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    耐鎘芽孢桿菌對(duì)Cd2+的吸附機(jī)制

    2019-12-23 07:23:39余雪梅彭書(shū)明王洪婷伏媛李璟張山
    江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2019年20期

    余雪梅 彭書(shū)明 王洪婷 伏媛 李璟 張山

    摘要:從攀枝花礦區(qū)淤泥樣品中通過(guò)逐級(jí)提高Cd2+濃度進(jìn)行馴化,獲得1株高耐鎘菌株P(guān)FYN01,經(jīng)16S rDNA PCR鑒定為芽孢桿菌(Bacillus sp),最大耐Cd2+濃度為3 900 mg/L。研究初始Cd2+濃度、pH值、菌量對(duì)菌株吸附Cd2+的影響,利用掃描電鏡(SEM)和傅葉里紅外光譜(FTIR)探究菌株吸附機(jī)制。結(jié)果表明,PFYN01在初始Cd2+濃度為75 mg/L、菌量為1.0 g/L、pH值為5.0時(shí),對(duì)Cd2+的吸附率達(dá)到34.98%;吸附符合Langmuir模型,最大吸附量為 1.974 mg/g。對(duì)比分析Cd2+吸附前后的細(xì)胞形態(tài)和紅外光譜變化,證實(shí)了“細(xì)胞成分羥基(O—H)、酰胺基(N—H)、烴基(C—H)、羧基(C[FY=,1]O)、羰基(—COOH)參與了Cd2+與PFYN01的相互作用”的結(jié)論。PFYN01是一株對(duì)Cd2+有較強(qiáng)吸附能力的細(xì)菌菌株,對(duì)其吸附Cd2+影響因素及吸附機(jī)制研究的結(jié)果將為重金屬污染微生物修復(fù)提供指導(dǎo)。

    關(guān)鍵詞:鎘污染;耐鎘細(xì)菌;馴化;生物吸附;吸附機(jī)理

    中圖分類號(hào):X703.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A

    文章編號(hào):1002-1302(2019)20-0293-05

    隨著工業(yè)的發(fā)展,尤其是采礦、冶煉、工業(yè)活動(dòng)的大肆開(kāi)展,越來(lái)越多重金屬通過(guò)不同途徑進(jìn)入到土壤或水體環(huán)境中,對(duì)生態(tài)環(huán)境和人體健康產(chǎn)生嚴(yán)重威脅[1-2]。鎘是一種毒性很強(qiáng)的重金屬,可降低酶活性,引起DNA斷裂、細(xì)胞氧化損傷[3-4]。由于鎘具有難遷移、難降解和生物累積等特點(diǎn),如何有效治理重金屬鎘污染問(wèn)題已成為目前國(guó)內(nèi)外研究熱點(diǎn)之一[5-6]。

    微生物是生態(tài)系統(tǒng)中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)循環(huán)的關(guān)鍵,尤其可以在各種極端的pH值、溫度甚至有毒金屬條件下生存和生長(zhǎng),部分微生物群已對(duì)重金屬形成了一定的耐性和抗性。研究表明,從市政廢水中分離出能夠耐受1 000 mg/L Cd2+的芽孢桿菌,并對(duì)其他重金屬Cr6+、Ni2+、Co2+也有一定抗性[7];從韓國(guó)重金屬污染土壤中分離出1株能夠耐鎘濃度為200 mg/L的芽孢桿菌(Bacillus sp.)菌株,該菌株也對(duì)其他單一重金屬Pb、Cu、Ni、Mn、Cr、Co、Zn和混合重金屬有較高的吸附性[8]。通過(guò)UV照射獲得枯草芽孢桿菌的突變種,該菌株能夠耐受的鎘濃度為337.23 mg/L,對(duì)其他重金屬Cr、Hg、Pb的耐受濃度分別為208、100、932.4 mg/L,而野生型枯草芽孢桿菌只能耐受的鎘濃度為28 mg/L[9]。從重金屬鎘污染土壤中篩選出1株能在鎘濃度為200 mg/L的固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的蠟狀芽孢桿菌,具有較高的抗性能力[10]。然而,這些報(bào)道的芽孢桿菌屬對(duì)Cd2+耐受和抗性濃度主要集中在1 000 mg/L以下,而對(duì)其他有較高耐受的芽孢桿菌屬的報(bào)道較少。

