飼用凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌組合使用對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能影響初探

王志祥，白華毅，王桂瑛，楊保和，袁明鳳，陳朝勇，廖國(guó)周，王雪峰，鄒建華，程志斌*

（ 1.云南省祿勸縣畜牧獸醫(yī)總站，云南 祿勸 651500；2.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)，昆明 650201；3.云南快大多畜牧科技有限公司，云南 玉溪 650201；4.昆明三正生物科技（集團(tuán)）有限公司，昆明 650217；5.云南省西雙版納州勐臘縣畜牧獸醫(yī)站，云南 勐臘 666300）

飼用凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌組合使用對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能影響初探

王志祥1，白華毅2，王桂瑛2，楊保和3，袁明鳳3，陳朝勇4，廖國(guó)周2，王雪峰2，鄒建華5，程志斌2*

（ 1.云南省祿勸縣畜牧獸醫(yī)總站，云南 祿勸 651500；2.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)，昆明 650201；3.云南快大多畜牧科技有限公司，云南 玉溪 650201；4.昆明三正生物科技（集團(tuán)）有限公司，昆明 650217；5.云南省西雙版納州勐臘縣畜牧獸醫(yī)站，云南 勐臘 666300）

將28日齡斷奶仔豬32頭（杜×長(zhǎng)×大）分為4個(gè)處理組：對(duì)照組（抗生素組）、試驗(yàn)組1（凝結(jié)芽孢桿菌組）、試驗(yàn)組2（枯草芽孢桿菌組）、試驗(yàn)組3（同時(shí)添加凝結(jié)芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌組），研究凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌組合使用對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能和飼料養(yǎng)分消化率的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明，平均日增重指標(biāo)，試驗(yàn)組1和試驗(yàn)組3差異不顯著（P>0.05），均顯著高于對(duì)照組和試驗(yàn)組2（P<0.05）。料肉比指標(biāo)，試驗(yàn)組1顯著低于其他3個(gè)處理組（P<0.05）。試驗(yàn)組1仔豬對(duì)飼料的干物質(zhì)表觀消化率與對(duì)照組差異不顯著（P>0.05），均顯著高于試驗(yàn)組2（P<0.05）。試驗(yàn)結(jié)果表明，仔豬商業(yè)飼料在組合使用多種常規(guī)飼用抗生素的基礎(chǔ)上，單一添加飼用凝結(jié)芽孢桿菌能夠進(jìn)一步改善斷奶仔豬的生產(chǎn)性能，然而單一添加枯草芽孢桿菌或凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌組合使用均沒(méi)有獲得顯著的正效應(yīng)。

凝結(jié)芽孢桿菌；枯草芽孢桿菌；仔豬；生長(zhǎng)性能

凝結(jié)芽孢桿菌自2013年12月列入我國(guó)農(nóng)業(yè)部《飼料添加劑品種目錄》以來(lái)，動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)家與飼料企業(yè)配方師一直在研究飼用凝結(jié)芽孢桿菌在畜禽飼料中的應(yīng)用技術(shù)[1-2]。尤其在減少斷奶仔豬飼用抗生素使用領(lǐng)域取得一定成果與進(jìn)展[3-6]。充分肯定飼用凝結(jié)芽孢桿菌的應(yīng)用效果與商業(yè)價(jià)值[7-9]。

我國(guó)農(nóng)業(yè)部《飼料添加劑品種目錄》規(guī)范使用的飼用微生態(tài)制劑有34種，除了凝結(jié)芽孢桿菌外，市場(chǎng)常見(jiàn)的飼用微生態(tài)制劑種類還包括：酵母菌、枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、屎腸球菌、糞腸球菌、丁酸梭菌等6種，且當(dāng)前商業(yè)推廣的飼用微生態(tài)產(chǎn)品，多為多種菌種的復(fù)合制劑產(chǎn)品。這一趨勢(shì)提示，在確定單一飼用凝結(jié)芽孢桿菌使用效果的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步研究凝結(jié)芽孢桿菌與其他飼用微生態(tài)制劑的組合效果，以支持商業(yè)復(fù)合微生態(tài)制劑產(chǎn)品的研發(fā)與推廣，具有現(xiàn)實(shí)意義[3-7]。鑒于當(dāng)前這方面的研究報(bào)道極少，本試驗(yàn)探索性開(kāi)展飼用凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌組合使用對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能影響的研究，為“無(wú)抗、減抗”仔豬飼料的研發(fā)及復(fù)合飼用微生態(tài)制劑的推廣奠定科學(xué)基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

