不同水平N-氨甲酰谷氨酸對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能及血清生化指標(biāo)的影響

楊 泰， 王 慧， 寧 維， 楊志輝， 問(wèn) 鑫， 田科雄*

（1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，湖南長(zhǎng)沙 410128；2.路凱（湖南）科技有限公司，湖南長(zhǎng)沙 410128）

科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究

不同水平N-氨甲酰谷氨酸對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能及血清生化指標(biāo)的影響

楊 泰1， 王 慧1， 寧 維1， 楊志輝2， 問(wèn) 鑫1， 田科雄1*

（1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，湖南長(zhǎng)沙 410128；2.路凱（湖南）科技有限公司，湖南長(zhǎng)沙 410128）

為研究不同水平N-氨甲酰谷氨酸（NCG）對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、腹瀉率以及血清生化指標(biāo)的影響，本試驗(yàn)選取品種相同、胎次和體重相近的21日齡（杜×長(zhǎng)×大）三元健康仔豬288頭，隨機(jī)分成6組，每組6個(gè)重復(fù)（公母各半），每個(gè)重復(fù) 8 頭仔豬。 各處理組日糧中分別添加 0、0.02%（Ⅰ組）、0.04%（Ⅱ組）、0.06%（Ⅲ組）、0.08%（Ⅳ組）和 0.10%（Ⅴ組）的NCG。結(jié)果顯示：（1）1～18 d，Ⅴ組的日采食量較對(duì)照組提高了14.8%（P＜0.05）；各試驗(yàn)組日增重和料重比較對(duì)照組差異不顯著（P＞0.05）。19～28 d，除Ⅳ組外，其余試驗(yàn)組日采食量均顯著高于對(duì)照組，分別提高10.4%（I組）、13.0%（Ⅱ組）、7.6%（Ⅲ組）、9.1%（Ⅴ組）（P ＜ 0.05）；I組、Ⅲ組日增重相比對(duì)照組提高 20.8%和 19.0%（P ＜ 0.05）；同時(shí)，Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組的料肉比與對(duì)照組相比分別降低12.7%、7.1%、8.1%和10.2%（P＜0.05）。試驗(yàn)全期，日糧中添加0.02%、0.04%、0.10%NCG后，日采食量相比對(duì)照組分別提高了12.2%、12.4%和12.1%（P＜0.05）；Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ組的日增重分別比對(duì)照組提高13.0%、14.6%、5.7%和 15.5%（P ＜ 0.05）；日糧中添加 0.02% ～ 0.10%NCG 組料重比均顯著降低（P ＜ 0.05）。 （2）試驗(yàn)組腹瀉率與對(duì)照組相比差異不顯著（P＞0.05），但有降低的趨勢(shì)。（3）各試驗(yàn)組血液常規(guī)和血清生化指標(biāo)較對(duì)照組相比雖有一定變化，但均在正常生理范圍。由此可見(jiàn)，NCG對(duì)斷奶仔豬健康無(wú)負(fù)面影響，且能增加仔豬日采食量與日增重，降低料重比，提高生長(zhǎng)性能，降低腹瀉。

N-氨甲酰谷氨酸；斷奶仔豬；生長(zhǎng)性能；血清生化指標(biāo)

This study was conducted to investigate the effect of N-carbamoylglutamate （NCG）on growth performance，diarrhea and serum biochemical indices of weaned piglets.A total of 288 （Duroc×Landrace×Yorkshire） 21 day-old crossbred healthy piglets with same breed，similar parity and weight were selected.They were randomly divided into 6 groups，6 repeats each group （half number males and half number females），8 piglets each repeat.The each experimental group were added 0，0.02%（Group Ⅰ），0.04%（Group Ⅱ），0.06%（Group Ⅲ），0.08%（Group Ⅳ）and 0.10%（Group Ⅴ）NCG.The results showed that：（1）After 1 ～ 18 d the average daily feed intake（ADFI） of group Ⅴ increased by 14.8%compared with the control group（P ＜ 0.05）；the differences in the daily gain（ADG） and feed/gain（F/G） of experimental groups were not significant（P ＞ 0.05）.After 19 ～ 28 d，except for group Ⅳ，the ADFI of the other test groups were significantly higher than the control group，respectively，increased by 10.4% （group I），13.0% （group Ⅱ），7.6% （group Ⅲ），9.1% （group Ⅳ）（P ＜ 0.05）；The ADG of groupⅠ and group Ⅲ were 20.8%and 19.0%higher than that of control group（P ＜ 0.05）；except 0.10%group，the F/G of experimental groups were significantly reduced （P ＜ 0.05）.In whole trial period，the diet added 0.02%，0.04%，0.10%NCG significantly improved the ADFI of piglets，increased by 12.2%，12.4%and 12.1%（P ＜ 0.05）；The ADG of group Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ andⅤ increased by 13.0%，14.6%，5.7%and 15.5%，respectively （P＜0.05），the F/G in 0.02% ～0.10%NCG groups were significantly decreased （P ＜ 0.05）.（2） Compared with control group，the differences in the diarrhea rate of experimental groups were not significant （P ＞ 0.05），but it had a tendency to reduce.（3）The routine examination in blood and serum biochemical indexes of each experimental group were different from that of the control group，but they were in the normal physiological range.In conclnsion，NCG has no negative impact to health of weaning piglets，and it could increase ADFI and ADG of piglet，reduce F/G，improve the growth performance，reduce the diarrhea.

