炎癥因子IL-32、 IL-1β、 IL-18及EpCAM在肝細(xì)胞肝癌診斷和生存預(yù)測(cè)中的作用

曾明曦，康長(zhǎng)明，王瓊芳,李政偉

1.四川省人民醫(yī)院消化內(nèi)科(成都 610072)，2.陜西省神木市醫(yī)院(神木719300)

炎癥因子IL-32、 IL-1β、 IL-18及EpCAM在肝細(xì)胞肝癌診斷和生存預(yù)測(cè)中的作用

曾明曦1，康長(zhǎng)明1，王瓊芳1,李政偉2△

1.四川省人民醫(yī)院消化內(nèi)科(成都 610072)，2.陜西省神木市醫(yī)院(神木719300)

目的：探討血清IL-32、IL-18、IL-1β及EpCAM在肝細(xì)胞癌的診斷、預(yù)后的臨床價(jià)值。方法：前瞻性入組60例肝細(xì)胞癌患者和15例健康志愿者，在患者入院后給予相應(yīng)治療前采血，采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血清IL-32、 IL-1β、 IL-18及EpCAM水平。結(jié)果： HCC組患者血清IL-32、IL-18、EpCAM水平均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，HCC組與對(duì)照組的血清IL-1β水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；血清IL-32、IL-18水平與MELD評(píng)分正相關(guān)；EpCAM曲線下面積(AUC)為0.985，截?cái)帱c(diǎn)為3.40，為診斷肝細(xì)胞癌最有價(jià)值的標(biāo)志物；除了EpCAM，其它細(xì)胞因子與HCC患者的生存率無(wú)關(guān)(P>0.05)。結(jié)論：雖然細(xì)胞因子可作為肝癌的診斷標(biāo)志物，但其對(duì)肝細(xì)胞癌患者的預(yù)后沒(méi)有參考價(jià)值；血清EpCAM可為肝細(xì)胞癌的診斷及患者的預(yù)后提供有效的參考價(jià)值。

肝細(xì)胞癌(HCC)預(yù)后與腫瘤分期和肝功能密切相關(guān)。白細(xì)胞介素(IL)-6和IL-32在肝細(xì)胞癌患者中高表達(dá)[1]，IL-32還與肝細(xì)胞癌患者預(yù)后密切相關(guān)[2]。除此之外，IL-18，IL-1β，上皮細(xì)胞黏附分子(EpCAM)可能也與肝細(xì)胞癌患者預(yù)后相關(guān)[3]。本研究通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)檢測(cè)患者血清IL-32，IL-1β，IL-18及EpCAM水平，探討其對(duì)肝細(xì)胞癌的診斷和預(yù)后價(jià)值,報(bào)告如下。

資料與方法

1 一般資料 前瞻性納入2013年1月至2016 年12月我院收治的肝細(xì)胞癌患者(HCC)60例，其中男49例，女11例，平均年齡為(60±9)歲。均經(jīng)MRI確診為肝細(xì)胞癌，并伴有甲胎蛋白(AFP)逐漸升高。所有患者均合并肝硬化，評(píng)估患者肝硬化的病因-乙型肝炎肝病毒(HBV)，丙型肝炎病毒或其它病因，并計(jì)算患者的Chile-Pugh和終末期肝病模型(MELD)評(píng)分。并納入15例健康患者作為對(duì)照組。HCC組60例患者的病因?yàn)榫凭?例，乙型肝炎病毒感染41例，丙型肝炎病毒感染12例，其他3例，Chile-Pugh分級(jí)中A級(jí)40例，B級(jí)18例，C級(jí)2例。HCC組與健康對(duì)照組在年齡，性別構(gòu)成比上無(wú)顯著性差異(P>0.05)，具有可比性。

