復(fù)方中草藥對肉雞生長性能、肌肉品質(zhì)、免疫功能和腸道菌群的影響

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(河北農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科技學(xué)院,河北保定 071000)

復(fù)方中草藥對肉雞生長性能、肌肉品質(zhì)、免疫功能和腸道菌群的影響

周茜,楊建喬,董小涵,閆晨靜,白冰瑤,韓雪,趙文*

(河北農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科技學(xué)院,河北保定 071000)

研究以烏梅為主的復(fù)方中草藥對羅斯肉仔雞生長性能、肌肉品質(zhì)、免疫功能和腸道菌群的影響。將300只肉仔雞隨機(jī)分為5組,分別為空白對照組、金霉素對照組(50 mg/kg)、復(fù)方中草藥低劑量組(5 mL/L)、復(fù)方中草藥中劑量組(10 mL/L)、復(fù)方中草藥高劑量組(20 mL/L),摻入飲水喂飼42 d。結(jié)果表明,與空白對照組相比,復(fù)方中草藥各劑量組顯著提高肉雞全期日增重(p<0.05),高劑量效果最明顯;中、高劑量組的胸肉彈性顯著提高(p<0.05),高劑量組的胸肉咀嚼性和亮度顯著提高(p<0.05);高劑量組的胸腺指數(shù)顯著提高(p<0.05),中、高劑量組的法氏囊指數(shù)顯著升高(p<0.05);高劑量組的腸道內(nèi)乳酸菌菌落數(shù)顯著提高(p<0.05)。結(jié)果表明,本研究設(shè)置的復(fù)方中草藥劑量(5、10、20 mL/L)范圍能不同程度改善肉仔雞生長過程,其中以20 mL/L添加量促進(jìn)效果最顯著。

復(fù)方中草藥,生長性能,肌肉品質(zhì),免疫功能,腸道菌群

目前在肉雞養(yǎng)殖業(yè)中,由于長期使用飼用抗生素,使得肉雞中抗生素殘留日益嚴(yán)重,直接威脅消費(fèi)者的健康[1];同時(shí)也會導(dǎo)致肉雞病原菌產(chǎn)生耐藥性,并使這些耐藥細(xì)菌和基因傳遞給人類,造成了潛在危害[2]。1986年,瑞典首先提出禁止使用抗生素作為飼料添加劑;2006年,歐盟成員國全面停止所有抗生素生長促進(jìn)劑;2010年,美國號召逐步禁止畜牧養(yǎng)殖使用“具有重要醫(yī)學(xué)用途的抗菌藥”;2015年,歐盟公布《關(guān)于謹(jǐn)慎使用抗菌類獸藥的指南》,號召全世界范圍內(nèi)加強(qiáng)人類用藥和獸藥行業(yè)之間的協(xié)作,共同應(yīng)對抗生素耐藥性問題。自2015年開始,我國逐步在食品動物中停用洛美沙星、培氟沙星、氧氟沙星、諾氟沙星、硫酸粘桿菌素等。2016年,國家發(fā)改委、農(nóng)業(yè)部和國家林業(yè)局聯(lián)合發(fā)布的《關(guān)于加快發(fā)展農(nóng)業(yè)循環(huán)經(jīng)濟(jì)的指導(dǎo)意見》提出,引導(dǎo)農(nóng)業(yè)投入品科學(xué)施用,提高飼料利用效率,規(guī)范飼料添加劑使用,加強(qiáng)飼用抗生素替代品的研發(fā)和使用,逐步減少飼用抗生素用量[3-4]。因此研究安全、高效的飼料添加劑替代現(xiàn)有抗生素,對于肉雞養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展已經(jīng)成為必然趨勢。

