• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    食管鱗狀細(xì)胞癌中Beclin1、LC3和 mTOR的表達(dá)及其臨床意義

    2017-11-20 09:38:10舒向芳溫菲菲李揚(yáng)揚(yáng)劉夢(mèng)瑤吳淑華1
    關(guān)鍵詞:變組內(nèi)瘤高級(jí)別

    舒向芳,溫菲菲,李揚(yáng)揚(yáng),何 雙,劉夢(mèng)瑤,吳淑華1,

    食管鱗狀細(xì)胞癌中Beclin1、LC3和 mTOR的表達(dá)及其臨床意義

    舒向芳1,2,溫菲菲3,李揚(yáng)揚(yáng)3,何 雙3,劉夢(mèng)瑤3,吳淑華1,3

    目的探討B(tài)eclin1、LC3和mTOR在食管鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá),并分析其臨床意義。方法采用免疫組化EnVision法檢測(cè)食管30例正常黏膜、32例低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變、34例高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變、35例早期癌及126例進(jìn)展期癌中Beclin1、LC3和mTOR的表達(dá),并分析其相關(guān)性及其與臨床病理特征的關(guān)系。結(jié)果Beclin1在進(jìn)展期癌組中的表達(dá)高于其他四組(P<0.005)。LC3在食管進(jìn)展期癌組的表達(dá)高于正常黏膜組、低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變及早期癌組(P<0.005)。mTOR在進(jìn)展期癌組中的表達(dá)高于正常黏膜組、低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變及高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組(P<0.005)。Beclin1、LC3、mTOR表達(dá)與腫瘤TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有顯著相關(guān)性(P<0.05)。Beclin1與LC3、Beclin1與mTOR在食管進(jìn)展期癌中的表達(dá)均呈正相關(guān)(P<0.05),mTOR與LC3在高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組及進(jìn)展期癌中的表達(dá)呈正相關(guān)(P<0.05)。結(jié)論在食管癌的發(fā)生、發(fā)展中,Beclin1作為抑癌基因激活自噬,導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞過(guò)度自我消耗死亡;mTOR通過(guò)抑制自噬及促進(jìn)血管生成,促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)。聯(lián)合檢測(cè)Beclin1、LC3和mTOR在食管癌中的表達(dá),有助于評(píng)估進(jìn)展程度和預(yù)后判斷。

    食管腫瘤;鱗狀細(xì)胞癌;Beclin1;LC3;mTOR

    食管癌是消化系統(tǒng)常見(jiàn)的惡性腫瘤[1-2],對(duì)人類健康危害較大,5年生存率較低[3]。目前專家認(rèn)為絕大多數(shù)食管鱗狀細(xì)胞癌來(lái)自于上皮內(nèi)瘤變,即正常上皮→低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變→高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變→早期癌→進(jìn)展期癌,其中由低級(jí)別和高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變演變?yōu)榻?rùn)癌相對(duì)危險(xiǎn)度分別為9.8和28.3[4]。近年自噬與腫瘤發(fā)生的相關(guān)性倍受關(guān)注,研究顯示自噬在多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用[5-8]。目前,有關(guān)食管癌與自噬的相關(guān)性分析鮮有報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)采用免疫組化EnVision法在食管鱗狀細(xì)胞癌變過(guò)程中同步檢測(cè)自噬關(guān)鍵因子Beclin1、mTOR及LC3的表達(dá),探討自噬及其調(diào)控因子Beclin1與mTOR在食管癌變過(guò)程中的作用,為進(jìn)一步分析食管癌的發(fā)生、發(fā)展機(jī)制和治療提供新思路。

    1 材料與方法

    1.1臨床資料收集2009年1月~2011年12月濱州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院病理科胃鏡、手術(shù)切除的低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變32例、高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變34例、食管早期癌35例、食管進(jìn)展期鱗狀細(xì)胞癌126例;另收集正常食管黏膜(距腫瘤旁≥5 cm)30例。根據(jù)WHO(2010)消化系統(tǒng)腫瘤分類標(biāo)準(zhǔn)[9]進(jìn)行,所有切片均由兩位資深病理專家重新閱片分類,病例均為首次發(fā)現(xiàn),術(shù)前均未行放、化療。

    1.2試劑兔抗人Beclin1(ab55878)、LC3(ab48394)及mTOR(ab2732)抗體,均購(gòu)自Abcam公司;通用型二抗及DAB顯色液,購(gòu)自北京中杉金橋公司。

    1.3方法采用免疫組化EnVision法染色,將切片脫蠟、水化,3%H2O2孵育30 min,高壓熱修復(fù)抗原,一抗Beclin1(1 ∶200)、LC3(1 ∶50)、mTOR(1 ∶200)4 ℃過(guò)夜,二抗37 ℃孵育30 min,DAB顯色,蘇木精復(fù)染,1%鹽酸乙醇分化,脫水,透明,封固。用絨毛膜癌、正常腦組織和腎組織做陽(yáng)性對(duì)照,PBS代替一抗作陰性對(duì)照。

    1.4結(jié)果判斷Beclin1陽(yáng)性表達(dá)主要位于腫瘤細(xì)胞的胞膜和胞質(zhì),LC3和mTOR陽(yáng)性表達(dá)主要位于腫瘤細(xì)胞的胞質(zhì)中。病理醫(yī)師采用雙盲法在每張切片上隨機(jī)觀察10個(gè)高倍視野(400倍)。每個(gè)視野計(jì)數(shù)100個(gè)腫瘤細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞染色強(qiáng)度和陽(yáng)性細(xì)胞百分比判斷。按細(xì)胞染色強(qiáng)度計(jì)分:無(wú)陽(yáng)性著色為0分,淡黃色為1分,棕黃色為2分,棕褐色為3分;按陽(yáng)性細(xì)胞百分比計(jì)分:≤5%為0分,6%~25%為1分,26%~50%為2分,51%~75%為3分,76%~100%為4分;最后將兩者得分相乘,≤4分為陰性,>4分為陽(yáng)性。

