缺氧預(yù)處理攜帶肝細胞生長因子的骨髓干細胞對急性心梗大鼠心功能的影響

江金鋒 林修 蔡文欽 蘇津自 王芬珍

基礎(chǔ)研究

缺氧預(yù)處理攜帶肝細胞生長因子的骨髓干細胞對急性心梗大鼠心功能的影響

江金鋒 林修 蔡文欽 蘇津自 王芬珍

目的 探討缺氧預(yù)處理攜帶肝細胞生長因子（HGF）基因的骨髓間充質(zhì)干細胞（MSCs）對急性心梗大鼠心功能及心肌膠原合成的影響。方法 通過結(jié)扎冠狀動脈左前降支制作SD大鼠急性心肌梗死模型。隨機分為5組：對照組、假手術(shù)組、心梗組、MSCs組和MSCs-HGF組。移植后4周心彩超測定大鼠心功能；HE染色觀察心肌組織結(jié)構(gòu)；天狼星紅染色測心肌組織膠原；PCR法測心肌HGFmRNA表達；免疫印跡檢測心肌HGF蛋白表達；ELISA法測心肌組織膠原Ⅰ、Ⅲ含量。結(jié)果 與心梗組相比，MSCs-HGF組左室射血分數(shù)（LVEF）明顯好轉(zhuǎn)［（75.42±7.82）%比（66.36±8.55）%，P＜0.01］。PCR 與 Western-bloting結(jié)果示，MSCs-HGF組心肌組織HGF mRNA及蛋白表達顯著增加，其他各組均未見到表達；HE染色顯示心梗組心肌細胞減少，可見大量增生組織；MSCs-HGF組心肌細胞較為完整，間隙僅見少量增生組織。天狼星紅染色顯示心梗組有大量紅染纖維，MSCs-HGF組僅可見細束狀紅染纖維。ELISA結(jié)果顯示，與心梗組相比，MSCs-HGF組心肌組織膠原Ⅰ含量［（450±12）pg/ml比（523±13）pg/ml，P＜0.05］、組織膠原Ⅲ含量［（870±14）pg/ml比（1080±25）pg/ml，P＜0.05］均明顯著降低。結(jié)論 缺氧預(yù)處理攜帶HGF基因的MSCs改善心梗大鼠心功能可能與其抑制心梗后心肌纖維化有關(guān)。

骨髓間充質(zhì)干細胞； 肝細胞生長因子； 心功能； 膠原Ⅰ、Ⅲ

心肌梗死是心血管常見病、多發(fā)病，嚴重威脅患者的身心健康。心肌梗死發(fā)生后容易引起嚴重的心力衰竭及死亡。目前主要通過急診介入及溶栓來治療急性心肌梗死，然而介入治療有創(chuàng)傷，藥物治療不能促進大部分心肌的修復(fù)。干細胞在細胞修復(fù)和再生方面極具潛力，因此干細胞治療成為目前研究的熱點。骨髓間充質(zhì)干細胞（mesenchymal stem cells，MSCs）來源廣泛，具有多能分化及自我更新的能力，因此成為心肌組織工程的種子細胞[1,2]。然而研究[3,4]發(fā)現(xiàn)，MSCs移植到急性心肌梗死的大鼠，大部分細胞因環(huán)境不適而死亡，治療效果不佳，因此提高MSCs在移植區(qū)的成活率成為目前研究的熱點。肝細胞生長因子（hepatocyte growth factor，HGF）與其受體c-met結(jié)合后，激活細胞內(nèi)多個信號通路，參與調(diào)節(jié)機體的發(fā)育、分化、代謝和組織修復(fù)[5-7]，因此HGF基因轉(zhuǎn)染MSCs能提高細胞在心梗區(qū)域的再生能力。本課題組前期細胞體外實驗[8]已證實，攜帶HGF基因MSCs能減少在缺血、缺氧情況下凋亡及提高細胞遷移力。本研究通過觀察缺氧預(yù)處理攜帶HGF基因的MSCs對急性心梗大鼠心功能及心肌膠原合成作用，探討其可能的機制。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物 10周齡雄性SD大鼠40只，體重（250±10）g。飼養(yǎng)條件：4 只/籠，室溫（22±2）℃，濕度（55±5）%，人工光照明暗各 12 h/d，24 h自由取食和飲水，飼料由上海斯萊克公司提供。本次動物試驗經(jīng)福建醫(yī)科大學(xué)實驗動物倫理委員會批準(zhǔn)。