由于飼用抗生素的大量應(yīng)用,耐藥性菌株不斷產(chǎn)生,肉雞腸道菌群失調(diào),免疫力低下,為其疾病防治難度增加。隨著人民生活水平的不斷提高,公眾對于肉雞的消費(fèi)需求已經(jīng)由數(shù)量型轉(zhuǎn)向質(zhì)量型,因此肉雞肌肉的品質(zhì)、營養(yǎng)和安全性等因素成為肉雞養(yǎng)殖業(yè)追求的目標(biāo)[5-6]。中草藥添加劑以其安全、無殘留和藥源廣泛等優(yōu)勢,在肉雞養(yǎng)殖業(yè)飼用抗生素替代研究中逐漸受到重視。研究表明,中草藥內(nèi)既含有多種營養(yǎng)成分,同時(shí)又包含多種生物活性物質(zhì),這使其作為飼料添加劑具有雙重作用,即營養(yǎng)性和藥物性。本課題組前期研制出以烏梅為主的復(fù)方中草藥,研究表明具有選擇性抑菌活性、抗氧化活性、低毒等優(yōu)勢[7],因此本研究擬在此基礎(chǔ)上,通過在羅斯肉仔雞日糧中添加不同劑量復(fù)方中草藥,研究其對肉雞生長性能、肌肉品質(zhì)、免疫功能和腸道菌群的影響,旨為該復(fù)方中草藥在肉雞養(yǎng)殖業(yè)中的使用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1材料與儀器

7日齡健康羅斯肉仔雞,300 保定市潯源禽業(yè)有限公司。

復(fù)方中草藥(Chinese herbal formulation,CHF)成分包括烏梅(35%)、大青葉(20%)、柴胡(15%)、野菊花(13%)和生地(7%)等5味中草藥 保定第一中醫(yī)院。將5種中草藥混合,參照本實(shí)驗(yàn)室文獻(xiàn)方法[8]所敘述方法制備復(fù)方中草藥提取物,終濃度為0.5 g/mL(按生藥計(jì))。金霉素購自武漢馳飛精細(xì)醫(yī)藥技術(shù)發(fā)展有限公司。

YP3000型電子天平 奧豪斯儀器(上海)有限公司;BL-100型高速多功能粉碎機(jī) 浙江省永康市松青五金工具廠;SB-5200DTDN超聲波清洗機(jī) 寧波新芝生物科技股份有限公司;SPX-150S-Ⅱ型生化培養(yǎng)箱 上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司;LDZX-30KBS立式壓力蒸汽滅菌器 上海申安醫(yī)療器械廠;TMS Pro型食品物性分析儀 美國Food Technology Corporation公司;CR400型色彩色差儀 日本柯尼卡美能達(dá)公司。

1.2動物分組及飼養(yǎng)管理

羅斯肉仔雞隨機(jī)分為5組,每組6個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)10羽(公、母各半)。實(shí)驗(yàn)分為空白對照組、金霉素對照組、復(fù)方中草藥低劑量組(5 mL/L)、復(fù)方中草藥高劑量組(10 mL/L)和復(fù)方中草藥高劑量組(20 mL/L),以摻入飲水方式喂飼。

肉雞基礎(chǔ)日糧參照《家禽營養(yǎng)需要》標(biāo)準(zhǔn)(NRC,1994)[9],配制玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧,具體配方及營養(yǎng)成分見表1。實(shí)驗(yàn)雞采用疊層式籠養(yǎng),進(jìn)雛前對雞舍及設(shè)備進(jìn)行消毒。實(shí)驗(yàn)舍初始溫度控制在32～34 ℃。1～21 d喂前期料,22～42 d喂后期料,每組所備料槽和水槽位數(shù)相同,自由采食和飲水,24 h光照,定時(shí)清掃衛(wèi)生,定期對舍內(nèi)消毒。實(shí)驗(yàn)周期為6周。

表1 肉雞基礎(chǔ)日糧配方及營養(yǎng)水平Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets

注:a每千克預(yù)混料包括維生素A 150萬IU、維生素D340萬IU、維生素E 3300 IU、維生素K3300 mg、維生素B1300 mg、VB2950 mg、VB6600 mg、VB1245 mg、煙酸6500 mg、泛酸400 mg、葉酸150 mg、生物素15 mg、氯化膽堿75 mg、鐵9.5 g、銅6.5 g、錳12 g、鋅9 g、硒33 mg、碘150 mg。b營養(yǎng)成分均為計(jì)算值。

1.3生長性能指標(biāo)測定

實(shí)驗(yàn)開始前對每只肉雞進(jìn)行稱重,記錄為實(shí)驗(yàn)初始重。第21 d和42 d空腹稱重記錄,準(zhǔn)確記錄飼養(yǎng)期內(nèi)肉雞的給料量和撒料量,計(jì)算平均日增重、平均日采食量和飼料增重比[10]。

平均日增重(g)=(末重-始重)/天數(shù)

平均日采食量(g)=(階段末料重-階段初料重-撒料量)/天數(shù)

