血清IL-10檢測(cè)在結(jié)直腸癌臨床診斷及復(fù)發(fā)評(píng)估中的應(yīng)用

張秋環(huán) 李文靖 劉剛 郝亮

血清IL-10檢測(cè)在結(jié)直腸癌臨床診斷及復(fù)發(fā)評(píng)估中的應(yīng)用

張秋環(huán) 李文靖 劉剛 郝亮

目的 探討血清白細(xì)胞介素-10（interleukin-10，IL-10）檢測(cè)在結(jié)直腸癌臨床診斷及復(fù)發(fā)評(píng)估中的價(jià)值。方法 招募本院186例行結(jié)直腸癌切除手術(shù)患者，并同步招募60例健康對(duì)照人群。收集所有患者術(shù)前及術(shù)后1年血清，采用ELSIA方法對(duì)IL-10水平進(jìn)行檢測(cè)。采用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法對(duì)IL-10在患者臨床病理特征及腫瘤復(fù)發(fā)方面的評(píng)估作用進(jìn)行研究。結(jié)果 患者血清IL-10水平高于健康對(duì)照人群（P＜0．001）；患者臨床病理特征對(duì)術(shù)前、術(shù)后IL-10水平無明顯影響（P＞0．05）；術(shù)后患者IL-10水平較術(shù)前明顯降低，但仍高于健康對(duì)照人群（P＜0．001）；腫瘤復(fù)發(fā)患者IL-10水平高于未復(fù)發(fā)患者，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）。結(jié)論 動(dòng)態(tài)檢測(cè)血清IL-10水平，對(duì)結(jié)直腸癌患者的診斷及評(píng)價(jià)復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)起到一定的指導(dǎo)作用。

結(jié)直腸癌；白細(xì)胞介素-10；診斷；復(fù)發(fā)

結(jié)直腸癌是一種常見的消化道惡性腫瘤。據(jù)國(guó)家癌癥中心最新報(bào)道，2017年我國(guó)結(jié)直腸癌發(fā)病率和死亡率均列居惡性腫瘤發(fā)生的前5位。隨著生活飲食習(xí)慣的改變，近幾年結(jié)直腸癌的發(fā)生趨向年輕化[1-2]。腫瘤的發(fā)生發(fā)展與機(jī)體免疫狀態(tài)相關(guān)，白細(xì)胞介素-10（interleukin-10，IL-10）作為一種抗炎性細(xì)胞因子，在免疫調(diào)控方面起到了一定作用。已有研究報(bào)道結(jié)直腸癌患者癌組織、癌旁組織及血清中IL-10的變化[3-4]。但有關(guān)IL-10水平在不同腫瘤部位、不同Dukes分期、術(shù)后復(fù)發(fā)及未復(fù)發(fā)患者中的研究較少。本研究比較了IL-10水平在不同臨床病理特征的結(jié)直腸癌患者手術(shù)前后變化，并與健康人群相關(guān)指標(biāo)做比較，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年6月—2016年6月招募于本院行結(jié)直腸癌切除手術(shù)患者186例。其中，男108例，女78例。年齡為54～72歲，平均年齡為（62.12±5.58）歲，其中，≥60歲115例，＜60歲71例。經(jīng)手術(shù)及結(jié)腸鏡病理檢查證實(shí)，結(jié)腸癌患者81例，直腸癌患者105例。術(shù)后及病理檢查證實(shí)，患者腫瘤直徑平均為（5.01±1.17）cm，其中腫瘤直徑≥5 cm者102例，＜5 cm者84例。Dukes分期：A期50例，B期30例，C期60例，D期46例。同期，招募60例相同年齡范圍的健康人群作為對(duì)照組。其中，男38例，女22例，平均年齡為（61.85±4.98）歲。兩組患者在性別（χ2=0.522，P=0.470）、年齡（t=0.262，P=0.794）對(duì)比，差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

本研究排除已接受過術(shù)前放化療及免疫治療、存在嚴(yán)重心腦血管疾病、肝腎功能異常、妊娠期或哺乳期患者入組。本研究所有受試者均簽署知情同意書，并通過南寧市第一人民醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

所有受試者于手術(shù)前采集空腹靜脈血3 ml并置于無菌無抗凝管中，室溫靜置30 min后，3 000 r/min離心20 min，分離血清，并置于-80℃冰箱保存待測(cè)。所有患者隨訪1年，并于1年后入院復(fù)查并抽取同體積靜脈血。收集的血清采用Human IL-10試劑盒（杭州聯(lián)科生物技術(shù)有限公司）進(jìn)行IL-10水平檢測(cè)，操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察IL-10水平在不同性別、年齡、腫瘤部位、腫瘤直徑、Dukes分期、術(shù)前術(shù)后及復(fù)發(fā)、未復(fù)發(fā)組中的水平，并與對(duì)照組比較。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以（均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差）表示，兩組間比較用配對(duì)樣本t檢驗(yàn)，多組間比較采用方差分析；計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 患者組與對(duì)照組IL-10水平比較

