臨床分離新型隱球菌的耐藥性及臨床資料回顧性分析

朱波，徐和平，馬曉波

(廈門(mén)大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗(yàn)科，福建廈門(mén) 361003)

·調(diào)查研究·

臨床分離新型隱球菌的耐藥性及臨床資料回顧性分析

朱波，徐和平，馬曉波

(廈門(mén)大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗(yàn)科，福建廈門(mén) 361003)

目的了解臨床分離的新型隱球菌的分布、耐藥性及臨床治療效果。方法對(duì)2013年至2017年7月臨床總共分離的29株新型隱球菌，用Vitek 2 Compact全自動(dòng)微生物分析儀重新鑒定菌種，用ATB FUNGUS 3板條檢測(cè)抗菌藥物的敏感性。對(duì)臨床病例基礎(chǔ)疾病、治療及轉(zhuǎn)歸情況進(jìn)行回顧性分析。結(jié)果22例患者均經(jīng)病原學(xué)確診，其中中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染19例，血液感染5例，腹腔感染1例，胸腔感染2例，尿路感染2例,同時(shí)存在多部位感染6例。新型隱球菌對(duì)5-氟胞嘧啶和氟康唑的敏感率為93.10%和79.31%。臨床治療選擇5-氟胞嘧啶+兩性霉素B、氟康唑或聯(lián)合用藥。22例患者中，除去轉(zhuǎn)院4例，死亡1例，放棄治療6例，好轉(zhuǎn)出院11例。結(jié)論新型隱球菌除引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染外，也可引起全身多部位感染，應(yīng)警惕非中樞神經(jīng)系統(tǒng)隱匿性感染。早期病原學(xué)檢測(cè)對(duì)疾病的診治和預(yù)后十分重要，早期及時(shí)用藥和聯(lián)合用藥者預(yù)后較好。

新型隱球菌；感染；藥物敏感性

新型隱球菌是常見(jiàn)的深部真菌感染的病原體，常引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染，也可播散侵入其他部位，引起肺隱球菌病、腦膜炎以及侵害淋巴結(jié)、骨、皮膚、胸腔、腹腔及尿路等。隨著糖皮質(zhì)激素和免疫抑制劑的使用及新型隱球菌病原學(xué)檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展，非HIV感染患者的新型隱球菌感染率近年來(lái)有所升高[1]。新型隱球菌所致感染病程長(zhǎng)，死亡率很高，誤診也一直存在。本研究就我院近年來(lái)分離的29株新型隱球菌進(jìn)行重新鑒定和耐藥性檢測(cè)，并對(duì)患者的治療與轉(zhuǎn)歸情況進(jìn)行分析，以期為新型隱球菌感染的診治及預(yù)后判斷提供依據(jù)。

1 材料和方法

1.1菌株來(lái)源 我院2013年至2017年7月共培養(yǎng)出29株新型隱球菌，來(lái)源于臨床22例患者，其中分離自腦脊液19株、血液5株、中段尿2株、胸水2株、腹水1株。

1.2培養(yǎng)與鑒定 菌株復(fù)蘇用哥倫比亞血平板和沙保弱培養(yǎng)基均購(gòu)自鄭州安圖公司，35 ℃溫箱培養(yǎng)。用Vitek 2 Compact全自動(dòng)微生物分析儀及配套YST卡(法國(guó)生物梅里埃公司)進(jìn)行重新鑒定。質(zhì)控菌株新型隱球菌標(biāo)準(zhǔn)菌株(ATCC 32609)為本室保存。

1.3藥敏試驗(yàn) 采用ATB FUNGUS 3試劑條(法國(guó)生物梅里埃公司)以標(biāo)準(zhǔn)化微量肉湯稀釋法檢測(cè)新型隱球菌對(duì)5種常用抗真菌藥物的敏感性。藥敏質(zhì)控菌株白念珠菌ATCC 90028為本室保存。5-氟胞嘧啶與氟康唑折點(diǎn)參考范圍見(jiàn)參考文獻(xiàn)[1-3]。兩性霉素B、伊曲康唑和伏立康唑直接報(bào)告最低抑菌濃度(MIC)。

2 結(jié)果

2.1藥敏試驗(yàn)結(jié)果 5-氟胞嘧啶與氟康唑藥物敏感性試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。兩性霉素B、伊曲康唑和伏立康唑的MIC值中位數(shù)分別為0.5、0.125、0.06 μg/mL。

表1 29株新型隱球菌的藥敏結(jié)果[n(%)]

