血生物指標(biāo)在宮頸慢性炎癥及其病變中的作用分析研究

陶華，韋燕珍，王興民，周紅敏，麥美云

(廣西柳州市婦幼保健院婦科，柳州 545001)

血生物指標(biāo)在宮頸慢性炎癥及其病變中的作用分析研究

陶華*，韋燕珍，王興民，周紅敏，麥美云

(廣西柳州市婦幼保健院婦科，柳州 545001)

目的通過分析人乳頭瘤病毒(HPV)感染患者體內(nèi)血液相關(guān)參數(shù)的變化，探討宮頸上皮病變的有效防治措施和方法。方法收集2016年5月至2016年12月期間在本院門診確診的233例高危型HPV感染患者的血常規(guī)檢查、血清微量元素含量檢測及陰道鏡病理檢測結(jié)果等相關(guān)資料。根據(jù)陰道鏡及病理結(jié)果將研究對象分為慢性炎癥組(單純HPV感染組)、宮頸上皮病變 CINⅠ組、CINII組、CINIII組和宮頸癌組；HPV陰性者為對照組(233例)，采用方差分析與LSD多重比較法分析不同組間各檢測指標(biāo)的差異。結(jié)果(1)6組之間血常規(guī)參數(shù)中紅細(xì)胞計數(shù)(RBC)、白細(xì)胞計數(shù)(WBC)的平均水平的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，與對照組對比，慢性炎組的平均血小板體積(MPV)、平均血紅蛋白濃度(MCHC)顯著下降(P<0.05)，血小板計數(shù)(PLT)、血小板壓積(PCT)、血細(xì)胞平均體積(MCV)顯著升高(P<0.05)；CINⅠ組的PLT、PCT顯著上升，MPV顯著下降(P<0.05)；CINII組、CINIII組的MCHC、MPV顯著下降(P<0.05)，PLT、PCT顯著上升(P<0.05)；宮頸癌組的MCHC顯著下降(P<0.05)，MCV、MPV、PLT、PCT顯著上升(P<0.05)；(2)6組之間微量元素中鋅(Zn)、鎂(Mg)、銅(Cu)的平均水平的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；與對照組對比，慢性炎組的血清鈣(Ca)、血清鐵(Fe)水平顯著降低(P<0.05)；CINⅠ組、CINII組、CINIII組和宮頸癌組的血清鐵(Fe)水平均顯著降低(P<0.05)。結(jié)論HPV感染患者的宮頸上皮內(nèi)病變程度可能與患者的血常規(guī)結(jié)果中的MPV、MCV、MCHC、PLT、PCT及血清微量元素中的Fe、Ca含量相關(guān)，但需擴(kuò)大樣本量進(jìn)一步研究。

宮頸病變； HPV感染； 血液檢查； 微量元素

Objective： To study the changes of blood biochemical index in the patients infected by human papillomavirus(HPV)for obtaining scientific evidences in support of prevention and treatment for cervical inflammation and lesions.

Methods： The data including the results of blood routine examination，serum trace element content detection and colposcopic pathology of 233 patients diagnosed with high-risk HPV infection in the Liuzhou Maternity and Child Health Care Hospital from May to December 2016 were collected.According to colposcopy and pathological results，the patients were divided into five groups：chronic inflammatory(HPV infection alone)，CINI，CINII，CINIII，and cervical cancer group.Meanwhile，233 patients with negative HPV test were included as the control group.The variance analysis and LSD multiple comparison were used to analyze the differences among the different groups.

Results： The differences in various blood parameters including RBC and WBC were not significantly differnt among the six groups(P>0.05).Compared with control group，the mean platelet volume(MPV)and mean hemoglobin concentration(MCHC)were significantly decreased(P<0.05)，but the platelet count(PLT)，platelet count(PCT)and blood cell mean volume(MCV)were significantly increased in the chronic inflammatory group(P<0.05).The PLT and PCT were significantly increased，but MPV was significantly decreased in CINⅠ group(P<0.05).The MCHC and MPV were significantly decreased，but PLT & PCT were significantly increased in CINII and CINIII group(P<0.05).The levels of MCV，MPV，PLT and PCT were significantly increased，but the MCHC was significantly decreased in the cervical cancer group(P<0.05).There were no significant differences in the average levels of Zn，Mg and Cu among the six groups(P>0.05).Compared with the control group，the levels of serum calcium(Ca)and iron(Fe)were significantly decreased in chronic inflammation group(P<0.05).The levels of serum Fe were significantly decreased in CINⅠ，CINII，CINIII group and cervical cancer group(P<0.05).

