基于質(zhì)量常數(shù)評(píng)價(jià)方法劃分黃柏飲片等級(jí)研究

鄧哲　焦夢(mèng)姣　章軍　張慶　崔文金　沈立　程錦堂　劉安

[摘要] 質(zhì)量常數(shù)評(píng)價(jià)方法是一種基于傳統(tǒng)又優(yōu)于傳統(tǒng)的綜合性中藥飲片等級(jí)評(píng)價(jià)方法，該文基于質(zhì)量常數(shù)評(píng)價(jià)方法建立了黃柏飲片等級(jí)劃分的模式。研究結(jié)果顯示15批不同質(zhì)量的黃柏飲片其相對(duì)質(zhì)量常數(shù)范圍為0.41～0.96。如果把黃柏飲片劃分成3等級(jí)，則：一級(jí)黃柏飲片相對(duì)質(zhì)量常數(shù)≥0.77；二級(jí)黃柏飲片相對(duì)質(zhì)量常數(shù)<0.77且≥0.48；三級(jí)黃柏飲片相對(duì)質(zhì)量常數(shù)<0.48。該研究表明，質(zhì)量常數(shù)評(píng)價(jià)方法能夠科學(xué)、合理、客觀、準(zhǔn)確的劃分黃柏飲片等級(jí)，同時(shí)為皮類藥材或飲片的等級(jí)劃分提供了有益的參考。

[關(guān)鍵詞] 黃柏飲片； 相對(duì)質(zhì)量常數(shù)； 等級(jí)評(píng)價(jià)

Grades evaluation of Phellodendri chinensis cortex pieces

based on quality constant

DENG Zhe1，2， JIAO Mengjiao1， ZHANG Jun1， ZHANG Qing1， CUI Wenjin1， SHEN Li1，2，

Cheng Jintang1， LIU An1*

（1. Institute of Chinese Materia Medica， China Academy of Chinese Medical Sciences， Beijing 100700， China；

2. Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine， Nanchang 330004， China）

[Abstract] Quality constant is a comprehensive grades evaluation method for traditional Chinese medicine decoction pieces， which is better but based on traditional way. In this paper， a new grading mode for Phellodendri chinensis pieces was established based on quality constant evaluation method. The results showed that the range of relative quality constant for 15 batches of different samples was from 0.41 to 0.96. As customary， if these samples were divided into three grades： the relative quality constant shall be ≥0.77 for first grade； <0.77 but ≥0.48 for the second grade； and <0.48 for the third grade. This research indicated that the quality constant mode can be used to effectively grade the P. chinensis pieces in a scientific， reasonable， objective and specific way. Simultaneously， it provided a beneficial reference for grading cortex herbal pieces or medicines.

[Key words] Phellodendri chinensis pieces； relative quality constant； grade evaluation

黃柏來源于蕓香科植物黃皮樹Phellodendron chinense Schneid.的干燥樹皮，習(xí)稱“川黃柏”。其味苦性寒，歸腎、膀胱經(jīng)，具有清熱燥濕，瀉火除蒸，解毒療瘡等作用[1]?，F(xiàn)代藥理研究表明黃柏有抗炎[24]、抗腫瘤[56]、神經(jīng)保護(hù)[78]等作用，臨床上主要用于治療黃疸型肝炎、細(xì)菌性痢疾、慢性糖尿病等癥[9]。作為常用大宗藥材之一，黃柏在市場(chǎng)流通和臨床應(yīng)用均很廣泛。但對(duì)于黃柏的質(zhì)量評(píng)價(jià)，傳統(tǒng)上是從性狀方面著手的，認(rèn)為“肉厚色黃者為佳”。這種評(píng)價(jià)方法直觀明了，但缺乏現(xiàn)代的科學(xué)內(nèi)涵。也有學(xué)者基于化學(xué)成分研究，則認(rèn)為鹽酸黃柏堿和鹽酸小檗堿含量越高質(zhì)量越好[10]，但是缺乏傳統(tǒng)評(píng)價(jià)依據(jù)。由于上述問題的存在，黃柏飲片等級(jí)劃分的文獻(xiàn)報(bào)道較少，目前沒有形成統(tǒng)一的黃柏飲片等級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。因此，有必要建立一套科學(xué)、合理、可操作性強(qiáng)、實(shí)用性好的黃柏飲片等級(jí)評(píng)價(jià)方法，為規(guī)范中藥飲片市場(chǎng)、實(shí)現(xiàn)優(yōu)質(zhì)優(yōu)價(jià)、保障臨床用藥的良好療效提供有力支撐。