    1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,不同病變組間蛋白的表達(dá)差異采用χ2檢驗(yàn),經(jīng)P值修正,P<0.005為各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。各蛋白表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系及不同病變組各蛋白之間表達(dá)的相關(guān)性采用χ2檢驗(yàn),并采用Spearman相關(guān)性分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1Beclin1、LC3和mTOR在食管癌變過(guò)程中的表達(dá)在正常食管黏膜、低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組、高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組及癌變組中Beclin1、LC3和mTOR呈不同程度表達(dá)(圖1~3),經(jīng)多組二分類資料兩兩χ2檢驗(yàn)比較,自噬相關(guān)基因Beclin1在食管進(jìn)展期癌組中的表達(dá)高于正常黏膜組、低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組、高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組及早期癌組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.005);Beclin1在正常黏膜組、低級(jí)別內(nèi)瘤變組、高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組及早期癌組中表達(dá),兩兩比較其差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.005)。LC3在食管進(jìn)展期癌組中的表達(dá)高于正常黏膜組、低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組及早期癌組,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.005);LC3在正常黏膜組、低級(jí)別、高級(jí)別內(nèi)瘤變組及早期癌組中表達(dá),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.005)。mTOR在進(jìn)展期癌組中的表達(dá)高于正常黏膜組、低級(jí)別、高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.005);在進(jìn)展期癌組與早期癌組中的表達(dá),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.005);mTOR在正常黏膜組、低級(jí)別內(nèi)瘤變組及高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組,兩兩比較其表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.005,表1)。

    ①A①B①C②A②B②C③A③B③C

    圖1A.Beclin1在高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變呈陽(yáng)性,EnVision法;B.Beclin1在早期癌中呈陽(yáng)性,EnVision法;C.Beclin1在食管癌細(xì)胞質(zhì)及胞膜中呈強(qiáng)陽(yáng)性,EnVision法圖2A.LC3在高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變中呈陽(yáng)性,EnVision法;B.LC3在早期癌中呈陽(yáng)性,EnVision法;C.LC3在食管癌細(xì)胞質(zhì)中呈強(qiáng)陽(yáng)性,EnVision法圖3A.mTOR在高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變中呈陽(yáng)性,EnVision法;B.mTOR在早期癌中呈陽(yáng)性,EnVision法;C.mTOR在食管癌細(xì)胞質(zhì)中呈強(qiáng)陽(yáng)性,EnVision法

    表1 Beclin1、LC3和mTOR在食管不同病變組織中的陽(yáng)性率

    與進(jìn)展期癌比較,*P<0.005

    2.2Beclin1、LC3和mTOR表達(dá)與食管癌臨床病理特征的關(guān)系Beclin1、LC3、mTOR在食管癌中的表達(dá)與腫瘤TNM分期具有相關(guān)性,其中TNM分期低的腫瘤中,Beclin1、LC3、mTOR呈高表達(dá),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。Beclin1、LC3和mTOR與腫瘤是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有相關(guān)性,在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的食管癌中,其呈高表達(dá),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。Beclin1、LC3和mTOR表達(dá)與患者年齡、性別、大小、分化程度等臨床病理特征無(wú)相關(guān)性(P>0.05,表2)。

    表2 Beclin1、LC3 和mTOR表達(dá)與進(jìn)展期食管癌臨床病理特征的關(guān)系

    *P<0.05

    2.3Beclin1、mTOR和LC3在食管癌中表達(dá)的相關(guān)性Beclin1與LC3在食管進(jìn)展期癌中的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.282,P<0.05),在低級(jí)別、高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變及早期癌組中無(wú)明顯相關(guān)性(P>0.05)。mTOR與LC3在食管高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變及進(jìn)展期癌中的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.321,P<0.05;r=0.268,P<0.05);在低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變及早期癌組中無(wú)明顯相關(guān)性(P>0.05)。Beclin1、mTOR在食管進(jìn)展期癌中的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.222,P<0.05),在低級(jí)別、高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變及早期癌組中無(wú)明顯相關(guān)性(P>0.05,表3)。

    表3LC3、Beclin1、mTOR在食管不同病變組織中表達(dá)的相關(guān)性

    組別nBeclin1vsLC3r值P值mTORvsLC3r值P值Beclin1vsmTORr值P值低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變320.1210.2120.2010.1460.1320.226高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變340.1780.1450.3210.012?0.1690.117早期癌350.1890.1320.2130.0640.1450.121進(jìn)展期癌1260.2820.001?0.2680.002?0.2220.005?

    *P<0.05

    3 討論

    自噬也被稱為Ⅱ型程序性細(xì)胞死亡[10],是細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)雙層膜結(jié)構(gòu)包裹變性蛋白和受損細(xì)胞器的自噬體,其活性異常與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。腫瘤細(xì)胞發(fā)生自噬后出現(xiàn)兩種不同結(jié)果:(1)保護(hù)性自噬,能穩(wěn)定細(xì)胞內(nèi)環(huán)境使腫瘤細(xì)胞耐受缺氧環(huán)境,維持細(xì)胞存活[11];(2)過(guò)度的自噬,能誘導(dǎo)細(xì)胞的自噬性細(xì)胞死亡,抑制細(xì)胞增殖,殺傷腫瘤細(xì)胞[12]。目前,自噬已成為探討腫瘤發(fā)生和抑制腫瘤生長(zhǎng)、克服腫瘤放、化療抵抗性研究的熱點(diǎn)。LC3是自噬發(fā)生過(guò)程的關(guān)鍵蛋白,定位于前自噬泡和自噬泡膜表面,被認(rèn)為是自噬活動(dòng)的特異性標(biāo)志[13]。Beclin1與mTOR是調(diào)控自噬發(fā)生的2個(gè)非常重要的因子[14-15]。Beclin1是第一個(gè)被鑒定的自噬基因,是自噬過(guò)程中的必要調(diào)節(jié)分子,它參與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展[16]。mTOR是自噬誘導(dǎo)階段的關(guān)鍵分子,在自噬活性的負(fù)向調(diào)控中發(fā)揮重要作用,是多條信號(hào)通路的作用靶點(diǎn),在調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)、 自噬等方面具有重要作用,多種因子(如IGF-1、PI3K、AMPK等)可通過(guò)激活mTOR抑制細(xì)胞自噬[17]。何雙等[18]發(fā)現(xiàn)自噬及其調(diào)控因子LC3、Beclin1、mTOR在結(jié)直腸腺瘤惡性轉(zhuǎn)化中發(fā)揮重要作用,與腺瘤癌變進(jìn)展密切相關(guān)。目前,自噬在食管癌變過(guò)程中的作用尚不清楚。