1.1.2 試劑 Ad-HGF-EGFP質(zhì)粒載體（福建省高血壓研究所制備），Trizol（Invitrogen公司），逆轉(zhuǎn)錄試劑盒（Takara公司），real-timePCR試劑盒（Takara公司），β-actin單克隆抗體、胎牛血清、DMEM培養(yǎng)基、胰蛋白酶（Gibco），HRP標(biāo)記二抗（北京中杉公司），丙烯酰胺、Tris-base（Ameresco），PVDF 膜（millipore公司），免疫印跡化學(xué)發(fā)光試劑（Santa Cruz公司），引物設(shè)計、合成由大連寶生物公司完成。ELISA 試劑盒（BioSource International，Inc.）。

1.2.3 儀器 低溫冰箱（海爾，中國青島），超速低溫離心機（Allegra TM64R,Beckman），超凈臺（蘇州蘇凈集團）垂直電泳槽（BIO-RAD公司），DYY-Ⅲ-6B型穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀（北京六一儀器廠），熒光倒置相差顯微鏡（Ⅸ-70型，Olympus公司），蛋白轉(zhuǎn)移設(shè)備（北京六一儀器廠），混合氣體（福州林德氣體公司提供）。

1.2 實驗方法

1.2.1 MSCs的原代及傳代培養(yǎng)、HGF基因轉(zhuǎn)染梯度離心法收集SD大鼠股骨骨髓MSCs，進行分離及傳代培養(yǎng)。取3～5代且生長良好的MSCs進行基因轉(zhuǎn)染等實驗。本課題組保存有含HGF目的基因的腺病毒。轉(zhuǎn)染步驟參照本課題組既往發(fā)表文章，詳細方法見參考文獻[4,8]。

1.2.2 缺氧條件的構(gòu)建及MSCs缺氧培養(yǎng) 采用缺氧小室持續(xù)通入5%二氧化碳、95%氮氣進行細胞缺氧培養(yǎng)。取3～4代生長狀態(tài)好的MSCs。MSCs分為轉(zhuǎn)染組（轉(zhuǎn)染HGF目的基因）和未轉(zhuǎn)染組，移植前轉(zhuǎn)入缺氧培養(yǎng)小室內(nèi)培養(yǎng)6 h。缺氧培養(yǎng)前無血清培養(yǎng)72 h，使細胞同步化生長。

1.2.3 心梗大鼠模型的建立及分組 大鼠麻醉后固定于小動物操作臺，記錄術(shù)前心電圖；切開左胸第4與5肋間隙皮膚，暴露心臟；于肺動脈與左心耳之間，距左心耳下緣2～3 mm沿室間左前壁處結(jié)扎并記錄心電圖。梗死區(qū)域為蒼白的缺血區(qū)，并有相應(yīng)導(dǎo)聯(lián)ST改變即造模成功。心梗大鼠模型成功15 min后進行隨機分組。動物分組（n=8）：①A組對照組；②B組假手術(shù)組，大鼠僅在相同部位穿線但不結(jié)扎；③C組心梗組；④D組MSCs組，注射單純未轉(zhuǎn)染空載的 MSCs（100 μl，約 1×106個細胞）；⑤E組MSCs-HGF組，注射轉(zhuǎn)染HGF基因的MSCs（100 μl，約 1×106個細胞），直視下分 5 點在心肌梗死區(qū)及其心梗交界區(qū)注射。

1.2.4 大鼠心臟結(jié)構(gòu)與功能測定 術(shù)后4周采用GE VIVID7多普勒心臟彩色超聲儀，10S探頭（頻率5.4～11.8 MHz），測量及計算左心室舒張末期內(nèi)徑（left ventricular end-diastolic diameter，LVEDd）、左心室收縮末期內(nèi)徑（left ventricular end systolic diameter，LVESd）和左室射血分數(shù)（LVEF）。所有數(shù)據(jù)均測量5個心動周期，取平均值。

