高校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物屏障設(shè)施微生物監(jiān)控管理

彭麗娜，王朝霞

(上海交通大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心, 上海 200240)

隨著生命科學(xué)研究不斷深入，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物已成為高校進(jìn)行科學(xué)研究和教學(xué)實(shí)驗(yàn)的重要支撐條件。所有生命科學(xué)領(lǐng)域的科研、教學(xué)、檢定、安全評價(jià)和成果評定都離不開動(dòng)物實(shí)驗(yàn)[1]。隨著實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在高校的廣泛應(yīng)用，高校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物機(jī)構(gòu)對屏障設(shè)施和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康狀況要求也越來越高，各地高校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物機(jī)構(gòu)逐步重視動(dòng)物微生物監(jiān)控程序的建設(shè)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的健康狀況會(huì)影響到其在科研中的使用，對科研本身、人類健康和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種群都有可能造成影響。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康管理的一個(gè)首要目標(biāo)就是要確定種群中存在或者不存在某些特定的病原體，所以健康監(jiān)控有時(shí)可稱為微生物監(jiān)控[2]。上海交通大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心(閔行校區(qū))是校級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科研平臺(tái)，具有上海市實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可。中心致力于校優(yōu)質(zhì)服務(wù)平臺(tái)的建設(shè), 已成為支撐學(xué)校生、農(nóng)、醫(yī)、藥等科研發(fā)展的重要?jiǎng)游飳?shí)驗(yàn)基地。本文以上海交通大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心屏障設(shè)施為研究對象，對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物監(jiān)控管理加以討論，以期對高校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物屏障設(shè)施微生物監(jiān)控管理提供借鑒。

1 環(huán)境質(zhì)量控制

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物屏障設(shè)施的消毒

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物屏障設(shè)施的消毒是維持設(shè)施內(nèi)部清潔，不受微生物污染的必要措施。高校動(dòng)物屏障設(shè)施由于實(shí)驗(yàn)人員復(fù)雜性、流動(dòng)性大、設(shè)施使用頻繁和操作時(shí)間的不確定性等因素，大大增加了設(shè)施內(nèi)部環(huán)境微生物污染的機(jī)會(huì)，因此消毒工作更加嚴(yán)峻。屏障系統(tǒng)在啟用前或者受到污染后重新啟用都需要對其進(jìn)行徹底消毒。啟用后隨著實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)數(shù)量的增加和實(shí)驗(yàn)人員的頻繁進(jìn)出，設(shè)施內(nèi)的微生物數(shù)量也會(huì)不斷增加，因此還要對屏障系統(tǒng)進(jìn)行常規(guī)的維持性消毒[3]。設(shè)施重新啟用前首先對房間進(jìn)行前期處理，如關(guān)閉送風(fēng)口和排風(fēng)口；清空房間或者將房間內(nèi)籠架、儀器設(shè)備等物品先消毒；最后用過氧化氫滅菌器按照《過氧化氫滅菌器的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》對屏障設(shè)施進(jìn)行滅菌消毒。高校屏障設(shè)施的維持性消毒應(yīng)注重消毒劑的選擇，對消毒能力、消毒作用時(shí)間、消毒頻率要求較高。通過對多種消毒劑不同使用濃度的消毒效果、消毒作用時(shí)間及其穩(wěn)定性、安全性能的比對測試，選用季銨鹽類(0.5%百衛(wèi)士消毒液)、含氯消毒劑(0.03%過氧乙酸消毒液)以及聚六亞甲基雙胍類(1%聚潔消毒液)三種消毒劑進(jìn)行每周交替輪流使用。根據(jù)不同區(qū)域和設(shè)施對微生物的控制要求以及人員使用的頻率，按照次、日、周、月、季度的消毒頻率，采用滅菌、化學(xué)和物理等多種消毒方法相結(jié)合的消毒方式，來保障屏障內(nèi)環(huán)境質(zhì)量安全。具體做法如表1。