    眾所周知,食管黏膜異型增生是食管癌的癌前病變,早在2000年上皮內(nèi)瘤變的概念就被引入到消化系統(tǒng)腫瘤中,其被定義為上皮浸潤(rùn)前的腫瘤性改變,分為低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變和高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變,高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變繼續(xù)進(jìn)展則為早期癌、進(jìn)展期癌[4]。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),自噬相關(guān)基因LC3在食管進(jìn)展期癌組中的表達(dá)高于正常黏膜組、低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組、早期癌組,進(jìn)展期癌組的表達(dá)明顯高于高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組,而進(jìn)展期癌組中LC3蛋白的表達(dá)與高級(jí)別內(nèi)瘤變組無(wú)明顯差異,提示在食管進(jìn)展期癌組、高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組自噬水平升高;Beclin1在食管進(jìn)展期癌組中的表達(dá)高于正常黏膜組、低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組、高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組及早期癌組;mTOR在進(jìn)展期癌組中的表達(dá)高于正常黏膜組、低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組、高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組,進(jìn)展期癌組明顯與早期癌組的表達(dá)無(wú)明顯差異。作者認(rèn)為在食管高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變中,食管鱗狀上皮內(nèi)血管較少,不能滿足細(xì)胞高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變所需的營(yíng)養(yǎng),自噬水平的升高可以緩解食管上皮內(nèi)瘤變中的缺血、缺氧,維持細(xì)胞的生長(zhǎng)。隨著病變的發(fā)展,一旦突破基膜發(fā)展為早期癌,mTOR表達(dá)增加,抑制自噬,同時(shí)上調(diào)VEGF的表達(dá),促進(jìn)血管的生成;并且在食管黏膜下層,血運(yùn)豐富,無(wú)需自噬為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng),自噬水平較低,腫瘤生長(zhǎng)迅速。在進(jìn)展期食管癌中,Beclin1表達(dá)顯著增加,自噬水平被持續(xù)激活,腫瘤細(xì)胞因過(guò)度自我消耗死亡,腫瘤出現(xiàn)壞死。此時(shí),自噬作為程序性死亡方式之一,殺傷腫瘤細(xì)胞,在一定程度上抑制腫瘤發(fā)展。同時(shí),mTOR表達(dá)持續(xù)升高,促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)。因此,在食管癌的發(fā)生、發(fā)展中,Beclin1作為抑癌基因激活自噬,導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞過(guò)度自我消耗死亡;而mTOR通過(guò)抑制自噬及促進(jìn)血管生成,促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)。針對(duì)Beclin1與mTOR在食管癌變過(guò)程中的不同功能,探索新的腫瘤標(biāo)志物或靶點(diǎn)阻斷劑,可為早期預(yù)測(cè)腫瘤及研發(fā)腫瘤個(gè)性化治療提供新思路。

    吳淑華等[19]發(fā)現(xiàn)多種腫瘤的分化程度、轉(zhuǎn)移等臨床病理特征與細(xì)胞自噬活性的改變有關(guān)。Won等[20]發(fā)現(xiàn)Beclin1表達(dá)與胃癌組織學(xué)分級(jí)、腫瘤大小、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等臨床病理特征呈負(fù)相關(guān),Belin1高表達(dá)更有利于胃癌的預(yù)后。Wu等[21]也發(fā)現(xiàn)LC3蛋白在中+低分化結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)明顯高于高分化結(jié)直腸癌組,在伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組,并且與多藥耐藥蛋白表達(dá)及預(yù)后相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)在與食管進(jìn)展期癌臨床病理特征的相關(guān)性分析中發(fā)現(xiàn),Beclin1、LC3、mTOR在TNM分期高、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的食管進(jìn)展期癌組中呈高表達(dá),但與患者年齡、性別、腫瘤分化程度等均無(wú)相關(guān)。提示Beclin1、LC3、mTOR不僅參與食管癌的發(fā)生、發(fā)展,還參與腫瘤的轉(zhuǎn)移,且與腫瘤的分期密切相關(guān)。