前期研究[1112]表明質(zhì)量常數(shù)評(píng)價(jià)方法是一種基于傳統(tǒng)又優(yōu)于傳統(tǒng)的綜合性中藥飲片質(zhì)量評(píng)價(jià)方法。而對(duì)于不同類的中藥飲片，質(zhì)量常數(shù)評(píng)價(jià)方法能有效地結(jié)合該類中藥的特點(diǎn)，制定出合理的等級(jí)評(píng)價(jià)思路、劃分合理等級(jí)。如根及根莖類中藥飲片大多是規(guī)則形的飲片，因此可以視為標(biāo)準(zhǔn)圓柱體模型開展等級(jí)劃分研究。而對(duì)于皮類飲片，標(biāo)準(zhǔn)圓柱體模型不合適，因此，需基于質(zhì)量常數(shù)評(píng)價(jià)方法建立一種新的模型來探討皮類飲片等級(jí)劃分。本文以黃柏為例，以期說明皮類飲片評(píng)價(jià)模型的實(shí)用性，建立黃柏飲片等級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，為皮類飲片的等級(jí)劃分研究提供新思路、新方法。

1 材料

1.1 樣品

從7個(gè)廠家購(gòu)買了15批不同品質(zhì)的黃柏飲片，其信息見表1，圖1。

1.2 儀器與試劑

島津LC20AT型高效液相色譜儀（日本島津公司，DGC20 A型在線脫氣系統(tǒng)，SIL20 A型自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)，CTO20 A型柱溫箱，SPDM20 A型二極管陣列檢測(cè)），BS224S型1/10萬電子分析天平（德國(guó)賽多利斯公司）；KQ250DB型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；Sartorious BS 210 S型電子天平；鹽酸小檗堿對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院，純度為86.8%，批號(hào)110713200911），鹽酸黃柏堿對(duì)照品（中藥固體制造技術(shù)國(guó)家工程研究中心，純度≥98%，批號(hào)Y05140210），水為娃哈哈純凈水，其他試劑為分析純。endprint

2 方法

2.1 質(zhì)量常數(shù)

中藥飲片質(zhì)量常數(shù)是由本課題組提出的中藥飲片等級(jí)評(píng)價(jià)新方法[1112]，其定義為單位成分質(zhì)量與其厚度平方的比，其形式是廣泛的、多樣的，根據(jù)中藥飲片的不同特點(diǎn)形成不同的方程。對(duì)于皮類飲片，一般認(rèn)為其厚度越厚，寬越小越好。在此基礎(chǔ)上，作者建立了皮類中藥飲片等級(jí)評(píng)價(jià)模型：將皮類飲片視為標(biāo)準(zhǔn)長(zhǎng)方體，見圖2，飲片的厚度為h，寬度（切制寬度）為w，長(zhǎng)度為L(zhǎng)。因飲片的質(zhì)量與L無關(guān)，為了簡(jiǎn)化研究，采用單位長(zhǎng)度的飲片用于等級(jí)評(píng)價(jià)?；谫|(zhì)量常數(shù)評(píng)價(jià)方法得出公式（1）。2015年版《中國(guó)藥典》黃柏飲片有2個(gè)指標(biāo)成分，所以根據(jù)公式（2）計(jì)算黃柏飲片的相對(duì)質(zhì)量常數(shù)。

其中，ρ是飲片密度；h是飲片厚度；w是飲片寬度；L是飲片長(zhǎng)度；Ai是質(zhì)量常數(shù)； c是指標(biāo)成分含量；C′n是藥典限量值；A′z是黃柏飲片相對(duì)質(zhì)量常數(shù)（i=1，2，3……n）。

2.2 黃柏飲片形態(tài)參數(shù)的測(cè)定

從每批黃柏飲片中隨機(jī)抽取飲片，每批平行3次，分別記錄重量和總寬度，求出1 cm長(zhǎng)度質(zhì)量、平均寬度。

2.3 黃柏飲片內(nèi)在成分指標(biāo)的測(cè)定[1]

2.3.1 色譜條件

2.3.1.1 鹽酸小檗堿含量測(cè)定 色譜柱Agilent ExtendC18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；以乙腈0.1%磷酸溶液（50∶50）（每100 mL加十二烷基磺酸鈉0.1 g）為流動(dòng)相；柱溫30 ℃；流速1 mL·min-1；檢測(cè)波長(zhǎng)265 nm；理論板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計(jì)算不低于4 000。

2.3.1.2 鹽酸黃柏堿含量測(cè)定 色譜柱Agilent ExtendC18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；以乙腈0.1%磷酸溶液（每100 mL加十二烷基磺酸鈉0.2 g）（36∶64）為流動(dòng)相；柱溫30 ℃；流速1 mL·min-1；檢測(cè)波長(zhǎng)284 nm；理論板數(shù)按鹽酸黃柏堿峰計(jì)算不低于6 000。

