TGF—β1、Smad3在星形細(xì)胞瘤腫瘤組織中的表達(dá)及其相關(guān)性

馬志君　吉潔　李春輝　王維興

[摘要]目的：探討TGF-β1、Smad3在星形細(xì)胞瘤腫瘤組織中的表達(dá)情況以及兩者的相關(guān)性。方法：采用免疫組化染色檢測30例手術(shù)切除的星形細(xì)胞瘤患者腫瘤組織標(biāo)本中TGF-β1和Smad3的表達(dá)水平，并對兩者的相關(guān)性進(jìn)行分析。結(jié)果：TGF-β1和Smad3表達(dá)水平在不同級別星形細(xì)胞瘤中各組間均有顯著差異（P<0.01），TGF-β1的表達(dá)與Smad3表達(dá)水平之間呈明顯正相關(guān)。結(jié)論：TGF-β1和Smad3在星形細(xì)胞瘤腫瘤組織中的表達(dá)水平與腫瘤的病理分級呈正相關(guān)，TGF-β1/Smad3信號傳導(dǎo)通路在星形細(xì)胞瘤的異常增殖過程中起到了重要作用。

[關(guān)鍵詞]星形細(xì)胞瘤；TGF-β1；Smad3

星形細(xì)胞瘤約占顱腦腫瘤的13%-26%，其主要的生物學(xué)行為是惡性增殖和侵襲。目前手術(shù)仍然是臨床治療的主要方法，但術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)率高，預(yù)后差成為治療該病的難點(diǎn)。因此從分子生物學(xué)的角度來探討星形細(xì)胞瘤增殖、侵襲的機(jī)制，為靶向治療提供理論依據(jù)具有重要意義。本實(shí)驗以手術(shù)切除的星形細(xì)胞瘤患者腫瘤組織為研究標(biāo)本，分別檢測低級別星形細(xì)胞瘤和高級別星形細(xì)胞瘤中TGF-β1和Smad3表達(dá)情況，從分子生物學(xué)的角度研究其在星形細(xì)胞瘤發(fā)病機(jī)制中的影響，使其成為臨床治療中新的靶點(diǎn)。

1材料與方法

1.1材料與試劑

男性18例、女性12例，年齡12-76歲，平均（56.25±7.51）歲；參照WHO分型標(biāo)準(zhǔn)：低級別星形細(xì)胞瘤（Ⅰ～Ⅱ級）14例，高級別星形細(xì)胞瘤（Ⅲ～Ⅳ級）16例。

兔抗人TGF-B1、Smad3單克隆抗體（美國CellSignaling公司）；濃縮型DAB試劑盒（北京中山金橋公司）；免疫組化MaxVision試劑盒（上海拜力生物科技公司）；Trizol試劑盒（上海聯(lián)碩生物科技公司）。

1.2方法

免疫組化染色：

DAB顯色5min，蘇木素輕度復(fù)染，二甲苯透明，封片后鏡檢。黃色、棕黃色為陽性結(jié)果，評定采用Volm雙評分法。

1.3統(tǒng)計學(xué)分析

SPSS17.0軟件數(shù)據(jù)分析，計量資料以（x±s）表示，兩獨(dú)立樣本t檢驗，等級資料秩和檢驗，相關(guān)性Spearman分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

各組間TGF-β1、Smad3免疫組化染色情況比較，如表1所示。

3討論

TGF-β1/Smad信號傳導(dǎo)通路被看做是機(jī)體重要的抑瘤系統(tǒng)，但相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，TGF-β1在腫瘤細(xì)胞中的抑制作用常常失效，相反起到了促進(jìn)作用，這與TGF-β/Smads信號傳導(dǎo)出現(xiàn)紊亂有關(guān)。Smads蛋白家族在TGF-β信號傳導(dǎo)中起到至關(guān)重要的作用，Smads蛋白是目前僅有的已經(jīng)被證實(shí)的TGF-β受體作用的細(xì)胞內(nèi)激酶底物，具有轉(zhuǎn)錄因子活性和核轉(zhuǎn)位功能。Smads在TGF-β1/Smad信號傳導(dǎo)過程中出現(xiàn)任何異常都會影響到正常的信號傳導(dǎo)，TGF-β1信號傳導(dǎo)出現(xiàn)異常進(jìn)而促進(jìn)了腫瘤的發(fā)生。Smad2/3在TGF-β1信號傳導(dǎo)過程中充當(dāng)細(xì)胞介導(dǎo)因子的角色，受體調(diào)節(jié)型Smad3比Smad2更易與TGF-β1Ⅰ型受體結(jié)合發(fā)生磷酸化，再與Smad4形成復(fù)合物，該復(fù)合物轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核內(nèi)，可以和各類轉(zhuǎn)錄因子相結(jié)合，進(jìn)而編碼相關(guān)的調(diào)控基因，使得TGF-β1得以發(fā)揮控制細(xì)胞增殖和凋亡的作用。這也說明TGF-β1主要是通過TGF-β1/Smad3細(xì)胞信號傳導(dǎo)通路來控制細(xì)胞的增殖和凋亡的，Smad3表達(dá)水平的高低變化將直接作用到TGF-β1信號的傳導(dǎo)。

本研究顯示，TGF-β1和Smad3在星形細(xì)胞瘤腫瘤組織中的表達(dá)水平與腫瘤的病理分級呈正相關(guān)，兩者表達(dá)水平之間亦呈明顯正相關(guān)，其表達(dá)水平升高與星形細(xì)胞瘤的異常增殖有一定的關(guān)系。

綜上所訴，TGF-β1和Smad3兩者與星形細(xì)胞瘤發(fā)生及惡性程度相關(guān)，檢測其表達(dá)情況可為星形細(xì)胞瘤的診治提供分子生物學(xué)依據(jù)，TGF-β1和Smad3有望成為一個基因治療靶點(diǎn)。