    Beclin1與mTOR分別作為細(xì)胞自噬正向和負(fù)向調(diào)節(jié)因子,目前多數(shù)文獻(xiàn)報(bào)道局限于針對(duì)mTOR或Beclin1中的某一分子,尚缺乏兩者在食管癌發(fā)生、發(fā)展中的相關(guān)性報(bào)道。作為自噬的重要調(diào)控分子,同步分析mTOR、Beclin1兩類不同的作用分子,對(duì)于進(jìn)一步揭示食管癌與自噬的相關(guān)性及其意義具有重要價(jià)值。本實(shí)驗(yàn)分析了自噬相關(guān)分子LC3、Beclin1、mTOR在食管癌變過(guò)程中的表達(dá)及相關(guān)性,發(fā)現(xiàn)Beclin1和mTOR在食管進(jìn)展期癌中的表達(dá)呈正相關(guān),并且均與LC3呈正相關(guān)。作者認(rèn)為在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中,mTOR、Beclin1可能通過(guò)不同的信號(hào)通路各自發(fā)揮其自噬調(diào)控作用。Beclin1基因通過(guò)結(jié)合Ⅲ型PI3K與VPS15,促進(jìn)自噬的發(fā)生,而mTOR受其上游的Ⅰ型PI3K信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的調(diào)控,抑制自噬活性。在食管進(jìn)展期癌中,Beclin1過(guò)表達(dá)促進(jìn)自噬的發(fā)生,mTOR被激活,抑制自噬活性,并且Beclin1過(guò)表達(dá)產(chǎn)生的自噬促進(jìn)作用遠(yuǎn)大于mTOR過(guò)表達(dá)產(chǎn)生的自噬抑制作用。因此,在食管鱗狀細(xì)胞癌中,自噬活性標(biāo)志分子LC3的蛋白表達(dá)水平明顯增高,即食管鱗狀細(xì)胞癌的自噬活性增高。

    綜上所述,自噬相關(guān)基因Beclin1、LC3和mTOR在食管癌的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。自噬是一把雙刃劍,既可以是腫瘤的生存性自噬,又能誘發(fā)腫瘤的自噬性細(xì)胞死亡。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示,自噬在食管癌變?cè)缙诖龠M(jìn)腫瘤的發(fā)生與惡化,而在腫瘤的進(jìn)展期持續(xù)活化的自噬則可能誘導(dǎo)自噬性細(xì)胞死亡,殺傷腫瘤細(xì)胞。進(jìn)一步探討自噬在食管癌變過(guò)程中的分子機(jī)制,有助于揭示腫瘤發(fā)生、發(fā)展的規(guī)律,并指導(dǎo)腫瘤的臨床診治。聯(lián)合檢測(cè)自噬相關(guān)基因Beclin1、LC3與mTOR在食管癌中的表達(dá),有助于評(píng)估疾病的進(jìn)展和預(yù)后判斷及合理選擇個(gè)性化治療方案。

    [1] Li Z H, Zheng R, Chen J T,etal. The role of copper transporter ATP7A in platinum-resistance of esophageal squamous cell cancer (ESCC)[J]. J Cancer, 2016,7(14):2085-2092.

    [2] Yang C S, Chen X, Tu S. Etiology and prevention of esophageal cancer[J]. Gastrointest Tumors, 2016,3(1):3-16.

    [3] Napier K J, Scheerer M, Misra S. Esophageal cancer: a review of epidemiology, pathogenesis, staging workup and treatment modalities[J]. World Gastrointest Oncol, 2014,6:112-120.

    [4] Wang G Q, Abnet C C, Shen Q,etal. Histological precursors of oesophageal squamous cell carcinoma: results from a 13 year prospective follow up study in a high risk population[J]. Gut, 2005,54(2):187-192.

    [5] Wang S F, Wu M Y, Cai C Z,etal. Autophagy modulators from traditional Chinese medicine: mechanisms and therapeutic potentials for cancer and neurodegenerative diseases[J]. Ethnopharmacol, 2016,194:861-876.

    [6] Aveic S, Tonini G P. Resistance to receptor tyrosine kinase inhibitors in solid tumors: can we improve the cancer fighting strategy by blocking autophagy?[J]. Cancer Cell Int, 2016,2(16):62.

    [7] Singh P, Ravanan P, Talwar P. Death associated protein kinase 1 (DAPK1): a regulator of apoptosis and autophagy[J]. Front Mol Neurosci, 2016,9:46.

    [8] Zambrano J, Yeh E S. Autophagy and apoptotic crosstalk: mechanism of therapeutic resistance in HER2-positive breast cancer[J]. Breast Cancer (Auckl), 2016,10:13-23.

    [9] 周曉軍,樊祥山. 解讀2010年消化系統(tǒng)腫瘤WHO分類(Ⅰ)[J]. 臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志, 2011,27(4):341-346.

    [10] Notte A, Leclere L, Michiels C. Autophagy as a mediator of chemotherapy-induced cell deam in cancer[J]. Biochem Pharmacol, 2011,82:427-434.

    [11] Wu X, Feng X, Zhao X,etal. Role of Beclin1-mediated autophagy in the Survival of pediatric leukemia cells[J]. Cell Physiol Biochem, 2016,39(5):1827-1836.

    [12] Fukuda T, Oda K, Wada-Hiraike O,etal. Autophagy inhibition augments resveratrol-induced apoptosis in Ishikawa endometrial cancer cells[J]. Oncol Lett, 2016,12(4):2560-2566.

    [13] Hao C L, Li Y, Cheng Y F,etal. High level of microtubule-associated protein light chain 3 predicts poor prognosis in resectable ESCC[J]. Int J Clin Exp Pathol, 2014,7(7):4213-4221.

    [14] Al Dhaheri Y, Attoub S, Ramadan G,etal. Carnosol induces ROS-mediated Beclin1-independent autophagy and apoptosis in triple negative breast cancer[J]. PLoS One, 2014,9(10):e109630.

    [15] Zhou Z W, Li X X, He Z X,etal. Induction of apoptosis and autophagy via sirtuin1- and PI3K/Akt/mTOR-mediated pathways by plumbagin in human prostate cancer cells[J]. Drug Des Devel Ther, 2015,9:1511-1554.

    [16] Yue Z, Jin S, Yang C,etal. Beclin1, an autophagy gene essential for early embryonic development, is a haploinsufficient tumor suppressor[J]. Proc Natl Acad Sci USA, 2003,100(25):15077-15082.

    [17] Luo L, Lu A M, Wang Y,etal. Chronic resistance training activates autophagy and reduces apoptosis of muscle cells by modulating IGF-1 and its receptors, Akt/mTOR and Akt/FOXO3a signaling in aged rats[J]. Exp Gerontol, 2013,48(4):427-436.