表 1 屏障設(shè)施清潔及消毒頻率

1.2 進(jìn)入屏障內(nèi)物品和動(dòng)物的消毒

屏障設(shè)施內(nèi)的物品根據(jù)其功能主要?jiǎng)澐譃轱曫B(yǎng)物品和實(shí)驗(yàn)物品。高校屏障設(shè)施內(nèi)由于各課題組使用實(shí)驗(yàn)物品種類繁多, 依據(jù)各類物品的性狀, 需要采取多種消毒方式來保障物品性狀及消毒效果。對物品的消毒主要采用三種消毒方式: (1) 高壓蒸汽滅菌方法。所有能耐高壓滅菌的物品均采用高壓蒸汽滅菌(121℃, 20～30 min)的方式進(jìn)入屏障系統(tǒng)。(2) 化學(xué)消毒方法。主要針對一些不耐高溫、高壓的物品如注射器; 具有生物活性的物品如實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、抗體、細(xì)胞、蛋白制劑; 以及經(jīng)60Co輻照滅菌后的飼料等。高校課題組使用的化學(xué)試劑、生物試劑種類繁多，在傳入屏障時(shí)需要確保其生物活性和化學(xué)性狀不受影響。動(dòng)物的飼料和部分實(shí)驗(yàn)用品經(jīng)高壓滅菌后會(huì)破壞其營養(yǎng)成分和性狀，因此對這些物品或?qū)嶒?yàn)動(dòng)物的外包裝表面采用化學(xué)消毒方式，通過擦拭、浸泡和噴霧消毒并配合紫外線照射后經(jīng)傳遞窗傳入屏障設(shè)施。物品傳遞和動(dòng)物傳遞窗對傳遞物品的表面消毒要求較高，需要達(dá)到消毒時(shí)間短、腐蝕性小、消毒效果強(qiáng)的效果，因此主要采用1%百衛(wèi)士(第四代季銨鹽技術(shù)和配方，輔以協(xié)同增效的高效清潔劑，使殺菌和清潔雙效合一)消毒品進(jìn)行消毒。(3)物理消毒方法。高校課題組的一些特殊小型儀器，如眼壓儀、游標(biāo)卡尺等容易受化學(xué)消毒品腐蝕而影響其精密度，因此這些物品經(jīng)表面除塵后采用75%的酒精擦拭和紫外線照射的方法通過傳遞窗傳入屏障。另外屏障設(shè)施內(nèi)的一些大型的儀器設(shè)備，如IVC籠架，超凈臺(tái)，實(shí)驗(yàn)儀器等，因體型較大不能通過物品傳遞窗傳遞。主要通過外表面除塵、常規(guī)消毒品或者75%酒精擦拭消毒以及經(jīng)過物品出口緩沖間延長紫外照射(2 h)的方式傳入屏障設(shè)施內(nèi)(表2)。

表2 進(jìn)入屏障設(shè)施內(nèi)物品及動(dòng)物的消毒方式

1.3 質(zhì)控管理

定期對屏障設(shè)施內(nèi)環(huán)境及物品的消毒、滅菌效果進(jìn)行微生物監(jiān)測，是保障屏障設(shè)施內(nèi)環(huán)境安全的重要舉措。如每月對屏障設(shè)施內(nèi)空氣落下菌、各區(qū)域環(huán)境衛(wèi)生、飼養(yǎng)物品(墊料、飼料、飲水、籠具)及實(shí)驗(yàn)用品按照標(biāo)準(zhǔn)操作流程(SOP)進(jìn)行微生物檢測。如檢出個(gè)別位置空氣落下菌或者環(huán)境衛(wèi)生不合格，則加強(qiáng)消毒，如不合格的位置較多則考慮更換高效過濾器或者消毒品。如屏障內(nèi)使用的是84消毒液，因其需要作用的時(shí)間較長且經(jīng)長期使用后微生物會(huì)產(chǎn)生耐藥性，若發(fā)現(xiàn)空氣落下菌檢出率增加，提示其消毒效果降低，在實(shí)際工作中，我們將消毒液更換為聚潔消毒液后空氣落下菌的檢出率就大大降低，保障了屏障設(shè)施內(nèi)環(huán)境質(zhì)量安全。物品如檢出不合格則直接淘汰，經(jīng)重新消毒或高壓滅菌后方可繼續(xù)使用。另外高校課題組實(shí)驗(yàn)人員攜入的外來實(shí)驗(yàn)用品種類較多且使用頻繁，通過采用儲(chǔ)物柜分類儲(chǔ)存并定期清理和部分公共物品中心內(nèi)部提供相結(jié)合的管理方式，來預(yù)防和降低實(shí)驗(yàn)物品頻繁進(jìn)出或延期使用造成的污染風(fēng)險(xiǎn)。

