圈養(yǎng)靈長(zhǎng)類動(dòng)物寄生蟲(chóng)病的診治及效果評(píng)價(jià)

何相寶 郝春曉 李若楠 張海軍 關(guān)春宇

(1.哈爾濱北方森林動(dòng)物園，哈爾濱，150322；2.東北林業(yè)大學(xué)野生動(dòng)物資源學(xué)院，哈爾濱，150040；3.鄂爾多斯市家畜改良工作站，鄂爾多斯，017000)

圈養(yǎng)靈長(zhǎng)類動(dòng)物寄生蟲(chóng)病的診治及效果評(píng)價(jià)

何相寶1郝春曉2李若楠1張海軍3關(guān)春宇1

(1.哈爾濱北方森林動(dòng)物園，哈爾濱，150322；2.東北林業(yè)大學(xué)野生動(dòng)物資源學(xué)院，哈爾濱，150040；3.鄂爾多斯市家畜改良工作站，鄂爾多斯，017000)

稿件運(yùn)行過(guò)程

圈養(yǎng)靈長(zhǎng)類動(dòng)物； 球蟲(chóng)； 毛尾線蟲(chóng)； 蠕形住腸線蟲(chóng)； 治療效果

長(zhǎng)期以來(lái)，人們對(duì)非人靈長(zhǎng)類身上所攜帶能引起疾病的病毒和細(xì)菌給予了足夠重視和研究，然而常見(jiàn)且同樣具有高強(qiáng)度傳染性以及危害性的腸道寄生蟲(chóng)卻往往被人們忽略[1]。目前為止，非人靈長(zhǎng)類腸道寄生蟲(chóng)的研究報(bào)道較少[2]，已有研究證明非人靈長(zhǎng)類腸道寄生蟲(chóng)可引發(fā)反復(fù)腹瀉、腹痛、肺炎、致盲等癥狀。作為人類近親的非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物，最易傳染給人類某些疾病[3]，包括寄生蟲(chóng)病，對(duì)人類健康構(gòu)成嚴(yán)重威脅，因此對(duì)靈長(zhǎng)類寄生蟲(chóng)的持續(xù)關(guān)注是非常必要的。

2016年6月中旬，哈爾濱北方森林動(dòng)物園圈養(yǎng)的川金絲猴(Rhinopithecusroxellanae)，表現(xiàn)出稀便較多，顏色為灰色，排泄到地面上呈片狀，稀便占糞便總量的60%～80%。另外樹(shù)葉的食入量也有所減少，比正常量減少30%～40%的異常癥狀。但其精神狀態(tài)、水果和窩頭等飼料的食入量則無(wú)明顯異常。前期診斷懷疑其為消化系統(tǒng)疾病，經(jīng)過(guò)一段時(shí)間治療無(wú)好轉(zhuǎn)。后診斷疑似寄生蟲(chóng)感染，于是采集其糞樣進(jìn)行寄生蟲(chóng)檢測(cè)。同時(shí)我們還對(duì)園內(nèi)飼養(yǎng)的黑猩猩(Pantroglodytes)、埃及狒狒(Papiohamadryas)、東非狒狒(Papioanubis)、豚尾猴(Macacanemestrina)和灰斑懸猴(Cebusnigrivittatus)共5種靈長(zhǎng)類動(dòng)物的糞便樣本進(jìn)行了檢測(cè)?，F(xiàn)將對(duì)上述6種動(dòng)物進(jìn)行糞便蟲(chóng)卵的檢測(cè)和藥物治療的結(jié)果總結(jié)如下。

1 材料與方法

1.1糞便采集與處理

采集新鮮糞便 10～20 g，裝入干凈封口袋，帶回實(shí)驗(yàn)室，當(dāng)天進(jìn)行檢查。處理方法：用飽和食鹽水漂浮法，檢查是否為陽(yáng)性，顯微鏡下觀察其形態(tài)結(jié)構(gòu)并拍照。靈長(zhǎng)類動(dòng)物糞便樣品采集檢查情況如表1。