飼用凝結(jié)芽孢桿菌制劑1×1010cfu·g-1，飼用枯草芽孢桿菌制劑2×1010cfu·g-1，均由昆明三正生物科技（集團(tuán)）有限公司提供。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與試驗(yàn)設(shè)計(jì)

按照日齡一致、體重相近的原則，選擇28日齡斷奶健康商品閹公豬（杜×長(zhǎng)×大）32只，分為4個(gè)處理組，每組8只，開(kāi)展試驗(yàn)，所有試驗(yàn)豬代謝籠飼養(yǎng)。對(duì)照組（抗生素組），添加吉他霉素50 mg· kg-1、土霉素50 mg· kg-1、金霉素75 mg·kg-1。在對(duì)照組日糧及預(yù)混合飼料基礎(chǔ)上，試驗(yàn)組1添

加飼用凝結(jié)芽孢桿菌500 g·t-1；試驗(yàn)組2添加飼用枯草芽孢桿菌500 g·t-1；試驗(yàn)組3同時(shí)添加飼用凝結(jié)芽孢桿菌500 g·t-1和飼用枯草芽孢桿菌500 g·t-1。

1.3 試驗(yàn)飼糧

試驗(yàn)采用“玉米-豆粕-魚粉”型基礎(chǔ)日糧，參照NRC（1998）豬營(yíng)養(yǎng)需要標(biāo)準(zhǔn)并結(jié)合云南省市場(chǎng)實(shí)際情況配制試驗(yàn)日糧，見(jiàn)表1。試驗(yàn)飼料由云南快大多畜牧科技有限公司生產(chǎn)。

1.4 飼養(yǎng)管理

飼養(yǎng)試驗(yàn)在云南省祿勸縣畜牧獸醫(yī)總站豬場(chǎng)進(jìn)行，在試驗(yàn)期每天8:00、12:30、18:00定時(shí)飼喂，自由飲水，免疫、消毒、衛(wèi)生等飼養(yǎng)管理按常規(guī)進(jìn)行。試驗(yàn)期為28 d。

1.5 測(cè)定指標(biāo)

1.5.1 生長(zhǎng)性能

測(cè)定豬體重、采食量，計(jì)算平均日增重、平均日采食量、料肉比等指標(biāo)。

1.5.2 飼料表觀消化率試驗(yàn)

采用內(nèi)源指示劑法測(cè)定仔豬對(duì)飼料主要營(yíng)養(yǎng)組分的表觀消化率[10]。試驗(yàn)從第14天開(kāi)始，連續(xù)4 d收集糞樣，-20℃保存。待試驗(yàn)結(jié)束后，糞樣統(tǒng)一解凍，于60±3℃烘干，粉碎后待檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)室分析測(cè)定干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗纖維等表觀消化率，由云南農(nóng)業(yè)大學(xué)完成。

1.6 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0軟件One Way ANOVA進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，并進(jìn)行Duncan's多重比較，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 飼用凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌組合使用對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能的影響

飼用凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌組合使用對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能的影響見(jiàn)表2。

由表2可知，試驗(yàn)結(jié)束仔豬56日齡的末體重，單一添加凝結(jié)芽孢桿菌的試驗(yàn)組1仔豬體重顯著高于對(duì)照組（抗生素組）（P<0.05），而單一添加枯草芽孢桿菌的試驗(yàn)組2仔豬體重與對(duì)照組差異不顯著（P>0.05），同時(shí)使用凝結(jié)芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌的試驗(yàn)組3仔豬體重雖然大于對(duì)照組，但差異不顯著（P>0.05）。平均日增重指標(biāo)：試驗(yàn)組1和試驗(yàn)組3差異不顯著（P>0.05），均顯著高于對(duì)照組和試驗(yàn)組2（P<0.05），且對(duì)照組和試驗(yàn)組2差異不顯著（P>0.05）。料肉比指標(biāo)：試驗(yàn)組1顯著低于其他3個(gè)處理組（P<0.05）。此外，試驗(yàn)全期4個(gè)處理組仔豬腹瀉率均在實(shí)際養(yǎng)殖合理的范圍內(nèi)。

