東方蓼不同部位乙醇提取液對牛蒡長管蚜的生物活性影響研究

紀日新，單良，鄧志剛

（通化市城市綠化管理處，吉林通化134000）

東方蓼不同部位乙醇提取液對牛蒡長管蚜的生物活性影響研究

紀日新，單良，鄧志剛

（通化市城市綠化管理處，吉林通化134000）

研究了東方蓼不同部位乙醇提取液的不同濃度對牛蒡長管蚜的生物活性影響,并運用了均勻設(shè)計法獲得東方蓼根、莖、葉的乙醇提取液對牛蒡長管蚜觸殺和拒食作用效果。東方蓼的新鮮植株在陰涼處晾干后，將根、莖、葉分離出來并剪成小段，然后用乙醇進行浸泡提取，獲得原液。將原液分別稀釋至2 mg/mL、4 mg/mL、6 mg/mL的濃度后，用牛蒡長管蚜作為供試昆蟲進行生物活性試驗。試驗結(jié)果顯示，東方蓼乙醇提取液對牛蒡長管蚜的觸殺和拒食都有一定作用，拒食比觸殺效果更為明顯。東方蓼莖的乙醇提取液對牛蒡長管蚜的觸殺和拒食效果明顯，以6 mg/mL的效果最佳。

東方蓼；乙醇；牛蒡長管蚜；生物活性

東方蓼(Ploygonum orientale L.)也叫紅蓼、紅草、水紅花、大蓼、天蓼，是蓼科(Ploygonaceae)蓼屬(Ploygonum)的一年生蓼科草本植物[1]。高50～100 cm，莖直立、粗壯，生長于溫暖濕潤且光照充足的山谷、路旁、田埂、河邊兩岸的草地和河灘濕地，具有祛風除濕、清熱解毒、驅(qū)蟲殺蟲等作用[2]。

牛蒡長管蚜(Uroleucon gobonis)也稱紅花指管蚜，是同翅目(Homoptera)蚜科指管蚜屬的一種昆蟲。廣布于中國的東北、華北、西北、華東等地區(qū)，寄生于菊科植物如紅花、牛蒡、蒼術(shù)、大薊等，給牛蒡、紅花的生產(chǎn)造成嚴重危害。主要集中在植物嫩葉、嫩莖上吸食汁液[3]，使枝葉呈現(xiàn)黃褐色微小斑點，莖葉短小，分枝和孕蕾數(shù)減少。目前牛蒡長管蚜的生物預防和治理仍處于探究階段。

1 材料與方法

1.1 供試植物與昆蟲

東方蓼是在通化師范學院后山上采集的，將采摘的新鮮東方蓼用清水洗干凈，放在陰涼處，陰干待用。在通化師范學院后山捕捉生長于大薊上的牛蒡長管蚜，選取大小相似、生命力旺盛、活躍的牛蒡長管蚜為供試昆蟲。將供試昆蟲置于用保鮮膜覆蓋的培養(yǎng)皿中飼養(yǎng)待用，進行試驗之前對供試昆蟲饑餓處理12 h[4]。

1.2 藥液制備與制備方法

將陰干后的東方蓼分離出根、莖、葉,剪成小段，分別稱取質(zhì)量為30 g的1份，放入1 000 mL的3個燒杯中，加乙醇600 mL直到覆蓋材料。在室溫(24±2)℃下浸泡48 h，用4層紗布過濾浸泡好的液體，然后在溫度為60～70℃的恒溫水浴鍋中進行濃縮，得到濃度為1 g/mL的原液。獲得原液A(東方蓼根乙醇原液)、原液B(東方蓼莖乙醇原液)及原液C(東方蓼葉乙醇原液)。

用1 mL的移液管將獲得的原液A分別吸取0.2 mL、0.4 mL、0.6 mL，分別放入3個容量瓶中，加蒸餾水到100 mL刻度線，配成濃度為2 mg/mL、4 mg/mL、6 mg/mL的藥液，稱之為藥液A1、A2、A3，分別倒入3個100 mL錐形瓶中，保鮮膜密封保存，貼上標簽。按照原液A的配制方法，配制出藥液B1、B2、B3及藥液C1、C2、C3。