飼料增重比=平均日采食量/同期平均日增重

1.4肌肉品質(zhì)測定

實(shí)驗(yàn)第21 d和42 d,每個(gè)重復(fù)隨機(jī)取3只肉雞,放血宰殺后,立即從右側(cè)胸肉取樣,進(jìn)行肌肉色澤和質(zhì)構(gòu)分析測定。采用色差儀測定宰后胸肉的亮度(L*)、紅度(a*)和黃度(b*)。肌肉質(zhì)構(gòu)分析包括硬度、彈性、膠黏性和咀嚼性等參數(shù)。按肌纖維方向切為大小為1.5 cm×1.5 cm×1.0 cm的肌肉樣品,室溫下檢測[11]。TMS-Pro物性分析儀的探頭型號:P35,最小力:1 N;探頭回升到樣品表面上面的高度:18 mm;形變量:40%;檢測速度:30 mm/min。每樣分析3次。

1.5免疫器官指數(shù)測定

表2 復(fù)方中草藥對肉雞生長性能的影響Table 2 Effects of CHF on growth performance of broilers

注:同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(p<0.05),不同大寫字母表示差異極顯著(p<0.01),相同字母表示差異不顯著(p>0.05)，表3、表4同。

各實(shí)驗(yàn)組分別在第21、42日齡時(shí)隨機(jī)抽取6只雞稱重后,取脾臟、胸腺和法氏囊,仔細(xì)剝離周圍結(jié)締組織稱重,計(jì)算免疫器官指數(shù)[12]。

免疫器官指數(shù)(mg/g)=免疫器官重量/體重

1.6肉雞腸道菌群數(shù)量測定

飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)束,取含食糜內(nèi)容物的盲腸10 cm左右,分別采用菌落計(jì)數(shù)法檢測腸道內(nèi)容物中大腸桿菌、乳酸菌數(shù)量。無菌稱取腸內(nèi)食糜1 g,加入裝有9 mL無菌稀釋液的試管中制成10-1稀釋,振蕩均勻后從10-1稀釋液中吸取1 mL加入到第二支裝有9 mL稀釋液的試管中形成10-2稀釋,依次類推稀釋到10-7,然后分別選擇3個(gè)稀釋度,每個(gè)稀釋度做3個(gè)重復(fù),檢測內(nèi)容物中大腸桿菌數(shù)和乳酸菌數(shù)[13]。

1.7數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)

實(shí)驗(yàn)所獲得數(shù)據(jù)采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析,用F檢驗(yàn)進(jìn)行組間差異檢驗(yàn),再用Duncan’s法進(jìn)行多重比較,結(jié)果均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示,以p<0.05作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1復(fù)方中草藥對肉雞生長性能的影響

烏梅含有多種活性物質(zhì),包括有機(jī)酸、萜類、黃酮、脂類等,具有抑菌、抗氧化、抗炎癥、降血糖及免疫增強(qiáng)效果等多種生物學(xué)活性,中醫(yī)理論具有斂肺澀腸、生津止渴、驅(qū)蟲止痢等功效[14]。大青葉含有靛藍(lán)、色氨酮、有機(jī)酸類等,具有解熱、抗菌、抗病毒、抗內(nèi)毒素及增強(qiáng)免疫力等作用[15]。野菊花提取物富含萜類和黃酮類化合物,具有抗氧化、促進(jìn)動物生長發(fā)育及調(diào)節(jié)機(jī)體免疫應(yīng)答等功能[16]。由表2可知,1～21日齡,與空白對照組相比,復(fù)方中草藥低、中、高劑量組和金霉素對照組處理后,肉雞日增重顯著增高(p<0.05);低、中、高劑量組肉雞平均日采食量隨劑量增加而增加,但與空白對照組和金霉素對照組均無顯著性差異;高劑量組肉雞料重比較空白組上升了10.3%(p<0.05),但與金霉素組無顯著差異。22～42日齡,復(fù)方中草藥中劑量組及金霉素組肉雞日增重顯著高于空白對照組(p<0.05);低、中、高劑量組肉雞平均日采食量隨劑量增加而增加,但與空白對照組和金霉素對照組均無顯著性差異;低、高劑量組和金霉素組肉雞料重比與空白組相比,分別降低了24.58%、9.50%、23.46%(p<0.05)。1～42日齡實(shí)驗(yàn)全期,各劑量組均顯著提高了肉雞平均日增重(p<0.05),其中,高劑量組和金霉素組效果最為明顯,且兩者無顯著差異(p>0.05);各劑量組肉雞平均日采食量與對照組無顯著差異;低劑量組肉雞料重比與空白組相比降低了9.60%(p<0.05),且與金霉素組無顯著差異(p>0.05)。結(jié)果表明在肉仔雞日糧中添加復(fù)方中草藥均能顯著提高肉雞日增重和料重比(p<0.05),但對肉雞日采食量雖有不同程度增加,但無顯著影響(p>0.05),這可能是由于烏梅口味酸澀影響飼料適口性而影響肉雞的采食量,需要進(jìn)一步深入研究。

