肺結(jié)核患者痰結(jié)核桿菌檢驗(yàn)的方法及效果分析

李 嫻 袁若愚 顧文超

(南通大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇 南通 226001)

肺結(jié)核患者痰結(jié)核桿菌檢驗(yàn)的方法及效果分析

李 嫻 袁若愚 顧文超

(南通大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇 南通 226001)

目的 分析肺結(jié)核患者痰結(jié)核桿菌檢驗(yàn)的方法及效果。方法 選擇2016年1月—2016年12月在我院接受治療的肺結(jié)核患者75例，分別經(jīng)由PCR檢查以及痰涂片檢查，分析兩種檢查結(jié)果陽(yáng)性率。結(jié)果 75例肺結(jié)核患者經(jīng)痰涂片檢出陽(yáng)性20例，約占26.67%，經(jīng)PCR檢查，痰結(jié)核桿菌陽(yáng)性者55例，約占73.33%；PCR檢查結(jié)果陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組，差異顯著，χ2=28.8235，Plt;0.05。結(jié)論 肺結(jié)核患者經(jīng)由PCR方法檢驗(yàn)痰結(jié)核桿菌準(zhǔn)確率較高，建議進(jìn)一步在臨床應(yīng)用及推廣。

肺結(jié)核；結(jié)核桿菌；痰涂片；PCR

肺結(jié)核是一種臨床常見(jiàn)的呼吸系統(tǒng)傳染病，主要由結(jié)核桿菌感染引起。我國(guó)目前已經(jīng)成為肺結(jié)核發(fā)病的重災(zāi)區(qū)，若未能及時(shí)得到有效治療，可導(dǎo)致患者病情進(jìn)一步發(fā)展，甚至發(fā)展至難治性肺結(jié)核。通常情況下，肺結(jié)核多經(jīng)X線檢出，但很多肺結(jié)核患者無(wú)典型影像學(xué)特征[1]。PCR是一種在臨床上應(yīng)用范圍比較廣泛的檢驗(yàn)方法，主要用于生化檢驗(yàn)。本次研究選擇2016年1月—2016年12月在我院接受治療的肺結(jié)核患者75例，分別經(jīng)由PCR檢查以及痰涂片檢查，分析兩種檢查結(jié)果陽(yáng)性率，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2016年1月—2016年12月在我院接受治療的肺結(jié)核患者75例，其中男性65例，女性10例，年齡18～70歲，平均年齡(30.54±9.85)歲，病程4個(gè)月～45年，平均病程(29.60±10.11)年；75例中包括復(fù)治者11例，約占14.67%；主要臨床表現(xiàn)為咳嗽、氣短、咯痰、胸痛、乏力、納差、發(fā)熱、盜汗以及消瘦等[2]。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)臨床資料完整，研究中途無(wú)脫出；(2)入院后給予CT檢查、肺組織活檢等，結(jié)合藥敏試驗(yàn)結(jié)果、臨床表現(xiàn)，明確肺結(jié)核診斷；(3)精神系統(tǒng)正常，能夠與人正常交流，能夠閱讀文字資料；(4)對(duì)本次研究?jī)?nèi)容知情，自愿參與，患者本人、家屬或法定代理人同意與醫(yī)院簽訂知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)臨床資料不完整，經(jīng)溝通后，不愿意配合本次研究者；(2)除肺結(jié)核以外的其他傳染性疾病，結(jié)核桿菌感染其他臟器[3]；(3)腫瘤，凝血障礙、白血病等血液系統(tǒng)疾??；(4)心肝腎等嚴(yán)重臟器疾??；(5)其他不適合參加本次研究者。

1.2檢驗(yàn)方法 所有患者均收集其晨起痰液標(biāo)本，即晨起深呼吸后，咳痰，由專(zhuān)門(mén)容器收集；若患者無(wú)法咯出痰液，則收集其咽拭子標(biāo)本，即肺部分泌物[4]。所有標(biāo)本采集完畢后送檢實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢驗(yàn)，檢驗(yàn)方法包括痰涂片和PCR。

