宮頸癌患者外周血T淋巴細(xì)胞及NK細(xì)胞檢測的臨床意義

薄艷秋

宮頸癌患者外周血T淋巴細(xì)胞及NK細(xì)胞檢測的臨床意義

薄艷秋

目的探討宮頸癌患者外周血T淋巴細(xì)胞及NK細(xì)胞檢測的臨床意義。方法選取2015年2月—2016年10月我院收治的48例宮頸癌患者與同期健康檢查的48名健康女性分為宮頸癌組與健康對照組。對兩組分別使用流式細(xì)胞儀檢測外周血T淋巴細(xì)胞及NK細(xì)胞水平，并作對比。結(jié)果健康對照組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及CD16+CD56+細(xì)胞水平較宮頸癌組II、III、IV期明顯更高，CD8+細(xì)胞水平明顯更低（P＜0.05）；宮頸癌組II、III、IV期的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及CD16+CD56+細(xì)胞水平呈階梯性下降，CD8+呈階梯性上升，III、IV期的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及CD16+CD56+細(xì)胞水平較II期明顯更低，CD8+細(xì)胞水平明顯更高（P＜0.05）。結(jié)論 宮頸癌患者的免疫功能的下降，造成腫瘤細(xì)胞的發(fā)生與發(fā)展；采用流式細(xì)胞儀對外周T淋巴細(xì)胞與NK細(xì)胞進(jìn)行檢測可有效監(jiān)測宮頸癌患者免疫功能，從而對宮頸癌患者的臨床治療提供有利的數(shù)據(jù)參考。

宮頸癌；T淋巴細(xì)胞；NK細(xì)胞

宮頸癌屬于一種女性常見生殖道腫瘤疾病之一，其發(fā)病率在近年來有明顯上升趨勢，嚴(yán)重威脅女性患者的生命健康[1]。臨床發(fā)現(xiàn)，腫瘤發(fā)生和發(fā)展與機(jī)體免疫功能，尤其是與T淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞水平密切相關(guān)，且在機(jī)體抗腫瘤免疫作用中細(xì)胞免疫占據(jù)著主導(dǎo)地位[2]。為進(jìn)一步了解臨床檢測外周血T淋巴細(xì)胞與NK細(xì)胞的價值，故進(jìn)行了本次研究，現(xiàn)作如下報道。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年2月—2016年10月我院收治的48例宮頸癌患者與同期健康檢查的48名健康女性分為宮頸癌組與健康對照組。宮頸癌組患者48例，年齡36～62歲，平均年齡（52.31±3.52）歲；均經(jīng)病理檢查后確診，參照《新編常見惡性腫瘤診治規(guī)范》[3]的TNM分期標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行腫瘤分期，I期11例，II期14例，III期12例，IV期11例。健康對照組30名，年齡37～61歲，平均年齡（53.24±4.02）歲。兩組一般資料對比，P＞0.05，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

1.2 儀器與試劑

儀器：購自索尼生物科技有限公司的SP6800Z全光譜高性能流式細(xì)胞分析儀；試劑：紅細(xì)胞裂解液購自上海澤葉生物科技有限公司；單克隆抗體抗CD8PE、抗CD3FITC、抗CD4PE及CD16+56PE，均購自武漢博士德生物工程有限公司；CD3+、CD4+、CD8+、CD16+及CD56+代表T、TH、TS及NK細(xì)胞。

1.3 檢測方法

取所有對象10 ml清晨空腹靜脈血放于容量為10 ml的肝素抗凝離心管內(nèi)中；取所有對象外周血100 μl，在其中加入20 μl單克隆抗體后混合搖勻，于正常室溫、避免光線直射條件下染色30 min；隨后向其中加入劑量為1.5 ml的紅細(xì)胞裂解液再混合搖勻后，于正常室溫、避免光線直射條件下放置；之后采用離心機(jī)以每分鐘1 500轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速離心5 min，去掉上清液；在每管內(nèi)加2 ml的磷酸鹽緩沖液（內(nèi)含0.1%疊氮鈉），混合搖勻后，采用采用離心機(jī)以每分鐘1 000轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速離心5 min，去掉上清液；在每管內(nèi)加1 ml的磷酸鈉緩沖液，混合搖勻后，于2 h之內(nèi)完成檢測。獲取分析數(shù)據(jù)軟件：CellQuest；淋巴細(xì)胞門設(shè)置：FSC-H/SSC-H；FL1、FL2非特異性結(jié)合水平確定：IgG-FITC/IgG2aPE；每個管內(nèi)獲取1×105個細(xì)胞。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS18.0軟件處理數(shù)據(jù)，計量數(shù)據(jù)用（均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差）表示，采用t檢驗，P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