2.2復(fù)方中草藥對肉雞肌肉品質(zhì)的影響

質(zhì)構(gòu)是食品的物理性質(zhì)通過感覺而得到的感知,是食品重要的品質(zhì)特性之一,是評價(jià)食品的重要依據(jù)。硬度指肌肉達(dá)到一定變形所需的力,彈性表示探頭與肌肉接觸時(shí)用于克服兩者表面吸引力所需的力,膠黏性與咀嚼性都代表了肌肉的口感[16]。由表3可知,與空白對照組相比,復(fù)方中草藥不同劑量組的胸肉硬度和膠黏性均有上升趨勢,但差異不顯著(p>0.05);低、中、高劑量組胸肉彈性明顯增高,其中,中、高劑量組差異顯著(p<0.05),低、中和高劑量組較金霉素對照組差異顯著(p<0.05);高劑量組雞胸肉咀嚼性分別顯著高于空白、金霉素對照組(p<0.05)。肉色是肌肉生理學(xué)、生物化學(xué)和微生物學(xué)變化的外部體現(xiàn),也是肌肉外觀評定的重要指標(biāo)[12]。L*表示肉表面的反光程度,a*值表示肉的紅度,a值在一定范圍內(nèi)越高表示肉的新鮮度越高,b*表示肉的黃度。復(fù)方中草藥高劑量組和金霉素組較空白對照組胸肉亮度存在顯著性升高(p<0.05);而與空白組相比,復(fù)方中草藥低、中和高劑量組及金霉素組胸肉紅度和黃度差異均不顯著(p>0.05)。

表3 復(fù)方中草藥對肉雞肌肉品質(zhì)和色差的影響Table 3 Effects of CHF on breast meat quality and color difference of broilers

表4 復(fù)方中草藥對免疫器官指數(shù)的影響(mg/g)Table 4 Effects of CHF on immune organ index of broilers(mg/g)

2.3復(fù)方中草藥對肉雞免疫器官指數(shù)的影響

胸腺、法氏囊和脾臟是家禽免疫系統(tǒng)重要的免疫器官,其免疫器官指數(shù)是初步衡量機(jī)體免疫功能的重要指標(biāo)。胸腺和法氏囊屬于中樞免疫器官,是淋巴細(xì)胞發(fā)育成熟的重要場所;脾臟屬于外周淋巴器官,是淋巴細(xì)胞定居和進(jìn)行免疫應(yīng)答的場所,從形成到整個(gè)成年期一直存在,對機(jī)體的免疫功能至關(guān)重要[17]。由表4可知,21日齡時(shí),隨著劑量增加,復(fù)方中草藥低、中、高劑量組免疫器官指數(shù)均有一定提高,但與空白對照組和金霉素對照組相比,無顯著差異(p>0.05)。42日齡時(shí),與空白對照組相比,復(fù)方中草藥高劑量組胸腺指數(shù)顯著提高(p<0.05),中、高劑量組法氏囊指數(shù)均有顯著升高(p<0.05),各脾臟指數(shù)有升高趨勢,但差異不顯著(p>0.05);且3個(gè)劑量組免疫器官指數(shù)與金霉素對照組比較均差異不顯著(p>0.05)。結(jié)果表明適宜劑量的復(fù)方中草藥能有效刺激免疫器官的發(fā)育,提高機(jī)體主動免疫能力。

表5 復(fù)方中草藥對肉雞盲腸菌群的影響(單位:lgcfu/g)Table 5 Effects of CHF on caecal microflora of broilers(lgcfu/g)

注:同列肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(p<0.05),不同大寫字母表示差異極顯著(p<0.01),相同字母表示差異不顯著(p>0.05)。