Conclusions： The degree of cervical intraepithelial lesion may be related to MPV，MCV，MCHC，PLT，PCT and serum trace elements in patients with HPV infection，but need to further expand the sample size of study.

Keywords： Cervical lesions； HPV infection； Blood routine examination； Trace elements

(JReprodMed2017，26(10)：1006-1010)

宮頸上皮病變(CIN)是已婚女性常見的一種疾病，子宮頸癌在女性惡性腫瘤中排第二位，僅次于乳腺癌，女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤中占第一位。全世界每年超過20萬的婦女死于宮頸癌[1]，其中主要原因是缺乏病因?qū)W的預(yù)防及早診早治方案。因此，研究宮頸癌早期病變時期機(jī)體相關(guān)因素的變化其發(fā)病的危險因素，對于宮頸癌的預(yù)防及治療十分重要。

在1995年，由IARC專題討論會確認(rèn)了HPV感染是子宮頸癌的主要病因。德國病毒學(xué)家哈拉爾德.楚爾.豪森(Harald zur Hausen)博士因?yàn)槭紫劝l(fā)現(xiàn)了HPV與宮頸癌的關(guān)系而榮獲諾貝爾生理學(xué)/醫(yī)學(xué)獎[2-5]。文獻(xiàn)研究結(jié)果顯示，導(dǎo)致宮頸上皮病變的因素有很多，包括：行為危險因素、生物因素、遺傳因素和微量元素缺乏?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)宮頸癌與微量元素銅、鋅、硒有關(guān)[6-7]。近年來國內(nèi)外已開始利用血細(xì)胞分析進(jìn)行臨床局部感染的相關(guān)研究，常把血小板平均體積(MPV)與血小板計數(shù)(PLT)相結(jié)合進(jìn)行研究。而目前關(guān)于HPV病毒感染是否會影響血液分析參數(shù)的改變尚無研究數(shù)據(jù)，有待進(jìn)行進(jìn)一步的調(diào)查研究。

2012年柳州市疾病和預(yù)防控制中心調(diào)查顯示柳州市常住人群子宮頸癌發(fā)病率為14.74/10萬，死亡率為5.1/10萬，發(fā)病率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于當(dāng)年的世界人口年齡調(diào)查的發(fā)病率(世調(diào)率)7.73/10萬，同時也高于2005年全國45個腫瘤登記處平均水平(世調(diào)率)6.45/10萬[8]。因此，系統(tǒng)研究柳州地區(qū)婦女宮頸上皮病變的發(fā)病原因及患者血液變化對宮頸病變的早期預(yù)防和臨床治療具有重要的指導(dǎo)意義。本次研究對柳州市HPV感染患者的微量元素五項和全血細(xì)胞檢查結(jié)果進(jìn)行系統(tǒng)分析，探索不同病理等級的HPV感染的宮頸上皮病變的患者體內(nèi)生理指標(biāo)的變化情況，嘗試提出宮頸上皮病變進(jìn)展的預(yù)防措施，為臨床早期診斷和婦女健康促進(jìn)措施提供科學(xué)依據(jù)，提高柳州市婦女健康水平。

資料與方法

一、研究對象

選取在2016年5月1日至2016年12月30日期間，于本院婦科就診的非妊娠期患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：1)年齡在18歲至65歲之間；2)近期無生育要求；3)宮頸分泌物經(jīng)HC2(Hybrid capture2)檢測確診為高危型(包括：16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68共13種高危亞型)HPV陽性患者。排除標(biāo)準(zhǔn)：1)子宮切除史及骨盆放射治療史患者；2)心血管系統(tǒng)，免疫系統(tǒng)和代謝性疾病等其他嚴(yán)重全身性疾病患者；3)近期有急性感染性疾病患者；4)地中海貧血及病理性貧血患者。納入符合標(biāo)準(zhǔn)的患者共233例。