表1動(dòng)物糞便樣品采集情況

Tab.1 Sample collection of animal feces

1.2 感染強(qiáng)度的測(cè)定

采用麥克馬斯特計(jì)數(shù)法(McMaster’s method)，稱取5 g糞便，與40 mL飽和鹽水混合均勻。通過(guò)過(guò)濾除渣，用移液槍吸取糞汁注入麥?zhǔn)嫌?jì)數(shù)室里，靜置3～5 min，置于顯微鏡上，然后在鏡下記錄2個(gè)計(jì)數(shù)室內(nèi)蟲(chóng)卵總數(shù)，求出2個(gè)計(jì)數(shù)室蟲(chóng)卵的平均數(shù)，將所得值乘以60，即每克糞便中的蟲(chóng)卵數(shù)。

1.3 治療效果的評(píng)價(jià)

通過(guò)驅(qū)蟲(chóng)前后檢測(cè)靈長(zhǎng)類腸道寄生蟲(chóng)蟲(chóng)卵的種類、感染率和感染強(qiáng)度(EPG)的變化狀況，對(duì)治療效果進(jìn)行評(píng)價(jià)。

2 結(jié)果

2.1 靈長(zhǎng)類動(dòng)物消化道寄生蟲(chóng)蟲(chóng)卵種類及形態(tài)特征

在糞便的檢測(cè)中我們發(fā)現(xiàn)了毛尾線蟲(chóng)(Trichurissp.)、蠕形住腸線蟲(chóng)(Enterobiusvermicularis)和球蟲(chóng)(Isosporasp.)3類寄生蟲(chóng)。毛尾線蟲(chóng)蟲(chóng)卵60.31 μm ×23.50 μm，在埃及狒狒、東非狒狒和川金絲猴糞便中均有發(fā)現(xiàn)。蠕形住腸線蟲(chóng)蟲(chóng)卵64.09 μm×28.94 μm，只在黑猩猩糞便中發(fā)現(xiàn)。球蟲(chóng)蟲(chóng)卵20.96 μm×19.50 μm，僅在川金絲猴糞便中發(fā)現(xiàn)。3種蟲(chóng)卵的形態(tài)如圖1所示。

圖1 糞檢陽(yáng)性動(dòng)物寄生蟲(chóng)蟲(chóng)卵(×400)Fig.1 The parasite eggs in feces positive animal(×400) 注：A.毛尾線蟲(chóng)。鏡下毛首線蟲(chóng)(鞭蟲(chóng))蟲(chóng)卵，可見(jiàn)其蟲(chóng)卵呈腰鼓狀，黃褐色，卵殼內(nèi)充滿紫褐色顆粒狀內(nèi)容物，兩端具塞，處單細(xì)胞期。B.蠕形住腸線蟲(chóng)。近無(wú)色透明，兩側(cè)不對(duì)稱，呈柿核狀，卵殼較厚，內(nèi)含一幼蟲(chóng)。C.艾美耳球蟲(chóng) Note：A.Trichuris sp.Under microscope the eggs of Trichuris sp. are visible drum shaped，tawny，with purplish-brown granular contents of eggshell，both ends with a plug，single cell.B.Enterobius vermicularis.Nearly colorless and transparent，anisopleural，persimmon nuclear shaped，egg shell israther thick，containing a larva.C.Eimeria sp.

