炎癥性腸病患者腸道菌群結(jié)構(gòu)的變化及其與炎性指標(biāo)的關(guān)系研究

李 陶，劉雁冰

（天津市解放軍第254醫(yī)院急救康復(fù)中心，天津 300020）

炎癥性腸病患者腸道菌群結(jié)構(gòu)的變化及其與炎性指標(biāo)的關(guān)系研究

李 陶，劉雁冰

（天津市解放軍第254醫(yī)院急救康復(fù)中心，天津 300020）

目的 探討炎癥性腸?。↖BD）患者腸道菌群結(jié)構(gòu)變化及其與相關(guān)炎性指標(biāo)的關(guān)系，為臨床治療提供病原學(xué)依據(jù)。方法 選取2015年8月～2016年9月來(lái)我院治療的170例炎癥性腸病患者（IBD）作為本次研究的對(duì)象，其中116例為潰瘍性結(jié)腸炎患者（UC組）和54例為克羅恩病患者（CD組），另選54名健康志愿者作為對(duì)照組，采集所有患者和健康志愿者的新鮮糞便標(biāo)本，對(duì)菌群進(jìn)行培養(yǎng)分析，比較患者和健康自愿者的菌群變化，研究炎性指標(biāo)（包括血小板、血沉、血白細(xì)胞和C-反應(yīng)蛋白）和菌群數(shù)目之間的相關(guān)性。結(jié)果 相比于對(duì)照組，UC組患者SB、BL、LC、EC、BD、PS、SC的數(shù)量明顯增加，而ES數(shù)量下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；CD組患者SB、BL、LC、EC、BD、PS的數(shù)量明顯增加，而SC和ES數(shù)量下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；培養(yǎng)結(jié)果陽(yáng)性檢出率與菌群數(shù)量變化結(jié)果基本相符合；而菌群與炎性指標(biāo)（血小板、血沉、血白細(xì)胞和C-反應(yīng)蛋白）有較弱相關(guān)性。結(jié)論 炎癥性腸病患者的腸道菌群失衡，其發(fā)病與真桿菌屬數(shù)量的減少有關(guān)。

炎癥性腸??；腸道菌群；炎性指標(biāo)

炎癥性腸?。↖BD）是一類慢性腸道炎癥性疾病，主要包括有克羅恩病（CD）和潰瘍性結(jié)腸炎（UC）[1]。到目前為止，IBD的發(fā)病機(jī)制尚不明確，與遺傳、感染、患者免疫系統(tǒng)及腸道菌群變化和環(huán)境等因素密切相關(guān)[2-3]。IBD的臨床癥狀表現(xiàn)為腹痛、腹瀉等。近些年來(lái)，有研究表明我國(guó)炎癥性腸病的發(fā)病率每年呈上升的趨勢(shì)。該疾病容易反復(fù)發(fā)作，給患者的生活帶來(lái)很大的影響，同時(shí)連續(xù)使用藥物和外科干預(yù)也給患者帶來(lái)很大的精神負(fù)擔(dān)和經(jīng)濟(jì)損失。有文獻(xiàn)研究表明，IBM發(fā)病的主要原因是腸道黏膜自身免疫出現(xiàn)異常從而引發(fā)炎癥，而腸道中菌群結(jié)構(gòu)出現(xiàn)變化是導(dǎo)致免疫紊亂的關(guān)鍵因素。因此，腸道菌群結(jié)構(gòu)發(fā)生改變和IBD發(fā)病及炎癥性反應(yīng)等有一定的相關(guān)性。本次研究選取2015年8月～2016年9月在我院就診的116例潰瘍性結(jié)腸炎患者和54例克羅恩病患者為研究對(duì)象，另選54名健康志愿者作為對(duì)照組，對(duì)患者腸道菌群進(jìn)行研究，探討腸道菌群結(jié)構(gòu)的變化及其與相關(guān)性炎性指標(biāo)的關(guān)系，為臨床制定合理的治療方案以及合理的預(yù)后評(píng)估提供參考依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年8月～2016年9月醫(yī)院收診的116例UC患者和54 例CD患者為研究對(duì)象。UC患者年齡22～65歲、平均（45.5±5.5）歲，其中男63例、女53 例；CD患者年齡21～67歲、平均（44.9±5.8）歲，男33例、女21例；另選54名健康自愿者為對(duì)照組，年齡20～68歲、平均（44.5±5.2）歲，男34名、女20名。三組患者和健康自愿者在性別、年齡等資料方面差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），具有可比性。