    考慮到從礦堆的淤泥中篩選的微生物有很高的耐受性,可能存在多重吸附機(jī)制以及許多微生物能夠同時(shí)降解或吸附多種污染物,有助于高效降低礦堆重金屬濃度[11-12]。因此,本研究從渣場(chǎng)堆淤泥中分離出1株高耐鎘細(xì)菌菌株,研究影響菌株吸附Cd2+的最佳條件,通過(guò)掃描電鏡觀察Cd2+在吸附過(guò)程中微觀形貌的變化,利用紅外光譜,通過(guò)官能團(tuán)吸收峰值的變化和位移,分析Cd2+存在時(shí)細(xì)胞壁表面化學(xué)基團(tuán)的變化情況,以期對(duì)Cd2+的吸附行為有一個(gè)更加清晰的認(rèn)識(shí)。本研究可為尋找具有高選擇性和高吸附能力的吸附劑提供理論依據(jù),為微生物在鎘污染治理中的應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料

    以四川攀枝花巴關(guān)河西渣場(chǎng)堆渣區(qū)旁池塘淤泥為試驗(yàn)樣品,隨機(jī)選取3個(gè)樣方,每個(gè)樣方面積約1 m2。在每個(gè)樣方中隨機(jī)采集適量淤泥,淤泥樣品采集完后立即密封保存,儲(chǔ)存于實(shí)驗(yàn)室4 ℃冰箱。

    LB液體培養(yǎng)基:蛋白胨10 g,酵母浸膏粉5 g,NaCl 10 g,加純水至1 L,pH值調(diào)至5.5~5.7,121 ℃高壓滅菌20 min。LB固體培養(yǎng)基須要另加入1.5%瓊脂,121 ℃高壓滅菌20 min。

    1.2 試驗(yàn)方法

    1.2.1 菌株馴化

    從攀枝花礦渣淤泥樣品中吸取2 mL上清液加入到50 mL液體培養(yǎng)基中,對(duì)耐受性菌種進(jìn)行分離純化。將篩選出的菌株接種至液體培養(yǎng)基上,置于30 ℃、120 r/min恒溫?fù)u床上培養(yǎng);5 d后吸取0.5~2 mL培養(yǎng)物在新配制的液體培養(yǎng)基中接種,恒溫?fù)u床培養(yǎng)繼續(xù)5 d,記錄其生長(zhǎng)曲線。

    1.2.2 菌株抗鎘能力

    重復(fù)“1.2.1”節(jié)接種馴化3~4次,對(duì)馴化后的菌液采用稀釋涂布平板法,取菌液并稀釋成10-3和10-4的稀釋液各100 μL,分別在含Cd2+濃度為10、30、60、100、200、400、800、…、3 600 mg/L的平板上涂布培養(yǎng)。不同鎘濃度梯度各做1組平行,采用同樣方法將菌液稀釋液涂布于固體平板上進(jìn)行培養(yǎng),記錄生長(zhǎng)情況及菌落形態(tài)等。

    1.3 耐鎘菌株吸附Cd2+的條件分析

    挑取單菌落到LB液體培養(yǎng)基中,30 ℃、120 r/min條件下培養(yǎng)至對(duì)數(shù)期(16~24 h);6 000 r/min離心7 min,棄上清,稱其菌體鮮質(zhì)量;將所收集菌體制成定量菌懸液。

    將100 μL菌懸液接種到20 mL含有不同濃度Cd2+的培養(yǎng)基中,在設(shè)置的各參數(shù)下吸附,6 000 r/min離心7 min,取上清,用原子吸收分光光度法測(cè)定Cd2+濃度(每個(gè)濃度做3個(gè)平行),每組均以不加菌體組為對(duì)照,按以下公式計(jì)算菌體對(duì)Cd2+的吸附率A(%):