二、研究方法

1.分組：根據(jù)2014年世界衛(wèi)生組織女性生殖道病理分類指南進(jìn)行病理分類，將納入的研究對象分為，(1)慢性炎癥組：病理診斷為慢性炎癥，即宮頸上皮細(xì)胞沒有異型，或陰道鏡檢查未見異常的單純HPV感染患者，共164人。(2)CINⅠ組：病理診斷為CINⅠ級，為輕度不典型增生，即宮頸上皮異型細(xì)胞局限于上皮層的下1/3，共20人。(3)CINⅡ組：病理診斷為CINⅡ級，為中度不典型增生，即宮頸上皮異型細(xì)胞局限于上皮層的下2/3層，共18人。(4)CINⅢ組，病理診斷為CINⅢ級，為重度不典型增生，即宮頸上皮異型細(xì)胞全部累及上皮層，但未突破基底層；共21人。(5)宮頸癌組：病理診斷為宮頸癌，即宮頸上皮異型細(xì)胞已突破基底層，共10人。以上患者均為有病理診斷者，術(shù)前已征得患者同意，且已通過院內(nèi)倫理委員會審核通過，研究過程無違背倫理行為。(6)對照組：HPV陰性的正常人233例。

2.標(biāo)本采集：獲取研究對象知情同意后收集研究對象的血液樣本和宮頸分泌物，由專門的一位檢驗(yàn)員進(jìn)行微量元素五項、全血細(xì)胞檢查以及HC2的檢測，要求所有研究對象禁食禁飲12 h以上，于第2天清晨由經(jīng)過培訓(xùn)的專業(yè)護(hù)士抽取靜脈血，分別抽取2 ml靜脈血用于血常規(guī)檢驗(yàn)，5 ml靜脈血用于微量元素五項檢驗(yàn)。將所有患者的靜脈血置于聚丙烯試管內(nèi)，在4 ℃溫度下，以2 000g離心10 min分離血清，血清在零下20℃的溫度條件下保留待測；由?？漆t(yī)生用專用試劑瓶進(jìn)行宮頸分泌物的標(biāo)本采集，24 h內(nèi)按照儀器說明書進(jìn)行操作檢驗(yàn)。

3.標(biāo)本檢測：(1)HC2 HPV-DNA檢測方法：使用美國Digene生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的HC2高危型HPV-DNA 檢測試劑盒對研究對象的宮頸分泌物進(jìn)行檢測；(2)陰道鏡及病理檢查：采用SLC2000-B陰道鏡對所有研究對象均常規(guī)在其非月經(jīng)期進(jìn)行陰道鏡檢查，對陰道鏡下發(fā)現(xiàn)有可疑病變的患者進(jìn)行宮頸定點(diǎn)活體組織病理檢查；(3)病理學(xué)制片方法及診斷標(biāo)準(zhǔn)：將所取標(biāo)本用10%甲醛液固定后送我院病理實(shí)驗(yàn)室，由專業(yè)病理科醫(yī)生進(jìn)行病理檢查；(4)血常規(guī)檢測：采用深圳邁瑞公司提供的BC5300全血細(xì)胞分析儀對研究對象的血清進(jìn)行檢測；(5)微量元素檢測：采用北京博暉公司提供的原子吸收光譜儀人體元素專用檢測儀對研究對象的血清進(jìn)行檢測。

4.分析指標(biāo)內(nèi)容：紅細(xì)胞數(shù)目(RBC)、血小板計數(shù)(PLT)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(MCHC)、紅細(xì)胞平均體積(MCV)、血小板壓積(PCT)、白細(xì)胞計數(shù)(WBC)、平均血小板體積(MPV)；血清銅(Cu)含量、血清鈣(Ca)含量、血清鎂(Mg)含量、血清鋅(Zn)含量、血清鐵(Fe)含量等。

