吉林地區(qū)流式細(xì)胞術(shù)檢測白細(xì)胞抗原B27陽性率分析

張 敏 許友強 周婷婷 苗永迪 王 晶 孫 偉 李雨艷（吉林金域醫(yī)學(xué)檢驗所有限公司，吉林長春 130000）

人類白細(xì)胞抗原B27（HLA-B27）是第6號染色體HLA基因B座一個等位基因的表達(dá)產(chǎn)物，因與強直性脊柱炎（ankylosing spondylitis，AS）的高度相關(guān)性逐漸得到認(rèn)識[1-2]?；颊咴谠缙谟蟹α?、消瘦、長期或間斷的低熱、厭食、輕度貧血等癥狀。但是癥狀都比較輕，所以大多數(shù)患者都很難在早期發(fā)現(xiàn)病情，導(dǎo)致耽誤了治療，失去了最佳的治療時機[3]。研究發(fā)現(xiàn)，AS患者中HLA-B27抗原表達(dá)量明顯高于對照人群，并推斷HLA-B27與AS存在極大的關(guān)聯(lián)[4]。本研究對吉林省內(nèi)2 474例患者進(jìn)行分析，了解HLA-B27抗原陽性率在不同性別疑似病例中存在的差異，探討其在AS中的早期診斷價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年5月至2017年6月在吉林金域醫(yī)學(xué)檢驗所有限公司檢測的HLA-B27患者作為研究對象。其中男性1 467例，女性998例。

1.2 儀器與試劑

抗HLA-B27 FITC/CD3 PE熒光抗體（美國BD公司）、FC500 MCL 流式細(xì)胞儀（美國 貝克曼庫爾特公司）、校準(zhǔn)微球和溶血素（美國BD公司）、BD鞘液（美國BD公司）、小牛血清（Gibico）、多聚甲醛（國藥）。

1.3 方法

（1）取合格外周血樣本100μL，加入抗體至管底，振蕩混勻，避光室溫孵育15～20 min，加入2 mL溶血素-FACS Lysing solution（1×）溶解紅細(xì)胞。

（2）振蕩混勻，避光室溫孵育6～12 min至完全溶血。1 700 rpm/min，用1%小牛血清洗液2 mL洗滌，加入600 μL 1%多聚甲醛固定液，上機檢測。

2 結(jié)果

2.1 不同性別HLA-B27陽性表達(dá)分布情況

2 474例患者中陽性患者536例，陰性患者1 938例，陽性率21.66%。其中男性患者1 476例，陽性患者383例，陽性率25.95%，女性患者998例，陽性患者153例，陽性率15.33%，見表 1。

表1 不同性別HLA-B27陽性表達(dá)分布情況[例（%）]

圖1 男性、女性患者HLA-B27抗原陽性率

2.2 不同年齡HLA-B27陽性表達(dá)分布情況

2 474例患者中10歲以內(nèi)兒童，陽性患者45例，陽性率6.76%。11 ～ 20歲患者陽性患者26例，陽性率20.97%，21 ～ 30 歲陽性患者158例，陽性率37.44%，31 ～ 40歲陽性患者 131例，陽性率 30.75%，41 ～ 50歲陽性患者95例，陽性率26.61%，51 ～ 60歲陽性患者46例，陽性率16.54%，大于60歲陽性患者35例，陽性率21.67%。

2.3 男性患者不同年齡HLA-B27陽性表達(dá)分布情況

男性患者1476例其中10歲以內(nèi)兒童陽性患者為35例，陽性率8.01%，11 ～ 20歲陽性患者 19例，陽性率23.17%，21 ～ 30歲陽性患者125例，陽性率42.96%，31 ～ 40歲陽性患者 99例，陽性率 39.44%，41 ～ 50歲陽性患者56 例，陽性率31.28%，51 ～ 60歲陽性患者34例，陽性率25.37%，大于60歲陽性患者21例，陽性率20.59%。

2.4 女性患者不同年齡HLA-B27陽性表達(dá)分布情況

女性患者998例其中10歲以內(nèi)兒童陽性患者10例，陽性率4.36%，11 ～ 20歲陽性患者7例，陽性率16.67%，21 ～ 30 歲陽性患者 33例，陽性率 25.19%，31 ～ 40歲陽性患者32例，陽性率18.29%，41 ～ 50歲陽性患者39例，陽性率21.91%，51 ～ 60歲陽性患者12例，陽性率8.33%，大于60歲陽性患者14例，陽性率14.14%，見圖1。

3 討論與結(jié)論

本次研究顯示吉林省2474例患者，陽性率為21.66%。結(jié)果表明，男性患者陽性率為25.95%，明顯高于女性患者陽性為15.33%，這與鄒玲莉研究結(jié)果相似；不同年齡組結(jié)果表明21 ～ 30歲結(jié)果的陽性率37.44%，明顯優(yōu)于其他組別；不同性別不同年齡的分組結(jié)果表明男性女性患者21 ～ 30歲患者結(jié)果陽性率最高分別為42.96%，25.19 %，21 ～ 30歲男性患者陽性率是女性患者的1.7倍。

流式細(xì)胞術(shù)與傳統(tǒng)檢測方法相比，方法操作簡單，標(biāo)本用量少，穩(wěn)定性、特異性和重復(fù)性較好且檢測速度較快，是目前對HLA-B27最理想的檢測方法[5-6]。通過對吉林地區(qū)不同性別、年齡的HLA-B27的流行病學(xué)調(diào)查有助于揭示其在AS疾病發(fā)病機制中的作用[7-8]。