2 研究方法 在患者入院后給予相應(yīng)治療前，空腹靜脈采血，分離血清置-20℃保存待測(cè)。血清IL-32， IL-1β，EpCAM均采用固相ELISA檢測(cè)，血清IL-18采用雙抗夾心ELISA檢測(cè)。對(duì)本組病例進(jìn)行12～24個(gè)月的隨訪，每3個(gè)月隨訪1次，了解患者復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移，死亡時(shí)間，死亡原因等。

3 觀察指標(biāo) 對(duì)比HCC組及對(duì)照組受試者血清IL-32，IL-18，IL-1β及EpCAM水平；對(duì)比HCC組幸存者和死亡者IL-32，IL-18，IL-1β及EpCAM水平。

結(jié) 果

1 兩組血清IL-32，IL-18，IL-1β，EpCAM檢測(cè)結(jié)果 HCC組患者血清IL-32， IL-18，EpCAM水平均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，HCC組與對(duì)照組的血清IL-1β水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。隨后我們進(jìn)行了相關(guān)性分析，結(jié)果表明甲胎蛋白(AFP)，臨床診斷HCC的重要血清標(biāo)記物，與IL-32， IL-18，EpCAM等負(fù)相關(guān)(P>0.05)，血清IL-32，IL-18水平與MELD評(píng)分正相關(guān)(r= 0.315，P= 0.03；r= 0.297，P= 0.04)。

2 IL-32，IL-18，EpCAM診斷HCC的ROC曲線 在腫瘤標(biāo)志物的ROC分析中，血清AFP，IL-32，IL-18，EpCAM區(qū)別HCC組患者和對(duì)照組均表現(xiàn)出了有價(jià)值的截?cái)嗨?P<0.001)，所有腫瘤標(biāo)志物均表現(xiàn)出了高靈敏度，特異性，準(zhǔn)確性。血清EpCAM水平的截?cái)帱c(diǎn)為3.40，為診斷HCC最有價(jià)值的標(biāo)志物(AUC = 0.985，P<0.001)。

3 血清IL-32，IL-18，IL-1β，EpCAM水平對(duì)HCC患者預(yù)后的影響 隨訪期間，HCC組共有35例患者(58%)死亡，該組的中位生存期是7.3±1.4個(gè)月。隨訪期間死亡的肝細(xì)胞癌患者EpCAM水平顯著高于幸存者(22.3 vs 17.9 pg/ml，P=0.01)。其它標(biāo)記物與HCC患者的總體病死率沒(méi)有相關(guān)性，肝細(xì)胞癌患者的生存率與血清甲胎蛋白(AFP)水平?jīng)]有相關(guān)性，見(jiàn)表1。

表1 HCC組幸存和死亡者血清IL-32，IL-18，IL-1β，EpCAM水平比較( pg/ml)

注：與死亡組相比，*P<0.05

討 論

肝細(xì)胞癌是一個(gè)重要的全球健康問(wèn)題。為了改善患者預(yù)后和長(zhǎng)期生存，早期診斷肝癌是實(shí)施治療干預(yù)的關(guān)鍵。IL-32主要是由免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞產(chǎn)生的一種促炎癥細(xì)胞因子，在潰瘍性結(jié)腸炎和其他多種炎癥性疾病高表達(dá)[4]。在41%胃癌患者和29%的肺癌患者腫瘤組織可見(jiàn)IL-32高表達(dá)[5]，這與慢性炎癥和腫瘤進(jìn)展密切相關(guān)的共識(shí)一致。因此我們推測(cè)IL-32可能與HCC進(jìn)展密切相關(guān)。在本研究中，我們發(fā)現(xiàn)HCC患者外周血中IL-32表達(dá)明顯增高，這也進(jìn)一步表明IL-32可作為HCC的診斷指標(biāo)。