2 動(dòng)物質(zhì)量控制

2.1 動(dòng)物來源把控

安全、可靠的動(dòng)物來源是高校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康監(jiān)測管理的源頭和質(zhì)量保障, 《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》[4]規(guī)定: “對引入的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物, 必須進(jìn)行隔離檢疫”。目前就嚙齒類動(dòng)物而言，基因修飾小鼠是病原微生物攜帶的高危群體。隨著科研能力的增強(qiáng)，現(xiàn)在越來越多的轉(zhuǎn)基因小鼠出自某一科研團(tuán)隊(duì)的實(shí)驗(yàn)室而非生產(chǎn)單位, 從而導(dǎo)致微生物控制水平參差不齊, 伴隨這類動(dòng)物在不同機(jī)構(gòu)之間的輸出流轉(zhuǎn),安全隱患不言而喻。高校科研人員具有多學(xué)科、多方向的科研性質(zhì), 使其通過各種渠道獲得動(dòng)物的頻率和種類更加龐雜，因而動(dòng)物隔離檢疫和隔離觀察就顯得尤為重要，特別是動(dòng)物來自不明健康等級(jí)的供應(yīng)者或?qū)嶒?yàn)室時(shí)，更需要嚴(yán)格的防疫管理程序。

因此優(yōu)先采用統(tǒng)一訂購的方式引進(jìn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，并制定《國內(nèi)新進(jìn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理規(guī)定》和《進(jìn)境實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理規(guī)定》來保障實(shí)驗(yàn)動(dòng)物引入安全。動(dòng)物來源必須是經(jīng)過資質(zhì)認(rèn)可的供應(yīng)商，并進(jìn)行定期抽檢，以監(jiān)督所供應(yīng)動(dòng)物的質(zhì)量和穩(wěn)定性。從非認(rèn)可機(jī)構(gòu)引進(jìn)的動(dòng)物，須進(jìn)行隔離觀察和隔離檢疫，待動(dòng)物送檢合格后可轉(zhuǎn)為正常飼養(yǎng)。如檢測不合格，一律進(jìn)行生物凈化。

2.2 動(dòng)物健康監(jiān)測方案的制定

高校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心因其服務(wù)對象的廣泛化和科學(xué)研究的多樣化等特點(diǎn)，制定動(dòng)物健康監(jiān)測方案時(shí)，在考慮國內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)的同時(shí)也要和國際標(biāo)準(zhǔn)接軌。參照歐洲實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)聯(lián)合會(huì)(FELASA)的解決建議，需要考慮微生物單元、引入有害微生物的風(fēng)險(xiǎn)、監(jiān)測的頻率、樣品數(shù)和哨兵鼠、檢測的方法及要監(jiān)測的病原、檢測報(bào)告、方案實(shí)施的可行性等諸多因素，應(yīng)結(jié)合實(shí)際情況，制定個(gè)性化健康監(jiān)測方案。首先，確定監(jiān)測方案中的相關(guān)責(zé)任人，行政主任對整個(gè)健康監(jiān)測方案的實(shí)施進(jìn)行決策，獸醫(yī)師或者獸醫(yī)技術(shù)員負(fù)責(zé)動(dòng)物樣品的微生物檢測，檢測結(jié)果由總獸醫(yī)師進(jìn)行判定并制定處理方案，所有文檔由辦公室文員負(fù)責(zé)存檔保存。其次，根據(jù)所監(jiān)測實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的微生物等級(jí)按照相應(yīng)的國家標(biāo)準(zhǔn)來定期監(jiān)測，如SPF小鼠，每季度送檢并按國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行全部項(xiàng)目檢測。另外參照FELASA的解決建議，針對不同監(jiān)測“單元”的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目根據(jù)其實(shí)驗(yàn)性質(zhì)進(jìn)行病原體選擇，制定每個(gè)監(jiān)測“單元”的病原體排除列表。第三，獸醫(yī)和科研人員及時(shí)進(jìn)行有效溝通和協(xié)商，確定病原體排除計(jì)劃，包括監(jiān)測種群的方法、頻率、取樣量等因素。最后由獸醫(yī)根據(jù)實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展和動(dòng)物感染程度等，確定感染動(dòng)物是否需要進(jìn)行隔離飼養(yǎng)、延長監(jiān)測期、進(jìn)行生物凈化或者實(shí)施安死術(shù)。