2.4復(fù)方中草藥對肉雞腸道菌群的影響

盲腸是家禽消化道微生物含量最多的器官,其腸道內(nèi)菌群是否平衡直接影響腸道代謝、宿主健康及生產(chǎn)性能[18]。大腸桿菌屬革蘭氏陰性菌,當(dāng)宿主機(jī)體發(fā)生變化或進(jìn)入消化道以外的部位時(shí),則成為致病菌。乳酸菌是胃腸道中的正常菌群成員,可通過產(chǎn)酸和細(xì)菌素等有效抑制致病菌生長。由表5可知,復(fù)方中草藥低、中、高劑量組及金霉素對照組對肉雞盲腸內(nèi)大腸桿菌均有極顯著抑制作用(p<0.01),但對于乳酸菌生長影響不一致。金霉素處理使得乳酸菌菌落數(shù)呈現(xiàn)出極明顯降低趨勢(p<0.01),20 mL/L復(fù)方中草藥劑量組能顯著提高盲腸乳酸菌菌落數(shù)(p<0.05)。因此,復(fù)方中草藥在顯著抑制大腸桿菌生長的同時(shí),又促進(jìn)了乳酸菌的生長,對肉雞腸道菌群起到了改善作用;而金霉素抑制大腸桿菌的同時(shí)也抑制了乳酸菌的正常生長,從而打破了腸道菌群平衡。結(jié)果表明復(fù)方中草藥有利于維持和調(diào)整肉雞腸道內(nèi)微生物平衡,對肉雞腸道菌群起到改善作用,比金霉素更具有潛在優(yōu)勢。

3 結(jié)論

本研究中,肉雞日糧中添加以烏梅為主的復(fù)方中草藥(5、10、20 mL/L)能不同程度改善肉仔雞生長,其中20 mL/L復(fù)方中草藥劑量組顯著提高了羅斯肉仔雞的日增重,改善了生產(chǎn)性能;顯著改善了雞胸肉的彈性、咀嚼性和亮度,提高了胸腺指數(shù)和法氏囊指數(shù),抑制腸道內(nèi)大腸桿菌的同時(shí)顯著提高了乳酸菌菌落數(shù)。但該復(fù)方中草藥作用效果的穩(wěn)定性和有效性及其作用機(jī)理和生理功能的認(rèn)識還不完善,預(yù)進(jìn)行深入研究。

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EffectsofChineseherbalformulationonthegrowthperformance,meatquality,immuneorganindexandintestinalmicrobiotaofbroilers

ZHOUQian,YANGJian-qiao,DONGXiao-han,YANChen-jing,BAIBing-yao,HANXue,ZHAOWen*

(College of Food Science and Technology,Agricultural University of Hebei,Baoding 071000,China)

The effects of Chinese herbal formulation(CHF)mainly based on Frucuts mume on growth performance,meat quality,immune organ idex and intestinal microbiota of broilers were evaluated. Total 300 Ross broilers were randomly divided into five groups. Dietary treatments were as follows:control group,50 mg/kg aureomycin group,CHF low dose treatment(5 mL/L),CHF medium dose treatment(10 mL/L)and CHF high dose treatment(20 mL/L)respectively,and the feeding period was 42 d. Results showed that compared to the control,the CHF significantly enhanced the daily gain(p<0.05),and the effect of high dose of CHF was the best. The elasticity of breast meat in 10 mL/L and 20 mL/L of CHF was significantly enhanced(p<0.05)and the chewiness and brightness were also enhanced significantly in 20 mL/L of CHF treatment(p<0.05). The thymus index in high dose treatment and bursal index in medium and high dose treatment were also significantly increased(p<0.05). The lactic acid bacteria in intestinal in high dose group were significantly increased(p<0.05). In conclusion,results suggested that dietary supplementation with CHF had a positive impact on growth of broiler and the best effects were found in 20 mL/L CHF supplement.

Chinese herbal formulation;growth performance;immune organ index;meat quality;intestinal microbiota

2017-03-16

周茜(1986- )，女，博士，講師，研究方向：活性物質(zhì)研究與食品安全，E-mail:zhouqianyz513@126.com。

*通訊作者:趙文(1962- )，女，碩士，教授，研究方向：營養(yǎng)分析與食品安全，E-mail:13582820221@163.com。

河北省科技計(jì)劃項(xiàng)目(15273204D)；河北省食品科學(xué)與工程學(xué)科“雙一流”建設(shè)資金項(xiàng)目(2016SPGCA18)。

TS201.1

:A

:1002-0306(2017)17-0084-05

10.13386/j.issn1002-0306.2017.17.017