1.2.5 心導(dǎo)管法測定大鼠血液流變學(xué)指標(biāo) 術(shù)后4周大鼠麻醉后剃除頸部毛，正中切開皮膚，暴露右側(cè)頸總動脈；結(jié)扎右頸總動脈遠心端，眼科剪將頸動脈剪一楔形小口，插入自制的硅膠心導(dǎo)管，另一端與多道生理記錄儀配套的壓力換能器相連接；將導(dǎo)管緩慢送入左心室；觀察電腦屏幕上壓力波變化，如窄小的動脈波變?yōu)閷挻蟮男氖也?；固定心?dǎo)管，推注約0.5 ml生理鹽水，穩(wěn)定5 min，記錄左室收縮末壓（left ventricular end systolic pressure，LVESP）、左室舒張末壓（left ventricular end-diastolic pressure，LVEDP）及左室壓力最大上升或下降速率（LV+dp/dtmax，LV-dp/dtmax）。

1.2.6 心肌組織HE染色及天狼星紅染色觀察組織膠原分布及含量 術(shù)后4周取出大鼠心臟于生理鹽水中漂洗，10%甲醛固定24 h，脫水，石蠟包埋，切片，常規(guī)脫蠟至水，加蘇木素或苦味酸天狼猩紅染色液，脫水，涼干，中性樹脂封片。心肌膠原分析：苦味酸天狼猩紅染色后，高倍鏡下（×200）觀察并利用圖文分析系統(tǒng)進行圖像處理，每張切片隨機選取5個視野，計算每個視野心肌外膜膠原容積分數(shù)（collagen volume fraction，CVF）（CVF＝膠原面積/全視野面積×100%），取平均值。

1.2.7 ELISA測定心肌組織膠原Ⅰ、Ⅲ水平 根據(jù)ELISA試劑盒說明進行操作，450 nm波長測量OD值；根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)濃度和OD值算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程，并計算被測樣品濃度。

1.2.8 Western-blotting檢測心肌組織HGF蛋白表達 取大鼠左室前壁心梗區(qū)心肌組織50 mg，加入1 ml RIPA組織裂解液提取蛋白，10%SDS-PAGE電泳，半干轉(zhuǎn)膜45 min，3%脫脂奶粉室溫封閉30 min，加一抗4℃過夜，TBS-T洗膜5 min×3次；加二抗（1∶5000）37 ℃ 1.5 h，TBS-T 洗膜 5 min×3次；曝光，顯影，定影，光密度分析。HGF/β-actin比值（OD）表示HGF蛋白水平。

1.2.9 Real-time PCR檢測心肌組織HGF基因的表達 取大鼠左室前壁心梗區(qū)心肌組織50 mg，加1 ml Trizol勻漿，根據(jù)Trizol說明書取總RNA，紫外分光光度計測定總RNA的濃度與純度，A260 nm/A280 nm OD比值為1.8～2.0可進行逆轉(zhuǎn)錄實驗。RNA逆轉(zhuǎn)錄過程參照Takara PrimeScript RT Reagent Kit產(chǎn)品說明進行操作，反應(yīng)條件37℃20 min，85 ℃ 10 s，-20 ℃保存?zhèn)溆?。Real-time PCR過程參照Takara PrimeScript PCR Reagent Kit產(chǎn)品說明進行操作，引物設(shè)計與合成由TaKaRa公司完成。引物序列如下：HGF引物序列：正義鏈：5′-AGCATGAGCCGTATGCACTAGA-3′；反義鏈：5′-GCACTAACTACACAGAGACGTA-3′；GADPH 引物序列：正義鏈：5′-CTCATGACCACAGTCCATGCCA-3′；反義鏈：5′-GCCTTGGCAGCACCAGTGGATG-3′；實驗結(jié)果的分析，目的基因與內(nèi)參照GAPDH相對量表示。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件系統(tǒng)分析。計量資料以±s表示，多組間的均數(shù)比較采用單因素方差分析（One-Way ANOVA），組內(nèi)的兩兩均數(shù)比較采用最小顯著性差異（least significant difference，LSD）法檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 缺氧預(yù)處理攜帶HGF基因MSCs細胞對心梗大鼠左心血流動力學(xué)影響 與假手術(shù)組相比，心梗組心功能明顯下降（P＜0.01）；與心梗組及MSCs組相比，MSCs-HGF組心功能明顯好轉(zhuǎn)（P＜0.05）。見表1。