2.2 靈長(zhǎng)類動(dòng)物腸道寄生蟲(chóng)首次測(cè)定的感染情況

在首次檢測(cè)川金絲猴糞便時(shí)，檢測(cè)到了球蟲(chóng)蟲(chóng)卵和毛尾線蟲(chóng)蟲(chóng)卵，在7份糞便中5份檢測(cè)出寄生蟲(chóng)蟲(chóng)卵，其中2份同時(shí)感染2種寄生蟲(chóng)。在1份名為童童的糞便樣品中檢測(cè)出大量的毛尾線蟲(chóng)蟲(chóng)卵，其他4份都只檢測(cè)出少量的蟲(chóng)卵，寄生蟲(chóng)感染率71.43%(5/7)。在首次檢測(cè)埃及狒狒和東非狒狒糞便樣品時(shí)，檢測(cè)到毛尾線蟲(chóng)蟲(chóng)卵，東非狒狒感染極少；黑猩猩檢測(cè)到蠕形住腸線蟲(chóng)，豚尾猴和灰斑懸猴未發(fā)現(xiàn)任何寄生蟲(chóng)感染且未表現(xiàn)出臨床癥狀，因此之后不再檢測(cè)豚尾猴和灰斑懸猴。所有靈長(zhǎng)類動(dòng)物總感染率66.7%(8/12)，6種靈長(zhǎng)類動(dòng)物寄生蟲(chóng)感染情況見(jiàn)表2。

2.3 靈長(zhǎng)類動(dòng)物主要寄生蟲(chóng)感染強(qiáng)度動(dòng)態(tài)

川金絲猴糞便的首次檢測(cè)中，7份樣品中5份感染毛尾線蟲(chóng)，在1份名為童童的糞便樣品中檢測(cè)出大量的毛尾線蟲(chóng)蟲(chóng)卵，其他4份都只檢測(cè)出少量的蟲(chóng)卵。但由于這次童童的糞便收集太少，無(wú)法進(jìn)行蟲(chóng)卵計(jì)數(shù)，所以毛尾線蟲(chóng)蟲(chóng)卵計(jì)數(shù)只測(cè)了其他4份，蟲(chóng)卵的平均感染強(qiáng)度偏低(圖2)。在驅(qū)蟲(chóng)期間的第二次檢測(cè)中，我們發(fā)現(xiàn)只有童童感染毛尾線蟲(chóng)，其他川金絲猴均沒(méi)有再檢測(cè)到寄生蟲(chóng)。在第三次檢測(cè)中，毛尾線蟲(chóng)感染強(qiáng)度明顯下降，而第四次的感染強(qiáng)度恢復(fù)到最高值后不再發(fā)生明顯的波動(dòng)。埃及狒狒和東非狒狒盡管在7月5～7日進(jìn)行了藥物驅(qū)蟲(chóng)，但感染強(qiáng)度未發(fā)生明顯波動(dòng)。黑猩猩在驅(qū)蟲(chóng)后的第一次檢測(cè)中，較驅(qū)蟲(chóng)前感染強(qiáng)度偏低，在驅(qū)蟲(chóng)后的第二次檢測(cè)中，感染強(qiáng)度較快增大。

表2 哈爾濱北方森林動(dòng)物園靈長(zhǎng)類動(dòng)物腸道寄生蟲(chóng)感染情況

Tab.2 Infection situation of parasite

注：* 本次實(shí)驗(yàn)的最小檢出限是30，飽和鹽水漂浮發(fā)現(xiàn)了蟲(chóng)卵，但麥克馬斯特法計(jì)數(shù)結(jié)果為0

Note：The minimum detection limit of this experiment is 30，the eggs was found by brine floatation，but the result of McMaster’s method was 0