健康對照組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及 CD16+CD56+細(xì)胞水平較宮頸癌組II、III、IV期明顯更高，CD8+細(xì)胞水平明顯更低（P＜0.05）；宮頸癌組II、III、IV期的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及CD16+CD56+細(xì)胞水平呈階梯性下降，CD8+呈階梯性上升，III、IV期的 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及CD16+CD56+細(xì)胞水平較II期明顯更低，CD8+細(xì)胞水平明顯更高（P＜0.05）。詳見表1。

3 討論

機(jī)體免疫系統(tǒng)是從生物的不斷進(jìn)化中逐漸發(fā)展起來的，所以機(jī)體的穩(wěn)定性是免疫系統(tǒng)存在和功能正常運(yùn)動的基礎(chǔ)。一般情況下，機(jī)體免疫功能可有效抵抗一些病原性微生物侵襲，從而對變老細(xì)胞活機(jī)體損傷的細(xì)胞有效清除，并將機(jī)體內(nèi)少量異常性細(xì)胞處理掉，因此細(xì)胞免疫在抗腫瘤的作用中起到極其重要的作用[4]。

臨床發(fā)現(xiàn)，T淋巴細(xì)胞與NK細(xì)胞比例和功能改變與腫瘤發(fā)生、發(fā)展及擴(kuò)散均明顯相關(guān)。諸多腫瘤患者的T淋巴細(xì)胞亞群呈現(xiàn)出比例嚴(yán)重失調(diào)、異常等現(xiàn)象。而機(jī)體免疫功能調(diào)節(jié)主要是由CD3+、CD4+及CD8+來完成，其中CD3+、CD4+主要是協(xié)助B細(xì)胞的分化進(jìn)而產(chǎn)生抗體，而CD8+則對抗體分泌與合成以及T細(xì)胞增殖起到明顯抑制作用，幾種細(xì)胞有效維持著機(jī)體免疫應(yīng)答的正?；痆5-6]。本研究結(jié)果顯示，健康對照組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+細(xì)胞水平較宮頸癌組II、III、IV期明顯更高，CD8+細(xì)胞水平明顯更低。提示宮頸癌患者的免疫功能明顯低于健康人群。本研究結(jié)果中，宮頸癌組II、III、IV 期的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及CD16+CD56+細(xì)胞水平呈階梯性下降，CD8+呈階梯性上升，III、IV期的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及CD16+CD56+細(xì)胞水平較II期明顯更低，CD8+細(xì)胞水平明顯更高。提示宮頸癌I期-IV期機(jī)體的細(xì)胞免疫功能持續(xù)下降，且呈現(xiàn)出階梯性，所以宮頸癌患者的免疫功能和TNM分期密切相關(guān)。

臨床還發(fā)現(xiàn)，NK細(xì)胞無需預(yù)先與抗原相互接觸就可產(chǎn)生殺傷作用，且沒有MHC的限制性，無需抗體或者補(bǔ)體的激活就可對MHCI分子表達(dá)能力缺失或低下腫瘤細(xì)胞進(jìn)行殺傷，因此NK細(xì)胞被臨床稱作為腫瘤發(fā)生、發(fā)展的首道防線，而CD16+、CD56+為NK細(xì)胞表面標(biāo)志物[7-8]。本研究結(jié)果顯示，健康對照組的CD16+CD56+細(xì)胞水平較宮頸癌組II、III、IV期明顯更高，且宮頸癌組II、III、IV期的CD16+CD56+細(xì)胞水平呈階梯性下降。提示宮頸癌患者的NK細(xì)胞水平與正常人相比更低，且晚期較早期NK細(xì)胞水平更低。分析其主要原因為機(jī)體為了對腫瘤細(xì)胞進(jìn)行殺傷并清除，從而消耗掉大量NK細(xì)胞。

