醫(yī)用抗菌凝膠噴劑抑菌效果的研究

黃慧穎 高靜賢 江蘇省醫(yī)療器械檢驗(yàn)所 （江蘇 南京 210019）

醫(yī)用抗菌凝膠噴劑抑菌效果的研究

黃慧穎 高靜賢 江蘇省醫(yī)療器械檢驗(yàn)所 （江蘇 南京 210019）

目的：研究醫(yī)用抗菌凝膠噴劑的抑菌效果。方法：分別參考GB15979-2002《一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》抑菌性能試驗(yàn)和《消毒技術(shù)規(guī)范（2002年版）》抑菌環(huán)試驗(yàn)方法，對(duì)該醫(yī)用抗菌凝膠噴劑的抑菌效果進(jìn)行評(píng)價(jià)。結(jié)果：該醫(yī)用抗菌凝膠噴劑對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和白色念珠菌的抑菌率均＞99.9%；對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和白色念珠菌的抑菌環(huán)直徑平均值分別為16.39mm、20.00mm、8.82mm。結(jié)論：該醫(yī)用抗菌凝膠噴劑對(duì)細(xì)菌繁殖體和真菌均具有較強(qiáng)的抑菌效果。

醫(yī)用抗菌凝膠噴劑 抑菌性能試驗(yàn) 抑菌環(huán)試驗(yàn)

醫(yī)用抗菌凝膠噴劑是一種新型的婦科用醫(yī)療器械，主要用于細(xì)菌性陰道炎、白色念珠菌性陰道炎以及急、慢性宮頸炎的治療。為了解該產(chǎn)品的抑菌效果，采用了兩種不同的檢測(cè)方法對(duì)該產(chǎn)品的抑菌作用進(jìn)行評(píng)價(jià)。

1.材料與方法

1.1 一般材料

1.1.1 試驗(yàn)樣品。試驗(yàn)樣品為醫(yī)用抗菌凝膠噴劑，是一種高分子凝膠溶液，噴出后性狀為凝膠泡沫，放置20～30min后泡沫即可消除，呈現(xiàn)為乳白色液體。試驗(yàn)用對(duì)照樣品由試驗(yàn)樣品生產(chǎn)企業(yè)提供，對(duì)照樣品與試驗(yàn)樣品同質(zhì)材料，同等大小，但不含抗菌材料，且經(jīng)滅菌處理。

1.1.2 試驗(yàn)菌株。大腸桿菌（8099），金黃色葡萄球菌（ATCC6538），白色念珠菌（ATCC10231）。

1.1.3 培養(yǎng)基及試劑。營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、沙氏瓊脂培養(yǎng)基、0.03mol/L磷酸鹽緩沖液（pH7.2）、定性濾紙片（將濾紙片制成直徑為5mm的圓片，經(jīng)壓力蒸汽滅菌處理后烘干備用）。

1.1.4 主要儀器。生物安全柜、培養(yǎng)箱、游標(biāo)卡尺。

1.2 方法

分別采用GB15979－2002《一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》[1]附錄C4抑菌性能試驗(yàn)和《消毒技術(shù)規(guī)范（2002年版）》[2]2.1.8.2抑菌環(huán)試驗(yàn)的方法對(duì)醫(yī)用抗菌凝膠噴劑的抑菌效果進(jìn)行評(píng)價(jià)。

1.2.1 菌液制備。取大腸桿菌（8099）、金黃色葡萄球菌（ATCC6538）、白色念珠菌（ATCC10231）的新鮮培養(yǎng)物，用5mL 0.03mol/L磷酸鹽緩沖液（以下簡(jiǎn)稱(chēng)PBS）洗下菌苔，用PBS稀釋成試驗(yàn)濃度菌懸液，備用。

1.2.2 被試樣液及對(duì)照樣液的制備。將醫(yī)用抗菌凝膠噴劑上下?lián)u動(dòng)10次以上確保凝膠溶液混勻，插入給藥導(dǎo)管，將其噴入無(wú)菌容器中，放置20～30min，取泡沫消除后的液體作為被試樣液，同法制備對(duì)照樣液。

1.2.3 抑菌性能試驗(yàn)。在4管被試樣液和4管對(duì)照樣液內(nèi)分別滴加100μL上述菌懸液（回收菌數(shù)為1×104～9×104cfu/mL），混勻，作用 2min、5min、10min、20min后取0.5mL的被試樣液及對(duì)照樣液用PBS稀釋?zhuān)?～3個(gè)稀釋度，用營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（細(xì)菌）或沙氏瓊脂培養(yǎng)基（酵母菌）作傾注，35?C培養(yǎng)48h后計(jì)數(shù)。試驗(yàn)重復(fù)3次，按

表1的試驗(yàn)結(jié)果表明，醫(yī)用抗菌凝膠噴劑分別作用2min、5min、10min、20min，對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌及白色念珠菌的抑菌率均＞99.9%，該樣品對(duì)這三種微生物均具有較強(qiáng)的抑菌作用。公式計(jì)算抑菌率（X =（A–B）/A×100%，X ：抑菌率，%，A：對(duì)照樣品平均菌落數(shù)，B：被試樣品平均菌落數(shù)），如抑菌率在50%～90%，則樣品有抑菌作用，如抑菌率≥90%，則樣品有較強(qiáng)抑菌作用。

