滁菊中有效成分的檢測方法研究概述

吳越

摘 要：滁州貢菊為滁州地方特產(chǎn)之一，具有重要的藥用價值，建立其有效成分的檢測方法尤為重要。該文概述了檢測滁菊中揮發(fā)油、黃酮類化合物、微量元素、氨基酸、糖類5種物質(zhì)的常見檢測方法，分別為：氣相色譜檢測器、紫外分光光度法、原子吸收檢測法、分子熒光檢測法及電分析化學(xué)檢測法。

關(guān)鍵詞：滁菊；有效成分；檢測方法

中圖分類號 O657.72 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A 文章編號 1007-7731（2017）19-0016-2

1 引言

菊科，為雙子葉植物綱、菊亞綱的第一大科，為草本植物。葉?；ド?，無托葉。頭狀花序單生或再排成各種花序，外形由一至多層苞片組成的總苞?；ㄓ袃尚?，單性或中性，還有極少的雌雄異株。花萼退化以后，常變?yōu)槊珷睢⒋堂珷罨蝼[片狀，稱之為冠毛。菊科有大量的藥用、觀賞和經(jīng)濟(jì)植物。

滁州貢菊（以下簡稱滁菊）是安徽省滁州的傳統(tǒng)特產(chǎn)，又名“甘菊”、“白菊”等，為多年生草本菊科植物，為中國“四大名菊”之一。其性微寒，味辛、苦、甘，歸肝肺經(jīng)，具有疏風(fēng)清熱、解毒、平肝明目之功。現(xiàn)代藥理檢測分析表明，滁菊中含有黃酮、揮發(fā)油、氨基酸和微量元素等有效成分，其中含有揮發(fā)油的主要成分二烯酮、龍腦、樟腦、按葉油素等明顯高于其他菊花；總黃酮含量比其他菊花高32%～61%；在含有的17種氨基酸中富含人體必需的8種氨基酸；另外還含有10種天然態(tài)的微量元素，尤其是硒的含量比其他菊花高8～40倍，其活性作用強(qiáng)于單純的無機(jī)鹽而更易被人體吸收。其使用方法可作茶沖泡飲用，可作中藥材入藥，亦可作菜直接使用，是藥、茶、食三用的純天然綠色食品保健品[1]。

對滁菊中有效成分的檢測，建立其標(biāo)準(zhǔn)方法是一項有著深遠(yuǎn)意義的研究課題，對推廣地方產(chǎn)業(yè)，發(fā)展地方特色有著重要的作用。本文就滁州特產(chǎn)——滁菊中揮發(fā)油、黃酮、微量元素、氨基酸、糖類的物質(zhì)的檢測分別進(jìn)行了概述，建立其檢測方法，并對現(xiàn)有的文獻(xiàn)中檢測數(shù)據(jù)進(jìn)行了歸納和總結(jié)，以期為今后的“模板化”檢測滁菊中有效成分提供理論依據(jù)。

2 有效成分的檢測方法

2.1 揮發(fā)油 揮發(fā)油類又稱精油，是一類具有揮發(fā)性可隨水蒸汽蒸餾出來的油狀液體，大部分具有香氣，如薄荷油、丁香油等。為多種類型化合物的混合物，其中有脂肪族化合物、芳香族化合物，但更多為萜類衍生物，其中脂肪族化合物：有烴、醇、醛、酮、酯等，廣泛存在于植物特別是水果中，如正丙醇、辛醛、醋酸乙酯、甲酸、辛酸乙酯等。萜類化合物的基本結(jié)構(gòu)大多為異戊二烯，具有（C5H8）n的通式。C10H16稱為單萜類，C15H24稱為倍半萜類，C20H32稱為二萜類，由6個或8個異戊二烯組成的化合物分別叫三萜類和四萜類，由更多異戊二烯組成的化合物叫多萜類。揮發(fā)油中的萜類主要為單萜與倍半萜，多萜類在揮發(fā)油中并不存在，而為某些樹脂、色素、橡膠等的成分。揮發(fā)油中的萜類化合物可以含氧或不含氧。對于大多數(shù)揮發(fā)油來說不含氧的烴類成分雖占大量，但多數(shù)無佳適香氣因而不是重要成分。含氧衍生物有醇、醛、酮、醚、酸、酚、酯等，含量雖較少但大多具有優(yōu)異芳香氣，是揮發(fā)油中的重要成分。

按《中國藥典》中揮發(fā)油測定，將滁菊粉碎使能通過2～3號篩，分別用水浸泡，采取水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)用，采用GC-MS聯(lián)用儀進(jìn)行檢測，經(jīng)色譜峰面積歸一化法，得出各組分的含量。周國梁等采用正交實(shí)驗(yàn)法，以揮發(fā)油得率為實(shí)驗(yàn)指標(biāo)，將粉碎度、加水量、浸泡時間、蒸餾時間為考察因素進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計，確定了提取滁菊中揮發(fā)油的最佳實(shí)驗(yàn)條件為：菊花粉碎度80100目，14倍加水量，浸泡10h，提取13h。王亞君等對安徽產(chǎn)菊花揮發(fā)性化學(xué)成分檢測中，其中檢測滁菊中共檢測出182個色譜峰，鑒定了50個化合物，鑒定率為73.22%，其中β-芹子烯為17.85%、杜松腦為7.72%、馬兜鈴烯環(huán)氧化物8.90%、龍腦12.84%、樟腦5.90%[2]。