2.2 MSCs-HGF移植心梗大鼠左室前壁心肌組織HGF mRNA及HGF蛋白表達水平 PCR及Western-Blotting檢測結(jié)果顯示，對照組、假手術(shù)組、心梗組、MSCs組均未見HGF mRNA及HGF蛋白表達。與MSCs組相比，MSCs-HGF組HGF mRNA及HGF蛋白表達水平明顯增高（P＜0.01）。

表1 各組缺氧預(yù)處理攜帶HGF基因的MSCs細胞對心梗大鼠左心血流動力學(xué)影響（±s）

表1 各組缺氧預(yù)處理攜帶HGF基因的MSCs細胞對心梗大鼠左心血流動力學(xué)影響（±s）

注：HR：心率；LVESP：左室收縮末壓；LVEDP：左室舒張末壓；LV+dp/dtmax：左室壓力最大上升速率；LV-dp/dtmax：左室壓力最大下降速率；LVEF：左室射血分數(shù)。與假手術(shù)組比較，aP＜0.01；與心梗組比較，bP＜0.01；與 MSCs組比較，cP＜0.05

LVEF（%）對照組 8 402.15±35.22 109.35±10.13 -4.11±2.08 4358.17±506.35 -4215.16±456.06 86.25±9.12假手術(shù)組 8 411.26±36.01 107.21±12.35 -4.05±1.59 4103.12±435.76 -4038.72±415.27 84.32±7.45心梗組 8 391.08±32.25 75.55±10.26a 25.58±3.05a 1851.17±403.35a -1873.08±316.22a 66.36±8.55aMSCs組 8 395.36±33.18 78.18±9.08a 23.45±2.16a 2074.65±457.12a -1956.14±325.47a 68.73±8.38aMSCs-HGF 組 8 405.12±35.55 103.45±11.05bc 15.88±2.38abc 3058.45±418.96abc -2801.24±348.55abc 75.42±7.82abc組別 例數(shù) HR（次/min）LVESP（mm Hg）LVEDP（mm Hg）LV+dp/dtmax（mm Hg/s）LV-dp/dtmax（mm Hg/s）

2.3 缺氧預(yù)處理攜帶HGF基因的MSCs對心梗大鼠左室前壁梗死區(qū)心肌組織結(jié)構(gòu)和膠原容積分數(shù)影響 HE染色顯示，對照組及假手術(shù)組心肌細胞排列整齊，未見到增生組織；心梗組心肌細胞減少，結(jié)構(gòu)紊亂，可見大量增生組織；MSCs-HGF組心肌細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)較為完整，心肌組織間隙僅見少量增生組織（見圖1A）。天狼星紅染色可見對照組和假手術(shù)組心肌組織有少量絲狀紅染纖維，心梗組有大量紅染纖維，呈束狀或片狀，MSCs-HGF組可見細束狀紅染纖維（見圖1B）。心肌膠原分析顯示，與假手術(shù)組相比，心梗組心梗區(qū)心肌膠原容積分數(shù)顯著增加（P＜0.01）；與心梗組相比，MSCs-HGF 組心肌膠原容積分數(shù)明顯降低（P＜0.05）（見圖1C）。

2.4 缺氧預(yù)處理攜帶HGF基因的MSCs對心梗大鼠左室前壁梗死區(qū)心肌組織膠原Ⅰ、Ⅲ的影響ELISA檢測結(jié)果顯示，與假手術(shù)組相比，心梗組左室前壁梗死區(qū)心肌組織膠原Ⅰ、Ⅲ含量均顯著增加（P＜0.01）；與心梗組相比，MSCs-HGF 組膠原Ⅰ、Ⅲ水平均明顯降低（P＜0.01）；心梗組與MSCs組之間未見統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。見圖2。