圖2 主要寄生蟲(chóng)感染強(qiáng)度EPGFig.2 Infection intensity EPG of main parasite 注：1.圖中川金絲猴、埃及狒狒和東非狒狒選擇的寄生蟲(chóng)都是毛尾線蟲(chóng)，黑猩猩是蠕形住腸線蟲(chóng)；2.5次采樣時(shí)間分別是6月17日、6月21日、6月28日、8月9日和8月23日；3.“驅(qū)蟲(chóng)1”指6月20～22日川金絲猴驅(qū)蟲(chóng)；“驅(qū)蟲(chóng)2”指7月5～7日埃及狒狒、東非狒狒和黑猩猩驅(qū)蟲(chóng)；4.為了與采樣日期相對(duì)應(yīng)，埃及狒狒、東非狒狒和黑猩猩的第一、二、三次蟲(chóng)卵檢測(cè)與圖中第三、四、五次相對(duì)應(yīng) Note：1.The parasites of Rhinopithecus roxellanae，Papio hamadryas and Papio anubis are all Trichuris sp.the parasites of Pan troglodytes is Enterobius vermicularis in the picture；2.The time of Five sampling were June 17，June 21，June 28，August 9，and August 23 respectively；3.“expelling parasite 1”refers to the expelling parasite of Rhinopithecus in June 20-22；“expelling parasite 2”refers to the expelling parasite of Papio hamadrys、Papio anubis and Pan troglodytes in July 5-7；4.In order to correspond to the time of sampling，the first，second，and third eggs detection of Papio hamadrys、Papio anubis and Pan troglodytes correspond to the third，fourth and fifth respectively

2.4 靈長(zhǎng)類動(dòng)物主要寄生蟲(chóng)治療效果

根據(jù)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果，我們選擇了甲苯咪唑片治療川金絲猴 、埃及狒狒和東非狒狒，鹽酸左旋咪唑片治療黑猩猩，通過(guò)藥物對(duì)動(dòng)物糞便EPG的影響作用來(lái)評(píng)價(jià)對(duì)動(dòng)物的治療效果。川金絲猴在驅(qū)蟲(chóng)前，糞便中檢測(cè)到毛尾線蟲(chóng)和球蟲(chóng)。在甲苯咪唑藥物治療后，球蟲(chóng)消失，而毛尾線蟲(chóng)的感染強(qiáng)度由4 980個(gè)/g迅速下降到180個(gè)/g，這說(shuō)明甲苯咪唑?qū)Υń鸾z猴毛尾線蟲(chóng)的驅(qū)蟲(chóng)治療效果較理想，對(duì)球蟲(chóng)的治療也有一定效果。埃及狒狒和東非狒狒連續(xù)3次的感染強(qiáng)度沒(méi)有發(fā)生明顯變化，我們無(wú)法判定甲苯咪唑是否對(duì)它們產(chǎn)生作用。經(jīng)檢測(cè)黑猩猩只感染了蠕形住腸線蟲(chóng)，驅(qū)蟲(chóng)后的第一次檢測(cè)，感染強(qiáng)度較驅(qū)蟲(chóng)前有所下降，但近半個(gè)月后的第二次檢測(cè)時(shí)，感染強(qiáng)度快速增大。這表明鹽酸左旋咪唑?qū)谛尚扇湫巫∧c線蟲(chóng)有良好的效果，很好地抑制住了蠕形住腸線蟲(chóng)對(duì)黑猩猩的侵害。

3 分析與討論

在對(duì)哈爾濱北方森林動(dòng)物園6種圈養(yǎng)靈長(zhǎng)類動(dòng)物的寄生蟲(chóng)檢測(cè)中，我們發(fā)現(xiàn)，寄生蟲(chóng)種類單一、感染強(qiáng)度較小、感染率低、毛尾線蟲(chóng)突出等特點(diǎn)。6種動(dòng)物，感染單種寄生蟲(chóng)的動(dòng)物有3種，占 50.00%(3/6)；感染2種寄生蟲(chóng)的有1種，占 16.67%(1/6)；未查出寄生蟲(chóng)卵的有2種，占 33.33%(2/6)。黑猩猩只感染蠕形住腸線蟲(chóng)，川金絲猴感染毛尾線蟲(chóng)和球蟲(chóng)，東非狒狒和埃及狒狒感染毛尾線蟲(chóng)，毛尾線蟲(chóng)為優(yōu)勢(shì)種。