患者組術(shù)前IL-10水平為（133.76±15.28）pg/ml，對(duì)照組IL-10水平為（67.66±8.06）pg/ml，兩組對(duì)比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）。

2.2 患者組在不同性別、年齡、腫瘤部位、腫瘤直徑、Dukes分期IL-10水平比較

患者組術(shù)前及術(shù)后1年IL-10水平在性別、年齡分層、腫瘤部位、腫瘤直徑、Dukes分期對(duì)比，差異均不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

2.3 患者組IL-10水平在術(shù)前、術(shù)后1年及復(fù)發(fā)、未復(fù)發(fā)組間的比較

隨訪患者1年，無失訪病例。其中，復(fù)發(fā)患者15例，包括男性7例，女性8例，結(jié)腸癌復(fù)發(fā)7例，直腸癌復(fù)發(fā)8例。治療后隨訪1年患者IL-10水平為（75.67±7.97）pg/ml，低于治療前IL-10水平（133.76±15.28）pg/ml，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=15.993，P＜0.001），但仍高于對(duì)照組IL-10水平（67.66±8.06）pg/ml，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=5.461，P＜0.001）。復(fù)發(fā)患者IL-10水平為（144.79±15.19）pg/ml，未復(fù)發(fā)患者IL-10水平為（71.89±9.37）pg/ml，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=27.253，P＜0.001）。

3 討論

近幾年，結(jié)直腸癌成為發(fā)病率上升較快的消化道惡性腫瘤之一。臨床醫(yī)生一直致力于腫瘤的治療。研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程與宿主的免疫防御系統(tǒng)呈正相關(guān)性[5]。細(xì)胞免疫因子介導(dǎo)了免疫防御反應(yīng)，對(duì)腫瘤發(fā)生發(fā)展過程產(chǎn)生一定的影響，其既能夠直接作用于腫瘤細(xì)胞阻滯腫瘤生長(zhǎng)，又能夠間接的影響腫瘤侵襲所需的營(yíng)養(yǎng)系統(tǒng)[6]。

IL-10是一類重要的免疫負(fù)向調(diào)節(jié)因子，在胃癌、乳腺癌、黑色素瘤等多種惡性腫瘤細(xì)胞中均過量表達(dá)[7]。IL-10主要由Th2細(xì)胞產(chǎn)生，當(dāng)機(jī)體產(chǎn)生腫瘤時(shí)，Th2細(xì)胞亞群升高造成了IL-10的異常增加[8]。IL-10水平過量進(jìn)而擾亂機(jī)體微環(huán)境，影響宿主免疫功能，導(dǎo)致免疫力降低及腫瘤發(fā)生。本研究發(fā)現(xiàn)，結(jié)直腸癌患者IL-10水平高于健康對(duì)照人群，這提示結(jié)直腸癌患者的免疫力相對(duì)低下，易發(fā)生免疫抑制。IL-10檢測(cè)可以作為結(jié)直腸癌篩查的指標(biāo)之一?；颊?年后復(fù)查IL-10水平相比手術(shù)前明顯下降，這指示手術(shù)前結(jié)直腸癌患者機(jī)體免疫抑制嚴(yán)重，Th2細(xì)胞通過分泌IL-10擾亂機(jī)體對(duì)免疫系統(tǒng)的監(jiān)視。手術(shù)后患者腫瘤消失，機(jī)體負(fù)荷降低，免疫抑制得到緩解，從而使得Th1/Th2平衡轉(zhuǎn)換傾向Th1，使得IL-10分泌減少。因此，IL-10能夠作為結(jié)直腸癌的一個(gè)預(yù)后指標(biāo)。但是，盡管術(shù)后患者IL-10下降明顯，但仍然高于健康人群對(duì)照組。這指示患者組體內(nèi)仍存在殘余炎癥反應(yīng)，免疫抑制的緩解是一個(gè)長(zhǎng)期的過程。呂坤等人報(bào)道[9]，結(jié)直腸癌IV期患者血清IL-10水平高于其他分期患者。本研究發(fā)現(xiàn)，術(shù)后IL-10水平在Dukes C和D期患者下降低于A和B期患者，但差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），這可能與患者腫瘤部位、直徑及患者的體質(zhì)相關(guān)。

表1 患者臨床病理特征及術(shù)前、術(shù)后血清IL-10水平比較（±s）

表1 患者臨床病理特征及術(shù)前、術(shù)后血清IL-10水平比較（±s）

性別男 136.38±12.49 0.220 0.826 77.72±16.12 -1.311 0.194女 135.97±11.71 82.10±23.49年齡＜60歲 132.69±19.43 0.032 0.975 79.60±22.71 0.100 0.921≥60歲 132.77±11.54 79.94±17.19腫瘤部位直腸癌 136.80±11.57 1.581 0.118 80.17±18.08 0.088 0.930結(jié)腸癌 133.70±12.30 79.88±22.08腫瘤直徑＜5 cm 133.97±12.72 0.373 0.710 77.99±17.05 -0.833 0.407≥5 cm 132.99±18.08 80.53±20.76 Dukes分期A期 135.57±12.82 0.703 0.511 76.43±14.79 2.204 0.089 B期 135.26±11.03 75.29±7.68 C期 133.27±20.10 84.33±27.14 D期 131.44±12.70 83.08±22.05

