乙肝肝硬化對外周血T細(xì)胞亞群、免疫球蛋白及補體水平的影響

梁志軍，李瑞娟，王素娜，連建奇

第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院感染科 (西安 710038)

乙肝肝硬化對外周血T細(xì)胞亞群、免疫球蛋白及補體水平的影響

梁志軍，李瑞娟，王素娜，連建奇

第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院感染科 (西安 710038)

目的：檢測乙型肝炎肝硬化患者外周血中T淋巴細(xì)胞亞群、免疫球蛋白及補體水平的變化并探討其臨床意義。方法：選取67例乙肝肝硬化患者和20例健康對照者，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測其外周血中T淋巴細(xì)胞亞群(CD4+、CD8+)，采用免疫比濁法測定其血清中免疫球蛋白(IgG、IgM、IgA)及補體(C3、C4)水平。結(jié)果：乙肝肝硬化患者外周血中CD4+T、CD8+T淋巴細(xì)胞計數(shù)低于對照組(P<0.05)，免疫球蛋白IgG、IgM、IgA均高于對照組(P<0.05)，而補體C3、C4低于對照組(P<0.05)。結(jié)論：乙肝病毒可以影響T細(xì)胞亞群和免疫球蛋白水平，從而導(dǎo)致機體細(xì)胞和體液免疫功能紊亂，免疫功能的檢測對評估乙肝肝硬化患者病情及判斷預(yù)后有一定臨床意義。

乙型肝炎病毒(HBV)感染人體后可有不同的發(fā)展，長期慢性感染可引起乙型肝炎肝硬化。乙肝肝硬化發(fā)病機制復(fù)雜，現(xiàn)主要認(rèn)為機體免疫調(diào)節(jié)功能紊亂是其產(chǎn)生病理損害的主要原因[1-2]。我們選擇了67例乙肝肝硬化患者和20例健康對照者，分別檢測其外周血T淋巴細(xì)胞亞群(CD4+、CD8+)、血清免疫球蛋白(IgG、IgM、IgA)及補體(C3、C4)的水平，探討它們在乙肝病毒導(dǎo)致的肝硬化發(fā)病中的作用及臨床意義。

資料和方法

1 一般資料 收集2012年5月至2013年10月期間在本科就診的乙肝肝硬化患者67例，依據(jù)2010年中華醫(yī)學(xué)會制定的《病毒性肝炎防治方案》中的臨床診斷與分期標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行診斷，且患者在3個月內(nèi)未經(jīng)免疫調(diào)節(jié)劑及抗病毒治療。對照組為20例健康獻(xiàn)血者，均無肝炎病史、乙肝血清學(xué)標(biāo)志呈陰性且肝功能正常。兩組一般資料差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。

2 方 法 ①標(biāo)本采集：抽取靜脈血10 ml，分為2份：一份EDTA抗凝用于淋巴細(xì)胞檢測，一份離心分離血清，置-80℃待檢。②儀器和試劑：檢測由本科室檢測中心專人負(fù)責(zé)，T淋巴細(xì)胞亞群采用流式細(xì)胞儀(美國BD公司)及BD公司配套試劑，血清免疫球蛋白和補體水平的檢測采用免疫比濁法。

結(jié) 果

1 外周血T淋巴細(xì)胞計數(shù)分析 乙肝肝硬化組患者外周血T淋巴細(xì)胞計數(shù)明顯低于對照組，且CD8+淋巴細(xì)胞降低程度較CD4+要高，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表1。

表1 各組外周血T淋巴細(xì)胞計數(shù)比較

注：與對照組比較*P<0.05

2 血清免疫球蛋白水平分析 乙肝肝硬化組患者的血清免疫球蛋白(IgG、IgM、IgA)水平明顯高于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 各組血清免疫球蛋白比較(lg/L)

注：與對照組比較*P<0.05

3 血清補體水平分析 乙肝肝硬化組患者的血清補體(C3、C4)水平明顯低于對照組，差別具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

表3 各組血清補體水平比較(g/L)

注：與對照組比較*P<0.05

討 論

乙型肝炎病毒的致病機制復(fù)雜，至今尚不完全清楚，目前普遍認(rèn)為感染乙型肝炎病毒后致病的嚴(yán)重程度及預(yù)后差異與機體的免疫狀態(tài)密切相關(guān)[3]。細(xì)胞免疫應(yīng)答主要表現(xiàn)為單個核細(xì)胞在肝組織內(nèi)的浸潤，從而引起不同程度的肝組織損傷，而組織損傷也與體液免疫相關(guān)，體液免疫應(yīng)答主要表現(xiàn)在抗體和補體或免疫復(fù)合物形成及在肝組織內(nèi)沉積。乙肝病毒誘導(dǎo)的機體免疫應(yīng)答是導(dǎo)致肝細(xì)胞損傷的主要機制[3]。乙肝病毒長期慢性感染可以導(dǎo)致肝臟纖維化。