    [18] 何 雙,吳淑華,胡金龍,等. 自噬調(diào)控因子Beclin1及mTOR在大腸腺瘤癌變過(guò)程中的表達(dá)及意義[J]. 世界華人消化雜志, 2014,7:920-926.

    [19] 吳淑華,胡金龍,何 雙,等. 大腸癌中Beclin1、LC3和mTOR的表達(dá)及意義[J]. 臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志, 2014,30(12):1333-1338.

    [20] Won K Y, Kim G Y, Lim S J,etal. Autophagy is related to the hedgehog signaling pathway in human gastric adenocarcinoma: prognostic significance of Beclin1 and Gli2 expression in human gastric adenocarcinoma[J]. Pathol Res Pract, 2015,211(4):308-315.

    [21] Wu S, Sun C, Tian D,etal. Expression and clinical significances of Beclin1, LC3 and mTOR in colorectal cancer[J]. Int J Clin Exp Pathol, 2015,8(4):3882-3891.

    Beclin1,LC3andmTORexpressioninesophagealsquamouscellcancerationanditsclinicalsignificance

    SHU Xiang-fang1,2, WEN Fei-fei3, LI Yang-yang3, HE Shuang3, LIU Meng-yao3, WU Shu-hua1,3

    (1DepartmentofPathology,BinzhouMedicalUniversity,Binzhou256603,China;2DepartmentofPathology,BoxingCountyPeople’sHospital,Boxing256500,China;3DepartmentofPathology,AffiliatedHospital,BinzhouMedicalUniversity,Binzhou256603,China)

    PurposeTo investigate the difference of expression of autophagy-related gene (Beclin1, LC3, mTOR) in the development of esophageal squamous cell cancer.MethodsImmunohistochemical EnVision method was adopted to detect the expression of autophagy-related gene Beclinl, LC3 and mTOR in 30 cases of normal esophageal mucosa, 32 cases of low-grade intraepithelial neoplasia (LGIN), 34 cases of high-grade intraepithelial neoplasia (HGIN), 35 cases of early carcinoma and 126 cases of advanced esophageal carcinoma, respectively. The correlation between their expression with clinicopathologic factors was also analysed.ResultsThe expression of Beclin1 in advanced esophageal carcinoma was obviously higher than that in another four groups (P<0.005). LC3 expression in advanced esophageal carcinoma was significantly higher than that in normal esophageal mucosa, LGIN and early carcinoma (P<0.005). The expression of mTOR in advanced esophageal carcinoma was significantly higher than that in normal esophageal mucosa, LGIN and HGIN (P<0.005). In advanced esophageal carcinoma group, the expression of Beclin1, LC3 and mTOR was related to tumor TNM stage and lymph node metastasis (P<0.05). Beclin1 expression was positively associated with LC3 and mTOR expression in advanced squamous cell carcinoma (P<0.05). Positive correlation was also observed between the expression of mTOR and LC3 in advanced esophageal carcinoma and HGIN (P<0.05).ConclusionIn the carcinogenesis and development of esophageal cancer, Beclin1, as a tumor suppressor gene, activates autophagy and leads to excessive self consumption and death of tumor cells. mTOR promotes tumor growth by inhibiting autophagy and promoting angiogenesis. The combined detection of Beclinl, LC3 and mTOR may be beneficial to evaluate the progression and prognosis of esophageal squamous cell cancer.

    esophageal neoplasm; squamous cell cancer; Beclin1; LC3; mTOR

    R 735.1

    A

    1001-7399(2017)09-0972-06

    10.13315/j.cnki.cjcep.2017.09.007

    接受日期:2017-06-16

    山東省科技發(fā)展計(jì)劃(2010GSF10259)