3 討論

MSCs是一種多能分化的干細胞，具有多向分化潛能、自我復(fù)制和更新能力，能分泌大量細胞因子，參與心肌梗死組織的修復(fù)，減少心肌梗死后纖維組織的增生并降低心力衰竭的發(fā)生。MSCs移植療效被基礎(chǔ)實驗及臨床試驗所證實，已成為治療心肌梗死組織工程的工具之一。但動物實驗[3,9,10]表明，單純MSCs移植到急性心梗的大鼠，其心功能及血流動力學(xué)改善不明顯，這與本實驗結(jié)果一致。究其原因，由于在急性大鼠梗死早期大量心肌細胞死亡，局部炎癥反應(yīng)及缺血缺氧的環(huán)境導(dǎo)致MSCs無法正常轉(zhuǎn)化為心肌細胞，嚴重影響其療效。因此提高MSCs的存活率是目前醫(yī)學(xué)界研究的熱點。HGF又名擴散因子，c-met受體是HGF受體，屬于酪氨酸激酶受體，HGF和c-met受體結(jié)合后激活細胞內(nèi)多個信號通路，發(fā)揮包括抗細胞凋亡、促進細胞增殖、促進組織血管再生、促進細胞定向歸巢等作用。HGF的分泌主要靠微環(huán)境的調(diào)節(jié)，但在心肌梗死的區(qū)域分泌量極少。本課題組通過對外源性基因HGF轉(zhuǎn)染MSCs后再移植到心梗的大鼠，4周后可見大鼠心肌梗死組織內(nèi)HGF mRNA及蛋白表達顯著增加，從而發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng)[11-16]：①促進毛細血管大量新生，改善心肌梗死周圍區(qū)域心肌細胞的血供，心肌組織實質(zhì)成分得到修復(fù)，從而改善心臟收縮功能，心臟功能顯著提升。②直接刺激梗死區(qū)域血管擴張，為MSCs遷移、增殖、分化等提供最佳的生長環(huán)境，最終提高MSCs的遷移力及存活率，使MSCs能轉(zhuǎn)化為心肌細胞，改善心功能。③HGF顯著抑制轉(zhuǎn)化生長因子β的產(chǎn)生，轉(zhuǎn)化生長因子β是與瘢痕形成緊密相關(guān)的細胞因子，可以減輕血管周圍膠原沉積，減少瘢痕組織的形成，減輕室壁僵硬度，限制心室重構(gòu)。④HGF具有抗凋亡的能力，能減少心肌細胞的死亡，保護心肌，改善心功能。而這些作用可能是HGF基因修飾后MSCs對心梗大鼠心臟功能改善的效果優(yōu)于單純應(yīng)用MSCs的原因。本實驗證實，移植后4周行心臟彩超或血流動力學(xué)檢測，MSCs-HGF組反映左室收縮功能的指標(biāo)（LVESP、LV+dp/dtmax、EF）較心梗組、MSCs組明顯提高，而反映心臟舒張功能指標(biāo)（LVEDP）較心梗組、MSCs組明顯恢復(fù)。

缺氧預(yù)處理是指對細胞進行短暫的非致命的缺氧適應(yīng)，使MSCs移植到急性心梗大鼠能夠適應(yīng)局部缺氧、缺血的惡劣環(huán)境，延遲細胞的程序性死亡。近來研究[17]發(fā)現(xiàn)，缺氧預(yù)處理可以提高細胞內(nèi)缺氧誘導(dǎo)因子1α的表達。缺氧誘導(dǎo)因子1α是具有轉(zhuǎn)錄活性的核蛋白，能夠控制下游多種基因的表達，這些基因參與血管生成、能量代謝及細胞存活、凋亡，以維持細胞在缺氧條件下內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定。劉容容等[18]和王耀晟等[19]的研究發(fā)現(xiàn)，缺氧預(yù)處理的MSCs通過旁分泌細胞因子SDF-1、VEGF促進血管內(nèi)皮細胞的增殖及血管的形成能力。本課題組前期細胞實驗證實，無血清缺氧培養(yǎng)條件下HGF基因轉(zhuǎn)染MSCs，能提高Bcl-2的表達而降低Bax的表達[20-22]。Bcl-2、Bax家族是調(diào)節(jié)細胞凋亡的重要分子，Bcl-2基因抑制細胞凋亡，而Bax基因促進細胞凋亡，Bcl-2和Bax可以形成二聚體，兩者相互拮抗，通過控制Bcl-2/Bax來調(diào)控細胞的凋亡，比值升高可抑制凋亡，比值降低則促進凋亡。因此HGF基因轉(zhuǎn)染MSCs能提高其在缺氧缺血條件下的抗凋亡的能力，從而提高MSCs的存活，增加MSCs轉(zhuǎn)化為心肌樣細胞的數(shù)量，并與宿主細胞建立電-機械耦合，參與心臟收縮與舒張，進而改善心功能。

