山東省諸城市羊群布魯氏菌病基線調查

李煥明，鄭兆芹，高 瀚，黨安坤，蘭鄒然

（1.諸城市動物疫病預防控制中心，山東諸城 262200；2.諸城市龍都畜牧獸醫(yī)管理站，山東諸城 262200；3.山東省動物疫病預防與控制中心，山東濟南 250022）

山東省諸城市羊群布魯氏菌病基線調查

李煥明1，鄭兆芹2，高 瀚1，黨安坤3，蘭鄒然3

（1.諸城市動物疫病預防控制中心，山東諸城 262200；2.諸城市龍都畜牧獸醫(yī)管理站，山東諸城 262200；3.山東省動物疫病預防與控制中心，山東濟南 250022）

為了解山東省諸城市羊群布魯氏菌病的感染情況，同時為本市羊群布魯氏菌病防治提供數(shù)據(jù)支撐，針對諸城市羊養(yǎng)殖業(yè)戶進行了布魯氏菌病流行病學調查。調查結果顯示：本市10個規(guī)模化羊場中，未檢出布魯氏菌病陽性；小規(guī)模養(yǎng)羊場場群表觀流行率和個體表觀流行率分別為1.14%（1/88）（95%CI：0.00%～3.35%）和0.16%（5/3 143）（95%CI：0.01%～0.30%）；從空間分布來看，布魯氏菌病陽性場位于本市小規(guī)模飼養(yǎng)場較多的西北部地區(qū)。

羊；布魯氏菌??；基線調查；流行率

布魯氏菌?。ㄒ韵潞喎Q布?。┦怯刹剪斒暇鸬?，以侵害生殖系統(tǒng)為主的一種人獸共患傳染病。該病可以在動物間、動物和人間交叉?zhèn)鞑?，不但對養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)帶來巨大損失，而且也嚴重威脅人類的健康。山東省諸城市位于膠東半島口蹄疫免疫無疫區(qū)和高致病性禽流感免疫無疫區(qū)中，動物疫病防控基礎扎實。對于布病防控，嚴格按照國家有關規(guī)定和省、市畜牧獸醫(yī)局重大動物疫病防控工作實施方案要求，禁止實施羊布病免疫。雖然近幾年諸城市的布病疫情呈穩(wěn)定控制態(tài)勢，但2010年以來，諸城市出現(xiàn)人間布病病例數(shù)逐年增多趨勢，尤其是養(yǎng)羊集中區(qū)和外調頻繁的規(guī)模養(yǎng)殖場。為了解諸城市羊群布病的流行狀況，開展了針對羊場布病的基線調查工作。

1 材料與方法

1.1 病例定義

陽性羊：對通過虎紅平板凝集初篩陽性的，經(jīng)試管凝集復核的垂直聯(lián)合實驗檢測仍為陽性的羊只。

陽性群：群內(nèi)至少有1只羊檢測為布病陽性的養(yǎng)羊場戶。

陽性鎮(zhèn)（街）：至少檢測出1個布病陽性養(yǎng)羊場戶的鎮(zhèn)（街）。

1.2 研究群和抽樣單元

研究群：結合諸城市2017年春季重大動物疫病防控和山東省《2017年布魯氏菌病流行狀況基線調查》要求，2017年5—6月，對諸城市13處鎮(zhèn)（街）的958個羊養(yǎng)殖場群（1個自然村所有小規(guī)模養(yǎng)羊戶視為1個場群）和10個羊規(guī)模場（年出欄500只以上）進行全面普查。

抽樣單元：對于群體，抽樣單元為每個研究群；對于個體，抽樣單元為研究群內(nèi)所有6月齡以上羊只。

1.3 抽樣方案設計

參照徐秀榮等[1]的方法進行調整。根據(jù)諸城市各鎮(zhèn)（街）羊的存欄情況，采用分層兩階段抽樣方法：第1層包括958個羊養(yǎng)殖場群（1個自然村所有小規(guī)模養(yǎng)羊戶視為1個場群），第2層為規(guī)?；B(yǎng)羊場（共10個）；第1階段為普查，對所有10個規(guī)模化養(yǎng)羊場全部進行抽樣，第2階段的群內(nèi)抽樣數(shù)量與第1層第2階段抽樣相同。

第1階段：在全市958個羊養(yǎng)殖場群內(nèi)隨機抽取需調查的場群。

第1步，計算全市抽取的場群數(shù)。用估計流行率的方法[2]抽取。按95%置信水平，預期流行率50%，10%的可接受誤差，全市958個場群，計算出抽樣場群為88個。計算公式為：

第2步，計算每個鎮(zhèn)街的抽樣場數(shù)。按配額方法進行，即根據(jù)每個鎮(zhèn)街場群數(shù)占全市場群數(shù)的比例（各鎮(zhèn)街場數(shù)占比=場數(shù)/958），分配這88個場群（配額場數(shù)=88×各鎮(zhèn)街場數(shù)占比）。