N-carbamoylglutamate；weaned piglets；growth performance；serum biochemical indices

在養(yǎng)豬生產(chǎn)中，斷奶應(yīng)激普遍存在，其引發(fā)的“斷奶應(yīng)激綜合征”嚴(yán)重影響著仔豬的健康和生長(zhǎng)。因此，尋找一條合理的途徑來(lái)緩解應(yīng)激勢(shì)在必行。精氨酸是豬的條件性必需氨基酸，在應(yīng)激狀態(tài)下和特殊生長(zhǎng)階段為必需氨基酸 （Van等，2007）。精氨酸不僅在動(dòng)物蛋白質(zhì)合成中起著關(guān)鍵作用，還是機(jī)體內(nèi)合成一氧化氮、多胺、肌酸等生物活性物質(zhì)的前體 （孔祥峰等，2009）。Flynn（2000）和 Wu（1997）研究表明，仔豬體內(nèi)合成的精氨酸遠(yuǎn)不能滿足其生理代謝需要。精氨酸的不足嚴(yán)重影響了斷奶仔豬的生長(zhǎng)速度，是仔豬斷奶應(yīng)激的重要原因（Wu等，2004a）。N-氨甲酰谷氨酸（NCG）是N-乙酰谷氨酸（NAG）的結(jié)構(gòu)類似物，是內(nèi)源性精氨酸合成的必需輔助因子，能夠通過(guò)促進(jìn)尿素循環(huán)提高內(nèi)源精氨酸的合成 （Hall等，1958）。研究發(fā)現(xiàn)，日糧中添加NCG能提高豬（周笑犁等，2011）、雞（湯智群等，2015）、羊（張桂杰等，2015）、 鼠 （黃新球等，2011）、 牛（Chacher，2014）的生長(zhǎng)性能，提高血清游離精氨酸的含量，促進(jìn)臟器發(fā)育，改善繁殖性能等（王若丞，2016；陳麗麗，2015；陳楠，2012；馮占雨，2011）。 受精氨酸價(jià)格的制約，在日糧中添加NCG促進(jìn)精氨酸的內(nèi)源合成是一種有效的方法。本試驗(yàn)擬在通過(guò)添加不同水平的NCG，探討其對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能，腹瀉率及血清生化指標(biāo)的影響，為NCG在斷奶仔豬生產(chǎn)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 NCG（含量：98.0%）由路凱（湖南）科技有限公司生產(chǎn)提供，批號(hào)：Z20130301。

1.2 試驗(yàn)日糧 基礎(chǔ)日糧依據(jù)NRC（1998）飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行配制，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)選用平均體重為 （7.83±0.36）kg的21日齡（杜×長(zhǎng)×大）三元雜交斷奶仔豬288頭，以欄為單位隨機(jī)分為6組（對(duì)照組、試驗(yàn)組Ⅰ、試驗(yàn)組Ⅱ、試驗(yàn)組Ⅲ、試驗(yàn)組Ⅳ、試驗(yàn)組Ⅴ），每個(gè)處理組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)8頭仔豬（公母各半）。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ在基礎(chǔ)日糧中分別添加0.02%、0.04%、0.06%、0.08%和0.10%的NCG。