綜上所述，宮頸癌患者的免疫功能的下降，造成腫瘤細(xì)胞的發(fā)生與發(fā)展；采用流式細(xì)胞儀對外周T淋巴細(xì)胞與NK細(xì)胞進(jìn)行檢測可有效監(jiān)測宮頸癌患者免疫功能，從而對宮頸癌患者的臨床治療提供有利的數(shù)據(jù)參考。

表1 兩組外周T淋巴細(xì)胞與NK細(xì)胞比較（±s，%）

表1 兩組外周T淋巴細(xì)胞與NK細(xì)胞比較（±s，%）

注：與健康對照組相比，#P＜0.05；與宮頸癌組I期、II期相比，＊P＜0.05

[1]張吟真，郭翠英，蘇靜芳.外周血淋巴細(xì)胞計數(shù)對早期宮頸癌手術(shù)患者生存狀況的預(yù)測價值[J].中國婦幼保健，2015，30（10）：1502-1504.

[2]楊軍文，吳玲玲，倪觀太.中性粒細(xì)胞與淋巴細(xì)胞比值在宮頸癌根治術(shù)預(yù)后評估中的價值[J].實用醫(yī)學(xué)雜志，2015，31（16）：2662-2665.

[3]霍喜蘭.宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢測在荷塘鎮(zhèn)婦女宮頸癌篩查中的意義[J].中外醫(yī)學(xué)研究，2014，12（8）：63.

[4]由然，龔巖，屈晨雪，等.皮膚T細(xì)胞淋巴瘤外周血淋巴細(xì)胞免疫表型的變化及其意義[J].檢驗醫(yī)學(xué)，2016，31（3）：195-200.

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[7]蘇全玲.腹腔鏡下子宮頸癌保留盆腔自主神經(jīng)子宮切除術(shù)的可行性研究[J].中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2014，11（4）：32-33.

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Clinical Significance of Detection of Peripheral Blood T Lymphocytes and NK Cells in Patients With Cervical Cancer

BO Yanqiu Department of Clinical Laboratory, The 245 Hospital of Shenyang City, Shenyang Liaoning 110043, China

ObjectiveClinical significance of detection of peripheral blood T lymphocytes and NK cells in patients with cervical cancer.MethodsFrom February 2015 to October 2016, 48 cases of cervical cancer patients and 48 healthy women in the same period were selected and divided into cervical cancer group and healthy control group. The levels of T lymphocytes and NK cells in peripheral blood were detected by fl ow cytometry in two groups.ResultsThe levels of CD3+, CD4+, CD4+/CD8+and CD16+CD56+cells in the healthy control group were signi fi cantly higher than those in the cervical cancer group II, III and IV, and the level of CD8+cells was significantly lower (P＜ 0.05); The levels of CD3+,CD4+, CD4+/CD8+and CD16+CD56+cells in II, III and IV stages decreased gradually in cervical cancer group, CD8+showed a stepwise increase, and the levels of CD3+, CD4+, CD4+/CD8+and CD16+CD56+cells in III and IV phases were signi fi cantly lower than those in II phase, level of CD8+cells was significantly higher (P＜ 0.05).ConclusionThe decline of immune function in patients with cervical cancer leads to the occurrence and development of tumor cells; The detection of peripheral T lymphocytes and NK cells by fl ow cytometry can e ff ectively monitor the immune function of patients with cervical cancer, so as to provide a favorable data reference for the clinical treatment of patients with cervical cancer.

cervical cancer; T lymphocyte; NK cell

R446

A

1674-9308（2017）24-0050-02

10.3969/j.issn.1674-9308.2017.24.024

沈陽二四五醫(yī)院檢驗科，遼寧 沈陽 110043