表1 試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧配方及營(yíng)養(yǎng)水平

表2 飼用凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌組合使用對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能的影響

2.2 飼用凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌組合使用對(duì)飼料養(yǎng)分表觀消化率的影響

飼用凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌組合使用對(duì)飼料養(yǎng)分表觀消化率的影響見(jiàn)表3。

由表3可知，試驗(yàn)組1仔豬對(duì)飼料的干物質(zhì)表觀消化率與對(duì)照組差異不顯著（P>0.05），均顯著高于試驗(yàn)組2（P<0.05）。試驗(yàn)組3干物質(zhì)表觀消化率與對(duì)照組相比差異不顯著（P>0.05）。粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗纖維等表觀消化率指標(biāo)，4個(gè)處理組之間差異不顯著（P>0.05）。

表3 飼用凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌組合使用對(duì)飼料養(yǎng)分表觀消化率的影響%

3 討論

2016年7月26 日，我國(guó)農(nóng)業(yè)部公告第2428號(hào)公布于2017年4月30日全面禁止使用硫酸黏菌素。2017年9月8日，我國(guó)農(nóng)業(yè)部針對(duì)高銅、高鋅發(fā)布了《飼料添加劑安全使用規(guī)范》的修訂意見(jiàn)征求稿，將<25 kg仔豬日糧銅的最高添加限量從200 mg·kg-1下調(diào)為125 mg·kg-1，同時(shí)將<25 kg仔豬日糧鋅的最高添加限量從2 250 mg·kg-1下調(diào)為150 mg·kg-1。這一修訂意見(jiàn)提示，我國(guó)廣大飼料企業(yè)配方師廣泛采用降低仔豬腹瀉的“三大”傳統(tǒng)組合方案：以硫酸黏菌素為主的組合飼用抗生素、高銅配方、高鋅配方，即將退出我國(guó)飼料工業(yè)與養(yǎng)豬業(yè)。這也催促?gòu)V大飼料企業(yè)及配方師，盡快完善“替抗”方案和選用優(yōu)質(zhì)“替抗”產(chǎn)品，以保障斷奶仔豬生產(chǎn)性能。據(jù)此，本文初步探索了飼用微生態(tài)制劑凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌在斷奶仔豬飼料中的組合使用技術(shù)及效果。

本試驗(yàn)對(duì)照組參考當(dāng)前飼料企業(yè)預(yù)防斷奶仔豬腹瀉的實(shí)際生產(chǎn)配方，添加了吉他霉素、土霉素、金霉素。鑒于當(dāng)前我國(guó)飼料工業(yè)與養(yǎng)豬業(yè)水平處于從“減抗”到“無(wú)抗”的過(guò)渡期，并沒(méi)有全面禁止飼用抗生素，因此為了使試驗(yàn)結(jié)果更接近于真實(shí)生產(chǎn)情況，在對(duì)照組日糧及預(yù)混合飼料基礎(chǔ)上，試驗(yàn)組1添加飼用凝結(jié)芽孢桿菌500 g·t-1；試驗(yàn)組2添加飼用枯草芽孢桿菌500 g·t-1；試驗(yàn)組3同時(shí)添加飼用凝結(jié)芽孢桿菌500 g·t-1和飼用枯草芽孢桿菌500 g·t-1。表3結(jié)果表明，4個(gè)處理組仔豬腹瀉率（2%~4%）均在合理的實(shí)際養(yǎng)殖生產(chǎn)水平范圍內(nèi)，研究表明試驗(yàn)日糧配方符合實(shí)際生產(chǎn)情況，試驗(yàn)數(shù)據(jù)能夠滿足廣大飼料企業(yè)配方師逐步實(shí)施“減抗”的需求[11-14]。

