直接藥敏試驗(yàn)與常規(guī)藥敏試驗(yàn)在臨床血液細(xì)菌鑒定與檢驗(yàn)中的臨床價(jià)值

陳婷婷

（九江市第三人民醫(yī)院，江西九江332000）

直接藥敏試驗(yàn)與常規(guī)藥敏試驗(yàn)在臨床血液細(xì)菌鑒定與檢驗(yàn)中的臨床價(jià)值

陳婷婷

（九江市第三人民醫(yī)院，江西九江332000）

目的研究直接藥敏試驗(yàn)與常規(guī)藥敏試驗(yàn)在臨床血液細(xì)菌鑒定與檢驗(yàn)中的臨床價(jià)值。方法觀察樣本選取413例需行血液細(xì)菌檢驗(yàn)患者其陽(yáng)性血液標(biāo)本，將每例樣本分作兩份，分別實(shí)施直接藥敏實(shí)驗(yàn)與常規(guī)藥敏試驗(yàn)，觀察并分析兩種試驗(yàn)結(jié)果中細(xì)菌鑒定結(jié)果、藥物敏感度、試驗(yàn)所需時(shí)間等。結(jié)果研究表明，兩種試驗(yàn)G+球菌與G-桿菌鑒定符合率達(dá)80.93%與89.47%；兩種試驗(yàn)的G-桿菌與G+球菌在耐藥、中度敏感、敏感等藥物敏感度指標(biāo)對(duì)比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；常規(guī)藥敏試驗(yàn)操作平均時(shí)間可見(jiàn)明顯長(zhǎng)于直接藥敏試驗(yàn)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論直接藥敏試驗(yàn)與常規(guī)藥敏試驗(yàn)在臨床血液細(xì)菌鑒定與檢驗(yàn)中均可獲取相關(guān)病原菌藥物特性等有效信息，但直接藥敏試驗(yàn)?zāi)芨焖俚孬@取相應(yīng)試驗(yàn)結(jié)果，可見(jiàn)在實(shí)際應(yīng)用中可為患者針對(duì)性治療與用藥爭(zhēng)取更多時(shí)間。

血液細(xì)菌；直接藥敏試驗(yàn)；常規(guī)藥敏試驗(yàn)；鑒定；檢驗(yàn)；臨床價(jià)值

機(jī)體感染細(xì)菌后極易誘發(fā)敗血癥、菌血癥此類(lèi)因細(xì)菌入血而形成的疾病癥狀，此類(lèi)疾病不僅會(huì)導(dǎo)致患者出現(xiàn)發(fā)熱、頭痛、呼吸不適、胃腸道癥狀等細(xì)菌感染引起的各種不良反應(yīng)，對(duì)其正常生活形成影響，還極有可能因細(xì)菌控制不良而對(duì)患者的生命健康造成嚴(yán)重威脅[1]。但由于近年來(lái)臨床上對(duì)抗生素的濫用也導(dǎo)致了各類(lèi)細(xì)菌的變異，其耐藥性在不斷提高，這也致使了臨床上針對(duì)血液細(xì)菌感染等疾病的控制難度在不斷增加[2]。而越早對(duì)患者血液作相應(yīng)細(xì)菌的鑒定與檢驗(yàn)，便可越早得知其病原菌，以此可對(duì)患者實(shí)施針對(duì)性的用藥治療，從而可有效地提升治療效果。現(xiàn)階段臨床上對(duì)血液細(xì)菌感染常采用血清學(xué)凝集試驗(yàn)、常規(guī)藥敏試驗(yàn)、直接藥敏試驗(yàn)等鑒定方法[3]，本次研究通過(guò)觀察對(duì)本院接受血液細(xì)菌鑒定與檢驗(yàn)的患者其陽(yáng)性血液標(biāo)本采取直接藥敏試驗(yàn)與常規(guī)藥敏試驗(yàn)的結(jié)果，旨在探究相關(guān)試驗(yàn)方法的臨床應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)于下文詳述觀察過(guò)程。

1 資料與方法

1.1 臨床資料本次研究以本院2015年4月～2016年4月期間收治需行血液細(xì)菌檢驗(yàn)與鑒定的413例患者其陽(yáng)性血液標(biāo)本為觀察樣本，所有患者入院時(shí)均存在不同程度的發(fā)熱癥狀，部分患者伴有全身感染。其中男223例，女190例；患者年齡11～76歲，平均年齡（32.81±6.87）歲。入選標(biāo)準(zhǔn)：①患者血液采集前48 h內(nèi)未接受過(guò)任何藥物治療或其他針對(duì)治療措施；②患者本人或其監(jiān)護(hù)人已簽署研究知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①存在血液疾病者；②存在凝血功能障礙者；③存在嚴(yán)重心、肺、腎等重要臟器疾病者。