2.3 哨兵動(dòng)物監(jiān)測方法

在某些實(shí)驗(yàn)或生產(chǎn)單位中，由于設(shè)施條件、動(dòng)物不充足等因素的限制，不能直接抽檢實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，因此采用哨兵動(dòng)物來實(shí)施健康監(jiān)測。高校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心因個(gè)別課題組委托飼養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物極其珍貴，受其數(shù)量限制和遺傳修飾等因素的影響，無法隨機(jī)抽取動(dòng)物進(jìn)行健康監(jiān)測。另外，一些免疫缺陷動(dòng)物因自身不能產(chǎn)生抗體，傳統(tǒng)的血清學(xué)檢測方法并不能反映出封閉環(huán)境內(nèi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的感染情況[6]。因此通過設(shè)置哨兵動(dòng)物來直接或者間接接觸在研實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，能夠在不干擾在研動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的前提下，快速預(yù)示病原體的感染狀況，有效地控制病原體的傳播。哨兵動(dòng)物一般經(jīng)外源引入, 也可以來源于現(xiàn)有的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種群。哨兵動(dòng)物可以間接的接觸被監(jiān)測動(dòng)物的墊料、飲水、飼料等材料，也可以直接放置在被監(jiān)測動(dòng)物的籠盒內(nèi)。哨兵動(dòng)物在檢測前需要和被監(jiān)測的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在相同的飼養(yǎng)條件下至少接觸6周時(shí)間，而更長的接觸時(shí)間(如10～12周)可能效果更好，因?yàn)橛行┎≡缰гw、嗜肺巴斯德桿菌等[5]的感染/血清轉(zhuǎn)化需要更多的時(shí)間。

哨兵鼠通常選用3～4周齡雌性ICR小鼠，設(shè)置到籠架的指定位點(diǎn)，一般每面籠架(60籠小鼠)設(shè)置1籠哨兵鼠(每籠2～3只)，或者直接放置在被監(jiān)測的實(shí)驗(yàn)小鼠籠內(nèi)。每周確保哨兵鼠籠里更換來自所監(jiān)測實(shí)驗(yàn)鼠的每一籠更換下來的“臟”墊料，以監(jiān)控實(shí)驗(yàn)用鼠的健康狀態(tài)。每月和每季度通過自檢和送檢相結(jié)合的方式進(jìn)行監(jiān)測，如該哨兵鼠檢測合格，則籠內(nèi)補(bǔ)設(shè)一只；如檢測不合格，此籠哨兵鼠淘汰并重新設(shè)置。哨兵鼠檢測項(xiàng)目主要包括國家標(biāo)準(zhǔn)中SPF小鼠必檢項(xiàng)目，特殊情況下(如進(jìn)境動(dòng)物)增添國外流行且可能對動(dòng)物實(shí)驗(yàn)造成影響的其他項(xiàng)目，如小鼠諾如病毒、螺旋桿菌等。