    1濱州醫(yī)學(xué)院病理學(xué)教研室,濱州 256603

    2山東省博興縣人民醫(yī)院病理科,博興 256500

    3濱州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院病理科,濱州 256603

    舒向芳,女,碩士,主治醫(yī)師。E-mail: 13561596548@163.com

    吳淑華,女,教授,碩士生導(dǎo)師,通訊作者。E-mail: wsh6108@126.com

    猜你喜歡
    變組內(nèi)瘤高級(jí)別
    成人高級(jí)別腦膠質(zhì)瘤術(shù)后復(fù)發(fā)相關(guān)因素分析
    肺原發(fā)未分化高級(jí)別多形性肉瘤1例
    p16/Ki-67雙染檢測(cè)在宮頸上皮內(nèi)瘤變2級(jí)及以上病變中的應(yīng)用
    350 MW機(jī)組機(jī)電聯(lián)鎖回路的優(yōu)化
    吉林電力(2020年5期)2020-02-15 04:09:53
    高級(jí)別管線鋼X80的生產(chǎn)實(shí)踐
    山東冶金(2019年2期)2019-05-11 09:12:00
    LEEP治療中度宮頸上皮內(nèi)瘤變對(duì)HPV感染的影響
    血清胱抑素C與2型糖尿病患者發(fā)生周圍神經(jīng)病變之間的關(guān)系
    LEEP術(shù)治療宮頸上皮內(nèi)瘤變的效果研究
    高級(jí)別島葉膠質(zhì)瘤的外科治療策略
    陰道鏡在基層醫(yī)院宮頸上皮內(nèi)瘤變?cè)\斷中的應(yīng)用探討
    国产成人精品无人区| 国产精品久久久久成人av| 日本欧美视频一区| 女性被躁到高潮视频| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 久久久久精品人妻al黑| 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 又黄又粗又硬又大视频| 午夜免费鲁丝| 黄色丝袜av网址大全| 99久久国产精品久久久| 男人操女人黄网站| 麻豆av在线久日| 老鸭窝网址在线观看| 怎么达到女性高潮| 18在线观看网站| 欧美乱妇无乱码| 女警被强在线播放| 亚洲人成电影免费在线| 久久久国产成人免费| 一边摸一边抽搐一进一小说 | 国产黄色免费在线视频| cao死你这个sao货| 久久国产精品大桥未久av| 啦啦啦 在线观看视频| 99国产精品免费福利视频| 亚洲精品美女久久av网站| 欧美黑人精品巨大| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 日本五十路高清| 国产深夜福利视频在线观看| 亚洲专区中文字幕在线| 欧美日韩亚洲高清精品| 午夜视频精品福利| 亚洲国产成人一精品久久久| 婷婷成人精品国产| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 纯流量卡能插随身wifi吗| 婷婷成人精品国产| 欧美久久黑人一区二区| 国产精品 欧美亚洲| 夜夜爽天天搞| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 国产一卡二卡三卡精品| 搡老岳熟女国产| 91成人精品电影| 久久久国产欧美日韩av| 亚洲精品在线观看二区| www.自偷自拍.com| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 亚洲精品国产区一区二| 国产亚洲一区二区精品| 亚洲精品成人av观看孕妇| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 手机成人av网站| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 美女国产高潮福利片在线看| 成年人午夜在线观看视频| 五月天丁香电影| 女性被躁到高潮视频| 国产精品99久久99久久久不卡| 亚洲中文字幕日韩| 亚洲成人免费电影在线观看| 老熟妇仑乱视频hdxx| 午夜视频精品福利| 色在线成人网| h视频一区二区三区| 18禁国产床啪视频网站| 99国产精品免费福利视频| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 日韩视频一区二区在线观看| 久久中文字幕一级| 精品福利永久在线观看| 香蕉国产在线看| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 99久久精品国产亚洲精品| 法律面前人人平等表现在哪些方面| svipshipincom国产片| 窝窝影院91人妻| 国产精品熟女久久久久浪| 在线观看免费视频日本深夜| 黄色 视频免费看| 成人av一区二区三区在线看| 久久久国产欧美日韩av| 日韩欧美一区视频在线观看| 欧美激情 高清一区二区三区| 国产一区二区激情短视频| 久久精品国产亚洲av高清一级| 国产色视频综合| 免费不卡黄色视频| 国产高清videossex| 黄色a级毛片大全视频| 香蕉久久夜色| 成人特级黄色片久久久久久久 | 国产不卡av网站在线观看| 女人久久www免费人成看片| 99国产综合亚洲精品| 最近最新免费中文字幕在线| 国产熟女午夜一区二区三区| 国产区一区二久久| 黄色丝袜av网址大全| 男男h啪啪无遮挡| 成年人午夜在线观看视频| 黄色 视频免费看| 精品一区二区三卡| 国产欧美日韩一区二区三| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 日韩大码丰满熟妇| 国产一区二区在线观看av| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 欧美乱码精品一区二区三区| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 国产成人精品无人区| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 婷婷丁香在线五月| 国产99久久九九免费精品| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 久热爱精品视频在线9| 精品人妻1区二区| 国产一卡二卡三卡精品| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 精品免费久久久久久久清纯 | 国产成人精品久久二区二区91| 一区在线观看完整版| 老司机福利观看| 91老司机精品| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 丰满饥渴人妻一区二区三| 免费黄频网站在线观看国产| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 亚洲九九香蕉| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 中文字幕色久视频| 中文字幕av电影在线播放| 欧美精品亚洲一区二区| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 男女无遮挡免费网站观看| 岛国毛片在线播放| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 日本wwww免费看| 国产精品一区二区在线不卡| 99九九在线精品视频| 久久青草综合色| 午夜日韩欧美国产| 男男h啪啪无遮挡| 9191精品国产免费久久| 午夜福利视频精品| 两个人看的免费小视频| 色尼玛亚洲综合影院| 精品少妇内射三级| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 在线观看免费视频日本深夜| 国产日韩欧美亚洲二区| 蜜桃在线观看..| 国产精品av久久久久免费| 免费人妻精品一区二区三区视频| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 欧美精品亚洲一区二区| www.