T淋巴細(xì)胞是細(xì)胞免疫應(yīng)答的主要執(zhí)行者。張艷等[4]研究發(fā)現(xiàn)非活動性HBsAg攜帶者淋巴細(xì)胞低于健康對照者，他們認(rèn)為慢性HBV攜帶者的免疫功能強于非活動性HBsAg攜帶者。本實驗結(jié)果顯示慢性乙型肝炎肝硬化患者CD4+、CD8+T細(xì)胞數(shù)量較對照組減少，提示機體參加免疫反應(yīng)的免疫活性細(xì)胞已經(jīng)發(fā)生改變，T細(xì)胞的減少可能導(dǎo)致機體細(xì)胞免疫功能下降。乙肝肝硬化組患者CD8+T細(xì)胞下降程度比CD4+T細(xì)胞程度多，從而導(dǎo)致CD4+/CD8+比值增高，可能與乙型肝炎病情進(jìn)展致CD8+細(xì)胞耗竭有關(guān)，細(xì)胞免疫功能低下可能是慢性乙型肝炎發(fā)展為乙肝肝硬化的重要因素。

B細(xì)胞是機體體液免疫的主導(dǎo)者。周臣敏[5]發(fā)現(xiàn)乙肝肝硬化患者的血清IgG、IgE、IgA顯著增高。實驗結(jié)果顯示乙肝肝硬化組血清IgG、IgM、IgA明顯高于健康對照組，與其結(jié)果基本一致。血清中免疫球蛋白水平升高可能與肝功能損害有關(guān)，一方面機體為了清除病毒產(chǎn)生大量的抗體，另一方面乙型肝炎病毒導(dǎo)致的肝硬化致使肝臟細(xì)胞功能障礙，清除抗體能力下降，從而使得機體免疫球蛋白升高。由此，免疫球蛋白的水平升高可提示體液免疫功能亢進(jìn)，且與乙肝肝硬化的病情程度相關(guān)。

補體系統(tǒng)也是機體免疫系統(tǒng)的重要組成部分。C3、C4是連接經(jīng)典途徑和旁路途徑的樞紐。本實驗結(jié)果顯示乙肝肝硬化組血清C3、C4水平低于健康對照組，乙肝肝硬化C3、C4水平下降可能是由于乙肝病毒感染導(dǎo)致機體免疫功能紊亂，免疫復(fù)合物的形成促使補體過度激活，體內(nèi)補體消耗增多；也可能與肝細(xì)胞受損，導(dǎo)致補體合成減少有關(guān)，提示補體水平的變化可能與肝臟損傷的程度及機體免疫狀態(tài)有關(guān)。

本實驗結(jié)果顯示乙型肝炎肝硬化患者細(xì)胞免疫及體液免疫功能失調(diào)。T淋巴細(xì)胞亞群(CD4+、CD8+)、血清免疫球蛋白(IgG、IgM、IgA)、補體(C3、C4)的變化，可作為動態(tài)指標(biāo)來反應(yīng)機體細(xì)胞免疫和體液免疫功能，為乙型肝炎肝硬化患者的病情判斷、臨床治療及預(yù)后評估提供依據(jù)。同時提示我們采用免疫制劑可以提高乙肝肝硬化患者的免疫功能，從而達(dá)到延緩乙肝肝硬化的病情進(jìn)展的目的。

[1] Liaw YF,Chu CM. Hepatitis B virus infection [J]. Lancet,2009, 373(9663):582-592.

[2] 王 萍，胥 冰， 張麗君，等. 不同類型HBV感染者外周血Treg/Th17細(xì)胞的變化及意義[J]. 陜西醫(yī)學(xué)雜志, 2013，42(11): 1456-1459.

[3] 王 姣，鄧 洪，謝冬英，等. HBV特異性CTLs表面CD244和PD-1共表達(dá)與慢性乙型肝炎嚴(yán)重程度的相關(guān)性[J]. 中華病理生理雜志，2012， 28(12): 2254-2260.

[4] 張 艷，孫繼紅，刺 梅，等. IL-12、單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞在HBeAb陽性HBV攜帶者中的相關(guān)性研究[J]. 臨床醫(yī)學(xué)與檢驗, 2016，13(2): 244-246.

[5] 周臣敏. 免疫球蛋白檢測在乙型肝炎患者病情及預(yù)后判斷的臨床意義[J]. 國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志, 2013，34(3): 376-377.

InfluenceofhepatitisBcirrhosisonperipheralbloodTlymphocytesubsets,immunoglobulinandcomplementlevels

Liang Zhijun，Li Ruijuqn,Wang Suna,et al.

Department of Infectious Diseases， Tangdu Hospital，The Fourth Military Medical University(Xi’an 710038)

Objective ：To study the changes of T-lymphocyte subsets, serum immunoglobulin and complement in patients with chronic hepatitis B (CHB)-related cirrhosis. Methods:The various T-lymphocyte subsets were detected by flow cytometry, serum immunoglobulin and complement by immune nephelometry in 67 patients with CHB-related cirrhosis and 20casesof healthycontrols. Results：Compared to the healthycontrol group, the CHB-related cirrhosis groups showed significantly less peripheral blood T cells percentages of CD4+(P<0.05) and CD8+(P<0.05). The levels of serum IgG、IgM and IgAin the patientswith CHB-related cirrhosis were significantly higher than those in healthy group (P<0.05).The levels of C3 and C4 in the patients with CHB-related cirrhosis were significantly higher than those in healthy group (P<0.05). Conclution：The immune function was disturbed in the patients with CHB-related cirrhosis. The detection of immune function has clinical significance in the diagnosis, treatment and predict prognosis of CHB-related cirrhosis.

Hepatitis B/complications Liver cirrhosis @T-lymphocyte subsets ImmunoglobulinComplement C3 Complement C4

乙型肝炎/并發(fā)癥 肝硬化 @T淋巴細(xì)胞亞群 免疫球蛋白 補體C3 補體C4

R575.1

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2017.12.013

(收稿：2017-07-07)