1.4 飼養(yǎng)管理 飼養(yǎng)試驗(yàn)在湖南佳和農(nóng)牧有限公司進(jìn)行，仔豬飼養(yǎng)于漏縫地板鐵圍欄內(nèi)。斷奶前3天用基礎(chǔ)日糧誘食，試驗(yàn)期為28 d。自由采食和自由飲水，準(zhǔn)確記錄日糧添加量，出現(xiàn)重度腹瀉或者疾病及時(shí)治療。其他飼養(yǎng)管理及免疫程序與豬場(chǎng)一致。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.5 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.5.1 生長(zhǎng)性能測(cè)定 于試驗(yàn)第1、18、28天08：00進(jìn)行空腹稱重。以重復(fù)（欄）為單位記錄飼料消耗情況，計(jì)算仔豬平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料重比（F/G）。試驗(yàn)過(guò)程中詳細(xì)記錄仔豬腹瀉情況。

腹瀉指數(shù)=腹瀉頭次/（本組供試豬總頭數(shù)×試驗(yàn)天數(shù)）。

1.5.2 血液指標(biāo)測(cè)定 試驗(yàn)第29天08：00～10：00，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)取1頭試豬實(shí)施前腔靜脈采血。約5 mL注入抗凝采血管，約10 mL注入普通采血管，靜置 30 min，3000 r/min離心 10 ～ 15 min，分離并分裝血清于1.5 mL離心管中，-20℃冰箱保存。以備血清生化指標(biāo)測(cè)定。

血常規(guī)檢驗(yàn)：抗凝血樣在采樣的當(dāng)天下午用邁瑞B(yǎng)C-2800 Vet全自動(dòng)動(dòng)物血液細(xì)胞分析儀進(jìn)行血常規(guī)檢驗(yàn)，檢驗(yàn)指標(biāo)包括：白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC）、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（RBC）、血紅蛋白（HGB）、紅細(xì)胞壓積（HCT）、血小板計(jì)數(shù)（PLT）。

血清生化指標(biāo)采用邁瑞B(yǎng)S-200全自動(dòng)血液生化測(cè)定儀檢測(cè)，采用相應(yīng)試劑盒檢測(cè)總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、尿素氮（BUN）含量，乳酸脫氫酶 （LHD）、 堿性磷酸酶 （ALP）、 谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）活性，所有試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

表2 NCG對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響

1.6 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)分析 數(shù)據(jù)用SPSS 21.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，生產(chǎn)性能數(shù)據(jù)進(jìn)行協(xié)方差分析，其余數(shù)據(jù)采用單因素方差分析和Duncan’s多重比較，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 NCG對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響 由表2可知，1～18 d試驗(yàn)階段，試驗(yàn)組Ⅴ的ADFI相較對(duì)照組提高了14.8%（P＜0.05），其他試驗(yàn)組相比于對(duì)照組有提高趨勢(shì)，但差異不顯著 （P＞0.05）；19 ～ 28 d試驗(yàn)階段，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ組ADFI顯著高于對(duì)照組 （P＜0.05），分別提高10.4%、13.0%、7.6%、9.1%；試驗(yàn)全期，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ組ADFI相比對(duì)照組顯著提高12.2%、12.4%和12.1%（P＜0.05）。1～18 d試驗(yàn)階段，各試驗(yàn)組ADG均有提高趨勢(shì)，但差異不顯著（P＞0.05）；19～28 d試驗(yàn)階段，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅲ組ADG相比對(duì)照組提高20.8%和19.0%（P＜0.05）；試驗(yàn)全期，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ組的ADG分別比對(duì)照組增加了 13.0%、14.6%、5.7%和 15.5%（P＜0.05）。1～18 d試驗(yàn)階段，各組間F/G無(wú)顯著差異 （P＞0.05）；19 ～ 28 d試驗(yàn)階段，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組的 F/G與對(duì)照組相比分別降低了12.7%、7.1%、8.1%和10.2%（P ＜ 0.05）；試驗(yàn)全期，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組的FIG與對(duì)照組相比降低了10%、8.9%、6.1%、7.8%和 11.1%（P＜0.05）。

2.2 NCG對(duì)斷奶仔豬腹瀉指數(shù)的影響 由表3可知，試驗(yàn)全期，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組腹瀉率分別較對(duì)照組降低100.00%、61.67%、51.67%、75.00%，差異均不顯著（P＞0.05），但除了試驗(yàn)Ⅴ組外，其他各試驗(yàn)組均有降低趨勢(shì)。

