凹凸棒石黏土在蛋白質(zhì)測定中對煮時間和測定結(jié)果的影響

羅有文 鄭 丹 許天宸 淡瑞芳

（①江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院 江蘇 泰州 225300 ②南京師范大學(xué)泰州學(xué)院 江蘇 泰州）

凹凸棒石黏土在蛋白質(zhì)測定中對煮時間和測定結(jié)果的影響

羅有文①鄭 丹②許天宸①淡瑞芳①

（①江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院 江蘇 泰州 225300 ②南京師范大學(xué)泰州學(xué)院 江蘇 泰州）

本文研究了凹凸棒石黏土對飼料原料中粗蛋白質(zhì)含量測定的影響，并探討其適宜添加量。結(jié)果表明：凹凸棒石黏土能夠適當(dāng)降低粗蛋白質(zhì)測定過程中的消化時間，減小平行樣之間的相對偏差，提高測定結(jié)果的準(zhǔn)確性。凹凸棒石黏土的添加量以凹土與飼料原料的比例1：1為宜。

凹凸棒石黏土 蛋白質(zhì) 測定

飼料中粗蛋白質(zhì)含量的測定一般采用常量或半微量蒸餾凱氏定氮法[1]，該方法是相關(guān)專業(yè)日常教學(xué)和學(xué)生必須掌握的經(jīng)典試驗方法之一，但該方法樣品消煮費時，測定周期較長。目前出現(xiàn)了不少全自動或半自動凱氏定氮儀，但這些儀器價格較高，且需專門試劑，目前較難普及[2]。凹凸棒石黏土又稱坡縷石，是一種含水富鎂鋁硅酸鹽礦物，具有良好的離子交換性、物理吸附性、熱穩(wěn)定性等。經(jīng)適當(dāng)改性活化處理的凹凸棒石黏土其物理結(jié)構(gòu)將發(fā)生一些變化，具有更加優(yōu)良的吸附性和熱穩(wěn)定性等[3]。本試驗旨在探討凹凸棒石黏土在飼料蛋白質(zhì)測定中對消煮時間和測定結(jié)果的影響。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器設(shè)備 凱氏蒸餾裝置；消化爐；電子分析天平；粉碎機等。

1.1.2 材料與試劑 濃硫酸；混合催化劑：按0.4g硫酸銅和6.0g硫酸鉀的比例混勻；混合指示劑：0.1%甲基紅乙醇溶液與0.5%溴甲酚綠乙醇溶液等體積混合。玉米(成熟，GB/T 17890-1999 1級)；凹凸棒石黏土(粒度＜200目，南京地質(zhì)礦產(chǎn)研究所提供)。

1.2 方法

1.2.1 試驗設(shè)計 試驗共分4組，每組添加不同含量的凹凸棒石黏土：（1）0.5g玉米+催化劑（2）0.5g玉米+催化劑+0.25g凹凸棒土；（3）0.5g玉米+催化劑+0.5g凹凸棒土；（4）：0.5g玉米+催化劑+0.75g凹凸棒土。每組設(shè)3個平行樣品，并計算平行樣之間的相對偏差(相對偏差=(單次測定值－平均值)/平均數(shù)×100%)。

1.2.2 試驗方法 將稱取好的樣品、催化劑和凹凸棒石黏土根據(jù)試驗分組加入潔凈干燥的消煮管中，然后加入2粒玻璃珠，再加入10ml濃硫酸，搖勻后置于消化爐中消煮。消煮過程在通風(fēng)廚內(nèi)進行(步驟和結(jié)果計算按照國標(biāo)GB/T6432-94進行)。

2 結(jié)果與分析

凹凸棒石黏土對蛋白質(zhì)測定過程中消煮時間和測定結(jié)果的影響見附表。由附表可見，凹凸棒石黏土可以縮短蛋白質(zhì)消化時間，降低平行樣品之間的相對偏差，提高準(zhǔn)確性。其中以第3組0.5g玉米中添加0.5g凹凸棒石黏土后樣品的相對偏差最小。

附表 凹凸棒石黏土對蛋白質(zhì)測定的影響 (g、min、%)

3 討論

（1）凹凸棒石粘土是一種具有特殊纖維晶體形態(tài)結(jié)構(gòu)的含水富鎂鋁硅酸鹽礦物[4]，具有較大的表面積，且由于其內(nèi)部存在強大的庫侖場和極性，因此具有極強的物理吸附性。為了增強其吸附性有時會對凹凸棒石黏土進行酸活化或高溫活化。凹凸棒石黏土加工過程中的活化工藝旨在激發(fā)全部的纖維結(jié)構(gòu)，擴大其比表面積，增強凹凸體的吸附性。Hassen等對蒙脫石、凹凸棒石黏土等的吸附性試驗發(fā)現(xiàn)，凹凸棒石黏土對大腸桿菌、假單胞菌具有很強的吸附性，吸附率分別達98.2%和60.0%[5]。動物試驗也發(fā)現(xiàn)，凹凸棒石黏土可以吸附氨類物質(zhì)[6]，在飼料中添加凹土后，可以改善肉雞腸道菌群，抑制大腸桿菌的增殖、提高乳酸桿菌的數(shù)量，提高動物生產(chǎn)性能[7]。（2）在蛋白質(zhì)測定過程中，凹凸棒石黏土遇到了濃硫酸后其晶體纖維結(jié)構(gòu)被激發(fā)，擴大其比表面積，增強了其吸附性，從而能夠吸附蛋白質(zhì)及其消化過程產(chǎn)生的物質(zhì)。又由于在消化過程中受到高溫的作用，其吸附的氮類物質(zhì)和蛋白質(zhì)被逐漸緩釋出來。由于飼料中蛋白質(zhì)被強酸分解生成的氮類物質(zhì)經(jīng)過了凹凸棒石黏土的緩釋作用，減少了氮在空氣中的損失，從而降低了平行樣之間的相對偏差，提高了蛋白質(zhì)測定的準(zhǔn)確性。

[1] 飼料標(biāo)準(zhǔn)資料委員會. 飼料標(biāo)準(zhǔn)資料匯編(上)[M]. 北京： 中國標(biāo)準(zhǔn)出版社, 1996.

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