添加了飼用凝結(jié)芽孢桿菌（5×106cfu·g-1）的試驗(yàn)組1和試驗(yàn)組3兩組仔豬的平均日增重差異不顯著，均顯著高于對(duì)照組（抗生素組）和試驗(yàn)組2（枯草芽孢桿菌組）。這一結(jié)果表明，在所有試驗(yàn)仔豬腹瀉率正常、健康狀況良好的條件下，添加飼用凝結(jié)芽孢桿菌能夠進(jìn)一步提高28~56日齡仔豬的生長(zhǎng)速度。高書鋒等研究了3個(gè)劑量（5×106、7.5×106、1×107cfu·g-1）凝結(jié)芽孢桿菌對(duì)28日齡斷奶仔豬（7 kg）生長(zhǎng)性能的影響，結(jié)果表明，與對(duì)照組（金霉素50 mg·kg-1）相比，3個(gè)添加了飼用凝結(jié)芽孢桿菌的試驗(yàn)組仔豬平均日增重均顯著提高[4]。本試驗(yàn)結(jié)果與高書鋒等的報(bào)道一致。

試驗(yàn)4個(gè)處理組的試驗(yàn)仔豬在平均日采食量差異不顯著的條件下，試驗(yàn)組1料肉比優(yōu)于其他3個(gè)處理組。結(jié)果表明，在日糧含有規(guī)范使用的抗生素基礎(chǔ)上，飼用凝結(jié)芽孢桿菌能夠進(jìn)一步改善仔豬的飼料轉(zhuǎn)化效率[3-6]。表4分析仔豬對(duì)飼料的表觀消化率表明，試驗(yàn)組1的干物質(zhì)消化率最高，印證了表3生產(chǎn)性能的結(jié)果。在日糧含有抗生素的基礎(chǔ)上，使用較高劑量（1×107cfu·g-1）的飼用枯草芽孢桿菌降低了飼料轉(zhuǎn)化效率。

表3結(jié)果表明，試驗(yàn)組2添加枯草芽孢桿菌的仔豬料肉比最高，表4進(jìn)一步分析表觀消化率表明，試驗(yàn)組2的干物質(zhì)消化率最低。在日糧含有抗生素的基礎(chǔ)上，試驗(yàn)組3同時(shí)添加飼用凝結(jié)芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌，仔豬綜合生產(chǎn)性能反而略低于單一使用凝結(jié)芽孢桿菌的試驗(yàn)組1。造成以上結(jié)果的原因包括：選用優(yōu)質(zhì)的飼用凝結(jié)芽孢桿菌制劑產(chǎn)品是獲得斷奶仔豬良好生產(chǎn)性能的關(guān)鍵。因?yàn)榘凑占?xì)菌功能劃分，凝結(jié)芽孢桿菌在仔豬腸道內(nèi)增殖、增生過(guò)程中產(chǎn)生L-乳酸，因此凝結(jié)芽孢桿菌屬于乳酸菌類細(xì)菌，具有直接殺菌抑菌功效[7,15]。研究表明采用牛津杯法實(shí)驗(yàn)表明，凝結(jié)芽孢桿菌體外強(qiáng)效抑制致病大腸桿菌[16-19]。周映華等飼養(yǎng)試驗(yàn)表明，飼喂凝結(jié)芽孢桿菌能夠顯著降低斷奶仔豬糞便中的致病大腸桿菌數(shù)量[6]?？莶菅挎邨U菌抑制豬腸道大腸桿菌的試驗(yàn)一直沒(méi)有確證?，F(xiàn)有的一些綜述只是假設(shè)為枯草芽孢桿菌的“腸道占位”理論[13]。但在實(shí)際生產(chǎn)的復(fù)雜養(yǎng)殖條件下，這一假設(shè)不足以保障仔豬腸道菌群平衡，因?yàn)闆](méi)有枯草芽孢桿菌的直接抑菌證據(jù)，這也是枯草芽孢桿菌在仔豬斷奶料中使用效果不穩(wěn)定的根本原因[13]。不同微生態(tài)制劑之間是協(xié)同、還是頡頏效應(yīng)決定了復(fù)合飼用微生態(tài)制劑的實(shí)際效果[20]。姚曉紅等和趙鈺等采用牛津杯法試驗(yàn)表明，凝結(jié)芽孢桿菌體外對(duì)枯草芽孢桿菌具有一定抑制作用[17-18]。與本試驗(yàn)的結(jié)果吻合，與對(duì)照組添加多種抗生素相比，單一添加飼用凝結(jié)芽孢桿菌能夠進(jìn)一步改善斷奶仔豬的生產(chǎn)性能，但是凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌組合使用時(shí)沒(méi)有獲得顯著的正效應(yīng)。這一結(jié)果進(jìn)一步表明，當(dāng)前市場(chǎng)大量銷售的凝結(jié)芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌復(fù)合產(chǎn)品，其作用效果與機(jī)理有待進(jìn)一步研究。