表3 NCG對(duì)斷奶仔豬腹瀉指數(shù)的影響%

2.3 NCG對(duì)斷奶仔豬血液常規(guī)指標(biāo)的影響 由表 4 可知， 各 處 理 組 WBC、RBC、HGB、HCT 和MCH與對(duì)照組相比無(wú)明顯變化（P＞0.05）。與對(duì)照組相比，添加量從低到高的試驗(yàn)組MCV分別提高2.8% （P ＞ 0.05）、10.4%（P ＜ 0.05）、2.2%（P ＞ 0.05）、3.9%（P ＞ 0.05）和 5.6%（P ＞ 0.05）；試豬的 PLT，只有試驗(yàn)組Ⅳ顯著低于對(duì)照組（P＜0.05），其他各試驗(yàn)組與對(duì)照組均無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

表4 NCG對(duì)斷奶仔豬血液常規(guī)指標(biāo)的影響

2.4 NCG對(duì)斷奶仔豬部分血清生化指標(biāo)的影響由表5可知，各試驗(yàn)組血清ALB、TP和BUN水平與對(duì)照組相比均無(wú)顯著差異（P＞0.05）；試驗(yàn)組Ⅲ血清ALP活性顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），其他各試驗(yàn)組與對(duì)照組均無(wú)顯著差異（P＞0.05）；試驗(yàn)組Ⅳ、Ⅴ血清LDH活性顯著高于對(duì)照組 （P＜0.05），其他試驗(yàn)組與對(duì)照組均無(wú)顯著差異 （P＞0.05）；與對(duì)照組相比，各試驗(yàn)組ALT活性無(wú)顯著差異（P＞0.05）；試驗(yàn)組V血清AST活性顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），其他各試驗(yàn)組與對(duì)照組間無(wú)顯著差異（P ＜ 0.05）。

表5 NCG對(duì)斷奶仔豬血清生化指標(biāo)的影響

3 討論

印遇龍等 （2008）研究表明，日糧中添加0.08%的NCG可顯著提高21日齡早期斷奶仔豬平均日增重和采食量，與對(duì)照組相比平均日采食量提高42.36%，平均日增重提高89.43%。每天給4、9日齡哺乳仔豬按50 mg/kg BW劑量灌服NCG兩次，直至14、17日齡，仔豬日增重分別提高61%、25%（Frank，2007；Wu，2004b）。在精氨酸合成途徑中，NAG可激活氨甲酰磷酸合成酶-Ⅰ（CPS-Ⅰ）（ Guo，1998），NCG 作為 NAG 的結(jié)構(gòu)類似物，同樣可以激活CPS-Ⅰ來(lái)促進(jìn)精氨酸的合成（Elhaji，2004）。 精氨酸在一氧化氮合酶（NOS）作用下分解成NO，激活哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）通路，使核糖體蛋白 P70S6激酶Ⅰ（P70S6Ⅰ）磷酸化，進(jìn)而促進(jìn)蛋白質(zhì)合成（Pervin，2007）。本研究表明，日糧中添加NCG能顯著提高仔豬日增重及日采食量，降低料重比，但在試驗(yàn)前期無(wú)明顯效果。Frank等（2007）對(duì)9日齡哺乳仔豬灌服NCG發(fā)現(xiàn)，血漿精氨酸含量提高了32%；曹洪戰(zhàn)等（2013）也發(fā)現(xiàn)，灌服NCG可顯著提高哺乳仔豬血清精氨酸及瓜氨酸的含量；王錚韡等（2010）研究發(fā)現(xiàn)，日糧中添加NCG可提高斷奶仔豬血清中游離氨基酸的含量，NCG添加量為0.08%時(shí)，仔豬血清游離精氨酸含量顯著提高。這些研究結(jié)果表明，日糧中添加NCG促進(jìn)了內(nèi)源精氨酸的合成。對(duì)飽食大鼠腦室注射谷氨酸或谷氨酸受體激動(dòng)劑后產(chǎn)生了強(qiáng)烈但短暫的采食行為（Duva，2002），證明谷氨酸對(duì)下丘腦采食調(diào)控有較大影響。王錚韡等（2010）的試驗(yàn)結(jié)果表明，NCG可顯著提高血清谷氨酸的含量，為仔豬采食量的增加提供了依據(jù)，進(jìn)而提高了仔豬的生長(zhǎng)速度。