2.4 排風(fēng)道粉塵(EAD)監(jiān)測

從IVC系統(tǒng)中對環(huán)境樣本進(jìn)行分析是一種比較新的，有前景的方法，可以用來改善實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施的健康監(jiān)測。盡管如此，大多數(shù)的健康監(jiān)測項(xiàng)目都是基于哨兵鼠的檢測。患病動(dòng)物可以用于直接測試，但是許多實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的感染是亞臨床感染并且一些受感染動(dòng)物的臨床表現(xiàn)并不明顯[5]。哨兵鼠在適當(dāng)?shù)慕佑|時(shí)間后，通過多種方法對其病原體進(jìn)行檢測，這導(dǎo)致大量的小鼠為了健康監(jiān)測而犧牲。然而，并不是所有的病原體都是通過臟墊料來傳播，如仙臺(tái)病毒、淋巴細(xì)胞性脈絡(luò)叢腦膜炎病毒、嗜肺巴斯德桿菌以及鼠皮螨和饒蟲等[7]。

通過臟墊料哨兵鼠來進(jìn)行動(dòng)物健康監(jiān)測，雖然仍是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物領(lǐng)域的一項(xiàng)技術(shù)，但因其自身存在多個(gè)缺點(diǎn)，這一缺陷可能會(huì)導(dǎo)致許多不同的病原體被忽視。研究表明[8-11]，即使在患病率很低的情況下，EAD監(jiān)測方法相比哨兵鼠檢測有很明顯的優(yōu)勢。EAD-PCR主要通過定期收集IVC高效過濾器上的粉塵，對同一監(jiān)測“單元”的粉塵樣品進(jìn)行合并，通過PCR方法檢測粉塵內(nèi)的各類微生物，達(dá)到動(dòng)物健康監(jiān)測目的。EAD-PCR方法具有對動(dòng)物無影響、病原檢出率高、操作簡單、成本低等優(yōu)勢，但仍需要哨兵鼠來確認(rèn)活的微生物(如病毒血清)，因此可作為傳統(tǒng)血清學(xué)、細(xì)菌學(xué)和寄生蟲學(xué)檢測方法的替代和補(bǔ)充，是一種可靠的且易于建立的快速檢測方法，將逐步應(yīng)用到實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的健康監(jiān)測管理中。

2.5 制定病原體排除列表及排除計(jì)劃

病原體排除列表是指在某些研究領(lǐng)域的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種群中不能存在的傳染性病原體微生物的列表。高校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心涉及的一些模型動(dòng)物、免疫缺陷動(dòng)物、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物較多，因此不同飼養(yǎng)單元內(nèi)不同實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種類和研究類型可能會(huì)有不同的病原體排除列表。

根據(jù)研究者提交的《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究計(jì)劃》了解設(shè)施里不同飼養(yǎng)單元內(nèi)飼養(yǎng)和使用的動(dòng)物品種品系及其實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。根據(jù)現(xiàn)有品系對某種流行性疾病的流行病學(xué)和病理學(xué)分析，判斷該病原體對實(shí)驗(yàn)結(jié)果科學(xué)性的影響，并根據(jù)不同的病原體排除列表制定相應(yīng)的排除計(jì)劃。例如，在排除列表上的病原體一旦被檢出，對該監(jiān)測單元的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物立即啟動(dòng)應(yīng)急預(yù)案。對于已明確感染的動(dòng)物直接實(shí)施安死術(shù)，其它可疑動(dòng)物則根據(jù)檢出的病原體分類級(jí)別、傳播速度和動(dòng)物的死亡率及科研進(jìn)展程度等因素，采取緊急降級(jí)、隔離飼養(yǎng)和生物凈化等多種措施。若檢出的病原體屬于條件性致病菌或者三類病原微生物，因其在應(yīng)激情況下才有可能導(dǎo)致動(dòng)物發(fā)病，則主要采取降級(jí)處理，即將可疑動(dòng)物轉(zhuǎn)移至微生物控制級(jí)別相對低的設(shè)施；若檢出的病原體有一定傳播性和致病性，則應(yīng)將可疑動(dòng)物轉(zhuǎn)移至隔離包內(nèi)進(jìn)行隔離飼養(yǎng)，并進(jìn)行生物凈化。對降級(jí)飼養(yǎng)的動(dòng)物實(shí)施全面的自檢普查，增加哨兵鼠的設(shè)置數(shù)量和監(jiān)測頻率。對檢出陽性的動(dòng)物實(shí)施安死術(shù)，對檢出陰性的動(dòng)物繼續(xù)進(jìn)行跟蹤監(jiān)測，連續(xù)監(jiān)測3次后無陽性病原檢出，則該降級(jí)單元轉(zhuǎn)為常規(guī)監(jiān)測飼養(yǎng)。如仍有陽性動(dòng)物檢出，則需要跟課題組協(xié)商，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇生物凈化或者直接實(shí)施安死術(shù)，盡快消滅傳染源。