三、統(tǒng)計學(xué)分析

結(jié) 果

一、各組患者全血細(xì)胞學(xué)檢查情況

對血常規(guī)各項數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，結(jié)果顯示：6組之間RBC、WBC的平均水平差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；與對照組對比，慢性炎組的MPV、MCHC顯著下降(P<0.05)，PLT、PCT、MCV顯著升高(P<0.05)；CINⅠ組的PLT、PCT顯著上升(P<0.05)，MPV顯著下降(P<0.05)；CINII組、CINIII組的MCHC、MPV顯著下降(P<0.05)，PLT、PCT顯著上升(P<0.05)；宮頸癌組的MCHC顯著下降(P<0.05)，MCV、MPV、PLT、PCT顯著上升(P<0.05)；與宮頸癌組相比，慢性炎組、CINⅠ組、CINIII組的MCV顯著上升，MPV顯著下降(P<0.05)；而CINII組僅MPV顯著低于宮頸癌組。

二、各組患者血清微量元素檢查情況

對血清微量元素各項數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，結(jié)果顯示：6組之間血清Zn、Mg、Cu的平均水平差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；與對照組對比，慢性炎組及其余各組的血清Fe水平顯著降低(P<0.05)，其中慢性炎和CINII組血清Fe水平顯著高于宮頸癌組；而慢性炎癥組的血清Ca水平也顯著降低，同時也顯著低于宮頸癌組；差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)(表2)。

討 論

HPV感染引起的宮頸上皮病變從原理上來說，本質(zhì)就是病毒感染引起的炎癥反應(yīng)。研究證實(shí)，宮頸鱗狀上皮內(nèi)病變的進(jìn)展和消退時間與HPV感染相關(guān)[9]。研究表明，型特異性的血清抗體存在一定的交叉反應(yīng)，例如，HPV31和45分別與HPV33和18存在交叉反應(yīng)。檢測血清中的HPV抗體可以用于說明是否曾經(jīng)獲得HPV感染。但需要說明的是，部分HPV DNA陽性的女性可能不產(chǎn)生HPV抗體或不發(fā)生血清學(xué)轉(zhuǎn)換[10]。這也有可能是導(dǎo)致本次研究中其他血細(xì)胞檢測未出現(xiàn)明顯差別的原因。

表1 HPV感染宮頸病變不同程度的血常規(guī)檢查情況(-±s)

注：與對照組對比，*P<0.05；與宮頸癌組對比，#P<0.05

表2 HPV感染宮頸病變不同程度的微量元素檢查情況(-±s)

注：與對照組對比，*P<0.05；與宮頸癌組對比,#P<0.05

本次研究發(fā)現(xiàn)，HPV感染的患者中，各級宮頸病變的患者M(jìn)CHC、MPV、PLT、PCT值與對照組對比均提示差異有統(tǒng)計學(xué)意義，MCHC、MPV明顯減小，PLT、PCT明顯增大，MCV在宮頸癌組時提示與各組相比較明顯縮小。提示HPV感染時對血細(xì)胞的影響主要體現(xiàn)在紅細(xì)胞及血小板的體積、血小板的數(shù)量上，紅細(xì)胞及白細(xì)胞的總數(shù)無明顯變化。MCHC、MPV、PLT、PCT的變化與馬岳[11]關(guān)于病毒感染影響紅細(xì)胞、血小板指數(shù)的差異變化的研究結(jié)果一致，在此項研究中發(fā)現(xiàn)HBsAg陽性及HCV感染的患者會發(fā)生血液學(xué)指標(biāo)中部分參數(shù)改變，提示乙肝的病原體HBV、丙肝的病原體HCV以不同的機(jī)制影響造血微環(huán)境及巨核祖細(xì)胞。而目前關(guān)于HPV病毒感染是否會影響血細(xì)胞分析的參數(shù)改變尚無研究數(shù)據(jù)，有待進(jìn)行進(jìn)一步的調(diào)查研究。本次研究還發(fā)現(xiàn)宮頸癌組患者的MCV水平跟各組比較明顯縮小，但目前無相關(guān)研究數(shù)據(jù)進(jìn)行對比，提示MCV數(shù)值可能可以做為HPV感染患者預(yù)后宮頸癌的指標(biāo)之一?？傊Ｒ?guī)結(jié)果中MCV、MCHC、MPV、PLT、PCT結(jié)果能夠提示宮頸上皮病變進(jìn)展，有待擴(kuò)大樣本量進(jìn)一步研究證實(shí)。