Wu等 （2010）在基礎(chǔ)日糧中添加0.08%的NCG發(fā)現(xiàn)，仔豬腹瀉率顯著降低。王琤韡等（2010）研究發(fā)現(xiàn)，飼料中添加0.04%、0.08%的NCG可降低斷奶仔豬腹瀉率，但是0.12%的NCG不僅對(duì)仔豬腹瀉沒(méi)有積極作用，還導(dǎo)致腹瀉指數(shù)顯著提高。周錫紅等（2010）也得到了相似的結(jié)果。這些研究表明，一定濃度的NCG可以減輕仔豬腹瀉，可能是由于其有改善腸道萎縮，緩解腸道功能障礙的作用，同時(shí)能夠促進(jìn)熱休克蛋白Hsp70的表達(dá)（Wu，2010），維持腸道完整性，促進(jìn)腸道發(fā)育，改善腸道消化機(jī)能，而較高水平的NCG不僅對(duì)仔豬的腹瀉沒(méi)有積極作用，還會(huì)導(dǎo)致腹瀉發(fā)生，這可能是因?yàn)檩^高水平的NCG可導(dǎo)致仔豬體內(nèi)精氨酸急劇升高，使NO的合成劇增，從而產(chǎn)生氧化應(yīng)激，對(duì)機(jī)體造成破壞，使仔豬腸道受損（Wink，1998）。本試驗(yàn)各組仔豬腹瀉率均較低，各組仔豬腹瀉率均無(wú)顯著差異，但日糧中添加0.02%～0.08%NCG組仔豬腹瀉率有明顯的降低趨勢(shì)。

血液常規(guī)指標(biāo)能夠有效的反映動(dòng)物的健康狀態(tài)。本試驗(yàn)結(jié)果表明，日糧中添加0.02%的NCG可顯著提高平均紅細(xì)胞體積；添加0.08%的NCG可顯著降低血小板計(jì)數(shù)，說(shuō)明對(duì)仔豬的凝血能力造成了一定的影響。其余各項(xiàng)血液常規(guī)指標(biāo)均無(wú)顯著差異，說(shuō)明0.02%～0.10%的NCG對(duì)斷奶仔豬體內(nèi)環(huán)境未造成損害。

血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶是檢測(cè)肝功能的重要指標(biāo)，可反映肝細(xì)胞損害程度；堿性磷酸酶在體內(nèi)可直接參與磷酸基團(tuán)的轉(zhuǎn)移和代謝，與機(jī)體鈣、磷代謝有關(guān)，臨床上用于骨骼 、肝膽系統(tǒng)疾病的診斷和鑒別診斷；乳酸脫氫酶可以反映心肌疾??；血尿素氮是腎功能主要指標(biāo)之一，是人體蛋白質(zhì)代謝的主要終末產(chǎn)物。陳楠（2012）研究表明，哺乳仔豬灌服NCG對(duì)血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶和尿素氮沒(méi)有顯著的影響，每天灌服150 mg/kg BW劑量的NCG，血清中白蛋白和總蛋白分別顯著提高 33.66%、16.09%，每天灌服 100、150 mg/kg NCG可提高血清堿性磷酸酶的含量，但差異不顯著。Frank等（2007）研究發(fā)現(xiàn)，在哺乳仔豬日糧中添加50 mg/kg BW的NCG，可降低尿素氮的濃度。Ying等（2012）研究也發(fā)現(xiàn)，日糧中添加0.05%NCG能顯著降低斷奶仔豬尿素氮的濃度。本研究中，各個(gè)酶指標(biāo)均在正常生理范圍內(nèi)，并且各組之間無(wú)顯著差異。尿素氮和總蛋白與對(duì)照組相比也無(wú)顯著差異，可能是因?yàn)樵囼?yàn)日糧的蛋白質(zhì)含量已達(dá)到仔豬需求。

4 結(jié)論

4.1 日糧中添加NCG具有提高斷奶仔豬采食量、增加日增重、降低料重比，提高斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的作用，綜合生長(zhǎng)效果與經(jīng)濟(jì)成本，NCG的添加量以0.02%最佳。

4.2 日糧中添加0.02%～0.10%的NCG對(duì)仔豬健康無(wú)不良影響。

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S816.7

A

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