2.6 動(dòng)物監(jiān)測頻率

微生物監(jiān)測的頻率需要考慮多方因素，一般不作明確規(guī)定，在節(jié)約資源和檢測到病原體感染的最短時(shí)間選擇平衡點(diǎn)[12]。設(shè)施需要考慮所要監(jiān)測的種群的用途、某一或者某些病原對該種群的影響程度、病原侵入的風(fēng)險(xiǎn)及經(jīng)費(fèi)等。根據(jù)飼養(yǎng)方式的不同，在經(jīng)常引入新動(dòng)物的設(shè)施，與不常引入新進(jìn)動(dòng)物的設(shè)施相比，監(jiān)測頻率應(yīng)適度提高。一般原則是高頻度的小樣本監(jiān)測(如每4～6周檢測3～5只動(dòng)物)比低頻度的大樣本監(jiān)測(如3個(gè)月監(jiān)測10只動(dòng)物)更可靠[3]。

參照現(xiàn)行版的《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物等級(jí)及監(jiān)測》國家標(biāo)準(zhǔn)，以及針對自身情況擬定的病原體排除列表計(jì)劃，并結(jié)合獸醫(yī)巡檢情況來確定屏障內(nèi)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康監(jiān)測頻率。通過送檢每個(gè)飼養(yǎng)室的哨兵鼠，對國家標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定必須要排除的病原體進(jìn)行季度全項(xiàng)檢測。對各個(gè)飼養(yǎng)室排除列表上的病原體則采用自檢、送檢相結(jié)合的方式進(jìn)行，自檢檢測陽性或者疑似陽性項(xiàng)目，送第三方復(fù)檢。復(fù)檢陽性時(shí)，檢測頻率從每季度提升至每月。

3 人員管理

高校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心相比其他實(shí)驗(yàn)動(dòng)物機(jī)構(gòu)有一個(gè)顯著特點(diǎn)是人員管理的復(fù)雜性，由于科研人員的流動(dòng)性和時(shí)間上的不固定性, 在管理上存在難點(diǎn)[13]。高校每年都有較多學(xué)生入學(xué)和畢業(yè)，人員交替頻繁，尤其畢業(yè)生在完成動(dòng)物實(shí)驗(yàn)后，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的交接工作經(jīng)常出現(xiàn)斷檔；教師類科研人員的實(shí)驗(yàn)時(shí)間具有不確定性，有時(shí)白天要進(jìn)行教學(xué)等工作需在晚上或周末開展實(shí)驗(yàn)，導(dǎo)致對其缺乏有效的監(jiān)督和指導(dǎo)。尤其是他們普遍缺乏實(shí)驗(yàn)動(dòng)物方面的相關(guān)知識(shí)，對動(dòng)物的微生物控制和屏障設(shè)施的運(yùn)行管理知之甚少，在管理上稍有疏忽，都有可能使屏障系統(tǒng)淪落為普通級(jí)的實(shí)驗(yàn)場所[13]。

3.1 加強(qiáng)人員培訓(xùn)管理

(1) 參照國際實(shí)驗(yàn)動(dòng)物評估認(rèn)證委員會(huì)(AAALAC)認(rèn)證要求，根據(jù)國家《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》、《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量管理辦法》等法規(guī)，學(xué)習(xí)和借鑒其他高校的經(jīng)驗(yàn)，結(jié)合自身實(shí)際情況，制定了屏障系統(tǒng)內(nèi)各種管理規(guī)定和SOP，以及上崗證培訓(xùn)制度和內(nèi)容。使得所有工作和實(shí)驗(yàn)人員都能夠有章可循, 規(guī)范執(zhí)行，并在管理實(shí)踐過程中不斷地完善。

