ROC曲線分析MCV、MCH篩查地中海貧血的價值

陳雅斌，蔣燕成，陳紫萱，張志珊

(泉州市第一醫(yī)院檢驗科，福建 泉州 362000)

ROC曲線分析MCV、MCH篩查地中海貧血的價值

陳雅斌，蔣燕成，陳紫萱，張志珊

(泉州市第一醫(yī)院檢驗科，福建 泉州 362000)

目的 探討MCV和MCH指標在地中海貧血篩查中的診斷價值。方法 比較地中海貧血、缺鐵性貧血和健康人群的MCV、MCH指標，通過ROC曲線評估MCV和MCH篩查地中海貧血的價值。結果 三組之間MCV差異具有統(tǒng)計學意義，MCH地中海貧血和健康人群差異具有統(tǒng)計學意義，但和缺鐵性貧血差異不具有統(tǒng)計學意義。ROC曲線分析得出，和健康人群比較，診斷出地貧的最佳MCV值為82.1fl，其敏感性、特異性分別為94.8%和100.0%；MCH值為27.3pg，其敏感性、特異性分別為96.7%和100.0%；和缺鐵性人群比較，診斷出地貧的最佳MCV值為69.9fl，其敏感性、特異性分別為71.3%和50.7%。結論 MCH篩查能力略優(yōu)于MCV，當MCV＜82.1fl和（或）MCH＜27.3pg時，應考慮為地中海貧血的疑似病例，并同時進行鐵相關檢查。

地中海貧血；ROC曲線；MCV；MCH

地中海貧血，是珠蛋白基因缺陷而導致的一組遺傳性血紅蛋白病，是人類最常見的單基因遺傳性疾病之一。根據(jù)累及的珠蛋白基因，可分為α、β、δ、γ等幾種類型，其中，以α和β地中海貧血最為常見。不同類型的地中海貧血臨床癥狀輕重不一，輕者無明顯表現(xiàn)，重者為致死性疾病，需要定期輸注紅細胞才能維持生命。然而，國際上尚無有效的方法治療地中海貧血，通過篩查高風險人群，或遺傳咨詢等手段，避免受累重癥胎兒的出生，是公認的預防對策[1]。眾多篩查方法中，MCV和MCH作為地中海貧血初步篩查的首要指標已經(jīng)得到了廣泛應用[2]，因此，本實驗檢測地中海貧血和缺鐵性貧血、健康對照的MCV、MCH，并進行三組之間的比較分析，繪制ROC曲線評價不同截斷值下MCV、MCH篩查地中海貧血的能力，以期建立一個適合本地區(qū)本實驗室的初步篩查方案。

1 資料與方法

1.1 標本來源2013年12月至2017年3月來泉州市第一醫(yī)院行地貧基因檢測并確診的病例422例，其中男性111例，女性311例，年齡16時～84歲，平均年齡27.2歲±13.0歲。并選取同時期檢驗的451例健康體檢病例作為健康對照組（男性203例，女性248例，年齡18歲～88歲，平均年齡33.8歲±5.2歲），416例缺鐵性貧血病例作為非地貧組（男性67例，女性349例，年齡12月～71歲，平均年齡29.9歲±10.3歲）。

以地中海貧血的基因檢測結果作為金標準，分類不同類型的地中海貧血，缺鐵性貧血的診斷標準參考《臨床血液病診療學》診斷標準[3]，為保證結果的準確性，同時剔除地中海貧血合并缺鐵性貧血的病例。

1.2 儀器和試劑血常規(guī)檢測用日本希森美康公司的XS-1000i血液分析儀，鐵相關檢測用美國貝克曼公司的IMMAGE 800和DxI 800免疫分析儀，儀器均采用原廠配套試劑，每日進行質控檢測保證結果準備可靠；DNA提取試劑盒、Taq酶以及α、β地中海貧血基因檢測試劑盒均購自深圳亞能生物科技有限公司。

1.3 檢測方法

1.3.1 全血細胞檢測EDTA-K2無菌真空抗凝管采集受檢者外周靜脈血標本2ml，1h內(nèi)進行血常規(guī)檢測，并記錄每個標本的MCV、MCH數(shù)值。