第3步，配額取整。

第4步，從每個鎮(zhèn)街中選取要抽樣的場。以958個羊場群作為抽樣框，用系統(tǒng)隨機抽樣（也叫等距抽樣）方法，選取每個鎮(zhèn)街要抽樣的場群。

第2階段：對第1階段選定的13處鎮(zhèn)（街）的88個羊場群進行樣本量計算和隨機抽取。

第1步，選定場群后，如果發(fā)現(xiàn)場群的羊只已經(jīng)出售，或者不符合抽樣要求，可以進行適當調整，采用就近選擇類似的場群即可。同樣采用估計流行率的方法抽取，按照95%的置信水平，可接受絕對誤差4.5%，預期流行率5%，計算選定的13處鎮(zhèn)（街）88個場群中每個場群的抽樣數(shù)。

第2步，場內(nèi)隨機選羊。同樣按系統(tǒng)隨機方法抽樣。如果，1個羊場150只羊，就要抽20只，那么可以讓羊排隊走過一過道，隔7只抽1只，直至抽夠20只為止。

1.4 檢測方法

對采集的血清，進行虎紅平板凝集試驗和試管凝集試驗垂直試驗，檢測布病抗體。先用虎紅平板凝集試驗初篩，對檢出的陽性樣品再用試管凝集實驗確診。本次調查參照文獻[3]，設定虎紅平板凝集實驗的敏感性、特異性分別為95%、80%，試管凝集試驗的敏感性、特異性分別為85%、90%，垂直聯(lián)合實驗的敏感性、特異性分別為81%和98%。

1.5 數(shù)據(jù)分析

血清流行率的計算：根據(jù)實驗室檢測結果，獲知該地區(qū)羊布病的個體表觀流行率和場群表觀流行率，利用公式TP=（AP+Sp-1）/（Se+Sp-1）計算出真實流行率。通過以下公式計算真實流行率的95%置信區(qū)間（CI）：

其中p為真實流行率，Z為標準正態(tài)分布中概率為0.05對應的統(tǒng)計量，n為抽樣數(shù)量。

2 結果

2.1 羊群布病流行率

2017年上半年，根據(jù)抽樣方案，共對諸城市13處鎮(zhèn)（街）958個羊場群中的88個羊場群和10個規(guī)模養(yǎng)殖場分別抽取樣本3 143、817份。經(jīng)實驗室檢測，10個規(guī)?；瘓龅?17份樣品中，未檢出布病陽性，場群和個體表觀流行率均為0（表1）；88個小規(guī)模養(yǎng)場群中，僅檢出1個陽性場群，小規(guī)模養(yǎng)羊戶場群表觀陽性率為1.14%（1/88）（95%CI：0.00%～3.35%），計算得到的真實流行率為負值；陽性鄉(xiāng)鎮(zhèn)舜王街辦的表觀場流行率為11.11%（1/9）（95%CI：0.00%～31.64%），計算得到的真實流行率為11.53%；陽性鄉(xiāng)鎮(zhèn)舜王街辦檢出陽性樣品5份，該街辦的布病個體表觀流行率為1.91%（5/262）（95%CI：0.25%～3.57%），計算得到的真實流行率為負值；小規(guī)模養(yǎng)羊戶個體表觀流行率為0.16%（5/3 143）（95%CI：0.01%～0.30%），計算得到的真實流行率為負值（表2、表3）。

表1 2017年諸城市羊規(guī)模場布病血清學調查結果統(tǒng)計

表2 2017年諸城市羊場群布病血清學調查結果統(tǒng)計

2.2 陽性場戶空間分布

諸城市共有13處鎮(zhèn)（街）、3處市屬重點園區(qū)（按養(yǎng)殖屬地管理分別并于3處街辦統(tǒng)計），其中有1個鎮(zhèn)街（舜王街辦）檢測出布病陽性場群，鄉(xiāng)鎮(zhèn)表觀陽性率為7.69%（1/13）（95%CI：0.00%～22.18%），根據(jù)公式計算得到真實流行率為7.21%（表3）。從陽性鎮(zhèn)街分布來看，陽性鄉(xiāng)鎮(zhèn)位于本市西北部。

表3 2017年諸城市小規(guī)模羊場的布病流行率統(tǒng)計

3 討論與結論

本研究首次對諸城市羊群布病的流行情況進行了全面摸底調查。從總體情況來看，諸城市10個規(guī)?；驁鲋形礄z出布病陽性；小規(guī)模養(yǎng)羊場群場群表觀流行率為1.14%（1/88）（95%CI：0.00%～3.35%），個體表觀流行率為0.16%（5/3 143）（95%CI：0.01%～0.30%），場群流行率和個體流行率均處于較低水平；陽性場群歸屬舜王街辦轄區(qū)，位于本市西北部地區(qū)。