2.3.2 對(duì)照品溶液的制備

分別取鹽酸小檗堿對(duì)照品和鹽酸黃柏堿對(duì)照品適量，精密稱定，加各自流動(dòng)相制成每1 mL分別為含143.2，84.7 μg的溶液。

2.3.3 供試品溶液的制備

2.3.3.1 測(cè)鹽酸小檗堿供試品溶液制備 取黃柏飲片粉末（過3號(hào)篩）約0.1 g，精密稱定，置100 mL量瓶中，加流動(dòng)相80 mL，超聲處理（功率250 W，頻率40 kHz）40 min，放冷，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.3.3.2 測(cè)鹽酸黃柏堿供試品溶液制備 取黃柏飲片粉末（過4號(hào)篩）約0.5 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入流動(dòng)相25 mL，稱定質(zhì)量，超聲處理（功率250 W，頻率40 kHz）30 min，放冷，再稱定質(zhì)量，用流動(dòng)相補(bǔ)足失重，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.3.4 測(cè)定法

分別精密吸取對(duì)照品溶液5 μL和供試品溶液5 μL，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。

2.4 相對(duì)質(zhì)量常數(shù)的計(jì)算

將每批黃柏飲片的外觀參數(shù)和內(nèi)在成分指標(biāo)相結(jié)合，根據(jù)公式（1）計(jì)算各指標(biāo)的質(zhì)量常數(shù)，根據(jù)公式（2）計(jì)算每批黃柏飲片的相對(duì)質(zhì)量常數(shù)。

3 結(jié)果與分析

3.1 黃柏飲片形態(tài)參數(shù)數(shù)據(jù)

塊、絲、片、段等是中藥飲片常見形式，皮類飲片一般均以絲的形式流通于市場(chǎng)。從15批黃柏飲片測(cè)得的寬度來看，各廠家切絲均為寬絲片，絲寬范圍為0.48～0.95 cm。

3.2 黃柏飲片內(nèi)在成分指標(biāo)含量

按照2.3.1色譜條件，其色譜圖見圖3。分別測(cè)定黃柏飲片中鹽酸小檗堿和鹽酸黃柏堿的含量。測(cè)定了16批黃柏飲片，其中有1批飲片指標(biāo)含量不符合藥典限量要求，其他15批均符合2015年版《中國(guó)藥典》鹽酸小檗堿質(zhì)量分?jǐn)?shù)不得少于3.0%和鹽酸黃柏堿不得少于0.34%的標(biāo)準(zhǔn)。其鹽酸小檗堿質(zhì)量分?jǐn)?shù)是3.60%～6.08%，鹽酸黃柏堿質(zhì)量分?jǐn)?shù)是0.360%～0.594%，見表2。

3.3 黃柏飲片相對(duì)質(zhì)量常數(shù)

質(zhì)量常數(shù)通過公式（1）求得，將所得的質(zhì)量常數(shù)通過公式（2）計(jì)算出相對(duì)質(zhì)量常數(shù)。從表2中可知，此15批黃柏飲片的相對(duì)質(zhì)量常數(shù)是0.41～0.96。結(jié)合廠家給定的黃柏飲片等級(jí)與計(jì)算出的相對(duì)質(zhì)量常數(shù)結(jié)果分析，發(fā)現(xiàn)相對(duì)質(zhì)量常數(shù)評(píng)價(jià)方法與廠家基于傳統(tǒng)的評(píng)價(jià)方法基本一致。如HB01～HB03等。同時(shí)，也并非厚度越厚，黃柏飲片質(zhì)量越好。如HB12的厚度幾乎是HB10的2倍，但HB12的內(nèi)在指標(biāo)成分含量均低于HB10。因此，相對(duì)質(zhì)量常數(shù)是一種綜合評(píng)價(jià)方法，能有效的結(jié)合外觀參數(shù)和內(nèi)在多指標(biāo)成分科學(xué)、合理的劃分中藥飲片等級(jí)。

為了更直觀的看出15批黃柏飲片等級(jí)差異，將其作圖，見圖4。假設(shè)以所測(cè)樣品最大相對(duì)質(zhì)量常數(shù)定為100%，其80%以上為一等飲片，其50%～80%為二等飲片，其下為三等，則：一級(jí)黃柏飲片相對(duì)質(zhì)量常數(shù)≥0.77，二級(jí)黃柏飲片相對(duì)質(zhì)量常數(shù)<0.77且≥0.48，三級(jí)黃柏飲片相對(duì)質(zhì)量常數(shù)<0.48。