1.3.2 地中海貧血基因的檢測EDTA-K2無菌真空抗凝管采集受檢者外周靜脈血標本2ml，按照試劑盒說明書及時進行DNA的提取和PCR擴增。采用跨越斷裂點（Gap）-PCR診斷3種常見的缺失型α 地中海貧血（--SEA、-α3.7、-α4.2），采用反向點雜交（RDB）-PCR對α和β地中海貧血非缺失型點突變基因進行檢測，包括3種α地中海貧血的突變（αWS、αQS、αCS）和 17 種常見的 β 地中海貧血基因突變（-28、-29、-30、-32、CD14-15、CD17、βE、CD27-28、CD31、CD41-42、CD43、CD71-72、IVS- Ⅰ -1、IVS-Ⅰ-5、IVS-Ⅱ-654、5′UTR；+40-43、Initiation condon）。按照試劑盒說明書操作并進行結果判定。

1.3.3 鐵相關檢測無菌真空促凝管采集受檢者外周靜脈血標本5ml，2h內(nèi)檢測血標本的血清鐵、鐵蛋白、總鐵結合力等鐵相關指標。

1.4 統(tǒng)計學方法SPSS 13.0軟件進行統(tǒng)計學分析，MCV、MCH 的檢測結果以均值±標準差（x±s）表示，多組間計量資料的比較使用單因素方差分析，以P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義；并繪制ROC曲線，計算曲線下面積和約登指數(shù)，評價不同截斷值下MCV、MCH篩查地中海貧血的敏感性、特異性。

2 結果

2．1 422例地中海貧血的檢測結果 422例地中海貧血中α地中海貧血227例，占53.79%，以αα/--SEA為主要基因型 (36.73%），β地中海貧血191例，占45.26%， 以 IVSⅡ-654/N、CD41-42/N、CD17/N 三種基因型為主（41.23%），更有4例為α、β復合型地中海貧血，占0.95%，具體結果見表1。

表1 422例地中海貧血基因分型

2.2 地中海貧血和缺鐵性貧血組、健康對照組的比較地中海貧血組、缺鐵性貧血組和健康對照組的MCV、MCH檢測結果見表2。統(tǒng)計分析表明MCV三組之間兩兩比較均具有統(tǒng)計學意義，MCH地中海貧血組和健康對照組、缺鐵性貧血組和健康對照組比較均具有統(tǒng)計學意義，但地中海貧血組和缺鐵性貧血組比較P＞0.05，差異沒有統(tǒng)計學意義。

表2 三組MCV、MCH的比較

2.3 ROC曲線分析以地中海貧血組為陽性例數(shù)，與缺鐵性貧血組和健康對照組進行比較，并計算特異性和敏感度，以敏感性為縱坐標，1-特異性為橫坐標，繪制MCV指標的ROC曲線（圖1、2）。由于地中海貧血組和缺鐵性貧血組MCH指標差異沒有統(tǒng)計學意義，因此，MCH指標只繪制地中海貧血組和健康對照組比較的ROC曲線（圖3）。計算不同ROC曲線下面積（AUC）和相關約登指數(shù)，以約登指數(shù)最大時的診斷界點作為最佳截斷值。分析得出與健康人群比較，診斷出地貧的最佳MCV值為82.1fl，其敏感性、特異性分別為94.8%和100.0%；MCH值為27.3pg，其敏感性、特異性分別為96.7%和100.0%；和缺鐵性人群比較，診斷出地貧的最佳MCV值為69.9fl，其敏感性、特異性分別為71.3%和50.7%。具體結果見表3。

表3 MCV、MCH指標診斷地中海貧血的評價

3 討論

地中海貧血作為人類最常見的單基因遺傳性疾病之一，在我國流行于長江以南地區(qū)，以廣東、廣西、四川、福建、海南等省份為高發(fā)地區(qū)，其中尤以廣東、廣西為甚，基因攜帶率可達11.07%和23.98%[4，5]。該病臨床癥狀輕重不一，輕者無明顯表現(xiàn)，重者為致死性疾病，需要定期輸注紅細胞才能維持生命。然而，臨床上尚無有效的方法治療地中海貧血，加強對高風險人群的篩查，避免純合子、或者雙重雜合子等受累重癥胎兒的出生，是目前公認的預防對策。