據(jù)國(guó)外報(bào)道[4]，不同種類的野生靈長(zhǎng)類動(dòng)物都有線蟲(chóng)感染，主要是鞭蟲(chóng)(Trichuristrichura)、蛔蟲(chóng)(Ascarislumbricoides)和十二指腸鉤口線蟲(chóng)(Ancylostomaduodenale)，這與我們的調(diào)查結(jié)果有所差異。國(guó)內(nèi)張迪[5]等人發(fā)現(xiàn)黑猩猩感染司氏伯特絳蟲(chóng)(Bertiellastuderi)，王蕓[6]等人發(fā)現(xiàn)北平頂猴(Macacaleonine)感染伯特絳蟲(chóng)(Bertiellastuderi)，而我們都沒(méi)有檢測(cè)到。林慧彪[7]等發(fā)現(xiàn)野生滇金絲猴種群毛首線蟲(chóng)卵陽(yáng)性率為72%。胡罕等人在靈長(zhǎng)類動(dòng)物糞樣中均查出毛首線蟲(chóng)卵，其中川金絲猴毛首線蟲(chóng)卵陽(yáng)性率為80.00%，EPG達(dá)(33 275±6 556.61)個(gè)/g。圈養(yǎng)的川金絲猴毛尾線蟲(chóng)的感染率很高，達(dá)到80%以上[8]，每克糞便中毛尾線蟲(chóng)卵達(dá)到10 000/g以上的占70%[9]。上述調(diào)查結(jié)果表明，毛首線蟲(chóng)是危害圈養(yǎng)金絲猴的主要寄生蟲(chóng)[10]。與他們測(cè)得的感染率、感染強(qiáng)度相比，我們測(cè)得川金絲猴的最高感染率僅為71.43%(5/7)，EPG最高4 980個(gè)/g，遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于以往報(bào)道。這表明哈爾濱北方森林動(dòng)物園靈長(zhǎng)類動(dòng)物的管理預(yù)防做得很好，有效地控制了寄生蟲(chóng)對(duì)靈長(zhǎng)類動(dòng)物的侵害。通過(guò)本次實(shí)驗(yàn)，我們認(rèn)為圈養(yǎng)川金絲猴驅(qū)蟲(chóng)最好做到間隔1個(gè)月進(jìn)行1次驅(qū)蟲(chóng)，這樣可以使川金絲猴體內(nèi)的毛尾線蟲(chóng)保持在最低水平，同時(shí)對(duì)靈長(zhǎng)類動(dòng)物持續(xù)階段性地進(jìn)行寄生蟲(chóng)檢查也是十分必要的。

非人靈長(zhǎng)類腸道寄生蟲(chóng)感染率受很多因素的影響[11]。最常見(jiàn)的影響因素就是外部環(huán)境周期性的波動(dòng)，即季節(jié)性[12]。同樣地，激素以及免疫機(jī)制的不同可能會(huì)影響寄生蟲(chóng)種類對(duì)宿主的選擇。本研究中，川金絲猴童童由于個(gè)體差異，體質(zhì)較弱可能是其毛尾線蟲(chóng)持續(xù)感染的主要因素[13]。動(dòng)物園中，圈養(yǎng)動(dòng)物生活在相對(duì)封閉潮濕的飼養(yǎng)環(huán)境中，這也增大了寄生蟲(chóng)感染率[14]。此外毛尾線蟲(chóng)和蠕形住腸線蟲(chóng)獨(dú)特的生活史也是圈養(yǎng)動(dòng)物寄生蟲(chóng)病流行的重要因素。毛尾線蟲(chóng)的發(fā)育不需要中間宿主[15]，在普通環(huán)境中需3個(gè)星期左右發(fā)育成侵襲性幼蟲(chóng)，幼蟲(chóng)在動(dòng)物盲腸中很難驅(qū)凈，川金絲猴對(duì)毛尾線蟲(chóng)又特別易感。蠕形住腸線蟲(chóng)雌蟲(chóng)會(huì)在宿主肛門(mén)和會(huì)陰部周圍產(chǎn)卵，并在該處發(fā)育成為感染性蟲(chóng)卵[16]。當(dāng)非人靈長(zhǎng)類相互理毛時(shí)，蟲(chóng)卵易存留在皮膚或指尖，經(jīng)手口傳播，幼蟲(chóng)在其小腸內(nèi)孵化，到大腸中發(fā)育為成蟲(chóng)[17]。在實(shí)際管理中，動(dòng)物園管理人員無(wú)法使動(dòng)物體表及環(huán)境中的蟲(chóng)卵完全去除。