    式中:C1為吸附前溶液中的Cd2+質(zhì)量濃度,mg/L;C2為吸附后溶液中的Cd2+質(zhì)量濃度,mg/L。

    1.3.1 不同的Cd2+濃度、時(shí)間、pH值、菌量對(duì)吸附的影響

    每個(gè)影響因素均設(shè)置3組平行試驗(yàn),為測(cè)定吸附平衡最佳時(shí)間,調(diào)節(jié)Cd2+濃度為75 mg/L、菌量為1.0 g/L,pH值為5.5,于30 ℃、130 r/min恒溫培養(yǎng)箱中振蕩培養(yǎng),分別于0、2、4、…、16、24、32、48 h取樣。為測(cè)定Cd2+濃度對(duì)吸附效果的影響,Cd2+濃度分別為10、25、50、75、100、125、150 mg/L,調(diào)節(jié)菌量為1.0 g/L、pH值為5.5,于30 ℃、130 r/min恒溫培養(yǎng)箱中振蕩培養(yǎng)8 h,吸附平衡后取樣。為了確保菌量對(duì)吸附效果的影響,菌量分別為0.01、0.1、0.5、1.0、2.0 g/L,調(diào)節(jié)Cd2+濃度為75 mg/L、pH值為5.5,于30 ℃、130 r/min恒溫培養(yǎng)箱中振蕩培養(yǎng)8 h,吸附平衡后取樣。為了測(cè)定pH值對(duì)吸附效果的影響,pH值分別調(diào)節(jié)為4.0、5.0、6.0、7.0、8.0,調(diào)節(jié)菌量為1.0 g/L、Cd2+濃度為75 mg/L,于30 ℃、130 r/min恒溫培養(yǎng)箱中振蕩培養(yǎng)8 h,吸附平衡后取樣。

    1.3.2 等溫吸附模型

    分別采用Langmuir和Freundlich吸附等溫式模擬吸附過(guò)程[13-14]。Langmuir模型中,吸附量qe與平衡時(shí)Cd2+濃度Ce的雙倒數(shù)成直線關(guān)系,模型如下:

    Langmuir方程式中b的值能反映吸附能力以及不同生物量大小的吸附率。

    Freundlich模型中,qe平衡時(shí)重金屬濃度Ce的雙對(duì)數(shù)成直線關(guān)系[13-14]。Freundlich吸附方程為:

    式中:KF和n均為Freundlich吸附模型的吸附常數(shù)。

    1.3.3 菌株Cd2+吸附機(jī)制分析

    用掃描電鏡(SEM)分析觀察,分別設(shè)置不添加Cd2+(對(duì)照)和添加20、300 mg/L Cd2+的2個(gè)處理,并按上述處理配制相應(yīng)的LB液體培養(yǎng)基。將培養(yǎng)液以2%接種量分別接種到上述培養(yǎng)基中,30 ℃、130 r/min振蕩培養(yǎng)24 h,將菌液分別用蒸餾水洗滌3遍。菌株細(xì)胞通過(guò)2.5%戊二醛固定、乙醇濃度梯度脫水、干燥和噴金等操作后,使用掃描電鏡觀察細(xì)胞表面形態(tài)。

    菌株P(guān)FYN01分別于Cd2+濃度為0、75 mg/L的液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)24 h,6 000 r/min離心7 min收集菌體,用蒸餾水清洗3次,70 ℃烘干至恒質(zhì)量,按1 ∶100比例取菌體和烘干的KBr粉末混勻,在瑪瑙研缽中充分研磨,壓片制樣后紅外光譜儀測(cè)定。

    1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

    采用Excel 2016處理試驗(yàn)數(shù)據(jù)并進(jìn)行誤差分析;采用Origin 9.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行擬合。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 菌落形態(tài)觀察及生長(zhǎng)情況

    2.1.1 耐鎘菌株的馴化

    采用微生物純培養(yǎng)方法從攀枝花巴關(guān)河西渣場(chǎng)礦區(qū)淤泥樣本中篩選出一批耐性菌株,通過(guò)逐級(jí)提高Cd2+濃度的方法馴化獲得1株高耐鎘菌株P(guān)FYN01。PFYN01能夠在Cd2+濃度為100 mg/L的LB培養(yǎng)基中生長(zhǎng),進(jìn)行傳代培養(yǎng)18代后仍能在3 600 mg/L Cd2+的LB固體培養(yǎng)基中生長(zhǎng),表明該菌株不但鎘的耐受濃度高,且耐鎘的遺傳穩(wěn)定性好。在Cd2+濃度為3 900 mg/L時(shí),菌株生長(zhǎng)很少,結(jié)果表明PFYN01菌株對(duì)Cd2+有較強(qiáng)的耐受性。

    2.1.2 菌落形態(tài)觀察

    PFYN01菌體生長(zhǎng)較快,在LB培養(yǎng)基中培養(yǎng)1 d左右,菌落形態(tài)近似圓形,表面光滑濕潤(rùn),邊緣不整齊,質(zhì)地軟,乳白色,色素不擴(kuò)散,較黏稠,易挑起(圖1)。該菌株能使淀粉水解,不能水解油脂和明膠,糖類發(fā)酵試驗(yàn)中顯陽(yáng)性。其生理生化特點(diǎn)與芽孢桿菌相似,16S rDNA序列同源性比較發(fā)現(xiàn),PFYN01的16S rDNA與芽孢桿菌(Bacillus sp.) L25親緣關(guān)系較近,同源性為99%。因此,可初步斷定PFYN01為芽孢桿菌(Bacillus sp.)。