1.3 東方蓼不同部位乙醇提取液對牛蒡長管蚜的觸殺和拒食活性測定

1.3.1 觸殺活性測定

在進行觸殺活性測定時，使用浸蟲法（圖1～圖9）。將饑餓12 h后的牛蒡長管蚜用鑷子夾出，分別在東方蓼不同部位乙醇提取液的3個濃度藥液中的其中一個浸泡10 s后取出，放進一個在底部鋪有濾紙并用清水浸濕的培養(yǎng)皿中。20只牛蒡長管蚜為一組，每個培養(yǎng)皿中放入3片直徑為1 cm的圓形鮮嫩大薊葉。用保鮮膜覆蓋培養(yǎng)皿并用昆蟲針扎30個小孔來保證有新鮮空氣，然后將培養(yǎng)皿置于室溫下培養(yǎng)。于12 h、24 h、48 h后觀察東方蓼不同部位乙醇提取液對牛蒡長管蚜觸殺活性影響情況。統(tǒng)計死亡個數(shù)并計算出死亡率。死亡率=(死亡蟲數(shù)/供試總蟲數(shù))×100%。

1.3.2 拒食活性測定

在進行拒食活性測定時，使用浸葉法（圖10～圖18）。每3片直徑為1 cm的圓形新鮮大薊葉為一組，分別在東方蓼不同部位乙醇提取液的3個濃度藥液中的其中一個浸泡10 s后取出，放進一個在底部鋪有濾紙并用清水浸濕的培養(yǎng)皿中，再放入20只經(jīng)過饑餓處理的牛蒡長管蚜，為一個處理組在培養(yǎng)皿中培養(yǎng)。用保鮮膜覆蓋培養(yǎng)皿并用昆蟲針扎30個小孔來保證有新鮮空氣，然后將培養(yǎng)皿置于室溫下培養(yǎng)。于12 h、24 h、48 h后觀察東方蓼不同部位乙醇提取液對牛蒡長管蚜拒食活性影響情況。統(tǒng)計并計算出拒食率。拒食率=(對照組牛蒡長管蚜棲息數(shù)-處理組牛蒡長管蚜棲息數(shù))/對照組牛蒡長管蚜總數(shù)×100%。

圖1

圖2

圖3

圖4

圖5

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圖7

圖8

圖9

圖10

圖11

圖12

圖13

圖14

圖15

圖16

1.4 數(shù)據(jù)分析與處理

運用均勻設(shè)計法，在分析處理試驗數(shù)據(jù)時使用均勻設(shè)計軟件，以快速而精確地得出東方蓼不同部位乙醇提取液的不同濃度對牛蒡長管蚜觸殺和拒食的影響。對試驗數(shù)據(jù)進行分析，可得出東方蓼不同部位乙醇提取液的不同濃度對牛蒡長管蚜觸殺致死率和拒食率(表1和表2)。

表1 東方蓼不同濃度的乙醇提取液觸殺致死率和拒食率統(tǒng)計表

表2 東方蓼不同濃度乙醇提取液觸殺和拒食活性回歸分析結(jié)果

2 結(jié)果與分析

在觸殺試驗中可以看出，當牛蒡長管蚜被藥液的不同濃度浸漬后，沒有方向地到處爬動，活動不斷變慢然后靜止不動，很少一部分在短時間內(nèi)不能恢復常態(tài)就直接死亡了，大部分能恢復活動但運動減慢直到靜止不動，48 h后牛蒡長管蚜的死亡數(shù)均超過50%且濃度越大死亡率越高。在東方蓼的根、莖、葉3部分乙醇提取液中，莖的乙醇提取液對牛蒡長管蚜的觸殺效果最好，在濃度為6 mg/mL時，牛蒡長管蚜死亡率達到95%。葉乙醇提取液的效果比根的好。原因可能是東方蓼莖乙醇提取液中含對牛蒡長管蚜生命活動產(chǎn)生影響的活性物質(zhì)，比根和葉提取液中的多，并且隨著濃度不斷升高，對牛蒡長管蚜生命活動發(fā)生影響的活性物質(zhì)也不斷增多，所以東方蓼莖乙醇提取液對牛蒡長管蚜的生命活動產(chǎn)生較大影響。