表1.醫(yī)用抗菌凝膠噴劑作用不同時(shí)間的抑菌率(%)

表2.醫(yī)用抗菌凝膠噴劑的抑菌環(huán)直徑(mm)

1.2.4 抑菌環(huán)試驗(yàn)。①制備試驗(yàn)樣片及陰性對(duì)照樣片：取上述濾紙片，每片滴加20μL樣液或20μL無(wú)菌蒸餾水，干燥后備用。②接種試驗(yàn)菌：用無(wú)菌棉拭子蘸取5×105～5×106cfu/mL的菌懸液，在營(yíng)養(yǎng)瓊脂（細(xì)菌）或沙氏瓊脂（酵母菌）平板表面均勻涂抹3次。③貼放樣片：每次試驗(yàn)貼放1個(gè)染菌平板，每個(gè)染菌平板貼放4片試驗(yàn)樣片和1片陰性對(duì)照樣片，置37?C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)16～18h后用游標(biāo)卡尺測(cè)量抑菌環(huán)的直徑，試驗(yàn)重復(fù)3次。④抑菌作用的判斷：抑菌環(huán)直徑大于7mm者，判為有抑菌作用。

2.結(jié)果

2.1 抑菌性能試驗(yàn)結(jié)果

2.2 抑菌環(huán)試驗(yàn)結(jié)果

表2表明醫(yī)用抗菌凝膠噴劑對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌及白色念珠菌的抑菌環(huán)直徑平均值分別為16.39mm、20.00mm、8.82mm，該樣品對(duì)這三種微生物均具有抑菌作用。

3.討論

抑菌效果是評(píng)價(jià)醫(yī)用抗菌凝膠噴劑的重要指標(biāo)，本文選取了抑菌性能試驗(yàn)和抑菌環(huán)試驗(yàn)兩種方法來(lái)考察樣品的抑菌效果。在抑菌性能試驗(yàn)中，4種不同的作用時(shí)間對(duì)樣品的抑菌率并沒(méi)有產(chǎn)生明顯的影響，樣品在作用2min時(shí)，就已表現(xiàn)出良好的抑菌活性，且樣品對(duì)于大腸桿菌、金黃色葡萄球菌及白色念珠菌的抑菌率沒(méi)有明顯差異，均＞99.9%。在抑菌環(huán)試驗(yàn)中，樣品對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌環(huán)直徑平均值最大（20.00mm），對(duì)白色念珠菌的抑菌環(huán)直徑平均值最?。?.82mm），對(duì)大腸桿菌的抑菌環(huán)直徑平均值居中（16.39mm），這表明該樣品的對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌效果優(yōu)于大腸桿菌及白色念珠菌。抑菌環(huán)試驗(yàn)和抑菌性能試驗(yàn)是兩種不同的試驗(yàn)體系：抑菌環(huán)試驗(yàn)采用濾紙片為載體來(lái)吸附樣品中的抑菌成分，濾紙片對(duì)于抑菌成分的吸收率和釋放率都可能對(duì)試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響[3]；抑菌性能試驗(yàn)中樣品則可與試驗(yàn)菌直接接觸反應(yīng)，能更有效的反映出樣品的實(shí)際抑菌效果。通過(guò)抑菌性能試驗(yàn)和抑菌環(huán)試驗(yàn)的檢測(cè)，醫(yī)用抗菌凝膠噴劑顯示出對(duì)細(xì)菌繁殖體及真菌均具有很好的抑菌性能。

[1] 中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局.GB15979-2002一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)[S].2002.

[2] 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部.消毒技術(shù)規(guī)范[S].2002.

[3] 張濛,王歆宇,王萬(wàn)海,等.兩種方法檢測(cè)抗菌劑抑菌效果的比較[J].中國(guó)消毒學(xué)雜志,2006,23(5):436-438.

Study on the Bacteriostatic Effect of Medical Antibacterial Gel Spray

HUANG Hui-ying GAO Jing-xian Jiangsu Institute of Medical Device Testing (Jiangsu Nanjing 210019)

Objective: To study the bacteriostatic effect of the medical antibacterial gel spray.Methods: The bacteriostatic test and bacteriostatic ring test were used to investigate bacteriostatic effect of the medical antibacterial gel spray.Results: The bacteriostatic rates of medical antibacterial gel spray to Escherichia coli, Staphylococcus aureus and Candida albicans were more than 99.9%.The diameter of bacteriostatic rings of Escherichia coli, Staphylococcus aureus and Candida albicans were 16.39mm, 20.00mm and 8.82mm, respectively.Conclusion: Medical antibacterial gel spray has strong bacteriostatic effect on bacteria propagules and fungi.

medical antibacterial gel spray, bacteriostatic test, bacteriostatic ring test

1006-6586(2017)23-0018-02

R613

A

2017-11-16