    2.1.3 不同初始濃度下PFYN01的生長(zhǎng)情況

    圖2為初始Cd2+質(zhì)量濃度分別在0、50、100、200、400 mg/L下培養(yǎng)48 h后的PFYN01生長(zhǎng)曲線圖。當(dāng)鎘濃度為0時(shí),PFYN01菌株 1 h 左右進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,大約24 h后進(jìn)入穩(wěn)定期。當(dāng)鎘濃度為50 mg/L時(shí),延長(zhǎng)了對(duì)數(shù)期且生長(zhǎng)量較低;當(dāng)鎘濃度超過(guò)50 mg/L[CM(22*5]時(shí),重金屬Cd2+對(duì)菌株的生長(zhǎng)有明顯的抑制作用。

    但菌株能夠在含鎘(100 mg/L以下)的液體培養(yǎng)基中正常生長(zhǎng),表明該菌株對(duì)Cd2+有耐受性。

    2.2 耐鎘菌株吸附條件研究

    2.2.1 初始Cd2+質(zhì)量濃度

    由圖3可知,當(dāng)Cd2+濃度為 10~25 mg/L時(shí),菌株P(guān)FYN01對(duì)Cd2+的吸附率隨濃度的增加而緩慢升高,在Cd2+濃度相對(duì)較低的環(huán)境中,吸附Cd2+可能以胞內(nèi)吸附結(jié)合為主[15];當(dāng)Cd2+濃度為50~75 mg/L時(shí),菌株P(guān)FYN01對(duì)Cd2+的吸附率迅速增高,在Cd2+濃度為 75 mg/L 時(shí)達(dá)到最大值,為34.98%。說(shuō)明在一定初始Cd2+質(zhì)量濃度范圍內(nèi),隨著Cd2+濃度增加有利于菌株對(duì)其的吸附,可能是因?yàn)榧?xì)菌與Cd2+在胞內(nèi)結(jié)合,使得Cd2+與菌株有效碰撞的概率增高、吸附位點(diǎn)增加,同時(shí)胞外吸附也起一定的作用;當(dāng)Cd2+濃度超過(guò)75 mg/L時(shí),隨著Cd2+濃度增加,吸附率降低,可能是因?yàn)楦邼舛鹊腃d2+會(huì)抑制微生物的生長(zhǎng)代謝,使其結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,相應(yīng)也會(huì)導(dǎo)致微生物表面吸附位點(diǎn)減少,從而減少其表面吸附量[12]。

    2.2.2 pH值

    一般而言,pH值是影響溶液中重金屬含量和吸附劑吸附能力的重要因素之一,它會(huì)影響吸附劑的表面電荷、官能團(tuán)質(zhì)子化程度[16]。本研究的pH值范圍為4.0~8.0,結(jié)果如圖4所示,隨著pH值的升高,Cd2+吸附率呈先上升后下降的趨勢(shì),pH值為5.0時(shí),Cd2+的吸附率達(dá)到最高,為33.98%。在pH值較低時(shí),溶液中存在大量的H3O+,占據(jù)菌體細(xì)胞壁的吸附活性位點(diǎn),活性基團(tuán)被質(zhì)子化,從而增加了細(xì)胞表面的靜電斥力,阻礙離子交換作用[12]。當(dāng)pH值達(dá)到 5.0~7.0時(shí),重金屬離子形態(tài)發(fā)生改變,導(dǎo)致吸附量減少,吸附率依次降低。

    2.2.3 菌量

    由圖5可知,隨著接種量從0.01 g/L增加到 2.0 g/L 的加入,菌株對(duì)Cd2+的吸附率從6.26%增加到 34.79%,吸附率在接種量為1.0 g/L時(shí)達(dá)到最高,可能是隨著接種量的增加,細(xì)菌量增多,提供吸附位點(diǎn)也相應(yīng)增加,總的生物吸附量也就變多,但吸附率并不完全隨著接種量的增加而升高;當(dāng)PFYN01的接種量從1.0 g/L增加到2.0 g/L時(shí),其對(duì)Cd2+的吸附率為34.12%,說(shuō)明此時(shí)細(xì)菌表面吸附位點(diǎn)達(dá)到飽和,當(dāng)接種量超過(guò)1.0 g/L時(shí),再繼續(xù)增加,吸附率增加不明顯[6]。因此,為了提高吸附率并節(jié)約成本,接種量不宜過(guò)大。