4 小結(jié)

試驗(yàn)結(jié)果表明，在組合使用多種常規(guī)飼用抗生素的基礎(chǔ)上，單一添加飼用凝結(jié)芽孢桿菌能夠進(jìn)一步改善斷奶仔豬的生產(chǎn)性能，表現(xiàn)在腹瀉率和料肉比降低、生長(zhǎng)速度提高方面。然而，單一添加枯草芽孢桿菌或凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌組合使用均沒(méi)有獲得顯著的正效應(yīng)。

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Effects of Combined Use of Bacillus Coagulans and Bacillus Subtilis on Growth Performance of Piglets

WANG Zhixiang1,BAI Huayi2,WANG Guiying2,YANG Baohe3,YUAN Mingfeng3,CHEN Chaoyong4,LIAO Guozhou2,WANG Xuefeng2,ZOU Jianhua5,CHENG Zhibin2*

（1.Animal Husbandry and Veterinary Station of Luquan County,Luquan 651500,Yunnan China;2.Yunnan Agricultural University,Kunming 650201,Yunnan China;3.Yunnan Kuaidaduo Animal Husbandry Technology Co.,Ltd.,Yuxi 653100,Yunnan China;4.Kunming Sanzheng Biotechnology Co.,Ltd.,Kunming 650217,Yunnan China;5.Animal Husbandry and Veterinary Station of Mengla County,Mengla 666300,Yunnan China）

The objective of this experiment was to study the effects of Bacillus coagulans and Bacillus subtilis on the growth performance and the nutrient utilization in weaned piglets.Thirty two Duroc×Landrance×York piglets at the age of 28 d were devided into four treatment groups,including the control group(antibiotic treatment),group 1(addition of Bacillus coagulans),group 2(addition of Bacillus subtilis),and group 3(combination use of Bacillus coagulans and Bacillus subtilis).The results showed that in the aspect of the average daily gain index,the difference between the experimental group 1 and the test group 3 was not significant(P>0.05),which was significantly higher than that of the control group and the experimental group 2(P<0.05).In the aspect of feed to meat ratio,the experimental group 1 was significantly lower than the other three treatment groups(P<0.05).The dry matter apparent digestibility of the piglets in the test group 1 was not significantly different from that of the control group(P>0.05),which was significantly higher than that of the control group(P<0.05),and the experimental group 2 was significantly higher than that of the control group.These findings suggested the Bacillus coagulans additive in weaned piglet diets could enhance the growth performance and nutrient utilization,but the addition of Bacillus subtilis or the combination use of Bacillus subtilis and Bacillus coagulans could not achieve the further improvement of the growth performance on the base of the conventional antibiotic diet.

Bacillus coagulans;Bacillus subtilis;weaned piglet;growth performance

S816.7；S828

A

1001-0084（2017）11-0008-05

2017-09-10

云南省省院省?？萍己献鲗ｍ?xiàng)（2015IB011）；昆明三正生物科技（集團(tuán)）有限公司云南省創(chuàng)新型企業(yè)試點(diǎn)項(xiàng)目、昆明市科技計(jì)劃項(xiàng)目（昆科計(jì)字：2013-02-06-A-G-02-3053）

王志祥（1965-），男，云南祿勸人，高級(jí)畜牧師，主要從事畜牧學(xué)研究。

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E-mail:chengzb99@163.com。