1.2 方法對(duì)所有納入研究觀察的患者發(fā)熱高峰期于無(wú)菌操作下抽取靜脈血液20 mL，對(duì)血液樣本冷藏后迅速將其送往檢驗(yàn)科進(jìn)行檢驗(yàn)。一份樣本均需進(jìn)行直接藥敏試驗(yàn)與常規(guī)藥敏試驗(yàn)，具體方法如下：

（1）直接藥敏試驗(yàn)：借助生化自動(dòng)血培養(yǎng)儀對(duì)檢驗(yàn)標(biāo)本實(shí)施自動(dòng)培養(yǎng)與相應(yīng)檢測(cè)，當(dāng)培養(yǎng)儀報(bào)警提示血液樣本呈陽(yáng)性檢測(cè)結(jié)果時(shí)，則表示血液中存在細(xì)菌生長(zhǎng)情況，繼而需以無(wú)菌注射器將陽(yáng)性血液樣品抽取并注入無(wú)菌試管內(nèi)，抽取劑量為10 mL，再將其置于離心機(jī)內(nèi)，設(shè)置離心參數(shù)為1 500 r/min，時(shí)間為5～10 min，然后對(duì)上清液進(jìn)行收集，再調(diào)整離心參數(shù)至3 000 r/min，時(shí)間為15～20 min，再棄去上清液，取沉淀物洗滌2次后，對(duì)細(xì)菌懸液進(jìn)行收集，采取革蘭染色后利用顯微鏡作檢測(cè)觀察。若鏡檢形態(tài)結(jié)果顯示為一般菌種，則直接于MH平板上接種菌懸液，以無(wú)菌試紙將其抹勻后再貼上藥敏紙片。若鏡檢呈鏈狀的革蘭陽(yáng)性球菌（G+），其藥敏初試驗(yàn)則采用MH+5%羊血血平板來(lái)完成，再根據(jù)初試驗(yàn)結(jié)果選擇酶，調(diào)整好適當(dāng)?shù)木簼舛?，于PC11綜合板上實(shí)施接種，并借助微生物分析儀進(jìn)行相應(yīng)試驗(yàn)。以2005 NCCLSI標(biāo)準(zhǔn)為參照，對(duì)檢測(cè)血液樣品的相應(yīng)觀察指標(biāo)進(jìn)行判定[4]。

（2）常規(guī)藥敏試驗(yàn)：在巧克力平板、麥康凱平板、血平板等平板上對(duì)采集血液樣本進(jìn)行接種，孵育環(huán)境溫度需控制于37℃，空氣質(zhì)量控制于5%CO2，孵育時(shí)間為18～24 h，然后對(duì)其進(jìn)行革蘭染色，并由染色檢測(cè)結(jié)果對(duì)酶試驗(yàn)作選擇。分析并記錄檢測(cè)血液樣品的相應(yīng)觀察指標(biāo)。

1.3 觀察指標(biāo)本次研究以兩種試驗(yàn)的G+球菌與G-桿菌細(xì)菌鑒定符合率、藥物敏感度符合率、試驗(yàn)所需時(shí)間作為觀察指標(biāo)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法本次研究記錄數(shù)據(jù)均經(jīng)專(zhuān)業(yè)軟件SPSS 21.0實(shí)施統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料采用“x±s”表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用例數(shù)（n）表示，組間率（%）的比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩種試驗(yàn)細(xì)菌鑒定結(jié)果分析研究結(jié)果表明，直接藥敏試驗(yàn)鑒定出41例G+球菌，238例G-桿菌，常規(guī)藥敏試驗(yàn)鑒定出51例G+球菌，266例G-桿菌，可見(jiàn)直接藥敏試驗(yàn)在G+球菌的檢測(cè)中符合率為80.93%，在G-桿菌的檢測(cè)中鑒定符合率為89.47%。見(jiàn)表1。

表1 兩種試驗(yàn)的細(xì)菌鑒定結(jié)果分析（n）Table 1 Analysis of bacterial identification results of two tests(n)

2.2 兩種試驗(yàn)藥物敏感度分析兩種試驗(yàn)方法的G+球菌耐藥、中度敏感、敏感等藥物敏感度符合率分別為95.31%、94.11%、98.73%，G-桿菌的耐藥、中度敏感、敏感等藥物敏感度符合率分別為95.08%、93.73%、97.32%，相關(guān)符合率對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這表明直接藥敏試驗(yàn)在針對(duì)藥物敏感度中檢驗(yàn)也可獲得較為準(zhǔn)確的結(jié)果。見(jiàn)表2。