    2.2.4 耐鎘菌株吸附Cd2+的等溫模型

    為了考察在最佳條件下PFYN01對(duì)Cd2+的吸附能力、最大吸附量與溶液中Cd2+濃度之間的平衡關(guān)系,采用的是Langmuir和Freundlich 2種模型來(lái)擬合吸附試驗(yàn)結(jié)果,模擬結(jié)果見(jiàn)圖6,相關(guān)參數(shù)見(jiàn)表1。Langmuir方程的決定系數(shù)R2=0.927,較Freundlich方程的R2高,吸附溫度為30 ℃,Cd2+濃度為75 mg/L時(shí),能達(dá)到平衡參數(shù)。通過(guò)計(jì)算,芽孢桿菌PFYN01對(duì)Cd2+的理論最大吸附力量為qmax=1.974 mg/g,與實(shí)際測(cè)得的1.902 mg/g相接近。因此可以判定Langmuir更適合描述菌對(duì)Cd2+的等溫吸附過(guò)程,說(shuō)明生長(zhǎng)菌體PFYN01對(duì)Cd2+吸附過(guò)程是一個(gè)單分子層吸附、吸附劑表面均勻。

    2.3 掃描電鏡分析

    掃描電鏡能從不同角度對(duì)樣品細(xì)胞表面微觀形態(tài)進(jìn)行觀察,對(duì)在空白對(duì)照(0)、低濃度(20 mg/L)和高濃度(300 mg/L)的Cd2+進(jìn)行吸附后的細(xì)菌掃描,觀察細(xì)胞的變化,分析Cd2+對(duì)細(xì)胞的影響,并推測(cè)作用機(jī)制。

    由圖7可知,PFYN01為革蘭氏陽(yáng)性長(zhǎng)桿菌,菌株在 0 mg/L Cd2+濃度下,細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整,表面光滑飽滿;在20 mg/L Cd2+濃度下,細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整,但表面出現(xiàn)大量褶皺,無(wú)細(xì)胞破碎,有些細(xì)胞出現(xiàn)大小不等的空泡,細(xì)胞內(nèi)可能發(fā)生變性反應(yīng),這說(shuō)明一定濃度的Cd2+會(huì)給細(xì)胞帶來(lái)?yè)p傷,使細(xì)菌出現(xiàn)凋亡特征;在300 mg/L Cd2+濃度下,PFYN01細(xì)胞表面褶皺更加明顯,部分細(xì)胞穿孔現(xiàn)象,胞內(nèi)物質(zhì)表面有細(xì)小顆粒堆積在細(xì)胞表面,表明胞內(nèi)物質(zhì)完全流失并與Cd2+形成絡(luò)合物,推測(cè)是由于Cd2+濃度過(guò)高,胞內(nèi)外滲透壓差距較大,更多高毒性的Cd2+進(jìn)入到細(xì)胞內(nèi)部,胞內(nèi)物質(zhì)迅速?gòu)目字幸绯觥?/p>