近年來，大量的流行病學(xué)調(diào)查、臨床實(shí)驗(yàn)研究及動物實(shí)驗(yàn)結(jié)果均表明，多種微量元素與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和治療等有著密切的關(guān)系[12-13]。在本次研究中發(fā)現(xiàn)，HPV感染的患者中，不同病變程度的各組患者血清鐵含量與對照組對比，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，隨病程發(fā)展，患者血清鐵含量逐漸減少。提示HPV感染后，血清鐵明顯減少，且與病變進(jìn)程相關(guān)。有研究[13]顯示子宮頸癌患者血清鐵含量減少，與本次研究結(jié)果一致，提出可能是因?yàn)閷m頸癌患者含鐵酶在肝細(xì)胞內(nèi)快速增殖，鐵的利用率升高所致。也有研究表明用硒防癌在江蘇省啟東肝癌高發(fā)區(qū)已獲得實(shí)際效果[14]，并且鎂、鉬、硒以及銅、鎂和鋅等有可能存在抑制癌癥發(fā)生的作用[15]。有學(xué)者提出鋅通過阻滯細(xì)胞脂膜過氧化的作用防止癌癥的發(fā)生，但是鋅同時也有致癌和促進(jìn)腫瘤發(fā)展的作用，微量元素在我們的日常生活中通過多種途徑進(jìn)入機(jī)體，如空氣、食物和水等，通過定期檢測體內(nèi)微量元素的含量，并進(jìn)行一系列措施對其進(jìn)行干預(yù)，可預(yù)防惡性腫瘤的發(fā)病[16]。

本次研究同時發(fā)現(xiàn)血清鈣在HPV感染的慢性炎癥期與對照組對比顯著降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，提示缺鈣有可能容易導(dǎo)致免疫力降低而感染HPV病毒；但宮頸癌組與慢性炎組對比血清鈣反而升高，且與對照組對比差異無統(tǒng)計學(xué)意義，因此血清鈣的變化在HPV感染預(yù)后方面可能無實(shí)際臨床意義，但微量元素中血清鐵、鈣含量可能可以提示宮頸上皮病變進(jìn)展。在本次研究中銅、鋅鎂等元素各組間對比無顯著性差異，有可能是研究樣本量不足導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)偏差，有待擴(kuò)大樣本量進(jìn)一步研究證實(shí)。

綜合以上各項研究提示，在對子宮頸癌、CIN患者以及HPV感染患者的治療過程中，應(yīng)動態(tài)觀察查患者血細(xì)胞及血清中微量元素的含量變化。本次研究選用了HPV患者的血細(xì)胞及血清中的微量元素進(jìn)行分析比對，得到血常規(guī)中的MCV、MCHC、MPV、PLT、PCT及血清中的鐵、鈣含量，可能可以提示HPV感染患者的宮頸上皮病變進(jìn)展情況。

宮頸癌對女性的身體健康影響極大，其發(fā)病率在女性惡性腫瘤中居第二位，僅次于乳腺癌；而其死亡率為女性惡性腫瘤死亡率第一位，惡性程度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于乳腺癌。其中主要原因是缺乏病因?qū)W的預(yù)防及早診早治方案。因此，研究宮頸癌的流行病學(xué)資料及其發(fā)病的危險因素，對于宮頸癌的預(yù)防及治療十分重要。根據(jù)我們的研究，HPV感染患者除生殖道發(fā)生宮頸病變外，血液細(xì)胞和血清微量元素也隨病情變化而變化。因此，關(guān)注HPV感染患者全身血細(xì)胞和微量元素的變化并在早期進(jìn)行干預(yù)，可能是臨床上預(yù)防宮頸癌的發(fā)病行之有效的方法。

[1] Parkin DM，Bray F，F(xiàn)erlay J，et al.Estimating the world cancer burden：Globocan 2000[J].Int J Cancer，2001，94：153-156.