表2 兩種試驗(yàn)藥物敏感度符合率分析（n）Table 2 Analysis of coincidence rate of drug sensitivity in two tests(n)

2.3 兩種試驗(yàn)操作所需時(shí)間分析研究匯總數(shù)據(jù)表明，直接藥敏試驗(yàn)的操作所需時(shí)間8～14 h，平均時(shí)間（10.12± 1.33）h；常規(guī)藥敏試驗(yàn)的操作所需時(shí)間48～72 h，平均時(shí)間（60.81±4.95）h，可見(jiàn)常規(guī)試驗(yàn)所需時(shí)間明顯較長(zhǎng)，兩組數(shù)據(jù)對(duì)比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

3 討論

菌血癥與敗血癥作為一類(lèi)由細(xì)菌侵入血液而引起的血液感染性疾病，其在現(xiàn)階段醫(yī)學(xué)技術(shù)不斷發(fā)展的影響下可見(jiàn)發(fā)病率也在不斷增加，這主要是由于介入治療、外科治療等治療手段均有可能導(dǎo)致細(xì)菌通過(guò)插管、靜脈注射、內(nèi)置器等渠道進(jìn)入人體內(nèi)，并隨著血液循環(huán)在體內(nèi)進(jìn)行播散[5-6]。此類(lèi)疾病發(fā)生后一般會(huì)出現(xiàn)驟起高熱、頭痛、呼吸異常、皮下血斑等全身性感染體征，高水平細(xì)菌感染情況下甚至有可能引發(fā)嚴(yán)重炎性反應(yīng)，對(duì)患者的生命健康形成極大的威脅[7]。近年來(lái)在針對(duì)此類(lèi)疾病作治療時(shí)，多出現(xiàn)了濫用抗生素的不良用藥現(xiàn)象，由此致使病原菌增加了對(duì)抗生素的耐藥性，對(duì)治療效率形成了不良影響，還加重了患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。這也表明了，做好對(duì)病原菌菌種的鑒定與準(zhǔn)確的藥敏實(shí)驗(yàn)對(duì)此類(lèi)疾病治療具備著較為重要的應(yīng)用意義。目前，臨床上常使用常規(guī)藥敏試驗(yàn)與直接藥敏試驗(yàn)來(lái)實(shí)施細(xì)菌鑒定，本次研究中便就此兩種檢測(cè)方法作深入探究。

常規(guī)藥敏試驗(yàn)是一種臨床定性試驗(yàn)，其是臨床上針對(duì)細(xì)菌鑒定最為常用的一種檢測(cè)方法。在應(yīng)用此方法過(guò)程中，一般會(huì)通過(guò)對(duì)抑菌環(huán)直徑進(jìn)行測(cè)量，還有確定抗生素藥物的抑菌水平來(lái)進(jìn)行相關(guān)試驗(yàn)的設(shè)計(jì)[8]。而由于此種試驗(yàn)應(yīng)用時(shí)對(duì)環(huán)境、設(shè)備精度等均存在較高要求，導(dǎo)致其在臨床推廣與應(yīng)用中存在較多阻礙因素。加之此種試驗(yàn)方法在試驗(yàn)、觀察等實(shí)施流程中需等待較長(zhǎng)的時(shí)間，少則2天，多則3天[9]。在等待藥敏結(jié)果過(guò)程中，醫(yī)生僅可根據(jù)患者臨床表現(xiàn)，結(jié)合自身臨床經(jīng)驗(yàn)來(lái)給予抗生素治療，這不僅有可能因用藥不當(dāng)致使病原菌耐藥性增強(qiáng)，增加了治療難度，對(duì)于一些多重感染或是較嚴(yán)重病癥的患者來(lái)說(shuō)更有可能錯(cuò)失最佳治療時(shí)機(jī)，降低了治療安全性[10]。本次研究數(shù)據(jù)表明，常規(guī)藥敏試驗(yàn)的操作所需時(shí)間在48～72 h范圍內(nèi)，這與相關(guān)文獻(xiàn)結(jié)果結(jié)論一致?？梢?jiàn)常規(guī)藥敏試驗(yàn)在臨床上存在一定的應(yīng)用局限性，并與現(xiàn)階段快速、高效的細(xì)菌感染治療目標(biāo)呈較明顯的偏離。