    2.4 菌株P(guān)FYN01吸附前后紅外光譜圖及分析結(jié)果

    將吸附Cd2+前后菌株樣品進(jìn)行紅外光譜檢測(cè),光譜圖如圖8所示,在500~4 000 cm-1波數(shù)內(nèi)均有吸收峰。根據(jù)文獻(xiàn)[17]對(duì)譜帶進(jìn)行歸屬,菌體主要成分是碳水化合物和蛋白質(zhì)。其中,3 330.3 cm-1附近的吸收帶是分子間氫鍵O—H和N—H的伸縮振動(dòng),吸收峰強(qiáng)而寬,Kim等研究發(fā)現(xiàn),蠟狀芽孢桿菌從3 200~3 600 cm-1的寬帶和強(qiáng)帶可能由胺的羥基(O—H)和氨基(N—H)的重疊造成的;吸收峰是—COOH中的 O—H和C—H;1 785.67、1 697 cm-1處的吸收峰主要來(lái)自蛋白酰胺Ⅰ帶或脂類化合物的C[FY=,1]O伸縮振動(dòng)[18]。Sun等的研究發(fā)現(xiàn),地衣芽孢桿菌在波數(shù)為1 734 cm-1的吸收峰處,呈現(xiàn)出羰基(C[FY=,1]O)和酰胺基([FY=,1]CO—、CO—NH)的變化;1 585 cm-1處的吸收峰來(lái)自蛋白質(zhì)酰胺Ⅱ帶(N—H彎曲與C—N伸縮振動(dòng))吸收峰[19]。Fang等研究發(fā)現(xiàn),蘇云金芽孢桿菌在 1 653、1 540 cm-1附近的主要譜帶歸屬于酰胺Ⅰ和酰胺Ⅱ,酰胺Ⅱ可能是細(xì)胞壁的重要組分之一;1 284、1 298 cm-1處吸收峰主要來(lái)自蛋白酰胺Ⅲ帶C—N伸縮振動(dòng)吸收,N—H變形振動(dòng)相當(dāng)于—CH2的剪式振動(dòng)方式[20]。陳永華等研究發(fā)現(xiàn),蠟樣芽孢桿菌在波數(shù)位于1 280.97~1 305.42 cm-1之間是典型脂碳鏈C—H伸展振動(dòng)吸收帶[21-22]。吸附后與對(duì)照組的紅外光譜圖相比,在 3 330.3 cm-1 處的吸收峰強(qiáng),在初始濃度為 75 mg/L的Cd2+作用下波數(shù)偏移到3 286 cm-1,說(shuō)明來(lái)自多聚糖、蛋白質(zhì)和脂肪酸組分的O—H和N—H參與了Cd2+吸附過(guò)程;在 1 785.67、1 697 cm-1處吸附后波數(shù)偏移到1 737、1 656.8 cm-1,強(qiáng)度有所下降,表明酰胺Ⅰ帶的C[FY=,1]O鍵伸縮振動(dòng)參與了Cd2+的吸附。FIRT分析表明,細(xì)胞參與鎘吸附的官能團(tuán)主要有酰胺基(N—H)、羧基(COOH)、羥基(O—H)、烴基(C—H)、羰基(C[FY=,1]O)。

    3 結(jié)論

    本研究從攀枝花礦渣淤泥中分離篩選獲得一批耐性菌株,通過(guò)逐級(jí)提高Cd2+濃度,馴化出1株在液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基中分別能夠耐受700、3 900 mg/L Cd2+的革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌,經(jīng)鑒定為芽孢桿菌(Bacillus sp.),命名為PFYN01;芽孢桿菌菌株P(guān)FYN01對(duì)Cd2+耐受和抗性濃度相比其他報(bào)道的芽孢桿菌屬高。

    菌株P(guān)FYN01對(duì)Cd2+有較好的吸附效果,在Cd2+初始濃度為75 mg/L、投菌量為1.0 g/L、pH值5.0時(shí),對(duì)Cd2+的吸附率可達(dá)到34.98%。運(yùn)用吸附等溫模型擬合菌株吸附Cd2+過(guò)程,發(fā)現(xiàn)菌株P(guān)FYN01符合Langmuir模型,最大吸附量為1.974 mg/g,表明菌株P(guān)FYN01在吸附過(guò)程中是單分子層吸附,屬于物理吸附。

    菌株SEM檢測(cè)發(fā)現(xiàn)PFYN01為長(zhǎng)桿狀,Cd2+濃度在0~300 mg/L之間,PFYN01可生長(zhǎng)繁殖。Cd2+濃度超過(guò) 20 mg/L 時(shí),菌體部分細(xì)胞發(fā)生形變,細(xì)胞質(zhì)嚴(yán)重收縮,胞內(nèi)物質(zhì)釋放,隨著Cd2+濃度增加對(duì)PFYN01抑制作用增強(qiáng)。

    通過(guò)FTIR分析PFYN01表面官能團(tuán)對(duì)Cd2+的螯合作用,結(jié)果表明,菌株P(guān)FYN01表面與Cd2+結(jié)合的官能團(tuán)有—OH、 N—H、C—H和C[FY=,1]O等,其中—OH和C[FY=,1]O是優(yōu)先吸附點(diǎn)。此外,在高濃度Cd2+吸附過(guò)程中,酰胺Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ譜帶發(fā)生了明顯的變化,表明在高濃度下,蛋白質(zhì)中酰胺基可能起著重要的作用,其次可能是脂類或糖類物質(zhì)。

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