4 討論

黃柏，又稱“檗木”，在《神農(nóng)本草經(jīng)》中被列為上品，屬于國(guó)家重點(diǎn)發(fā)展的“三木藥材”之一，在我國(guó)有著2 000多年的藥用歷史。歷代本草文獻(xiàn)多有關(guān)評(píng)價(jià)黃柏質(zhì)量?jī)?yōu)劣的記載[13]，如《本草經(jīng)集注》強(qiáng)調(diào)“輕薄色深為勝”，從質(zhì)地和色澤角度評(píng)價(jià)；《蜀本草》有“皮緊厚二、三分，鮮黃者上”之說，在質(zhì)地、色澤基礎(chǔ)上增加了皮的厚度，且給出了具體的皮厚數(shù)值；《本草圖經(jīng)》則采用產(chǎn)地評(píng)價(jià)模式，曰“以蜀中為佳?！爆F(xiàn)代對(duì)黃柏質(zhì)量的評(píng)價(jià)依然沿襲傳統(tǒng)評(píng)價(jià)模式。如《七十六種藥材商品規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)》主要從形狀、色澤、皮厚將黃柏藥材劃分2等級(jí)。四川為黃柏藥材的道地產(chǎn)區(qū)，一般認(rèn)為川產(chǎn)黃柏質(zhì)量最優(yōu)。以上主要是針對(duì)黃柏藥材質(zhì)量?jī)?yōu)劣的評(píng)價(jià)，而對(duì)于黃柏飲片的等級(jí)劃分（質(zhì)量?jī)?yōu)劣）研究較少并且缺乏統(tǒng)一的等級(jí)劃分標(biāo)準(zhǔn)。本研究采用質(zhì)量常數(shù)評(píng)價(jià)方法進(jìn)行了黃柏飲片等級(jí)評(píng)價(jià)，綜合了外觀和含量指標(biāo)，建立了統(tǒng)一的量化評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。endprint

依據(jù)市場(chǎng)和文獻(xiàn)，皮厚是黃柏飲片等級(jí)劃分外觀性狀中最關(guān)鍵的指標(biāo)。如周建理等[14]調(diào)查亳州藥材市場(chǎng)發(fā)現(xiàn)市場(chǎng)上流通的黃柏飲片有去皮和帶粗皮2種規(guī)格，每規(guī)格下又依據(jù)皮平均厚度劃分一、二等級(jí)。高源等[15]的根據(jù)皮厚并結(jié)合一些現(xiàn)代的物理化學(xué)指標(biāo)將黃柏飲片分為優(yōu)級(jí)、一級(jí)、統(tǒng)貨3等級(jí)。由于指標(biāo)成分含量與皮厚無正相關(guān)性，傳統(tǒng)的根據(jù)皮厚來劃分黃柏飲片等級(jí)進(jìn)而評(píng)判其質(zhì)量?jī)?yōu)劣明顯存在不足。所以，有必要將外在形態(tài)和內(nèi)在品質(zhì)綜合考慮，評(píng)價(jià)飲片質(zhì)量?jī)?yōu)劣。

對(duì)于皮類飲片，并不能像根及根莖類飲片一樣視為圓柱體模型，但是可以視為長(zhǎng)方體。依據(jù)質(zhì)量常數(shù)方程，可以推導(dǎo)出皮類飲片的質(zhì)量常數(shù)計(jì)算方法。對(duì)于皮類飲片，飲片的厚度和寬度是2個(gè)重要且顯著的指標(biāo)，傳統(tǒng)等級(jí)評(píng)價(jià)中厚度是飲片等級(jí)評(píng)價(jià)的關(guān)鍵指標(biāo)，而寬度代表飲片的切制工藝。

從15批黃柏飲片分級(jí)結(jié)果可以看出，質(zhì)量常數(shù)評(píng)價(jià)方法能獲得一個(gè)具體的量化數(shù)值，能客觀明確的劃分黃柏飲片的等級(jí)。本研究以80%和50%為界限將黃柏飲片劃分成3等級(jí)，還可以根據(jù)實(shí)際需要，設(shè)置若干等級(jí)。本研究樣品批次相對(duì)有限，還需測(cè)定更多的黃柏飲片來不斷的完善和豐富等級(jí)范圍。本研究為黃柏飲片的優(yōu)質(zhì)優(yōu)價(jià)提供理論基礎(chǔ)，為國(guó)家有關(guān)部門制定黃柏飲片的等級(jí)標(biāo)準(zhǔn)奠定基礎(chǔ)，也為其他皮類飲片的等級(jí)劃分研究提供了一種新思路、新方法。

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[責(zé)任編輯 孔晶晶]endprint