諸城市位于膠東半島高致病性禽流感免疫無疫區(qū)和口蹄疫免疫無疫區(qū)，對于動物疫病采取比較嚴厲的防控政策。對于羊布病防控，諸城市一直以來采取監(jiān)測凈化的方式來控制，嚴禁在羊群中開展布病疫苗免疫。一旦檢出陽性，立即撲殺陽性羊只，同時開展流行病學調查，查清陽性羊只的來源，消除疫情隱患。與此同時，倡導自繁自養(yǎng)，引入種羊或其他羊群時，嚴格進行布病檢疫和檢測，嚴防引入布病陽性羊只；堅持在混群前嚴格隔離的原則。

雖然諸城市的布病疫情相對平穩(wěn)，但從檢測結果來看，依然有少量陽性樣本存在。分析可能原因包括幾下幾點：

一是當?shù)靥囟ǖ酿B(yǎng)殖模式。本市養(yǎng)羊戶以中小規(guī)模為主。盡管畜牧獸醫(yī)主管部門一直對布病采取嚴厲的防控措施，宣傳自繁自養(yǎng)理念，但是一些養(yǎng)羊戶受利益驅使，不時從內(nèi)蒙古、新疆等外地購入羊只，以及從本省其他地區(qū)購入未經(jīng)檢疫的低價羊只，進行短期飼養(yǎng)育肥，待節(jié)日期間或高價時集中出售。這增加了布病傳入的風險。此外，相鄰自然村或鎮(zhèn)街存在共用種羊和放牧區(qū)現(xiàn)象。一旦有布病陽性羊只流入，恨容易導致布病的水平傳播。

二是以往開展布病調查時，在計算樣本量和隨機選擇羊群和羊只時，由于對獸醫(yī)流行病學知識了解不足，存在樣本量不足和便利抽樣的情況，從而導致對檢測結果的誤差控制不夠和出現(xiàn)漏檢陽性羊只情況。

三是以往調查時較多關注個體流行率，而對于羊場群流行率及群陽性的分布情況不太關注，對出現(xiàn)陽性的原因調查不充分，導致陽性鎮(zhèn)（街）一直沒有采取有效的控制措施。

本研究初步掌握了本市羊群布病的流行率和陽性鎮(zhèn)（街）的分布情況，確定了布病陽性鎮(zhèn)（街）的分布位置，對于進一步控制本市的布病具有重要作用。今后應重點加強對陽性鎮(zhèn)街的監(jiān)測和監(jiān)視，對于布病陽性的羊只，及時采取了撲殺及無害化處理措施。同時加大布病的培訓和宣傳工作，讓全社會認識布病，營造控制布病的良好氛圍。對羊群的布病免疫和檢疫，應強化監(jiān)督管理，防止養(yǎng)殖戶免疫布病疫苗及布病陽性羊只的調入，通過監(jiān)測有序開展布病凈化，最終消滅布病。

[1] 徐秀榮，袁凱，龔冬花，等. 縣級羊布魯氏菌病基線調查方案設計[J]. 中國動物檢疫，2017，34（7）：20-24

[2] THRUSFIELD M. Veterinary Epidemiology [M]. 3rd ed.Oxford：Blackwell science Ltd，2005：183-189.

[3] YAMEN M H，AMGAD M，SALAMA O，et al.Ruminant Brucellosis in the Kafr El Sheikh Governorate of the Nile Delta，Egypt：Prevalence of a Neglected Zoonosis[J].Public libraty of science，2011，5（1）：1-9.

（責任編輯：朱迪國）

Baseline Survey on Brucellosis in Sheep and Goats in Zhucheng City of Shandong Province

Li Huanming1，Zheng Zhaoqin2，Gao Han1，Dang Ankun3，Lan Zouran3
（1. Zhucheng Animal Disease Prevention and Control Center，Zhucheng，Shandong 262200；2. Longdu Animal Husbandry and Veterinary Management Station，Zhucheng，Shandong 262200；3. Shandong Provincial Center for Animal Disease Prevention and Control，Jinan，Shandong 250022）

In order to determine the infection status of Brucellosis in sheep and goats，and to provide data support for its prevention and control in Zhucheng City of Shandong Province，an epidemiological survey of Brucellosis in sheep and goat farms was carried out. The results showed that no Brucellosis positive samples was found in 10 scaled farms. The apparent prevalence rate at group and individual level in small-scaled farms were 1.14%（1/88）（95% CI：0.00%～3.35%）and 0.16%（5/3 143）（95% CI：0.01%-0.30%），respectively. From the spatial distribution，the Brucellosis positive farm was located in the northwest of this city with many small-scaled farms.

sheep and goat；Brucellosis；baseline survey；prevalence

S851.3

A

1005-944X（2017）11-0013-04

10.3969/j.issn.1005-944X.2017.11.004

山東省優(yōu)秀中青年科學家科研獎勵基金（BS2010NY020）

蘭鄒然