1.2.1檢驗(yàn)儀器及試劑 光學(xué)顯微鏡(奧林巴斯CX23)，實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀(安捷論Mx3000)；試劑為與檢驗(yàn)儀器配套試劑。其他主要檢驗(yàn)研究?jī)x器以及試劑包括：(1)高速離心機(jī)及微型離心機(jī)；(2)微型混勻器；(3)水浴箱；(3)冰箱，-80℃；(4)生物安全柜；(5)干式恒溫箱；石炭酸復(fù)紅染液，95%乙醇等。

1.2.2痰涂片培養(yǎng) 痰液標(biāo)本經(jīng)尼式抗酸染色后，涂片，置于光學(xué)顯微鏡下觀察，3～9條/100視野可診斷為陽(yáng)性[5]；閱片后，玻片經(jīng)脫油干燥后按照序號(hào)妥善保存，以備復(fù)檢。

1.2.3PCR檢查 取適當(dāng)NaOH溶液，與痰液標(biāo)本進(jìn)行混合，置于37℃環(huán)境下，停留40 min；混合液進(jìn)入離心機(jī)離心，去除上清液，將剩下混合液使用生理鹽水沖洗處理，直至檢驗(yàn)pH結(jié)果為中性。按照熒光值變化情況，評(píng)估結(jié)核桿菌檢驗(yàn)陽(yáng)性率。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 選擇SPSS18.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，P≤0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

75例肺結(jié)核患者經(jīng)痰涂片檢出陽(yáng)性20例，約占26.67%，經(jīng)PCR檢查，痰結(jié)核桿菌陽(yáng)性者55例，約占73.33%。PCR檢查結(jié)果陽(yáng)性率明顯高于痰涂片檢查，差異顯著，χ2=28.8235，Plt;0.01。見(jiàn)表1。

表3 兩種檢驗(yàn)方法結(jié)果比較

3 討 論

肺結(jié)核是一種常見(jiàn)的呼吸系統(tǒng)傳染性疾病，傳播速度很快，若未能及時(shí)接受有效診斷及治療，很容易引發(fā)結(jié)核桿菌感染其他臟器或系統(tǒng)，比如骨結(jié)核、腸道結(jié)核、腎臟結(jié)核，不僅帶給患者較大痛苦，還能提高治療難度，加速病情進(jìn)展，延長(zhǎng)治療時(shí)間，增加臟器功能衰竭風(fēng)險(xiǎn)[6]。隨著我國(guó)醫(yī)療水平的不斷深入發(fā)展，對(duì)肺結(jié)核防控力度的逐步加強(qiáng)，加上民眾對(duì)于醫(yī)療衛(wèi)生要求的逐漸提高，綜合作用之下，很多結(jié)核患者獲得了及時(shí)有效的治療[7]。但據(jù)醫(yī)學(xué)調(diào)查顯示，肺結(jié)核患者發(fā)病率仍然居高不下，現(xiàn)已成為全世界突出的公共衛(wèi)生問(wèn)題。