EpCAM在多種腺癌和鱗狀細(xì)胞癌中高表達(dá)。正常情況下成熟的肝細(xì)胞不表達(dá)EpCAM，有研究發(fā)現(xiàn)75.9%的慢性酒精性肝炎、63.6%的丙型肝炎以及55.6%的慢性自身免疫性肝炎和乙型肝炎患者肝細(xì)胞表達(dá)EpCAM，而乙型和丙型肝炎病毒感染在HCC的發(fā)生發(fā)展中尤為重要，因此，我們推測(cè)EpCAM在HCC中也有重要作用，而基因表達(dá)測(cè)序研究也證實(shí)了這一點(diǎn)。本研究中，隨訪期間死亡的HCC患者EpCAM水平均顯著高于幸存者，表明HCC患者EpCAM高表達(dá)者預(yù)后也較差。

綜上所述，本研究HCC患者外周血中IL-32，IL-18，EpCAM表達(dá)顯著增高，IL-32，IL-18水平與HCC患者M(jìn)ELD評(píng)分正相關(guān)，但其對(duì)HCC患者的預(yù)后沒(méi)有參考價(jià)值，而血清EpCAM與患者生存率正相關(guān)，可為HCC患者的診斷及預(yù)后提供有效的參考價(jià)值。

[1] 張慧賢,馬向明,付慶江,等.肝細(xì)胞癌患者血清IL-17細(xì)胞因子水平檢測(cè)的臨床意義[J].陜西醫(yī)學(xué)雜志, 2016,45(10):1394-1395.

[2] 彭 莉,李 丹.血清IL-17和MMP-7檢測(cè)在肝細(xì)胞癌診斷中的作用[J].中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào), 2017, 46(3):248-250.

[3] 何海華,楊志奇,孫振綱,等.IL-10、IL-17及IL-18在肝細(xì)胞肝癌中的表達(dá)特點(diǎn)及其臨床意義[J].標(biāo)記免疫分析與臨床,2016, 23(2):150-153.

[4] 李廣云,陳政華,徐逢皇,等.肝癌患者血清中共刺激分子sB7-H3和炎癥因子IL-17、IL-8相關(guān)性及臨床診斷研究[J].中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志, 2016,36(3):213-218.

[5] 陳 儒,沈關(guān)心.IL-32與腫瘤生物學(xué)行為[J]. 醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志, 2017, 14(1):55-58.

RoleofIL-32,IL-1β,IL-18andEpCAMinthediagnosisandpredictionofsurvivalofhepatocellularcarcinoma

Zeng Mingxi，Kang Changmin，Wang Qiongfang，et al.

Department of Gastroenterology,People’s Hospital of Sichuan Province(Chengdu 610072)

Objective: To investigate interleukin (IL)-32,IL-1β, IL-18 and epithelial cell adhesion molecule(EpCAM) in the diagnosis and assessment of prognosis of HCC.Methods: Sixty patients with HCC and 15 healthy volunteers were enrolled into this prospective study. Serum samples were obtained at the first admission before any treatment was given. Serum IL-32, IL-1β, IL-18 and EpCAM levels were determined by ELISA kits.Results: The mean serum level of IL-32, IL-18 and EpCAM in patients with HCC were significantly higher than in the control subjects (P<0.05). The mean IL-1β level in the HCC group was not different from that in the control group (P>0.05). IL-32 and IL-18 levels showed positive correlation with MELD scores. EpCAM with a cutoff of 3.40 seems to be the most valuable marker for the diagnosis of HCC(AUC = 0.985).Cytokine levels except EpCAM did not correlate with survival (P>0.05). Conclusions: Although cytokines can be a diagnostic marker for HCC, they did not have any significant prognostic value in patients with HCC. Only EpCAM may be used to determine the prognosis of HCC,thereby assisting with treatment management.

Liver neoplasms/diagnosis Interleukin-8 Interleukin-1beta Epithelial cell adhesion molecule

△通訊作者

肝腫瘤/診斷 白細(xì)胞介素-8 白細(xì)胞介素-1β 上皮細(xì)胞粘附分子

R735.7

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2017.12.021

(收稿：2017-07-02)