直接藥敏試驗(yàn)是一種于1973年提出的并逐漸投入應(yīng)用的一種藥敏實(shí)驗(yàn)檢測(cè)方法，其在實(shí)際應(yīng)用中借助儀器對(duì)血液標(biāo)本直接進(jìn)行接種，孵育后便可進(jìn)行相應(yīng)藥敏試驗(yàn)，由此可直接略過(guò)了常規(guī)藥敏試驗(yàn)中需分離進(jìn)行培養(yǎng)的步驟，對(duì)縮短試驗(yàn)時(shí)間可起顯著的促進(jìn)作用[11]。本次研究結(jié)果表明，直接藥敏試驗(yàn)在針對(duì)G+球菌與G-桿菌作細(xì)菌鑒定時(shí)與常規(guī)藥敏試驗(yàn)一樣，對(duì)埃希氏菌、大腸桿菌、葡萄球菌、克雷伯桿菌等均可取得一定的陽(yáng)性檢出率，其與常規(guī)藥敏試驗(yàn)的檢測(cè)結(jié)果相比，可見(jiàn)存在較高的鑒定符合率，這表明了直接藥敏試驗(yàn)在針對(duì)細(xì)菌鑒定中可發(fā)揮較高的應(yīng)用價(jià)值。另外，在觀察直接藥敏試驗(yàn)的藥物敏感度檢測(cè)結(jié)果中，其與常規(guī)藥敏試驗(yàn)在耐藥、中度敏感、敏感等指標(biāo)中也見(jiàn)存在著較高的符合率，意味著其在抗生素敏感度的檢測(cè)中同時(shí)能起良好指示作用。在本次研究中，直接藥敏試驗(yàn)的操作時(shí)間在8～14 h之間，這比常規(guī)藥敏試驗(yàn)的操作時(shí)間提前了許多，說(shuō)明了在直接藥敏試驗(yàn)應(yīng)用中，可快速地獲取準(zhǔn)確率較高的細(xì)菌鑒定結(jié)果，從而可為臨床治療提供具備較高指示價(jià)值的用藥信息。以此不僅能夠有效地提升治療效率，并為針對(duì)性用藥爭(zhēng)取早期寶貴的治療時(shí)間，還能夠通過(guò)準(zhǔn)確用藥、高效治療以有效地減少了患者的藥物費(fèi)用、住院費(fèi)用等，為提升醫(yī)療服務(wù)質(zhì)量提供了良好的技術(shù)助力[12]。

本次研究結(jié)果顯示，兩種試驗(yàn)的G+球菌與G-桿菌鑒定結(jié)果符合率達(dá)80.90%與89.47%；且兩種試驗(yàn)在耐藥、中度敏感、敏感等藥物敏感度指標(biāo)對(duì)比中可見(jiàn)不存在明顯差異，分析結(jié)果表示差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；但直接藥敏試驗(yàn)的操作所需時(shí)間與常規(guī)藥敏試驗(yàn)的操作時(shí)間相比可見(jiàn)明顯較少，數(shù)據(jù)對(duì)比結(jié)果表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

綜上所述，在血液細(xì)菌鑒定與檢驗(yàn)中采用直接藥敏試驗(yàn)與常規(guī)藥敏試驗(yàn)可獲取較良好的病原菌鑒定結(jié)果、相關(guān)藥物影響特性等有效信息，而直接藥敏試驗(yàn)獲取相應(yīng)結(jié)果的所需時(shí)間較少，可見(jiàn)在應(yīng)用中能為針對(duì)性治療與用藥爭(zhēng)取更寶貴的時(shí)間，并可顯著地提升相關(guān)醫(yī)療服務(wù)質(zhì)量。

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Clinical value of direct drug sensitivity test and routine drug sensitivity test in clinical blood bacteria identification and test

Chen Ting-ting
(Jiujiang Third People's Hospital,Jiujiang,Jiangxi,332000,China)

Objective To study the clinical value of direct drug sensitivity test and routine drug sensitivity test in clinical blood bacteria identification and test.Methods To select 413 cases of patients were collected for bacterial blood test positive blood samples,each sample is divided into two parts,respectively,the implementation of direct drug sensitivity test and conventional drug susceptibility testing,observation and analysis of two kinds of test results in the identification of bacteria and drug sensitivity test results,the time required.Results Two kinds of test G+aureus and Bacillus G-identification coincidence rate was 80.93%and 89.47%;two trials of G-coli and G+aureus in contrast sensitivity index of resistance,moderate sensitive and sensitive drugs,the difference was not statistically significant;the average time of routine drug sensitivity test operation can be seen significantly longer than the direct drug sensitivity test.The difference was statistically significant(P＜0.05).Conclusion Direct drug sensitivity test and conventional drug susceptibility testing of pathogens can obtain relevant drug characteristics of effective information in the clinical blood bacterial identification and inspection,but the direct drug sensitivity test can quickly obtain the corresponding test results,visible in the practical application of patients for treatment and medication to strive for more time.

Blood bacteria;Direct drug sensitivity test;Routine drug sensitivity test;Identification;Test;Clinical value

10.3969/j.issn.1009-4393.2017.24.019