(2) 所有工作人員包括管理和技術(shù)人員、設(shè)備維護(hù)人員、飼養(yǎng)人員等，均須參加上崗證培訓(xùn)。所有人員在上崗前還須經(jīng)過嚴(yán)格的崗位培訓(xùn)，明確崗位職責(zé)，熟悉和掌握屏障系統(tǒng)正常運(yùn)行的各種程序和操作方法。并且通過外出培訓(xùn)、邀請行內(nèi)專家進(jìn)行指導(dǎo)和交流以及員工內(nèi)部復(fù)培訓(xùn)相結(jié)合的方式，不斷加強(qiáng)和提升各類工作人員的業(yè)務(wù)水平和專業(yè)技能。

(3) 所有實(shí)驗(yàn)人員都必須參加由動(dòng)物中心組織的內(nèi)部培訓(xùn)，培訓(xùn)內(nèi)容包括理論學(xué)習(xí)和現(xiàn)場培訓(xùn)，經(jīng)考核合格并取得上崗證后才能獲得進(jìn)入權(quán)限。通過豐富多樣的培訓(xùn)內(nèi)容(制作各種飼養(yǎng)及實(shí)驗(yàn)操作視頻)以及理論(PPT講解理論知識(shí))和實(shí)踐(現(xiàn)場指導(dǎo)、練習(xí)操作)相結(jié)合的方式，讓實(shí)驗(yàn)人員盡快了解和掌握人員、物品、動(dòng)物進(jìn)出屏障系統(tǒng)的方式、方法，以及在動(dòng)物飼養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)過程中的操作細(xì)節(jié)和注意事項(xiàng)等，在提高了培訓(xùn)效率的同時(shí)，為屏障設(shè)施內(nèi)的環(huán)境和動(dòng)物質(zhì)量安全又增加了人員保障。

3.2 加強(qiáng)人員監(jiān)督管理

維護(hù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物屏障設(shè)施內(nèi)環(huán)境和動(dòng)物的質(zhì)量安全都離不開對人員的監(jiān)督管理。通過對設(shè)施各區(qū)域安裝高清晰監(jiān)控?cái)z像頭, 可對屏障系統(tǒng)內(nèi)工作人員和實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)行全方位實(shí)時(shí)監(jiān)控。另外質(zhì)量檢驗(yàn)人員通過不定期現(xiàn)場檢查工作人員和實(shí)驗(yàn)人員的各項(xiàng)制度和標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程的執(zhí)行情況, 來實(shí)施監(jiān)督的職能。發(fā)現(xiàn)違規(guī)操作及時(shí)上報(bào)并按照違規(guī)的不同性質(zhì)采用警告、張貼公示、通知課題負(fù)責(zé)人、暫停門禁并重新復(fù)培訓(xùn)等不同處理方式來保障人員合規(guī)操作。

4 結(jié)語

從高校公共實(shí)驗(yàn)動(dòng)物屏障系統(tǒng)的管理實(shí)踐獲知，長期維持屏障系統(tǒng)的潔凈狀態(tài)并非易事，而徹底消除一些既存病原體更是不太現(xiàn)實(shí)的。分等級(jí)、分區(qū)域管理尤為重要。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的微生物監(jiān)控管理，沒有統(tǒng)一的適合所有高校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物機(jī)構(gòu)的模式，某一監(jiān)測單元的病原體排除列表也不是一成不變的。各實(shí)驗(yàn)動(dòng)物機(jī)構(gòu)必須根據(jù)自身實(shí)際情況，做好微生物監(jiān)測的每一個(gè)環(huán)節(jié)，制定出符合自身設(shè)施的動(dòng)物健康監(jiān)測計(jì)劃并在實(shí)踐中逐步完善。

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