073-05

程智強(qiáng)）