自偷自拍.com| 热99久久久久精品小说推荐| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 99riav亚洲国产免费| 女人精品久久久久毛片| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 欧美性长视频在线观看| 欧美日韩亚洲高清精品| 国产免费av片在线观看野外av| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 久久久久久久久久久久大奶| 日本vs欧美在线观看视频| 最新美女视频免费是黄的| 国产老妇伦熟女老妇高清| 美女视频免费永久观看网站| 国产一区有黄有色的免费视频| 99精品欧美一区二区三区四区| 亚洲一码二码三码区别大吗| 热99re8久久精品国产| 黑人欧美特级aaaaaa片| 黑人操中国人逼视频| 亚洲精品国产区一区二| 欧美变态另类bdsm刘玥| 精品久久久久久久毛片微露脸| 欧美精品一区二区大全| aaaaa片日本免费| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 一本大道久久a久久精品| 丝袜在线中文字幕| 两个人免费观看高清视频| 大陆偷拍与自拍| 操出白浆在线播放| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 成年版毛片免费区| 男人舔女人的私密视频| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 免费看a级黄色片| 欧美激情 高清一区二区三区| 国产成人精品无人区| 夜夜夜夜夜久久久久| 黄色怎么调成土黄色| 黄色成人免费大全| 国产野战对白在线观看| 深夜精品福利| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 国产区一区二久久| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 一二三四在线观看免费中文在| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 午夜福利在线观看吧| 欧美一级毛片孕妇| 91精品国产国语对白视频| 国产一区二区三区视频了| 人妻 亚洲 视频| 俄罗斯特黄特色一大片| 99精国产麻豆久久婷婷| 国产精品久久久人人做人人爽| 在线观看www视频免费| 色婷婷久久久亚洲欧美| 丁香六月欧美| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 久久午夜综合久久蜜桃| av网站在线播放免费| 麻豆av在线久日| 国产成人av教育| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 欧美日韩av久久| 国产野战对白在线观看| av有码第一页| 成人手机av| 国产人伦9x9x在线观看| 欧美日韩av久久| 美女午夜性视频免费| 久久中文字幕人妻熟女| 国产av又大| 成人18禁在线播放| 欧美日韩精品网址| 精品亚洲成a人片在线观看| 久久久久精品人妻al黑| 国产成人影院久久av| 亚洲成a人片在线一区二区| 精品少妇内射三级| 亚洲精品在线美女| 午夜福利一区二区在线看| 最近最新中文字幕大全免费视频| 操美女的视频在线观看| 黄色a级毛片大全视频| 麻豆成人av在线观看| av在线播放免费不卡| 黄色视频,在线免费观看| 午夜精品久久久久久毛片777| 制服人妻中文乱码| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 亚洲全国av大片| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 国产男女超爽视频在线观看| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 国产黄色免费在线视频| 国产激情久久老熟女| 岛国在线观看网站| 男女午夜视频在线观看| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 一边摸一边抽搐一进一小说 | 午夜激情久久久久久久| 欧美人与性动交α欧美软件| 精品亚洲成国产av| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| av天堂久久9| 水蜜桃什么品种好| av在线播放免费不卡| 亚洲七黄色美女视频| e午夜精品久久久久久久| 一区二区三区国产精品乱码| 丝袜在线中文字幕| 国产一区二区激情短视频| 免费观看a级毛片全部| av国产精品久久久久影院| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 人妻 亚洲 视频| 丝袜人妻中文字幕| svipshipincom国产片| 国产精品国产高清国产av | 啦啦啦免费观看视频1| 中文字幕人妻丝袜制服| 日韩中文字幕视频在线看片| 咕卡用的链子| 亚洲精品在线观看二区| 一个人免费在线观看的高清视频| 国产国语露脸激情在线看| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 丝袜美腿诱惑在线| 久久这里只有精品19| 丰满少妇做爰视频| 午夜福利视频在线观看免费| 亚洲av电影在线进入| 精品国产一区二区久久| 人人澡人人妻人| 女同久久另类99精品国产91| 男女床上黄色一级片免费看| 成年人黄色毛片网站| 青青草视频在线视频观看| 一级黄色大片毛片| 日韩欧美三级三区| tocl精华| 一级毛片女人18水好多| 日本黄色视频三级网站网址 | 99精品欧美一区二区三区四区| 成人手机av| 我的亚洲天堂| 久久久精品区二区三区| 亚洲av美国av| 一进一出抽搐动态| netflix在线观看网站| videos熟女内射| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 水蜜桃什么品种好| 考比视频在线观看| 又大又爽又粗| 91大片在线观看| 美女视频免费永久观看网站| 日韩欧美三级三区| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 丁香六月欧美| 亚洲精品在线观看二区| 国产有黄有色有爽视频| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 欧美激情久久久久久爽电影 | 亚洲,欧美精品.| 国产精品成人在线| 真人做人爱边吃奶动态| 极品少妇高潮喷水抽搐| 母亲3免费完整高清在线观看| 亚洲人成伊人成综合网2020| 日日夜夜操网爽| videos熟女内射| 日韩欧美免费精品| av网站在线播放免费| 一区二区三区激情视频| 亚洲av美国av| 无人区码免费观看不卡 | 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 国产极品粉嫩免费观看在线| 亚洲中文日韩欧美视频| 纯流量卡能插随身wifi吗| 交换朋友夫妻互换小说| 国精品久久久久久国模美| 免费在线观看日本一区| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 久久婷婷成人综合色麻豆| 亚洲av日韩在线播放| 欧美久久黑人一区二区| 欧美 日韩 精品 国产| 亚洲精品自拍成人| 搡老熟女国产l中国老女人| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 色精品久久人妻99蜜桃| a级片在线免费高清观看视频| 久久久久久久久久久久大奶| 最近最新中文字幕大全电影3 | 欧美黑人精品巨大| 嫁个100分男人电影在线观看| 最近最新中文字幕大全电影3 | 女性生殖器流出的白浆| 免费观看a级毛片全部| 热re99久久国产66热| 男女午夜视频在线观看| 一级,二级,三级黄色视频| 精品国内亚洲2022精品成人 | 国产成人av教育| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 波多野结衣av一区二区av| 狠狠狠狠99中文字幕| 国产精品欧美亚洲77777| 美女视频免费永久观看网站| 女人久久www免费人成看片| 操美女的视频在线观看| 中文字幕精品免费在线观看视频| 一区福利在线观看| 嫁个100分男人电影在线观看| 亚洲精品在线美女| 国产免费现黄频在线看| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 五月天丁香电影| 大香蕉久久网| 亚洲欧洲日产国产| 国产亚洲av高清不卡| 国产精品久久久久成人av| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 又紧又爽又黄一区二区| 天堂中文最新版在线下载| 国产精品一区二区免费欧美| 波多野结衣av一区二区av| 久久午夜亚洲精品久久| 色播在线永久视频| 久热这里只有精品99| 国产区一区二久久| 91字幕亚洲| 91国产中文字幕| 热99国产精品久久久久久7| 国产欧美日韩一区二区三| 午夜久久久在线观看| 亚洲精品国产区一区二| 亚洲av欧美aⅴ国产| www.