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Captive nonhuman primates； Coccidium； Hairy nematodes；Enterobiusvermicularis； Treatment effeat

哈爾濱北方森林動(dòng)物園川金絲猴出現(xiàn)稀便多和攝食樹(shù)葉減少的異常癥狀，經(jīng)初步診斷疑似寄生蟲(chóng)感染。隨后我們?cè)诖ń鸾z猴(Rhinopithecusroxellana)糞便中檢測(cè)到大量的毛尾線蟲(chóng)(Trichurissp.)和少量的球蟲(chóng)(Isosporasp.)。通過(guò)給予川金絲猴甲苯咪唑進(jìn)行藥物治療。同時(shí)，對(duì)動(dòng)物園未表現(xiàn)出癥狀的其他5種靈長(zhǎng)類動(dòng)物，包括埃及狒狒(Papiohamadryas)、東非狒狒(Papioanubis)、豚尾猴(Macacanemestrina)、灰斑懸猴(Cebusnigrivittatus)和黑猩猩(Pantroglodytes)進(jìn)行腸道寄生蟲(chóng)的檢測(cè)。結(jié)果顯示，在埃及狒狒和東非狒狒的糞便中檢測(cè)出毛尾線蟲(chóng)，黑猩猩檢測(cè)到蠕形住腸線蟲(chóng)(Enterobiusvermicularis)，豚尾猴和灰斑懸猴均未檢測(cè)到寄生蟲(chóng)。埃及狒狒和東非狒狒給予甲苯咪唑(Mebendazole Tablets)，黑猩猩給予鹽酸左旋咪唑(Levamisole Hydrochloride Tablets)進(jìn)行治療。結(jié)果表明，治療效果良好。

Diagnosis and Treatment of Parasitosis in CaptivePrimates and Effectiveness Evaluation

He Xiangbao1Hao Chunxiao2Li Ruonan1Zhang Haijun3Guan Chunyu1

(1.Harbin Northern Forest Zoo，Harbin，150322，China；2.College of Wildlife Resources，Northeast Forestry University，Harbin，150040，China；3.Erdos Livestock Breeding Improved Workstation，Erdos，017000，China)

A golden monkey at the Northern Forest Zoo was found eating less leaves and defecated more loose feces in mid-June 2016.Preliminary diagnosis indicated parasitic infection.Fecal samples of the golden monkey were examined on 17 June 2016.We identified manyTrichurissp.and and fewIsosporasp.The veterinarian treated the Golden Monkey with Mebendazole tablets.At the same time，we conducted eggs inspection of other primates includingPapiohamadryas，Papioanubis，Macacaleonine，CebusnigrivittatusandPantroglodytes.Eggs ofTrichurissp. were found in the feces ofPapiohamadryasandP.anubis.Eggs ofEnterobiusvermiculariswere found in feces ofPantroglodytes.We did not find any parasite infection inMacacaleonineorCebusnigrivittatus.PapiohamadryasandP.anubiswere treated with Mebendazole tablets.Pantroglodyteswere given levamisole hydrochloride tablets.The treatments proved effective.

東北林業(yè)大學(xué)國(guó)家級(jí)實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心建設(shè)專項(xiàng)——本科實(shí)踐教學(xué)研究子項(xiàng)目立項(xiàng)

何相寶，男，41歲，碩士，高級(jí)工程師；主要從事野生動(dòng)物飼養(yǎng)與繁殖的研究。 E-mail：he191@sina.com

2016-09-29

S858.93

A

修回日期：2016-11-24

發(fā)表日期：2017-05-10

2310-1490(2017)02-200-05