圖17

圖18

在拒食試驗中可以看出，大薊葉在不同濃度東方蓼不同部位乙醇提取液中浸泡后，將饑餓處理后的牛蒡長管蚜放入到培養(yǎng)皿時，牛蒡長管蚜均遠離葉片，在培養(yǎng)皿的邊緣活動，基本不接近大薊葉片并食用。48 h后根和莖中牛蒡長管蚜的死亡率超過50%且濃度越大死亡率越高。在東方蓼的根、莖、葉3部分乙醇提取液中，莖的乙醇提取液對牛蒡長管蚜的拒食效果最好，其次是根，最差是葉。原因可能是東方蓼莖的乙醇提取液中含對牛蒡長管蚜產(chǎn)生拒食作用的活性物質(zhì)較多，并且隨著濃度的不斷增大，活性物質(zhì)也不斷增多，所以東方蓼莖乙醇提取液對牛蒡長管蚜的生命活動產(chǎn)生較大影響。

圖1、圖2、圖3分別為浸蟲法東方蓼根乙醇提取液濃度為2 mg/mL、4 mg/mL、6 mg/mL對牛蒡長管蚜的影響。

圖4、圖5、圖6分別為浸蟲法東方蓼莖乙醇提取液濃度為2 mg/mL、4 mg/mL、6 mg/mL對牛蒡長管蚜的影響。

圖7、圖8、圖9分別為浸蟲法東方蓼葉乙醇提取液濃度為2 mg/mL、4 mg/mL、6 mg/mL對牛蒡長管蚜的影響。

圖10、圖11、圖12分別為浸葉法東方蓼根乙醇提取液濃度為2 mg/mL、4 mg/mL、6 mg/mL對牛蒡長管蚜的影響。

圖13、圖14、圖15分別為浸葉法東方蓼莖乙醇提取液濃度為2 mg/mL、4 mg/mL、6 mg/mL對牛蒡長管蚜的影響。

圖16、圖17、圖18分別為浸葉法東方蓼葉乙醇提取液濃度為2 mg/mL、4 mg/mL、6 mg/mL對牛蒡長管蚜的影響。

3 結(jié)論與討論

由表1數(shù)據(jù)可知，東方蓼不同部位的乙醇提取液對牛蒡長管蚜的觸殺和拒食都有一定效果。由表2數(shù)據(jù)可以看出，拒食比觸殺的效果更為明顯，東方蓼莖乙醇提取液對牛蒡長管蚜觸殺和拒食的效果最好。同時還表現(xiàn)出不同部位提取液對牛蒡長管蚜觸殺和拒食的作用有所差異，觸殺效果是莖＞葉＞根，拒食效果是莖＞根＞葉，其中莖的最佳濃度是6 mg/mL?？赡艿脑蚴怯靡掖继崛|方蓼的不同部位時，提取出的莖提取液對牛蒡長管蚜的生命活動產(chǎn)生影響的有效成分最多。

目前，國內(nèi)外有關(guān)東方蓼不同部位乙醇提取液對牛蒡長管蚜生物活性影響的研究未見報道。本試驗的研究結(jié)果證實了東方蓼不僅可以開發(fā)藥用價值，而且可以用來制作生物農(nóng)藥，變成更多用途的植物。也探究了東方蓼的綜合開發(fā)價值，為提高東方蓼資源的利用價值提供理論依據(jù)。有關(guān)東方蓼莖對牛蒡長管蚜產(chǎn)生影響的物質(zhì)都有哪些生物活性成分，有待日后人們的進一步研究分析。

[1] 林妍妍.東方蓼提取物殺蟲殺菌活性初探[J].農(nóng)藥，2007(03)：211-213．

[2] 陳金法.紅蓼的栽培及利用價值[J].中國園藝文摘，2011(03)：176-177．

[3] 孫海峰，楊婷，嚴久江，等.中藥提取物及生物農(nóng)藥防治牛蒡長管蚜[J].東北林業(yè)大學學報，2008(02)：40-41，52．

[4] 丁梁斌,胡長效.牛蒡長管蚜防治藥劑篩選試驗[J].安徽農(nóng)業(yè)科學，2010(01)：226-227，341．

1005-2690（2017）11-0108-03

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2017-10-30）