2.2 黃酮類化合物 黃酮類化合物（flavonoids）是一類存在于自然界的、具有2-苯基色原酮（flavone）結(jié)構(gòu)的化合物（圖1）。它們分子中有一個酮式羰基，第一位上的氧原子具堿性，能與強(qiáng)酸成鹽，其羥基衍生物多具黃色，故又稱黃堿素或黃酮。黃酮類化合物在植物體中通常與糖結(jié)合成苷類，小部分以游離態(tài)（苷元）的形式存在。絕大多數(shù)植物體內(nèi)都含有黃酮類化合物，它在植物的生長、發(fā)育、開花、結(jié)果以及抗菌防病等方面起著重要的作用。主要代表物有黃岑素、槲皮素、黃岑苷等。

王松等研究了滁菊中黃銅的提取工藝，發(fā)現(xiàn)當(dāng)用80%的乙醇，固液比為1∶100（g/mL），萃取溫度為70℃時，獲得的總黃酮產(chǎn)率最高為75.46mg/g。袁敏等通過實(shí)驗(yàn)得出最佳提取工藝條件為70%乙醇為洗脫劑，樣品上樣濃度為29.75g/mL，料液比為1∶20。衛(wèi)強(qiáng)等研究了6種大孔樹脂吸附富集滁菊中總黃酮的工藝條件和參數(shù)。劉麗君等以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品，檢測波長為506nm，采用紫外-可見分光光度法測定總黃酮的含量，顯示總黃酮在0～100g/mL與吸收值呈良好的線性關(guān)系。舒俊生采用質(zhì)譜與液相色譜聯(lián)用法測定滁菊中含有槲皮素、芹黃素等23種黃酮類化合物。孫艷輝等根據(jù)黃酮類化合物與Al3+形成熒光絡(luò)合物的原理，以蘆丁為標(biāo)樣，測定437nm處同步熒光強(qiáng)度[3]。

2.3 微量元素的測定 菊花中常見的含量較多的微量元素主要有Ca、Mg、Fe、Zn等，對于滁州貢菊中微量元素的檢測鮮有報道。多為菊花中微量元素的檢測。對于礦物質(zhì)元素和重金屬元素含量的檢測一般采取原子吸收光譜法。鄧家勝等使用HNO3-HClO4體系消解樣品，火焰原子吸收光譜法測定產(chǎn)于安徽的3種藥用菊花中的微量元素，通過實(shí)驗(yàn)測得滁菊中主要含有Ca、Fe、Zn、Mn、Mg等對身體有益的礦物質(zhì)元素。呂瑞等采用粉碎機(jī)粉碎混合酸處理后，電熱板加熱微沸后加入雙氧水待測，利用火焰化原子吸收分光光度計測定了黃山貢菊和高原野菊中Fe、Mn、Zn、Cu含量的測定[4]。endprint

2.4 氨基酸的測定 氨基酸重要的作用是在機(jī)體中合成蛋白質(zhì)，為生命提供能量，滿足其生長發(fā)育。菊花中含有豐富的氨基酸，其中包含了人體必需的8種氨基酸，研究發(fā)現(xiàn)菊花中門冬氨酸、谷氨酸、羥脯氨酸的含量較高，胱氨酸、組氨酸、蛋氨酸含量較低。目前測定氨基酸的方法主要有比色法、色譜法及分子熒光光譜法等。吳霖生等利用氨基酸與乙酰丙酮和甲醛反應(yīng)可以生成能發(fā)出熒光的物質(zhì)，建立了測定滁菊中氨基酸總含量的方法，并討論了其光譜條件，從波長、酸度、反應(yīng)溫度、反應(yīng)時間等參數(shù)確定了最佳條件。王慶蘭等采用日立835-50型氨基酸自動測定儀對市售的8種菊花中氨基酸含量進(jìn)行測定，其中谷氨酸、羥脯氨酸較其他種類的菊花含量較高，苯丙氨酸、脯氨酸含量較低[5]。

2.5 糖類含量的測定 糖類是菊花的主要成分之一，研究發(fā)現(xiàn)糖類除了能夠?yàn)槿梭w提供必要的能量之外，還具有降血糖、抗病毒、降血脂等作用，菊花中較為常見的糖為：葡萄糖、果糖、蔗糖及各類寡糖、多糖。如今而言，多采用毛細(xì)管區(qū)帶電泳-安培檢測法分離測定糖類，該方法不僅前處理簡單，并且靈敏度、試劑用量小等特點(diǎn)。朱金坤等構(gòu)建了CZE-AD系統(tǒng)，對滁菊、杭黃菊、貢菊、亳菊4種菊花中的蔗糖、半乳糖、葡萄糖、果糖分別進(jìn)行分離檢測，其中滁菊中蔗糖、半乳糖、葡萄糖、果糖相對于其他4種菊花中的含量都較低[6]。

參考文獻(xiàn)

[1]王龍，王德群，韓邦興，等.滁菊茶用與藥用的發(fā)展變化[J].安徽中醫(yī)學(xué)院報，2010，29（6）：75-77.

[2]郭巧生，王亞君，楊秀偉，等.杭菊花揮發(fā)性成分的表征分析[J].中國中藥雜志，2008，33（6）：624.

[3]劉利軍，于艷，時維靜，等.安徽省3種藥用菊花總黃酮含量比較[J].安徽科技學(xué)院學(xué)報，2012，26（4）：47-50.

[4]呂瑞，劉璐，何越.兩種菊花中微量元素含量的測定[J].微量元素與健康究，2013，30（3）：34-36.

[5]王慶蘭，林慧彬，張素芹.不同菊花氨基酸含量的比較研究[J].中國中醫(yī)藥科技，2005，12（4）：249.

[6]朱金坤，姚孝林，鄭勝彪.菊花中糖類組分的毛細(xì)管電泳-安培檢測研究[J].宜春學(xué)院學(xué)報，2012，34（4）：94-97.

（責(zé)編：張宏民）endprint