1.2 方法

監(jiān)測(cè)和收集患者與健康志愿者的血沉、C-反應(yīng)蛋白、血白細(xì)胞和血小板這四項(xiàng)炎癥性指標(biāo)的相關(guān)數(shù)據(jù)。在無(wú)菌條件下分別取患者與健康志愿者自然排出的新鮮糞便約10 g置于厭氧罐中，然后立即送至實(shí)驗(yàn)室。本研究中選擇以下菌群：腸球菌（EC）、酵母菌（SB）、雙歧桿菌（BL）、消化球菌（PS）、小梭菌（CD）、腸桿菌（EMB）、葡萄球菌（SP）、擬桿菌（BD）、乳桿菌（LC）、真桿菌（ES）10種菌作為腸道菌群的代表，以瓊脂培養(yǎng)基準(zhǔn)備各菌型培養(yǎng)所需的選擇性培養(yǎng)基，需氧培養(yǎng)基：EC、SB、EMB、SP；厭氧菌培養(yǎng)基：BL、PS、BD、ES、CD、LC。參考日本岡知足法，細(xì)菌鑒定到屬的水平，檢測(cè)的下限為2×102CFU/g濕便，菌落數(shù)據(jù)均取其對(duì)數(shù)值LgN（CFU/g）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以例（n），百分?jǐn)?shù)（%）表示，采用x2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以“±s”表示，采用t檢驗(yàn)；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 腸道菌群數(shù)量

與對(duì)照組相比，UC患者腸內(nèi)的SB、BL、LC、EC、BD、PS、SC的數(shù)量明顯增加，而ES的數(shù)量則顯著下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；CD患者腸內(nèi)的SB、LC、BL、EC、BD、PS的數(shù)量有明顯增加，而SC、 ES的數(shù)量顯著下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 腸道菌群數(shù)量變化[LgN（CFU/g），（±s）

表1 腸道菌群數(shù)量變化[LgN（CFU/g），（±s）

病原菌對(duì)照組（n=54）UC組（n=116）CD組（n=54）SB1.62±0.332.30±0.422.78±0.35 BL3.22±0.625.21±0.544.93±0.41 LC3.52±0.225.63±0.134.63±0.45 EC3.60±0.456.61±0.246.89±0.29 BD2.96±0.395.65±0.274.44±0.53 PS4.18±0.346.36±0.266.24±0.33 SC1.97±0.603.62±0.310.89±0.32 ES2.39±0.671.63±0.251.14±0.31 EMB3.18±0.813.53±0.453.67±0.18 SP2.77±0.422.89±0.732.92±0.90

2.2 三組受試者腸道菌群陽(yáng)性檢出率

與對(duì)照組比，UC患者腸內(nèi)的BL、LC、SB、PS屬培養(yǎng)陽(yáng)性率顯著增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），CD患者腸內(nèi)的SB、BL、LC、PS屬培養(yǎng)陽(yáng)性檢出率顯著增高，ES培養(yǎng)陽(yáng)性檢出率顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 三組受試者腸道菌群陽(yáng)性檢出率

2.3 炎癥指標(biāo)

與對(duì)照組相比，高炎性指標(biāo)組UC患者SB的數(shù)量顯著高于對(duì)照組，其余菌種數(shù)量差異不明顯（P＞0.05）；CD患者EC的數(shù)量明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），其余菌種差異不明顯（P＞0.05），結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 炎性指標(biāo)組間菌群數(shù)的比較[LgN（CFU/g），（±s）