圖1 地中海貧血組和缺性貧血組MCV比較

圖2 地中海貧血組和健康對照組MCV比較

圖3 地中海貧血組和健康對照組MCH比較

地中海貧血的篩查方法多種多樣，包括MCV、MCH、RDW等紅細胞相關參數(shù)、血紅蛋白電泳、紅細胞滲透脆性實驗、網(wǎng)織紅細胞檢測等，其中又以MCV、MCH為大規(guī)模人群初步篩查的首要指標[6]。雖然國際多以MCV 80.0fl和 （或）MCH 27.0pg作為診斷界值，但國內(nèi)MCV取值較為寬泛，也有以MCV＜79.0fl或 MCV＜82.0fl作為診斷界值[2，7-10]，可見，目前MCV、MCH的診斷值還無法做到完全統(tǒng)一。因此，本地區(qū)作為地中海貧血的高發(fā)地區(qū)，為了能夠更加有效地從高風險人群中篩查出地中海貧血的疑似病例，亟需制定一個適合本實驗室的初篩指標。

本研究對近年來就診于本院的地中海貧血陽性病例MCV、MCH進行了分析，并繪制ROC曲線評價MCV、MCH篩查地中海貧血的能力。結果表明422例地中海貧血組MCV、MCH的均數(shù)、標準差分別為（67.42±7.96）fl、（21.08±2.83）pg；表現(xiàn)出小細胞低色素貧血的血液學特征，和健康對照組比較，MCV、MCH差異均具有統(tǒng)計學意義；相關的ROC曲線表明：和健康人群比較，診斷出地中海貧血的最佳MCV值為82.1fl，其敏感性、特異性分別為94.8%和100.0%；MCH值為27.3pg，其敏感性、特異性分別為96.7%和100.0%。顯示出MCV和MCH均具有較好的篩查地中海貧血的能力，且MCH的診斷能力略優(yōu)于MCV，與魏權、朱海勇、Ryan的研究結果相同，和周祥敏等人的研究結果雖然略有差異，但均體現(xiàn)出MCV、MCH具有較好的篩查能力[11-14]。略有差異的原因可能與周祥敏等人實驗選用標本量較少，或者地域的差異有關。

缺鐵性貧血組MCV、MCH的均數(shù)、標準差分別為（70.37±9.60）fl、（20.95±4.00）pg，也表現(xiàn)出小細胞低色素貧血的血液學特征，和地中海貧血組進行比較，顯示MCV差異具有統(tǒng)計意義，地中海貧血的MCV低于缺鐵性貧血；但MCH比較，P＞0.05差異沒有統(tǒng)計學意義，MCH并不能有效區(qū)分兩組貧血，和梁洪煥的研究結論一致[15]。因此本研究只繪制了相關MCV的ROC曲線。MCV的ROC曲線分析得出，從缺鐵性貧血的人群中篩查出地中海貧血的最佳截斷值為69.9fl，其敏感性、特異性分別為71.3%和50.7%。表明MCV雖有一定的診斷價值，但其敏感性和特異性均較低，提示如果單純依靠MCV值，區(qū)分地中海貧血和缺鐵性貧血較難，實驗結論和陳衛(wèi)東等人研究結果相同[16]，因此研究認為當被檢人群血常規(guī)指標出現(xiàn)MCV低于 82.1fl，MCH低于27.3pg的診斷值時，最好同時進行地中海貧血基因檢測和鐵相關檢查，以免出現(xiàn)遺漏診。

綜上所述，研究認為針對本地區(qū)本實驗室，當血常規(guī)檢測 MCV＜82.1fl和 （或）MCH＜27.3pg時，應考慮為地中海貧血的疑似病例，進行進一步的篩查或者基因檢測，同時為了避免缺鐵性貧血的遺漏診，應同時進行鐵相關檢查。

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R556.6+1，R446.11+1

A

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10.3969/j.issn.1674-1129.2017.05.040

2017-05-09；

2017-08-08)