綜上所述，IL-10是隨著腫瘤進(jìn)展、機(jī)體免疫程度而發(fā)生變化。結(jié)直腸癌患者血清IL-10水平的動(dòng)態(tài)變化，對(duì)結(jié)直腸癌患者的診斷及評(píng)價(jià)復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)起到一定的指導(dǎo)作用，具有重要的臨床參考價(jià)值。

[1] 中華醫(yī)學(xué)會(huì)消化內(nèi)鏡學(xué)分會(huì)消化系旱癌內(nèi)鏡診斷與治療協(xié)，中華醫(yī)學(xué)會(huì)消化病學(xué)分會(huì)消化道腫瘤協(xié)作組，中華醫(yī)學(xué)會(huì)消化內(nèi)鏡學(xué)分會(huì)腸道學(xué)組，等． 中國(guó)早期結(jié)直腸癌及癌前病變篩查與診治共識(shí)意見（2014年11月·重慶）[J]． 中華內(nèi)科雜志，2015，54（4）：375-389．

[2] 鄭樹，張?zhí)K展，黃彥欽． 結(jié)直腸癌研究30年回顧和現(xiàn)狀[J]． 實(shí)用腫瘤雜志，2016，31（1）：2-5．

[3] 鄧菲丹，羅建業(yè)． 結(jié)腸癌組織IL-10和IFN-γ mRNA的表達(dá)及其臨床意義 [J]． 中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2015，12（14）：60-63．

[4] 袁綬禮． 腹腔鏡結(jié)直腸癌根治術(shù)對(duì)患者血清CRP、IL-6、IL-10表達(dá)水平的影響[J]． 實(shí)用臨床醫(yī)藥雜志，2014，18（2）：47-48．

[5] 伍寧波，孫宏翔，楊曉東，等． MAPK信號(hào)通路與腸道疾病靶向應(yīng)用前景[J]．中國(guó)免疫學(xué)雜志，2016，32（3）：299-306．

[6] 陳宣辰，程軍． 結(jié)直腸癌相關(guān)炎性因子的研究進(jìn)展[J]．中國(guó)腫瘤生物治療雜志，2012，19（1）：103-106．

[7] 沈雁，鐘繼紅，徐磊，等． 鹽酸小檗堿對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎小鼠結(jié)腸組織TNF-α、IL-1β和IL-10表達(dá)的影響[J]． 中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)，2017（8）：1094-1098．

[8] 侯敏，王凱國(guó)，周乃寶，等． 氯胺酮對(duì)結(jié)直腸癌患者Th1和Th2細(xì)胞影響的研究[J]． 中華腫瘤防治雜志，2016，23（5）：292-296．

[9] 呂坤，張鶯鶯． 結(jié)直腸癌患者血清IL-23和IL-10水平的檢測(cè)及其意義 [J]． 中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2011，15（7）：1076-1078．

Application of Serum IL-10 in Clinical Diagnosis and Recurrence of Colorectal Cancer

ZHANG Qiuhuan LI Wenjing LIU Gang HAO Liang
Gastrointestinal Surgery Department, The First People's Hospital of Nanning City, Nanning Guangxi 530021, China

Objective To evaluate the value of serum interleukin-10(IL-10) in the diagnosis and recurrence of colorectal cancer. Methods A total of 186 patients underwent colorectal cancer resection were recruited and 60 healthy controls were recruited. The serum of all patients was collected before and one year after operation. The level of IL-10 was detected by ELSIA method. Statistical analysis was used to evaluate IL-10 in patients' clinical pathological feature and tumor recurrence. Results The level of IL-10 in patients was significantly higher than that in healthy controls (P＜ 0.001). The clinical pathological feature of patients had no significant effect on IL-10 level before and after operation (P ＞ 0.05).The level of IL-10 in patients decreased obviously, which was still higher than that in healthy controls (P ＜ 0.001). The level of IL-10 in patients with recurrent tumor was significantly higher than that in patients without recurrence, and the difference was statistically significant (P ＜ 0.05).Conclusion Dynamic detection of serum IL-10 levels plays a guiding role for the diagnosis in colorectal cancer and risk evaluation.

colorectal cancer; interleukin-10; diagnosis; recurrent

R735

A

1674-9308（2017）29-0076-03

10．3969/j．issn．1674-9308．2017．29．040

南寧市科學(xué)研究與技術(shù)開發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目合同（20153102）

南寧市第一人民醫(yī)院胃腸外科，廣西 南寧 530021

李文靖