表3 炎性指標(biāo)組間菌群數(shù)的比較[LgN（CFU/g），（±s）

病原菌對(duì)照組UC組CD組SB1.44±0.362.59±0.431.45±0.39 BL4.45±0.224.43±0.234.42±0.38 LC6.35±0.456.38±0.506.36±0.42 EC6.01±0.256.02±0.137.72±1.05 BD5.93±0.245.95±0.345.96±0.45 PS5.99±0.186.01±0.246.02±0.24 SC4.03±0.274.06±0.324.02±0.19 ES1.81±0.101.84±0.111.82±0.12 EMB7.89±0.417.92±0.387.92±0.43 SP2.34±0.122.37±0.152.34±0.16

2.4 菌群數(shù)量與炎癥指標(biāo)相關(guān)性

UC組患者的ES（r=-0.21）、EC（r=-0.33）與白細(xì)胞數(shù)量呈負(fù)相關(guān)性，BL（r=-0.25）、EC（r=-0.32）、EMB（r=-0.24）分別與C-反應(yīng)蛋白呈負(fù)相關(guān)性，腸球菌屬（ r=-0.26）與血小板數(shù)量呈負(fù)相關(guān)性，SB（r=0.22）與血沉呈正相關(guān)性；CD患者SP（r=-0.35） 與血沉呈負(fù)相關(guān)性。腸道菌群與炎癥性腸病患者炎性指標(biāo)呈現(xiàn)弱相關(guān)關(guān)系。

3 討 論

近年來(lái)我國(guó)IBD發(fā)病率每年不斷上升，特別是UC患者。有研究提出腸道菌群失衡是導(dǎo)致IBD的發(fā)病的原因；也有研究表明腸道功能紊亂是IBD的主要因素， 明確IBD發(fā)病機(jī)制、制定合適的治療方案是目前臨床研究的重要方向。本研究發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，UC患者腸內(nèi)的SB、BL、LC、EC、BD、PS、SC的數(shù)量明顯增加，而ES的數(shù)量則顯著下降；而CD組患者腸內(nèi)的SB、LC、BL、EC、BD、PS的數(shù)量有明顯增加，而SC、ES的數(shù)量顯著下降，菌群數(shù)量變化與培養(yǎng)陽(yáng)性率變化結(jié)果基本相符。本次研究采用C-反應(yīng)蛋白、血小板、白細(xì)胞和血沉四個(gè)指標(biāo)評(píng)估IBD病情，炎性指標(biāo)組間比較結(jié)果表明：SB、EC數(shù)量增多容易引起患者炎癥性反應(yīng)，其他菌群數(shù)量差異不明顯，可能是SB和EC數(shù)量增加導(dǎo)致代謝產(chǎn)物和毒素增加，損害腸道黏膜，引發(fā)腸道炎癥的發(fā)生和加劇。本次研究發(fā)現(xiàn)，炎性指標(biāo)與菌群數(shù)量相關(guān)性較弱，相關(guān)系數(shù)r均小于0.4，不能明確表明炎癥指標(biāo)高低與菌群數(shù)量之間的確切關(guān)系。

[1] 譚 蓓,錢(qián)家鳴.炎癥性腸病與腸道菌群[J].中華內(nèi)科雜志,2015,54(5):399-402.

[2] Fava F,Danese S.Intestinal microbiota in inflammatory bowel disease: friend of foe[J].World journal of gastroenterology:W JG,2011,17(5):557.

[3] Frank D N,Robertson C E,Hamm C M,et al.Disease phenotype and genotype are associated with shifts in intestinal-associated microbiota in inflamm-atory bowel diseases[J].Inflammatory bowel diseases,2011,17(1):179.

R378.2

B

ISSN.2095-6681.2017.28.81.02

李 豆