肺結(jié)核發(fā)病早期，并無(wú)典型臨床表現(xiàn)，而且由于癥狀復(fù)雜多樣，很容易被其他疾病所掩蓋，出現(xiàn)誤診及漏診情況，致使病情進(jìn)一步發(fā)展，不利于治療及預(yù)后。肺結(jié)核病情一般比較長(zhǎng)，通常根據(jù)痰菌檢測(cè)結(jié)果判斷臨床療效，而準(zhǔn)確的檢驗(yàn)結(jié)果是掌握當(dāng)前病情、調(diào)整治療計(jì)劃，判斷未來(lái)病情走向的重要依據(jù)。因此，對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確率、靈敏度要求比較高。通常而言，令人滿(mǎn)意的檢驗(yàn)需要具備安全性好、準(zhǔn)確率高、經(jīng)濟(jì)性?xún)?yōu)良、便于推廣等特點(diǎn)[8]。結(jié)核患者痰標(biāo)本涂片檢驗(yàn)具有經(jīng)濟(jì)性較好，推廣難度不高等特點(diǎn)，但存在著準(zhǔn)確率低及靈敏度不高等缺陷，這導(dǎo)致其臨床診斷價(jià)值不高。PCR檢驗(yàn)是目前廣泛應(yīng)用于臨床的一種檢驗(yàn)方法，主要通過(guò)對(duì)靶向序列互補(bǔ)的特異性熒光雙標(biāo)記微生物核苷酸探針，根據(jù)受檢標(biāo)本特異性PCR擴(kuò)增產(chǎn)物評(píng)估檢查結(jié)果，不僅適用于檢驗(yàn)痰液標(biāo)本，人體其他體液標(biāo)本，比如血液、胸腔積液以及宮頸分泌物等均能夠使用PCR方法檢驗(yàn)。本次研究中，75例結(jié)核患者經(jīng)PCR檢查結(jié)果陽(yáng)性率73.33%明顯高于對(duì)照組26.67%，χ2=28.8235，Plt;0.05。

此外，可通過(guò)支氣管鏡、胸膜標(biāo)本活檢等方法對(duì)肺結(jié)核患者進(jìn)行診斷。但由于這些方法屬于有創(chuàng)檢查，花費(fèi)較高，而且使用時(shí)需醫(yī)療機(jī)構(gòu)滿(mǎn)足一定的條件，因此存在一定的推廣難度。抽血檢驗(yàn)肺結(jié)核的血清標(biāo)志物也是肺結(jié)核的診斷方法之一，比如檢驗(yàn)MMP9血清蛋白、S100A9蛋白、SOD3血清蛋白等。

總之，肺結(jié)核患者經(jīng)由PCR方法檢驗(yàn)痰結(jié)核桿菌準(zhǔn)確率較高，診斷價(jià)值良好，有助于評(píng)估治療效果，調(diào)整治療方案，有利于預(yù)后，建議進(jìn)一步在臨床應(yīng)用及推廣。

[1] 向啟云，韓宇，莊倩，等.結(jié)核患者痰結(jié)核桿菌檢驗(yàn)的方法探討[J].中國(guó)社區(qū)醫(yī)師，2016,32(20)：132-133.

[2] 楊巍巍.結(jié)核患者痰結(jié)核桿菌檢驗(yàn)的方法探討[J].中國(guó)醫(yī)藥指南，2013,11(14)：258-259.

[3] 周玉娟，王飛.189例患者分泌物三種結(jié)核桿菌檢測(cè)方法的對(duì)比分析[J].湖北中醫(yī)雜志，2011,33(4)：50.

[4] 古莉冰，朱玉蘭，王佃鵬，等.結(jié)核分枝桿菌雙重實(shí)時(shí)RT-PCR檢測(cè)方法的研究[J].中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué)，2012,12(6)：756-758.

[5] 葛燕萍，張青.痰標(biāo)本RNA恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)對(duì)活動(dòng)性肺結(jié)核的臨床診斷價(jià)值[J].中國(guó)防癆雜志，2016,38(9)：742-746.

[6] 代穎.談肺結(jié)核病的診斷與預(yù)防[J].大家健康，2013,7(7)：180-181.

[7] 王泉，吳龍章，李君蓮，等.新疆烏魯木齊市2009-2011年非結(jié)核分支桿菌藥物敏感性試驗(yàn)結(jié)果分析[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2012,28(22)：3827-3829.

[8] 郭春梅，李玉梅，劉佃香.肺結(jié)核患者痰中結(jié)核分枝桿菌檢驗(yàn)的臨床價(jià)值[J].中國(guó)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)管理，2016,7(10)：164-166.

R446.1

B

1004-7115(2017)11-1299-02

10.3969/j.issn.1004-7115.2017.11.039

李嫻(1987—)，女，技師，碩士研究生，主要從事臨床檢驗(yàn)工作。

2017-08-11)