2.2臨床資料回顧 22例患者均經(jīng)病原學(xué)確診，其中6例為2種以上類型標(biāo)本均培養(yǎng)出新型隱球菌；22名患者中除3位無(wú)基礎(chǔ)疾病、1位宮內(nèi)妊娠29周外，其余基礎(chǔ)疾病涉及腎功能異常、糖尿病、高血壓、HIV感染、狼瘡性腎炎、肺結(jié)核、套細(xì)胞淋巴瘤等。臨床治療方案多選擇5-氟胞嘧啶+兩性霉素B、氟康唑或聯(lián)合用藥。22例患者中，除去轉(zhuǎn)院4例，死亡1例，放棄治療6例，好轉(zhuǎn)出院11例，治愈率為61.11%(11/18)。見(jiàn)表2。

3 討論

22名患者中基礎(chǔ)疾病有腎功能異常、糖尿病、肺隱球菌病、HIV感染、狼瘡性腎炎、肺結(jié)核、套細(xì)胞淋巴瘤等，大多患者免疫力受損或相對(duì)低下，易感性增加，引發(fā)感染和繼發(fā)播散感染。有研究指出2型糖尿病患者中新型隱球菌病高發(fā)[4]?；仡櫺园l(fā)現(xiàn)多部位感染的患者，尤其是腦膜炎合并其他部位感染者，感染重，治療效果差，預(yù)后較差。院內(nèi)完成治療的有18例，好轉(zhuǎn)11例，有7例死亡或危重放棄治療，治愈率61.11%，但因樣本量較小，總體提示新型隱球菌感染治愈率不高。本研究中存在2例新型隱球菌尿路感染，目前相關(guān)病例報(bào)道比較少，應(yīng)予以重視。

新型隱球菌性腦膜炎患者由于顱內(nèi)高壓，治療相對(duì)困難，在臨床治療分期中需要誘導(dǎo)治療，典型的隱球菌腦膜炎的治療包括誘導(dǎo)治療期，鞏固治療期以及額外的、防止復(fù)發(fā)的維持治療期。中國(guó)隱球菌感染診治專家共識(shí)推薦用兩性霉素B脂質(zhì)體聯(lián)合胞嘧啶抗真菌治療[5]，也有學(xué)者嘗試用胞嘧啶和氟康唑聯(lián)合用藥并取得不錯(cuò)的效果[6]。氟康唑作為常用的唑類抗真菌藥物，敏感率較高。在部分指南里，也有推薦使用氟康唑用于誘導(dǎo)期治療[7]。在好轉(zhuǎn)出院的患者中，聯(lián)合用藥取得不錯(cuò)效果。但也有部分好轉(zhuǎn)出院患者療程較短，主要由于經(jīng)濟(jì)原因而少于我國(guó)專家共識(shí)建議的誘導(dǎo)期8周。但國(guó)內(nèi)和國(guó)外的指南在治療時(shí)間和藥物劑量上不太一致，可能是由于人群差異導(dǎo)致[5，7]。

本研究病例時(shí)間跨度稍長(zhǎng)，未能對(duì)患者的腦脊液、血液、痰液、尿液、皮膚、胸腹水等篩查，僅對(duì)分離培養(yǎng)出的菌株進(jìn)行分析，是本研究的不足之處。

表2 新型隱球菌感染臨床資料及治療情況

注：病例5的肺組織標(biāo)本未能培養(yǎng)出新型隱球菌，僅病理確認(rèn)肺隱球菌病。

[1]CLSI.Reference method for broth dilution antifungal susceptibility testing of yeasts[S]. CLSI M27-A3, 2017.

[2]Aller AI, Martin-Mazuelos E, Lozano F,etal. Correlation of fluconazole MICs with clinical outcome in cryptococcal infection[J]. Antimicrob Agents Chemother，2000，44(6)：1544-1548.

[3]Cuenca-Estrella M, Lee-Yang W, Ciblak MA,etal. Comparative evaluation of NCCLS M27-A and EUCAST broth microdilution procedures for antifungal susceptibility testing ofCandidaspecies[J]. Antimicrob Agents Chemother，2002，46(11): 3644-3647.

[4]Li Y, Fang W, Jiang W,etal. Cryptococcosis in patients with diabetes mellitus Ⅱ in mainland China: 1993-2015[J].Mycoses, 2017,60(11):706-713.

[5]中國(guó)真菌學(xué)雜志編輯委員會(huì)．隱球菌感染診治專家共識(shí)[J].中國(guó)真菌學(xué)雜志,2010, 5(2):65-68．

[6]Yao ZW, Lu X, Shen C,etal. Comparison of flucytosine and fluconazole combined with amphotericin B for the treatment of HIV-associated cryptococcal meningitis: a systematic review and meta-analysis[J]Eur J Clin Microbiol Infect Dis,2014,33(8):1339-1344.

[7]Makadzange AT, McHugh G. New approaches to the diagnosis and treatment of cryptococcal meningitis[J].Semin Neurol, 2014, 34(1):47-60.

2017-09-06)

(本文編輯：劉群)

10.13602/j.cnki.jcls.2017.11.19

朱波，1978年生，男，主管技師，碩士，從事臨床微生物耐藥機(jī)制研究。

R446.5

A