不同產(chǎn)地巴戟天藥材中大黃素甲醚的含量測定

吳凌鳳，謝華松

(嘉應(yīng)學(xué)院醫(yī)學(xué)院，廣東 梅州 514000)

不同產(chǎn)地巴戟天藥材中大黃素甲醚的含量測定

吳凌鳳，謝華松*

(嘉應(yīng)學(xué)院醫(yī)學(xué)院，廣東 梅州 514000)

目的：對不同產(chǎn)地巴戟天藥材中大黃素甲醚的含量進行比較研究。方法：采用HPLC測定不同產(chǎn)地巴戟天藥材中大黃素甲醚的含量，色譜柱：Agilent(4.6 mm×250 mm,5μm)；以甲醇-0.1%磷酸水為流動相(78:22)；流速1.00 mL·min-1；柱溫30 ℃；檢測波長254 nm。結(jié)果：巴戟天藥材中大黃素甲醚的線性范圍為0.118-1.18 μg/mL，r2=0.9991,大黃素甲醚的平均回收率在87.12%。不同產(chǎn)地巴戟天藥材中大黃素甲醚的含量有所不同。結(jié)論：所建立的分析方法可以測定巴戟天藥材中大黃素甲醚的含量。

巴戟天；大黃素甲醚；高效液相色譜法；含量測定

巴戟天為茜草科巴戟天屬植物巴戟Morinda officinalis How．的干燥根莖，具補腎陽、強筋骨、祛風濕功效，臨床用于治療陽痿遺精、宮冷不孕、月經(jīng)不調(diào)、少腹冷痛、風濕痹痛、筋骨痿軟等癥。巴戟天始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品，歷代本草均有記載，主要分布在廣東、福建、廣西、海南等省的熱帶和亞熱帶地區(qū)，其中以廣東德慶為道地產(chǎn)地。巴戟天含多種化學(xué)成分，如蒽醌、環(huán)烯醚萜、寡糖、多糖等成分。巴戟天中的蒽醌類成分有具有促進骨髓基質(zhì)細胞增殖[1]等作用，而大黃素甲醚具有很強的抗炎、抗癌作用[2]，且有抗骨質(zhì)疏松活性[3]。

1 材料

島津LC-10AT高效液相色譜儀(SPD-10A檢測器)。巴戟天藥材于2016年10月購于五華，德慶等地，經(jīng)嘉應(yīng)學(xué)院醫(yī)學(xué)院副教授丘明建鑒定為巴戟天M．officinalis．的干燥成熟根莖。大黃素甲醚(中國藥品生物制品檢定所，批號：110758-201013)，甲醇為色譜純(天津科密歐化學(xué)試劑有限公司)，純凈水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

AgilentC18(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流動相以甲醇-0.1%磷酸水(78：22)；流速1.00 mL·min-1；柱溫30 ℃；檢測波長254 nm。在此實驗條件下，供試品溶液中大黃素甲醚對照品與其他成分得到良好分離，其色譜峰保留時間與相應(yīng)對照品一致(見圖1)。理論塔板數(shù)以大黃素甲醚峰計算應(yīng)不低于4 000。

2.2 對照品溶液的制備

精密稱取2.36mg大黃素甲醚對照品，置100mL容量瓶中，加甲醇溶解并定容，備用。

2.3 供試品溶液的制備取

巴戟天粉末1 g(過三號篩)，精密稱定，置100 mL圓底燒瓶中，加少量20%硫酸濕潤，靜置1h，精密加入三氯甲烷50mL，回流提取2 h，濾過，加硅膠(200-300目)0.2g拌勻，置水浴上蒸干，加于硅膠柱[200～300目，1g，內(nèi)徑為1cm，干法裝柱]上，以三氯甲烷-石油醚(5：5)混合溶液20ml洗脫，棄去洗脫液，再用三氯甲烷-石油醚(8:2)混合溶液10ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，即得。

2.4 標準曲線的制備

分別取上述對照品溶液0.05，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5mL至10 mL容量瓶中，稀釋至刻度，成系列對照品溶液。按“2.1”色譜條件，分別進樣20μL，測定峰面積。以大黃素甲醚濃度為橫坐標、峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，得回歸方程：y=1.8E+7X+1452.6,r2=0.9991。大黃素甲醚0.118～1.18μg/mL與峰面積的線性關(guān)系良好。