心梗后心肌缺血缺氧，鏡下HE染色可見大量心肌細胞壞死，心肌間質(zhì)成分異常增生。細胞外基質(zhì)增生主要是膠原纖維化，主要包括Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白，首先在血管周圍增生，進而進展到心肌細胞，導(dǎo)致心肌僵硬、心室增厚、冠狀動脈血流儲備減少和心功能異常，加速心力衰竭的過程。所以，減少Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白在心梗心肌的過量表達，可能是影響心肌纖維化程度的最根本因素。減少心肌纖維化可提高心臟的舒張與收縮功能，改善心功能。本實驗證實，移植后4周MSCs-HGF組心梗區(qū)域心肌組織Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白的表達較心梗組及MSCs組明顯減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，從而減少膠原增生，改善大鼠的心功能。

綜上所述，HGF基因轉(zhuǎn)染可通過增加缺氧、無血清培養(yǎng)MSCs在心梗大鼠局部表達HGF，以提高細胞存活率和遷移力，減少細胞的凋亡，并減少局部膠原蛋白的表達，從而改善心功能。

（本文圖片見后插五）

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The effect of hypoxia preconditioning MSC cells with HGF gene on the change of the heart function in AMI rats

JIANG Jin-feng＊，LIN Xiu，CAI Wen-qin，et al.＊Emergency Department，the Fuzhou First Hospital of Fujian Medical University，F(xiàn)uzhou 350009，China

Objective To observe the effect of hypoxia preconditioning MSC cells with hepatocyte growth factor（HGF）gene on the change of the heart structure and function and collagen synthesis in AMI rats.Methods Acute myocardial infarction （AMI）model was established by ligating left anterior descending coronary artery.40 Rats were randomly divived into 5 groups（8 rats per group）：control group，sham-operated group，AMI group，MSCs group，MSCs-HGF group.Echocardiography was performed to measure left ventricular ejection fractions（EF）.Cardiac hemodynamics was evaluated with left cardiac catherization.Hematoxylin-eosin（HE）and Sirus red staining were used to determine myocardial structure and collagen deposition.RT-PCR was performed to determine the expression of HGF mRNA.The level of HGF protein was estimated by Western-blotting.Enzyme Linked Immunosorbent Assay（ELISA）was used to assay the levels of collagenⅠ、Ⅲ.Results Compared with AMI groups：the left ventricular ejection fraction（EF）were significantly increased in MSCs-HGF group［（75.42±7.82）%vs AMI groups（66.36±8.55）%，P＜0.01］；Real-time PCR and Western-bloting shown：the levels of HGF mRNA and protein were remarkable elevated in MSCs-HGF group compared with those in MSCs group（P＜0.01）.There were no the expression of HGF mRNA and protein in control，sham，AMI and MSCs group.HE staining shown that in AMI rats myocardial cells lowed，disordered，A large number of fibrous tissue deposition，in MSCs HGF group only A small amount of fibrous tissue deposition.Myocardial tissue Sirius red staining，in AMI group a large number of beam and plate red dye of myocardial tissue，in MSCs-HGF group wispy bouquet of red dye of myocardial tissue.ELISA analysis shown the level of collagenⅠ、Ⅲ in heart tissue were greatly increased in AMI group while those were significantly decreased in MSCs-HGF group［collagenⅠ（450±12）pg/ml vs AMI groups（523±13）pg/ml，P＜0.05；collagenⅢ（870±14）pg/ml vs AMI groups（1080±25）pg/ml，P＜0.05］.Conclusion Hypoxia pretreated MSC cells with HGF gene improves cardiac function possibly through inhibiting myocardial fibrosis in AIM rats.

MSCs； Hepatocyte growth factor； Heart function； CollagenⅠ，Ⅲ

福建省自然科學(xué)基金（項目編號：2014J1433）

作者單位：350009 福建省福州市，福建醫(yī)科大學(xué)附屬福州市第一醫(yī)院急診科（江金鋒、林修、王芬珍）；福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院心血管內(nèi)科，高血壓研究所（蔡文欽、蘇津自）

10.3969/j.issn.1672－5301.2017.09.021

Q95-33；R542.2+2

A

1672-5301（2017）09-0849-05

2017-01-16）