精华液| 99久久人妻综合| 欧美日韩成人在线一区二区| 亚洲专区字幕在线| 久久毛片免费看一区二区三区| 最黄视频免费看| 黄色 视频免费看| 免费人妻精品一区二区三区视频| 无限看片的www在线观看| 国产不卡一卡二| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 丝袜美足系列| 97在线人人人人妻| 久久久久久免费高清国产稀缺| 啦啦啦免费观看视频1| 午夜老司机福利片| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 国产在线免费精品| 人人澡人人妻人| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 欧美乱妇无乱码| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 国产不卡av网站在线观看| 亚洲精品国产一区二区精华液| 色在线成人网| 99热国产这里只有精品6| 热re99久久精品国产66热6| 视频在线观看一区二区三区| 国产精品熟女久久久久浪| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 国产精品久久久av美女十八| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 日日夜夜操网爽| 亚洲精品粉嫩美女一区| 视频区欧美日本亚洲| 精品久久久久久久久久免费视频| 长腿黑丝高跟| 麻豆一二三区av精品| 综合色av麻豆| 中文字幕av在线有码专区| 成在线人永久免费视频| 亚洲最大成人中文| 又大又爽又粗| 国产爱豆传媒在线观看| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 在线视频色国产色| 欧美中文综合在线视频| 欧美黑人欧美精品刺激| 99久久精品一区二区三区| 极品教师在线免费播放| 岛国在线观看网站| 久久久久九九精品影院| 欧美日韩黄片免| 亚洲人成伊人成综合网2020| 日韩欧美精品v在线| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 88av欧美| 中文资源天堂在线| 亚洲黑人精品在线| 一个人免费在线观看电影 | 国产欧美日韩精品亚洲av| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 51午夜福利影视在线观看| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 男插女下体视频免费在线播放| 午夜福利高清视频| 亚洲欧美激情综合另类| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 亚洲第一电影网av| 亚洲精品美女久久av网站| 在线国产一区二区在线| av视频在线观看入口| 中文亚洲av片在线观看爽| www.www免费av| 999久久久国产精品视频| 免费在线观看亚洲国产| 国产不卡一卡二| 国产 一区 欧美 日韩| 亚洲精品美女久久av网站| 日韩欧美在线乱码| 天天躁日日操中文字幕| 老汉色∧v一级毛片| 三级毛片av免费| 成人三级黄色视频| 日韩欧美国产在线观看| 国产一区二区激情短视频| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 国产成人影院久久av| 久久久久久人人人人人| 91麻豆av在线| 97超视频在线观看视频| 在线观看舔阴道视频| 日韩av在线大香蕉| 精品一区二区三区视频在线观看免费| xxxwww97欧美| 国产主播在线观看一区二区| 国产av麻豆久久久久久久| 精品国产乱码久久久久久男人| 又紧又爽又黄一区二区| 熟女人妻精品中文字幕| 在线观看一区二区三区| 欧美一级a爱片免费观看看| 最近视频中文字幕2019在线8| 国语自产精品视频在线第100页| 成年人黄色毛片网站| 国产野战对白在线观看| 色尼玛亚洲综合影院| 99在线人妻在线中文字幕| 国产精品亚洲美女久久久| 免费看十八禁软件| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 美女扒开内裤让男人捅视频| 一二三四社区在线视频社区8| 中文资源天堂在线| 十八禁人妻一区二区| 国产精品综合久久久久久久免费| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 国产精品久久久久久精品电影| 美女被艹到高潮喷水动态| 岛国在线免费视频观看| 身体一侧抽搐| 性欧美人与动物交配| 久久精品国产清高在天天线| 欧美日本视频| 18美女黄网站色大片免费观看| 91字幕亚洲| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 精品国产三级普通话版| 级片在线观看| 波多野结衣高清作品| 香蕉久久夜色| 高清毛片免费观看视频网站| 999久久久国产精品视频| 特大巨黑吊av在线直播| 男女床上黄色一级片免费看| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 麻豆国产97在线/欧美| 午夜日韩欧美国产| 丝袜人妻中文字幕| 两个人的视频大全免费| 操出白浆在线播放| 波多野结衣高清无吗| 成人18禁在线播放| 成人特级av手机在线观看| 又黄又粗又硬又大视频| 一边摸一边抽搐一进一小说| 亚洲真实伦在线观看| 亚洲精品乱码久久久v下载方式 | 国产成人av教育| 国内揄拍国产精品人妻在线| 成人欧美大片| 亚洲黑人精品在线| www.自偷自拍.com| 久久伊人香网站| 中文字幕熟女人妻在线| 在线a可以看的网站| av片东京热男人的天堂| 1024香蕉在线观看| 韩国av一区二区三区四区| 男插女下体视频免费在线播放| 人人妻人人澡欧美一区二区| 制服人妻中文乱码| 偷拍熟女少妇极品色| 午夜两性在线视频| 欧美黄色淫秽网站| 哪里可以看免费的av片| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 嫁个100分男人电影在线观看| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 午夜久久久久精精品| 亚洲性夜色夜夜综合| 动漫黄色视频在线观看| 首页视频小说图片口味搜索| 丰满人妻一区二区三区视频av | 曰老女人黄片| 麻豆成人午夜福利视频| 国产一区在线观看成人免费| 麻豆一二三区av精品| 又大又爽又粗| 午夜福利18| 91老司机精品| 亚洲七黄色美女视频| 日韩人妻高清精品专区| 日韩欧美国产在线观看| 国产精品av久久久久免费| 亚洲电影在线观看av| 老司机福利观看| 国产一区二区在线av高清观看| 国产精品98久久久久久宅男小说| 操出白浆在线播放| cao死你这个sao货| 99久久成人亚洲精品观看| 老汉色av国产亚洲站长工具| 国产精品99久久99久久久不卡| 女警被强在线播放| 久久中文看片网| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 在线观看日韩欧美| 久久天堂一区二区三区四区| 欧美日韩国产亚洲二区| 两性夫妻黄色片| 国产又色又爽无遮挡免费看| 真人做人爱边吃奶动态| 嫁个100分男人电影在线观看| 久久国产乱子伦精品免费另类| 精品国产乱子伦一区二区三区| 亚洲精品中文字幕一二三四区|