圖1 A為大黃素甲醚對照品的色譜圖 B為巴戟天樣品的色譜圖

2.5 精密度試驗

取“2.4”項對照品溶液按“2.1”色譜條件重復(fù)進樣6次，每次20 μL，峰面積的RSD為0.8%(n=6)。結(jié)果表明精密度良好。

2.6 穩(wěn)定性試驗

在上述色譜條件下，精密吸取同一供試品溶液20μL，然后每隔4 h各考察1次。結(jié)果表明，供試品溶液在12h內(nèi)測定結(jié)果穩(wěn)，供試品溶液中大黃素甲醚色譜峰面積的RSD為1.6%說明樣品溶液在12h內(nèi)穩(wěn)定。

2.7 重復(fù)性試驗

對同一批巴戟天樣品按“2.3”項方法平行制備六份，按"2.1"項色譜條件進樣，峰面積RSD為2.1%(n=6)。結(jié)果表明本方法重復(fù)性良好。

2.8 加樣回收率試驗

精密稱取6份已知含量的樣品粉末，每份0.5 g，分別加入大黃素甲醚對照品溶液，按按“2.3”項方法平行制備六份，按“2.1”項色譜條件進樣，峰面積平均回收率為87.12%，說明該測定方法測定結(jié)果準確。

2.9 不同樣品的含量測定

取不同產(chǎn)地巴戟天藥材，按2.3項下制備成供試品溶液，并按2.1項下色譜條件進行含量測定，結(jié)果如下。

表1 不同產(chǎn)地巴戟天藥材中大黃素甲醚含量 μg/g

3 討論

本實驗樣品提取條件的選擇比較了氯仿，硫酸-氯仿，硫酸-石油醚，甲醇幾種提取方法，發(fā)現(xiàn)以硫酸-石油醚提取的樣品雖然雜質(zhì)較少，但大黃素甲醚的提取較少。以硫酸-氯仿提取的樣品大黃素甲醚含量最高，但雜質(zhì)也較多，故需對樣品進行純化。通過TLC篩選，發(fā)現(xiàn)氯仿-石油醚(8:2)能將大黃素甲醚與雜質(zhì)分開。實驗結(jié)果表明，收集的樣品中不同產(chǎn)地的巴戟天藥材中大黃素甲醚的含量是有一定差距的，以玉林產(chǎn)地的含量為最高，其次為欽州，而南靖的含量最低。本實驗為探求高質(zhì)量的巴戟天產(chǎn)地，篩選優(yōu)良品種和擴大藥源提供了參考依據(jù)，但單一成分并不能說明藥材總體質(zhì)量，還需結(jié)合其他成分含量進一步研究。

[1] 凌 昆，郭素華，趙諧.閩產(chǎn)巴戟天中促進骨骼基質(zhì)細胞增殖成分的初步研究[J].中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)雜志,2008,25(4):271.

[2] 唐 康.穗花大黃化學(xué)成分的研究[D]. 成都：西南交通大學(xué),2009．

[3] 吳巖斌.巴戟天抗骨質(zhì)疏松活性成分及品質(zhì)評價[D]. 福州：福建中醫(yī)藥大學(xué),2009.

(本文文獻格式：吳凌鳳，謝華松.不同產(chǎn)地巴戟天藥材中大黃素甲醚的含量測定[J].山東化工，2017，46(14)：76-77，79.)

HPLC analysis of physcion in Morinda officinalis from different locations

WuLingfeng,XieHuasong*

(Medical College of Jiaying University,Meizhou 514000,China)

Objective :To establish a HPLC method to determine the quantitative of physcion in Morinda officinalis from different locations.Methods:Separation column was Agilent C18(4.6×250mm,5μm)with the column temperature of room temperature.The mobile phase composition was methonal-0.1% phosphoric acid (78：22) and the flow rate was 1.0ml/min.The UV detection wavelength was 254nm.Results :A good linearity was obtained in the range of 0.118-1.18μg/mL with r2=0.9991.The average recovery was87.12%.Conclusion : The content of physcion was vary with the producing area of Morinda officinalis.The method was good for determining physcion in Morinda officinalis.

morinda officinalis;HPLC;physcion;content determination

2017-05-05

吳凌鳳(1988—)，女，廣東梅州人，助教，主要從事藥物分析研究。

O657.7+2

A

1008-021X(2017)14-0076-02