[2] 李晴.子宮頸疾病陰道鏡圖釋[M].第1版，北京：人民軍醫(yī)出版社，2012：32-35.

[3] Lizano M，De la Cruz-Hernández E，Carrillo-García A，et al.Distribution of HPV16 and 18 intratypic variants in normal cytology，intraepithelial lesions，and cervical cancer in a Mexican population[J].Gynecol Oncol，2006，102：230-235.

[4] Wright JD，Li J，Gerhard DS，et al.Human papillomavirus type and tobacco use as predictors of survival in early stage cervical carcinoma[J].Gynecol Oncol，2005，98：84-91.

[5] Mclachlin CM.Human papillomavirus in cervical neoplasia.Role，risk factors，and implications[J].Clin Lab Med，2000，20：257- 270.

[6] 鄭嘉欣.微量元素與腫瘤相關(guān)性研究的熱點(diǎn)及爭議[J].國際腫瘤學(xué)雜志，2010，37：117-119.

[7] 朱林，紀(jì)祥軍，王漢東.浸入式金屬白顯影技術(shù)檢測游離鋅離子在人腦外傷、急性腦缺血、癲癇后神經(jīng)元中的異常聚集[J].中華神經(jīng)醫(yī)學(xué)雜志，2013，12：9-12.

[8] 吳昕.2012年柳州市宮頸癌發(fā)病情況總結(jié)會匯編[D].柳州市疾病控制中心印制，2013：12-13.

[9] Tota JE，Ramanakumar AV，Villa LL，et al.Evaluation of human papillomavirus type replacement postvaccination must account for diagnostic artifacts：masking of HPV52 by HPV16 in anogenital specimens[J].Cancer Epidemiol Biomarkers Prev，2015，24：286-290.

[10] Schlecht NF，Platt RW，Duarte-Franco E，et al.Human papillomavirus infection and time to progression and regression of cervical intraepithelial neoplasia[J].J Natl Cancer Inst，2003，95：1336-1343.

[11] 馬岳.HBV、HCV感染影響紅細(xì)胞、血小板指數(shù)的差異[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2006，21：673-675.

[12] 初瑞雪，孟衛(wèi)東，崔晞.食管癌患者全血微量元素變化的臨床意義[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012，33：2397-2399.

[13] 王存平，張麗，齊欽增.婦科惡性腫瘤130例血清微量元素測定分析[J].西部醫(yī)學(xué)，2010，22：2046-2047.

[14] 屈蘭竺，楊松杰，禚蘇，等.微量必需元素硒的作用探析[J].中國農(nóng)學(xué)通報，2010，26：94-97.

[15] 傅銀鋒，周惠娜，巢浩界.婦科腫瘤患者血液微量元素的檢測及意義[J].山東醫(yī)藥，2009，49：87-88.

[16] 余悅心，朱以軍.卵巢癌患者血微量元素的檢測及臨床意義[J].浙江實(shí)用醫(yī)學(xué)，2009，14：192-193.

[編輯：辛玲]

Roleofbloodbiochemicalindexincervicalchronicinflammationandlesions

TAOHua*，WEIYan-zhen，WANGXing-min，ZHOUHong-min，MAIMei-yun

DepartmentofGynecology，LiuzhouMaternal&ChildHealthCareServices，Liuzhou545001

10.3969/j.issn.1004-3845.2017.10.010

2017-03-30；

2017-05-01

廣西醫(yī)藥衛(wèi)生科研課題(Z2016536)

陶華，女，廣西柳州人，主治醫(yī)師，婦產(chǎn)科宮頸疾病專業(yè).(*

，Email：937909873@qq.com)